苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素考察

周筱莉，羅亞虹，周 妮

（廣西壯族自治區(qū)桂林食品藥品檢驗(yàn)所，廣西桂林 541002）

苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素考察

周筱莉，羅亞虹，周 妮

（廣西壯族自治區(qū)桂林食品藥品檢驗(yàn)所，廣西桂林 541002）

目的：考察苯妥英鈉片紫外光譜鑒別過程中的各種影響因素。方法：對(duì)苯妥英鈉片的輔料、供試品溶液的制備過程、正庚烷溶劑進(jìn)行考察及用不同器具試驗(yàn)。用紫外-可見分光光度法在200～300 nm的波長(zhǎng)處掃描并測(cè)定其最大吸收及吸光值。結(jié)果：苯妥英鈉片輔料中的糊精、供試品溶液的浸漬時(shí)間與研磨時(shí)間及用不同的器具試驗(yàn)對(duì)紫外吸收有明顯影響。結(jié)論：苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素較多，容易誤判，建議對(duì)本法進(jìn)行修訂。

苯妥英鈉片；紫外光譜；鑒別；影響因素

苯妥英鈉片是抗癲癇大發(fā)作的首選藥物，也常用于抗心律失常、抗三叉神經(jīng)痛、抗輕度高血壓等。由于苯妥英鈉有廣泛的生物學(xué)活性和藥理治療作用，臨床上也常將其用于其他疾病的治療。收載于《中國(guó)藥典》2005年版[1]苯妥英鈉片的［鑒別］（2）項(xiàng)是紫外光譜法，將樣品與高錳酸鉀和氫氧化鈉與水加熱反應(yīng)，經(jīng)正庚烷萃取制成供試液，規(guī)定在（248±2）nm波長(zhǎng)處應(yīng)有最大吸收。筆者在檢驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)本法的檢驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性差。經(jīng)對(duì)苯妥英鈉片中的輔料[2]、供試品溶液的制備過程、及用不同的容器試驗(yàn)和正庚烷溶劑進(jìn)行考察[3-4]，找到了苯妥英鈉片檢驗(yàn)結(jié)果的影響因素?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 儀器與試藥

苯妥英鈉對(duì)照品：批號(hào)100210-200401（中檢所提供），樣品批號(hào)：070830、080101、090201、070601、090102、070501、0902161、080403、080602、081102，分別從各醫(yī)藥衛(wèi)生部門監(jiān)督抽驗(yàn)。

高錳酸鉀批號(hào)：061017，氫氧化鈉批號(hào)：060418，正庚烷批號(hào)：20020607、20040303、20041209、07081402、20090330、090201、20090915（均為分析純），分別購(gòu)自全國(guó)各化學(xué)試劑廠。

島津UV-2450紫外分光光度儀GR-202電子分析天平，可調(diào)壓電爐，酒精燈。

2 方法與結(jié)果

試驗(yàn)方法均按照 《中國(guó)藥典》2005年版二部苯妥英鈉片的［鑒別］（2）操作。即取制備好的供試品溶液的續(xù)濾液0.2 ml，（相當(dāng)于苯妥英鈉 10 mg）加高錳酸鉀 10 mg、氫氧化鈉0.25 g與水10 ml，小火加熱至沸并保持微沸2 min，放冷。各取5 ml加正庚烷20 ml，振搖提取，照紫外-可見分光光度法在（248±2） nm 的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（Aλmax）。

2.1 輔料對(duì)鑒別結(jié)果的影響

按處方量進(jìn)行組方或拆方試驗(yàn)。取苯妥英鈉原料藥500mg，分別加糊精、滑石粉、淀粉和硬脂酸鎂 70、70、70、和7.5 mg，混勻，加水10 ml浸漬，濾過，取續(xù)濾液0.2 ml按標(biāo)準(zhǔn)方法操作，測(cè)定，結(jié)果見表1。

表1 苯妥英鈉片輔料的考察結(jié)果

2.2 供試品浸漬、研磨時(shí)間的影響

取本品30片（共6份，每份5片，相當(dāng)于苯妥英鈉500mg），分置6個(gè)乳缽中，研細(xì)，分別用水10 ml浸漬5、10、15 min，加水 10 ml研磨 5、10、15 min；過濾，測(cè)定，結(jié)果見表 2。

表2 供試品浸漬、研磨時(shí)間試驗(yàn)結(jié)果 (批號(hào)090201)

2.3 正庚烷溶劑的影響因素考察

取正庚烷適量轉(zhuǎn)入石英杯中，在紫外-可見分光光度計(jì)上進(jìn)行基線掃描后，以空氣為空白，在200～300 nm波長(zhǎng)處掃描，并在 244～252 nm波長(zhǎng)處測(cè)定紫外吸收。另取5批苯妥英鈉片供試品各 10 片（100 mg/片）或 20 片（50 mg/片）（相當(dāng)于苯妥英鈉1 g），研細(xì)，加水20 ml浸漬，過濾，各取續(xù)濾液1.0 ml，置燒杯中，加高錳酸鉀50 mg、氫氧化鈉1.25 g與水50 ml，小火加熱至沸并保持微沸2 min，放冷。取5 ml/份，共5份。（每一批號(hào)平行試驗(yàn)5份，分別用5批不同廠家的正庚烷提取供試液，以避免加熱反應(yīng)的影響）用不同批號(hào)的正庚烷20 ml提取，測(cè)定，結(jié)果見表3。

表3 5批供試品考察不同廠家的正庚烷結(jié)果

2.4 用不同器具試驗(yàn)影響因素考察

取25 ml的小燒杯依次加入制備好的供試品溶液0.2 ml（相當(dāng)于苯妥英鈉10 mg）、高錳酸鉀10 mg、氫氧化鈉0.25 g與水10 ml，用可調(diào)壓電爐小火加熱至沸并保持微沸2 min，放冷；另取25 ml小試管（1.5 cm×18.0 cm）依次加入供試品溶液0.2 ml、高錳酸鉀10 mg、氫氧化鈉0.25 g與水10 ml，在酒精燈上小火加熱5 min，放冷。各取5 ml加正庚烷20 ml，振搖提取，取其上清液照紫外-可見分光光度法在（248±2）nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，結(jié)果見表 4。

表4 10批供試品用燒杯試驗(yàn)與用試管試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

從表1可見，苯妥英鈉片中的輔料主要有糊精、滑石粉、淀粉和硬脂酸鎂。通過拆方試驗(yàn)分析，由于輔料中糊精的干擾[5-6]，可使紫外光譜吸光度降低40%～50%。由于各廠家的生產(chǎn)工藝不同，平行試驗(yàn)測(cè)得的紫外吸光度差別較大,分析可能原因?yàn)橛行┧帍S生產(chǎn)的苯妥英鈉片中的輔料沒有糊精及受藥品原料的純度和投料比例的影響。

由表2所見，由于苯妥英鈉在空氣中及水中不穩(wěn)定，因此，在空氣中暴露時(shí)間及在水中研磨時(shí)間過長(zhǎng)，可加速其分解和水解，使測(cè)得的吸光度偏低。因此供試品溶液的制備最好是將其研細(xì)的粉末置于具塞瓶中浸漬。并先加試劑后加供試品溶液再加水進(jìn)行加熱反應(yīng)，這樣可縮短供試品暴露空氣中的時(shí)間，使測(cè)得的數(shù)據(jù)接近真值。

含有雜原子的有機(jī)溶劑，通常均具有很強(qiáng)的末端吸收；當(dāng)溶劑不純時(shí)，可增加干擾吸收[1]?！吨袊?guó)藥典》附錄紫外-可見分光光度法對(duì)溶劑的要求：測(cè)定供試品之前，要先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長(zhǎng)附近是否符合要求。按照苯妥英鈉片的測(cè)定波長(zhǎng)在（248±2）nm，正庚烷在244～252 nm的吸光度要求應(yīng)在0.20～0.10之間。經(jīng)考察7批中有2批不符合藥用要求，可影響紫外吸收，合格的正庚烷影響不大（表3）。因此每次使用前，都應(yīng)檢查正庚烷的紫外吸收，檢驗(yàn)合格再用于試驗(yàn)。

由于藥品標(biāo)準(zhǔn)沒有注明加熱時(shí)的溫度和用何種容器進(jìn)行試驗(yàn)，使得試驗(yàn)溫度無法控制。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，僅僅用小火加熱5 min，如果沒有沸騰，有時(shí)測(cè)得結(jié)果無紫外吸收或吸光度很低，重現(xiàn)性差。改為小火加熱至沸并保持微沸2 min，可使檢驗(yàn)數(shù)據(jù)重現(xiàn)。表4測(cè)定結(jié)果顯示，用小燒杯加熱不能反應(yīng)完全，同時(shí)用燒杯取樣加速樣品在空氣中分解而使測(cè)得數(shù)據(jù)降低。改用小試管試驗(yàn)并用酒精燈小火加熱反應(yīng)測(cè)得的吸光度比用小燒杯試驗(yàn)加熱反應(yīng)高，可把對(duì)苯妥英鈉片的紫外光譜鑒別影響因素降到最低限度。

由于苯妥英鈉片紫外光譜鑒別的影響因素較多，容易誤判，建議對(duì)本法進(jìn)行修訂[7-8]。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].二部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:324,附錄22.

[2]李燕,趙利剛,靖博.不同輔料對(duì)辛伐他汀片劑穩(wěn)定性的影響因素[J].中國(guó)藥劑雜志,2009,15(5):30-31.

[3]楊瑞瑞,楊海燕.刺五加注射液含量測(cè)定方法影響因素考察[J].中國(guó)藥業(yè),2009,19(25):55-56.

[4]胡碧波,黃祖帥.杭白菊中主要黃銅甙的測(cè)定及影響因素考察[J].中國(guó)中藥雜志,2006,21(1):88-89.

[5]陸濱,陰鳳霞.糊精對(duì)醋酸地塞米松等小劑量藥物含量測(cè)定的影響[J].中國(guó)藥業(yè),2003,12(1):40.

[6]羅貴萍.糊精溶液對(duì)氯化鈉含量測(cè)定的影響[J].河北醫(yī)藥,2006,28(9):868-869.

[7]賈首時(shí),張連成,劉峰.反相高效液相色譜法測(cè)定苯妥英鈉片的含量[J].藥物鑒定,2007,16(17):24.

[8]黃志遠(yuǎn).苯妥英鈉的HPLC測(cè)定[J].今日藥學(xué),2009,19(1):40-41.

Influencing factors of UV action spectrum of phenytoin sodium tablets

ZHOU Xiaoli,LUO Yahong,ZHOU Ni
(Guangxi Guilin Institute for Food and Drug Control,Guangxi Zhuang Autonomous Region,Guilin 541002,China)

Objective:To investigate the influencing factors in the process of action spectrum of phenytoin sodium tablets.Methods:Determined the auxiliary of phenytoin sodium tablets and in the process of preparation of the test solution and the menstruum of heptane and compare with different method of operation at 200 nm to 300 nm wavelength by UV spectrophotometry.Results:The dextrin of phenytoin sodium tablets,using different ware and method of operation could change obviously.Conclusion:The above influencing factors should be avoid due to cause lower determination results.

Phenytoin sodium tablets;UV action spectrum;Authentication;Influencing factors

R943

B

1674-4721（2010）10（a）-128-02

2010-07-16）