氣相色譜法測(cè)定保濟(jì)丸中百秋李醇的含量

趙喜蘭，劉秋鶴，郭煥（1.漯河醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，漯河市 46000；.漯河醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校第二附屬醫(yī)院，漯河市 46000；.漯河市第三人民醫(yī)院，漯河市 46000）

氣相色譜法測(cè)定保濟(jì)丸中百秋李醇的含量

趙喜蘭1＊，劉秋鶴2，郭煥3（1.漯河醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，漯河市 462000；2.漯河醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校第二附屬醫(yī)院，漯河市 462000；3.漯河市第三人民醫(yī)院，漯河市 462000）

目的：建立以氣相色譜法測(cè)定保濟(jì)丸中百秋李醇含量的方法，制定并完善保濟(jì)丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用非極性毛細(xì)管柱AT.SE-54（15 m×0.25 mm×0.33 μm），柱溫采用程序升溫：起始150 ℃，保持23 min，以8℃·min－1速率升至230℃，保持2 min，進(jìn)樣口溫度為280℃，檢測(cè)器（FID）溫度為280℃，載氣為氮?dú)猓魉贋?.0 mL·min－1。結(jié)果：百秋李醇進(jìn)樣量在0.12～0.36 μg范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好（r＝0.999 9），平均加樣回收率為98.62%，RSD＝4.69%。結(jié)論：該方法穩(wěn)定、結(jié)果可靠、重復(fù)性好，可作為保濟(jì)丸質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)之一。

保濟(jì)丸；百秋李醇；氣相色譜法；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

保濟(jì)丸為《中國(guó)藥典》2005年版（一部）收載的品種，由鉤藤、菊花、厚樸、化橘紅、廣藿香、葛根、薄荷等16味中藥精制而成，其中廣藿香為君藥，其主要活性成分為百秋李醇（廣藿香醇），具有解表、祛濕、和中的功效，用于暑濕感冒，癥見(jiàn)發(fā)熱頭痛、腹痛腹瀉、惡心嘔吐、腸胃不適，亦可用于暈車(chē)暈船[1，2]。保濟(jì)丸在現(xiàn)行藥典的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無(wú)百秋李醇的含量測(cè)定，難以很好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。為了提高該產(chǎn)品的質(zhì)量，保證臨床用藥的安全、有效，筆者采用氣相色譜（GC）法測(cè)定保濟(jì)丸中百秋李醇的含量，為保濟(jì)丸質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

GC7890F型GC儀、非極性毛細(xì)管柱AT.SE-54（15 m×0.25 mm×0.33 μm）（日本島津公司）；百秋李醇對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110772-200404）；SK2200HP型超聲波清洗器（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司）。

甲醇為色譜醇，水為屈臣氏蒸餾水，其它試劑均為分析醇。試驗(yàn)用保濟(jì)丸樣品為某藥廠(chǎng)產(chǎn)品，批號(hào)分別為：2009110603、2009110608、2009110620、2009120202、2009120210、2009110220。

2 方法與結(jié)果

2.1 GC條件

色譜柱：非極性毛細(xì)管柱AT.SE-54（15 m×0.25 mm×0.33 μm）；柱溫采用程序升溫：起始150 ℃，保持23 min，以8℃·min－1的速率升至230℃，保持2 min；進(jìn)樣口溫度：280℃；檢測(cè)器（FID）溫度：280 ℃；載氣為氮?dú)?，流速?.0 mL·min－1。在該色譜條件下進(jìn)樣，結(jié)果供試品得到良好分離。色譜見(jiàn)圖1。

圖1 氣相色譜圖A.對(duì)照品；B.樣品；C.陰性樣品；1.百秋李醇Fig 1 GC chromatogramsA.reference substance；B.sample；C.negative samples；1.patchouli alcohol

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取百秋李醇對(duì)照品適量，加正己烷制成濃度為每1.0 mL含百秋李醇30.00 μg的對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取該藥丸50粒，粉碎過(guò)80目篩。精密稱(chēng)取50.000 g，置于具塞錐形瓶中，精密加入氯仿100 mL，搖勻，密塞，超聲提取3次，每次20 min，濾過(guò)，合并濾液，回收溶劑至干，殘?jiān)诱和槭谷芙?，轉(zhuǎn)移至5 mL容量瓶中，搖勻，即得。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 取缺廣藿香的陰性樣品50.000g，同“2.2.2”項(xiàng)下方法制得陰性樣品。

2.3 線(xiàn)性關(guān)系考察

分別吸取百秋李醇對(duì)照品溶液4、6、8、10、12 μL，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸分析，回歸方程為Y＝3 628.3X－310（r＝0.999 9）。結(jié)果，百秋李醇進(jìn)樣量在0.12～0.36μg范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取百秋李醇同一份標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣6次，計(jì)算其峰面積。結(jié)果，RSD＝2.80%，表明本方法精密度良好。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

取適量同一批供試品溶液6份，分別按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，計(jì)算含量。結(jié)果，樣品平均含量為0.006 4 mg·g－1，RSD＝2.65%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，分別在0、5、10、15、20、24 h 測(cè)定。結(jié)果，峰面積的RSD＝2.65%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

取本品粉末25.000 g，精密稱(chēng)定，加入百秋李醇對(duì)照品，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，平均加樣回收率為98.62%，詳見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 1Results of recovery test（n＝6）

2.8 樣品含量測(cè)定

取保濟(jì)丸6批樣品，每批各取6份。按照“2.2.2”項(xiàng)下制得供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定樣品中百秋李醇的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 6批保濟(jì)丸樣品中百秋李醇的含量測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Content determination of patchouli alcohol in 6 batches of Baoji pills（n＝3）

3 討論

對(duì)廣藿香中的百秋李醇的含量測(cè)定時(shí)，色譜條件的選擇可以使用內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法進(jìn)行測(cè)定。本試驗(yàn)中由于內(nèi)標(biāo)物的色譜純?cè)噭┍容^難找到，而且經(jīng)過(guò)預(yù)試發(fā)現(xiàn)對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物的分離度不理想，故選用外標(biāo)法，以百秋李醇為對(duì)照品測(cè)定樣品中的含量，這樣圖譜中各峰分離效果較好。但是在測(cè)定時(shí)，必須保證進(jìn)樣量準(zhǔn)確，以免造成人為誤差。根據(jù)文獻(xiàn)資料[3～6]，廣藿香的GC條件采用程序升溫：起始溫度為60℃，以5℃·min－1的速率升至280℃，保持5 min可達(dá)到較好的分離效果。但筆者在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在這種條件下的峰型較寬，且峰與峰之間的分離度較小。通過(guò)改變GC條件：柱溫起始150℃，以8℃·min－1的速率升至230℃，保持2 min，此程序升溫方法可使廣藿香藥材的揮發(fā)性成分得到較好的分離。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：272.

[2]黃兆勝.中藥學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：1.

[3]席仲洪，帥銀花，文 萍，等.藿膽鼻炎軟膠囊中百秋李醇的含量測(cè)定研究[J].中國(guó)中藥雜志，2009，34（4）：491.

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[5]劉鄉(xiāng)鄉(xiāng)，黃曉玲，宋力飛，等.GC法測(cè)定廣藿香提取物中百秋李醇和廣藿香酮的含量[J].中藥材，2005，28（1）：30.

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Content Determination of Patchouli Alcohol in Baoji Pills by Gas Chromatography

ZHAO Xi-lan（Luohe Medical College，Luohe 462000，China）
LIU Qiu-he（The Second Affiliated Hospital of Luohe Medical College，Luohe 462000，China）GUO Huan（Luohe Municipal Third People’s Hospital，Luohe 462000，China）

OBJECTIVE：To develop gas chromatography（GC）method for the content determination of patchouli alcohol in Baoji pills and to establish the quality standard of it.METHODS：The determination was performed on AT.SE-54 capiltary column（15 m×0.25 mm×0.33 μm）.The increase of column temperature was controlled by programming；the initial temperature was 150℃ and maintained for 23 min，and then rose at 8℃·min－1up to 230℃ for 2 min.The injector temperature and detector temperature were both 280 ℃.Nitrogen was used as carrier and the flow rate was 1.0 mL·min－1.RESULTS：The linear ranges of patchouli alcohol was 0.12～0.36 μg（r＝0.999 9）with an average recovery of 98.62%（RSD＝4.69%）.CONCLUSION：The method is accurate，reliable and reproducible，and it can be used for the quality control of Baoji pills.

Baoji pills；Patchouli alcohol；Gas chromatography；Quality standard

R917

A

1001-0408（2010）40-3833-02

＊副教授，碩士。研究方向：臨床藥學(xué)。電話(huà)：0395-2967310。E-mail：xilanzhao@163.com

2010-08-17

2010-09-19）