尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)的研制

唐波，吳怡，鄒梅娟，梁學(xué)攴瑜，曾燕群，程剛（沈陽藥科大學(xué)藥學(xué)院，沈陽市 110016）

尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)的研制

唐波＊，吳怡，鄒梅娟，梁學(xué)攴瑜，曾燕群，程剛#（沈陽藥科大學(xué)藥學(xué)院，沈陽市 110016）

目的：制備尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)并考察其體外釋藥性。方法：利用固體分散體技術(shù)制備尼莫地平的速釋小片，采用干包衣法制備時滯4 h和8 h的脈沖小片，將此3種小片裝入膠囊制成尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)，并對小片和脈沖釋藥系統(tǒng)均進(jìn)行體外釋藥研究。差示掃描量熱（DSC）分析鑒別藥物在固體分散體載體中的狀態(tài)。結(jié)果：速釋小片在30 min內(nèi)釋藥95%以上，脈沖小片在4 h或8 h的時滯期內(nèi)釋藥＜10%，時滯期過后的3 h內(nèi)釋藥完全；脈沖釋藥系統(tǒng)分別在5 min、4 h、8 h時實現(xiàn)三次脈沖釋藥。藥物均勻分散于載體中，并以無定型狀態(tài)存在。結(jié)論：成功制備了尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)。

尼莫地平；脈沖釋藥；干包衣法；固體分散體；體外釋藥

＊碩士。研究方向：緩控釋制劑的研發(fā)及藥動學(xué)。電話：024-23986326。E-mail：tangbobox@126.com

#通訊作者：教授，博士研究生導(dǎo)師。研究方向：藥劑學(xué)和臨床藥學(xué)。電話：024-23986088。E-mail：chenggang63@hotmail.com

時辰藥理學(xué)研究[1，2]表明：人的血壓在24 h內(nèi)呈“兩峰一谷”狀態(tài)波動，一般表現(xiàn)為上午9～11時、下午3～6時最高，午夜最低。在血壓達(dá)到高峰時，患者常出現(xiàn)頭暈、頭痛、腦出血等癥狀。將患者的服藥時間改為血壓自然波動的兩個高峰前，就會使藥物顯效與血壓高峰同步化，從而更好地發(fā)揮藥效以使血壓平穩(wěn)。

針對高血壓疾病的上述時辰藥理學(xué)特點(diǎn)，筆者制備了降壓藥尼莫地平（Nimodipine，NMD）三次脈沖釋藥系統(tǒng)，該系統(tǒng)系將3種不同釋藥性能的小片裝入膠囊內(nèi)而得。該劑型早晨服藥，1日只服藥1次，從而增加了患者的順應(yīng)性。服藥后，膠囊內(nèi)的3種小片分別實現(xiàn)早、午、晚3次脈沖釋藥，從而達(dá)到平穩(wěn)降血壓的目的。在本研究中，筆者使用干包衣法（又稱壓制包衣）制備時滯4、8 h的脈沖小片，此方法是當(dāng)前國內(nèi)、外研究熱點(diǎn)，不但避免了水性包衣耗能、耗時的缺點(diǎn)，也避免了有機(jī)溶劑包衣環(huán)境污染、有毒的缺點(diǎn)[3，4]。目前，國內(nèi)、外尚無NMD干包衣制劑的相關(guān)文獻(xiàn)報道。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

尼莫地平原料藥及對照品（新華制藥股份有限公司，批號：080211，純度：99.65%）；尼莫地平市售片（天津市中央藥業(yè)有限公司，批號：080406，規(guī)格：每片含30 mg）；尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)（沈陽藥科大學(xué)藥學(xué)院）；微晶纖維素（MCC，江蘇常熟藥用輔料廠）；羥丙基甲基纖維素（HPMC，上海Colorcon公司，規(guī)格：K100M）；泊洛沙姆188（Poloxamer 188，德國BASF公司）；可壓性淀粉（焦作市先達(dá)貿(mào)易有限責(zé)任公司）；十二烷基硫酸鈉（SDS）、硬脂酸鎂、氯化鈉、醋酸鈉（天津市博迪化工有限公司）；乳糖（天津市大茂化學(xué)試劑廠）；磷酸氫二鈉（廣東汕頭市西隴化工廠），其它試劑均為分析純。

1.2 儀器

ZRD6-B型藥物溶出度儀（上海黃海藥檢儀器廠）；UV-2000型分光光度計（尤尼柯上海儀器有限公司）；智能型DZF2001A電熱恒溫真空干燥箱（上海蘇進(jìn)儀器設(shè)備廠）；TDP-120型單沖壓片機(jī)（東港市制藥設(shè)備廠）；電子分析天平（北京賽多利斯儀器有限公司）；恒溫水浴鍋（余姚電訊儀表實業(yè)公司）；差示掃描量熱儀DSC-60（日本島津儀器公司）。

2 方法與結(jié)果

以下各項片劑的制備均在避光條件下進(jìn)行。

2.1 NMD速釋小片的制備

2.1.1 NMD固體分散體的制備。采用熔融法，準(zhǔn)確稱量質(zhì)量比為2∶1的載體泊洛沙姆188與NMD原料藥，置于90℃水浴上，攪拌混勻，待混合物完全熔融呈黏稠狀時，迅速置于冰鹽浴上冷卻，待完全固化為止。固化物置于冰箱冷凍層放置8 h，取出，置于真空干燥箱中干燥24 h，取出粉碎，過100目篩，干燥、保存、待用。

2.1.2 NMD速釋小片的制備。分別稱取適量的NMD固體分散體粉末、可壓性淀粉、滑石粉等，混勻，并過80目篩3次，用直徑6 mm淺凹沖頭全粉末直接壓片。片重95 mg，含NMD 30 mg。

2.2 時滯4 h脈沖小片的制備

2.2.1 片芯的制備。稱取適量的固體分散體粉末、滑石粉，混勻，并過80目篩3次，用直徑4 mm淺凹沖頭全粉末直接壓片。片重50 mg，含NMD 15 mg。

2.2.2 干包衣法壓制脈沖小片。以30 mg HPMC、30 mg乳糖及適量滑石粉組成的混勻粉末作為包衣層，用6 mm淺凹沖頭直接壓制包衣片：先將2/3重的包衣層粉末填入沖模內(nèi)，將片芯置于沖模中心，預(yù)壓固定衣層粉末在片芯的側(cè)面和底部，再填入剩余包衣層粉末，壓片，即得時滯為4 h的脈沖片。片重115 mg，含NMD 15 mg。

2.3 時滯8 h脈沖小片的制備

片芯的制備及包衣壓片方法均同“2.2”項下方法，只是包衣層變?yōu)?0 mg HPMC、20 mg MCC及適量硬脂酸鎂組成的混勻粉末。片重115 mg，含NMD 15 mg。

2.4 體外釋放度測定的方法學(xué)考察

2.4.1 測定方法的選擇。參照《中國藥典》2005年版尼莫地平片相關(guān)規(guī)定[5]，含量測定方法選用紫外分光光度法，在波長238 nm處測定。專屬性試驗顯示，泊洛沙姆188等輔料在238 nm波長處的吸光度小于0.001，說明輔料不干擾NMD的測定。NMD速釋小片的釋放介質(zhì)選用pH 4.5醋酸鹽緩沖溶液（含0.3%SDS），脈沖小片的釋放介質(zhì)先后分別選用pH 1.2鹽酸溶液（含0.3%SDS）和pH6.8磷酸鹽緩沖溶液（含0.4%SDS）。

2.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備。精密稱取NMD對照品10 mg，置于100 mL容量瓶中，加乙醇10 mL，振搖使溶解，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，得NMD對照品貯備液（100 mg·L－1）。再用釋放介質(zhì)分別稀釋制成濃度為20、15、10、8、5、4、2、1 mg·L－1的對照品溶液，在238 nm波長處測定吸光度。以吸光度（A）對濃度（C）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程。結(jié)果，上述pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8 3種釋放介質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及檢測濃度線性范圍分別為C＝10.897A－0.051（r＝0.999 6，n＝6）、1～10 mg·L－1，C＝33.333A+0.191（r＝0.999 8，n＝6）、4～20 mg·L－1，C＝11.006A－0.018 3（r＝0.999 9，n＝6）、1～10 mg·L－1。

2.4.3 精密度試驗。取pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8 3種釋放介質(zhì)的8 mg·L－1對照品溶液，按精密度方法測定并計算。結(jié)果在3種釋放介質(zhì)中的RSD分別為0.182%、0.168%、0.197%（n＝6）。

2.5 NMD速釋小片體外釋藥試驗

參照《中國藥典》2005版尼莫地平片相關(guān)規(guī)定[5]，以市售NMD片、NMD原料藥（30 mg）為對照。以900 mL pH 4.5醋酸鹽緩沖溶液（含0.3%SDS）為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速75 r·min－1，介質(zhì)溫度（37±0.5）℃。在0、15、30 min時取樣5 mL，0.8 μm 微孔濾膜過濾，并即時補(bǔ)加同溫同種介質(zhì)5 mL。續(xù)濾液稀釋后按紫外分光光度法在波長238 nm處測定吸光度，計算藥物累積釋藥百分率（Q）。速釋小片、市售片及原料藥的體外Q-時間（t）曲線見圖1。

圖1 速釋小片、市售片及原料藥的體外釋藥曲線Fig 1 Dissolution curves of nimodipine immediate-release tablets，sale nimodipine tablets and crude drugs

由圖1可見，NMD原料藥、市售片和自制速釋小片在30 min內(nèi)的Q（平均值）分別為14.8%、91.5%和95.6%。表明自制NMD速釋小片符合《中國藥典》相關(guān)規(guī)定，達(dá)到了或略優(yōu)于市售片的釋藥性能，30 minQ值為原料藥的6.4倍，說明固體分散體有效地解決了難溶藥NMD的釋放問題。

2.6 NMD脈沖釋藥小片釋藥試驗

參照相關(guān)文獻(xiàn)[6～8]，采用2種釋放介質(zhì)分別模擬胃、腸道內(nèi)的環(huán)境。以900 mL pH 1.2鹽酸溶液（含0.3%SDS）為第1種釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速75 r·min－1，介質(zhì)溫度（37±0.5）℃，在第1、2 h時取樣。第2 h時取樣后立即將溶出杯中第1種釋放介質(zhì)倒去，換上第2種介質(zhì)，即900 mL pH 6.8磷酸鹽緩沖溶液（含0.4%SDS），轉(zhuǎn)速75 r·min－1，介質(zhì)溫度（37±0.5）℃，在第3、4、5、6、7、8、9、10、11 h時取樣。續(xù)濾液稀釋后按紫外分光光度法在波長238 nm處測定吸光度，計算藥物Q，Q-t曲線見圖2。

圖2 2種脈沖釋藥小片的體外釋藥曲線Fig 2 In vitro dissolution curves of 2 kinds of nimodipine pulsatile tablets

由圖2可見，時滯4 h脈沖釋藥小片在1～7 h內(nèi)的Q（平均值）分別為1%、3.2%、5.5%、8%、70.5%、92.2%、100%。時滯8 h脈沖釋藥小片在1～11 h內(nèi)的Q（平均值）分別為0.8%、1.6%、2%、3%、4.5%、6%、7.6%、9.3%、75.6%、91.6%、100%。結(jié)果表明，2種脈沖釋藥小片在規(guī)定時滯時間段內(nèi)幾乎不釋藥，時滯過后能迅速釋藥且釋藥完全。

2.7 三次脈沖系統(tǒng)的體外釋藥試驗

將1片速釋小片（每片含量30 mg）、2片時滯4 h脈沖釋藥小片（每片含量15 mg）、2片時滯8 h脈沖釋藥小片（每片含量15 mg）全裝入空硬膠囊內(nèi)構(gòu)成一個脈沖釋藥3次的系統(tǒng)（共含藥90 mg）。對此系統(tǒng)進(jìn)行體外釋藥試驗。試驗條件同“2.6”項下釋藥試驗條件。分別在5、10、40 min及1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11 h時取樣，續(xù)濾液稀釋后按紫外分光光度法在波長238 nm處測定吸光度，計算藥物累積釋藥量（W，mg），W-t曲線見圖3。

圖3 尼莫地平三次脈沖釋藥系統(tǒng)的體外釋藥曲線Fig 3 In vitro dissolution curves of nimodipine three-pulse drug release system

由圖3可見，膠囊殼在5 min左右溶蝕完全，這時膠囊內(nèi)的藥片才開始釋藥。結(jié)果表明，將3種具有不同釋藥性能的小片裝入膠囊后，其各自的釋藥性能未受影響；脈沖釋藥系統(tǒng)分別在5 min、4 h、8 h時實現(xiàn)三次脈沖釋藥。

2.8 差式掃描量熱（DSC）分析

將NMD、泊洛沙姆188以及兩者的物理混合物（質(zhì)量比為1∶2）和固體分散體分別進(jìn)行DSC分析。測試條件：以空鋁坩堝為參比物，另一坩堝內(nèi)放入樣品，掃描速度5℃·min－1，掃描范圍20～150℃。4種物質(zhì)的DSC分析結(jié)果見圖4。

Fig 4 DSC analysisA.nimodipine；B.poloxamer188；C.nimodipine-poloxamer188 physical mixture；D.nimodipine-poloxamer188 solid dispersion

由圖4B可見，泊洛沙姆188在49.25℃處有一吸熱峰，即熔點(diǎn)峰。由圖4A、C可見，NMD的吸熱峰位于122.58℃，為NMD熔點(diǎn)峰，而在圖D中NMD的熔點(diǎn)峰消失了，這說明在固體分散體中藥物很大程度上以無定型狀態(tài)存在，藥物均勻分散在載體中。

2.9 穩(wěn)定性試驗[9]

將制備的固體分散體置于相對濕度（RH）75%、40℃恒溫箱中放置3個月，測定體外釋放度并進(jìn)行DSC分析。3個月后，未見明顯老化現(xiàn)象，釋藥速率和DSC曲線幾乎無變化，表明固體分散體穩(wěn)定性較好。

3 討論

NMD是第2代二氫吡啶類鈣拮抗藥，廣泛應(yīng)用于治療高血壓、冠心病及腦血管疾患，但其難溶于水、生物利用度低、半衰期較短，每天需3次給藥。固體分散技術(shù)是提高難溶性藥物體外溶出速度和生物利用度的有效方法之一[9]，因此本文應(yīng)用該技術(shù)制備NMD速釋制劑。

制備固體分散體時，筆者曾對不同化合物為載體以及NMD與載體的比例進(jìn)行篩選。載體篩選除考察泊洛沙姆188外，還考察過聚乙二醇（PEG）6000、PEG4000及聚乙烯吡咯烷酮（PVP）k30等；NMD與載體的比例曾考察過2∶1、1∶1和1∶2等。結(jié)果，以泊洛沙姆188為載體、NMD與泊洛沙姆188以1∶2（熔融法或溶劑熔融法）組合的制備方法最佳、釋藥最快且制備的固體分散體穩(wěn)定。筆者制備脈沖釋藥小片時，固定片芯重量和包衣層的總重后，對包衣層的組成和比例（1∶1、2∶1、1∶2）曾進(jìn)行過篩選，包括HPMC K100M∶乳糖、HPMC K100M∶MCC、HPMC K100M∶PEG 4000、HPMC K100M ∶NaCl、HPMC K15M ∶MCC、HPMC K15M ∶PEG 4000、HPMC K15M ∶NaCl等。試驗結(jié)果證明，這些處方可以制備時滯1.5 h至12 h的脈沖釋藥片。由于篇幅原因，本文在此不詳述上述處方篩選試驗。

脈沖片釋放度測定前，為了滿足漏槽條件，筆者通過試驗確定了釋放介質(zhì)中SDS的加入量。結(jié)果表明，pH 1.2鹽酸溶液中加入0.3%SDS能達(dá)到漏槽條件，pH 6.8磷酸鹽緩沖溶液中加入0.4%SDS能達(dá)到漏槽條件?？疾觳煌尫沤橘|(zhì)（水、pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖溶液、pH 6.8磷酸鹽緩沖溶液）對片劑釋藥的影響，結(jié)果顯示無顯著影響。

為了有效地治療具有時辰藥理學(xué)特點(diǎn)的高血壓疾病，使藥物顯效與血壓高峰同步，筆者成功制備了由3種不同釋藥性能的小片組成的三次脈沖釋藥系統(tǒng)。體外釋藥等試驗證明，該處方設(shè)計合理，制備工藝簡單易行，穩(wěn)定性、重現(xiàn)性良好。本文所采用的干包衣法所需設(shè)備簡單，操作方便，可準(zhǔn)確地控制包衣層各成分的用量及比例，藥物釋放不受胃腸道pH值的影響[1]，與通常的水性包衣或有機(jī)溶劑包衣相比具有不可比擬的優(yōu)點(diǎn)（如節(jié)能、節(jié)時、無毒、無污染），值得進(jìn)一步推廣和研究。

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Preparation of a Three-pulse Drug Release System of Nimodipine

TANG Bo，WU Yi，ZOU Mei-juan，LIANG Xiao-yu，ZENG Yan-qun，CHENG Gang（School of Pharmacy，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China）

OBJECTIVE：To prepare a three-pulse drug release system of nimodipine and study its drug release.METHODS：Solid dispersion technique and dry-coating method were respectively applied to prepare immediate-release mini-tablets and Pulsatile mini-tablets with lag-time of 4 h or 8 h.Then those mini-tablets were filled into capsule to obtain a three-pulse drug release system and subjected to in vitro dissolution test.DSC was employed to determine drug status in solid dispersion.RESULTS：Immediate-release mini-tablets were released more than 95%in 30 min.Pulsatile mini-tablets were released less than 10%in 4 h or 8 h of lag-time period.After lag-time period，pulsatile mini-tablets were released completely in 3 h.The whole pulsatile drug release system achieved three times of drug release at 5 min，4 h，8 h，respectively.Nimodipine kept amorphous form and were delivered into carrier evenly.CONCLUSION：A three-pulse drug release system of nimodipine has been prepared successfully.

Nimodipine；Pulse drug release；Dry-coating method；Solid dispersion；In vitro release

R944.9；R972+.4

A

1001-0408（2010）05-0430-03

2009-03-24

2009-05-22）