降糖復(fù)方改善胰島素抵抗的實驗研究*

胡旭珍 寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬銀川市中醫(yī)醫(yī)院 (銀川 750001)

由西洋參、黃芪、生地、天花粉、玄參、丹參、葛根、山藥、麥冬、白僵蠶、水蛭等組成的中藥降糖復(fù)方(糖維康 ,TWK),是作者 10余年來在臨床實踐中根據(jù)益氣養(yǎng)陰、活血化瘀原則形成的經(jīng)驗方。為評價降糖復(fù)方對 2型糖尿病血糖、血脂、體質(zhì)量等的影響,本文通過動物實驗和臨床研究的方法,觀察降糖復(fù)方對 IR抵抗大鼠及 2型糖尿病患者與 IR有關(guān)的血生化指標(biāo)變化,初步探討其作用及機制,為臨床 2型糖尿病及 IR的治療提供實驗依據(jù)。

1 實驗動物和臨床資料

1.1 SD大鼠 雄性 60只,體重 (201± 22 g),購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心(醫(yī)動字第 08-005號 )。

1.2 病例選擇 根據(jù) W HO1999年糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn),選擇病程在 5年以內(nèi)的 2型糖尿病患者共 186例 ,男性 98例,女性 88例 ,平均年齡 (44±5.71)歲 ,平均病程(3.12±1.78)年。

2 實驗材料

2.1 藥品與試劑 降糖復(fù)方(TWK)由本院制劑室提供。鹽酸二甲雙胍 (Metformin,Met)批號2004100106,吉林省東北亞藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。胰島素放射免疫分析試劑盒購自北京科美東雅生物技術(shù)有限公司,批號050725。 TC、TG、LDL-C、HDL-C檢測試劑盒購自浙江東甌生物工程有限公司,批號 2005060005。

2.2 實驗儀器 OneTouch血糖儀及試紙條,美國Lifescan生產(chǎn)。 752N紫外可見分光光度計 ,上海精密科學(xué)儀器有限公司制造。GC-1200r放射免疫計數(shù)器,科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司。低溫超速離心機,日本東京 Hongo.BUNKYO-KU制造。

3 方 法

3.1 動物飼料 基礎(chǔ)飼料(每 100g含):標(biāo)粉 25g,玉米粉 30g,麩皮 20g,豆粉、魚粉各 10g,酵母粉 2g,食鹽、魚肝油各 1g,維生素添加劑、微量元素添加劑各 0.5g。高脂高糖飼料(每 100g含):基礎(chǔ)飼料 67g,膽固醇 2.5g,膽酸鈉 0.5g,白糖 20g,豬油 10g。

3.2 動物分組及處理 將大鼠隨機分為 6組,每組 10只。對照組,飼喂基礎(chǔ)飼料 ,同時給予蒸餾水;模型組,飼喂高脂高糖飼料,同時給予蒸餾水;Met組 ,飼喂高脂高糖飼料,同時給予 Met156mg/kg;降糖復(fù)方組,飼喂高脂高糖飼料,同時給予降糖復(fù)方 1.5g生藥/mL(TW K-L)和 0.75g生藥/mL(TWK-S)。各組均灌胃給藥,容量為 1mL/100g。飼養(yǎng)溫度 22±2℃,分籠飼養(yǎng),每籠 3～4只,自由飲水,晝夜交替 12h。 實驗期間,大鼠每周稱重 1次,喂養(yǎng) 10周后 ,大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉麻醉從心臟取血,制備血清測定各項指標(biāo),計算胰島素敏感指數(shù)ISI[1](Ln[1/(空腹血糖×空腹胰島素)])。

3.3 2型糖尿病患者在控制飲食和適當(dāng)運動的基礎(chǔ)上給予降糖復(fù)方(每粒膠囊 0.5g),每次 3～6粒 ,每天 3次,于餐前半小時口服,療程半年。分別觀察并比較治療前后血糖、血清胰島素、C-肽及血脂等變化。

3.4 血脂、血糖及胰島素的測定 TC、LDL-C、HDL-C、TG均按照試劑盒說明書進(jìn)行測定;血糖采用葡萄糖氧化酶法測定;血清胰島素及 C肽采用放射免疫分析方法測定。

3.5 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間對照用 SPSS統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析。

4 結(jié) 果

4.1 大鼠體重(g)的動態(tài)變化 高脂高糖飼料飼養(yǎng) 2～10周期間,模型組和各給藥組大鼠的體重均明顯低于空白對照組(P＜0.05,P＜0.01),各給藥組間未見顯著差別 ,圖 1。

4.2 降糖復(fù)方對 IR大鼠血糖、血清胰島素、C肽及 ISI的影響 與正常對照組比較,模型組血糖及各組血清胰島素水平均顯著升高 (P＜0.01),模型組、Met組 ISI明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)。與模型組比較,降糖復(fù)方組血糖及血清胰島素水平均顯著下降,ISI提高(P＜0.05,P＜0.01),表 1。

4.3 降糖復(fù)方對 IR大鼠血脂水平的影響 Met和降糖復(fù)方 1.5g生藥 /mL組均可降低 IR大鼠血清 TC、LDL-C、TG水平 ,升高 HDL-C水平。降糖復(fù)方 0.75g生藥 /mL組能降低LDL-C水平,升高 HDL-C水平。與 M et比較,降糖復(fù)方 1.5g生藥 /mL組的作用更明顯,圖 2。

4.4 降糖復(fù)方對 2型糖尿病患者血糖、血清胰島素及 C肽的影響 與治療前比較,治療 6個月后空腹和餐后 1、2、3h血糖均明顯降低(P＜0.05,P＜0.01),胰島素高峰前移至餐后1h,空腹及餐后 2、3h的高胰島素現(xiàn)象得到明顯改善(P＜0.01),C-肽也呈類似變化 ,圖 3～5。

4.5 降糖復(fù)方對 2型糖尿病患者血脂的影響 降糖復(fù)方能明顯降低 2型糖尿病合并高脂血癥患者的 TC、TG和 LDL-,C同時升高 HDL-C(P＜0.05,P＜0.01),圖 6。

表1 降糖復(fù)方對 IR大鼠血糖、血清胰島素、C肽及 ISI的影響()

表1 降糖復(fù)方對 IR大鼠血糖、血清胰島素、C肽及 ISI的影響()

與正常對照組比較?P＜0.05,◆P＜0.01;與模型組比較△P＜0.05,▲ P＜0.01;與 Met組比較□P＜0.05

組 別 血糖(mmol/L) 胰島素(mIu/L) ISI C-P(pmol/mL)空白對照組 4.04± 0.82 28.57± 6.89 -4.904± 0.42 0.039± 0.023模型組 4.97±0.92◆ 54.37± 8.67◆ -5.548± 0.31◆ 0.036±0.016二甲雙胍組 4.52± 0.56 41.24±9.84◆△ -5.194±0.30?▲ 0.050±0.023中藥復(fù)方組(1.5g生藥 /mL) 4.08±0.38▲ 43.12±7.41◆▲ -5.153±0.218▲ 0.049±0.020中藥復(fù)方組(0.75g生藥 /mL) 4.29±0.65△ 43.71±6.28▲◆ -4.893±0.19▲□ 0.051±0.020△

5 討 論 本研究所用降糖復(fù)方以益氣養(yǎng)陰、活血化瘀立方[2]。明代戴元禮在《論治要訣-消渴》中指出“三消得之氣之實,血之虛,久久不治,氣盡虛”,將益氣放在治療三消渴的首位,說明糖尿病的基本病機以氣虛為本[3]?；钛龇剿幨欠乐翁悄虿〉闹匾椒āＳ傺悄虿〉年P(guān)系中醫(yī)學(xué)早就有認(rèn)識,《內(nèi)經(jīng)》和《金匱要略》均有明確論述,如“血氣逆留,髓皮充肌,血脈不行 ,轉(zhuǎn)而為熱,熱則消肌膚,故為消癉?！敝赋隽讼逝c淤血之間的病理關(guān)系[4]。

IR是指胰島素在促進(jìn)葡萄糖的攝取和利用方面受損,即一定量的胰島素產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)低于預(yù)計正常水平。此時機體為了盡可能將血糖維持在正常水平,代償性分泌過多胰島素,導(dǎo)致高胰島素血癥。本研究采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)大鼠復(fù)制 IR動物模型,經(jīng)計算 ISI,證實模型復(fù)制成功[5]。實驗結(jié)果顯示,降糖復(fù)方 1.5g生藥 /m L、0.75g生藥 /m L均能增加 IR大鼠的ISI,降低其 TC、LDL-C、TG水平,升高 HDL-C水平。有研究發(fā)現(xiàn)肥胖與 IR密切相關(guān),通過減肥可以減輕 IR,改善胰島素的敏感性。但在本實驗中,IR大鼠的體重并不明顯增加,各給藥組的體重亦無顯著差別,提示在體重正常的情況下亦可出現(xiàn) IR,這與 IR在發(fā)病過程中的臨床表現(xiàn)一致[6]。IR時,出現(xiàn)脂質(zhì)代謝紊亂,脂蛋白脂酶活性下降,TG分解減慢,富含 TG的極低密度脂蛋白的乳靡微粒分解代謝受阻,導(dǎo)致在 IR時血中 TG、LDLC、TC含量升高,HDL-C含量下降[7]。降糖復(fù)方能顯著降低 IR大鼠和 2型糖尿病患者血脂水平的結(jié)果提示可能是其增加胰島素敏感性,改善 IR狀態(tài)的機制之一。

本研究所觀察的臨床病例,治療前空腹血糖及餐后血糖均較高,高峰值后移至餐后 2h,餐后 3h未能降至基礎(chǔ)值,經(jīng)過降糖復(fù)方 6個月的治療,各時相血糖值均降低,提示降糖復(fù)方對 2型糖尿病患者糖代謝紊亂有良好的改善作用。治療前各時相胰島素和 C-肽均較高,高峰值在餐后 2h,對糖負(fù)荷刺激反應(yīng)遲鈍,具有高胰島素血癥特點[8]。治療后胰島素和 C-肽值在空腹和餐后 2、3h均降低且高峰前移,提示降糖復(fù)方能改善高胰島素血癥及胰島素抵抗,胰島 B細(xì)胞負(fù)荷降低,對糖負(fù)荷刺激的反應(yīng)性增強。

以上結(jié)果提示,降糖復(fù)方可通過多個環(huán)節(jié),如降低血糖、血脂、減輕胰島素抵抗及增加胰島素敏感性等治療 2型糖尿病。Met是臨床常用的降糖藥之一,可促進(jìn)脂肪組織對葡萄糖的攝取,抑制胰高血糖素的釋放,改善患者的高胰島素狀態(tài),降糖復(fù)方的作用機制是否與其相似或有關(guān),尚有待進(jìn)一步的研究。

[1]李光偉,潘孝仁.檢測人群胰島素敏感性的一項新指數(shù) [J].中華內(nèi)科雜志,1993,10(32):656-660.

[2]陳家倫.淺談治療糖尿病中藥的研究與開發(fā) [J].國外醫(yī)學(xué)內(nèi)分泌學(xué)分冊,2004,24(3):150.

[3]周 藝.對治療 2型糖尿病 73首有效方藥應(yīng)用規(guī)律的探討[J].福建中醫(yī)藥,2007,38(2):52-53.

[4]吳 童.唐宋時期消渴病證治方藥統(tǒng)計分析 [J].中華中醫(yī)藥雜志,2008,23(10):918-920.

[5]李 慧,張 巖.喂養(yǎng)型胰島素抵抗動物模型的建立與評價 [J].中國誤診學(xué)雜志,2003,3(10),1531-1532.

[6]Francesco,Roberto,Mafalda.Obesity and body fat distribution induce endothelial dysfunction by oxidative stress.Diabetes,2001,50:159-165.

[7]Marja-Riitta,Taskinen. Diabetic dyslipidemia.Atherosclerosis supplements.2002,3:47-51.

[8]林 蘭.中西醫(yī)結(jié)合糖尿病學(xué)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1999:115.