復(fù)方血壓安緩釋片的制備及質(zhì)量控制

申獻玲，吳昌富，肖峰（湖北荊州市第一人民醫(yī)院藥劑科，荊州市 434000）

復(fù)方血壓安緩釋片的制備及質(zhì)量控制

申獻玲＊，吳昌富，肖峰（湖北荊州市第一人民醫(yī)院藥劑科，荊州市 434000）

目的：制備復(fù)方血壓安緩釋片并建立其質(zhì)量控制方法。方法：以緩釋材料羥丙基甲基纖維素為主要輔料，阿替洛爾、氫氯噻嗪、硝苯地平為主藥制備緩釋片；采用高效液相色譜法同時測定其中3主藥的含量；并考察其體外釋放行為。結(jié)果：所制制劑為淡黃色片，鑒別、檢查均符合2005年版《中國藥典》中的相關(guān)規(guī)定；阿替洛爾、氫氯噻嗪、硝苯地平檢測濃度的線性范圍分別為10～250（r＝0.999 4）、6～150（r＝0.999 6）、5～125 μg·mL－1（r＝0.999 2），平均回收率分別為99.95%、99.68%、99.42%，RSD分別為1.41%、1.55%、1.38%；該制劑體外釋放行為符合Higuchi方程，8 h累積釋放度＞80%。結(jié)論：該制劑制備工藝簡便，緩釋效果理想，質(zhì)量可控。

復(fù)方血壓安緩釋片；制備；質(zhì)量控制；高效液相色譜法

復(fù)方血壓安緩釋片為我院研制的一種治療高血壓的復(fù)方制劑，其主要成分為阿替洛爾（Atenolol）、氫氯噻嗪（Hydrochlorothiazide）和硝苯地平（Nifedipine）。經(jīng)我院心血管內(nèi)科（省重點?？疲┽t(yī)師多年的臨床經(jīng)驗證實，小劑量聯(lián)合應(yīng)用阿替洛爾、氫氯噻嗪、硝苯地平治療高血壓可取得滿意效果，但目前市場上無小劑量緩釋片供應(yīng)，為了維持療效，患者每天需多次服藥，又因每次用藥劑量很小，故極易造成分割劑量不準，不但影響治療效果，而且導(dǎo)致患者用藥依從性差。因此，筆者選用緩釋材料羥丙基甲基纖維素（HPMC）為主要輔料制備上述3種組成的小劑量的緩釋片，以延緩藥物釋放，有效降低血壓，延長患者服藥間隔時間，提高其用藥依從性。筆者在本試驗中，介紹了復(fù)方血壓安緩釋片的制備方法，并采用高效液相色譜（HPLC）法同時測定其中3種組分含量，考察其體外釋放度[1，2]，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

1100 HPLC儀（美國Agilent公司）；ZRS-4智能溶出試驗儀（天津大學(xué)無線電廠）；UV-265型紫外分光光度計（日本島津公司）；CQ50超聲波清洗儀（上海超聲波儀器廠）。

1.2 試藥

阿替洛爾標準品（批號：100117-200504，純度：99.8%）、氫氯噻嗪標準品（批號：100309-200702，純度：99.8%）、硝苯地平標準品（批號：100338-200502，純度：99.9%）均由中國藥品生物制品檢定所提供；阿替洛爾原料藥（天津市中央藥業(yè)有限公司，批號：070501，純度：98.5%）；氫氯噻嗪原料藥（運城市風(fēng)陵渡開元藥化有限公司，批號：060420，純度：99.2%）；硝苯地平原料藥（芮城縣虹橋藥用中間體有限公司，批號：060420，純度：99.4%）；血壓安緩釋片（本院自制，批號：20070814、20070926、20071022，規(guī)格：每片0.3 g，含阿替洛爾12.5 mg、氫氯噻嗪6.25 mg、硝苯地平5.0 mg）；HPMC（K4M，湖州展望天明藥業(yè)有限公司，批號：20061107）；微晶纖維素（批號：20070105）、乳糖（批號：20061112）均由安徽山河藥用輔料公司提供；乙腈、甲醇均為色譜純；其它試劑均為分析純。

2 處方與制備

2.1 處方

阿替洛爾12.5 g，氫氯噻嗪6.25 g，硝苯地平5.0 g，HPMC 90 g，微晶纖維素90 g，乳糖75 g，乙基纖維素、硬脂酸鎂及80%乙醇適量。

2.2 制備

按處方稱取過100目篩阿替洛爾、氫氯噻嗪及硝苯地平，與HPMC、微晶纖維素及乙基纖維素過篩充分混勻，加入80%乙醇制成軟材，過16目篩制粒，60℃下干燥，整粒，加入硬脂酸鎂，混勻，壓片，即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為淡黃色片。

3.2 鑒別

3.2.1 取本品細粉適量（約相當于阿替洛爾10 mg），置于100 mL容量瓶中，加無水乙醇適量，超聲，使阿替洛爾溶解，加無水乙醇至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 mL，置于另一100 mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，照阿替洛爾項下的鑒別（1）項[3]試驗，顯相同的反應(yīng)。

3.2.2 取本品細粉適量（約相當于氫氯噻嗪50 mg），加氫氧化鈉試液10 mL，振搖使氫氯噻嗪溶解，濾過，取續(xù)濾液3 mL，照氫氯噻嗪項下的鑒別（1）項，自“煮沸5分鐘”起[3]，依法試驗，顯相同的反應(yīng)。

3.2.3 取本品細粉適量（約相當于硝苯地平50 mg），加丙酮3 mL，振搖提取，放置后，取上清液，照硝苯地平項下的鑒別（1）項[3]試驗，顯相同的反應(yīng)。

3.3 檢查

應(yīng)符合2005版《中國藥典》（二部）片劑項下有關(guān)規(guī)定[3]。

3.4 含量測定

3.4.1 色譜條件。色譜柱：ZORBAXSB-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：0.01 mmol·L－1磷酸二氫鉀-甲醇-乙腈（6∶3∶1，pH＝3，含6.0 mmol·L－1庚烷磺酸鈉）（應(yīng)用前經(jīng)0.45 μm膜過濾，超聲脫氣）；進樣量：20 μL；柱溫：35℃；檢測波長：272 nm；流速：1.0 mL·min－1；紙速：0.25 cm·min－1。理論塔板數(shù)按各組分計算均不小于2 500；信噪比≥3。

3.4.2 標準品溶液的制備。精密稱取阿替洛爾標準品62.5 mg、氫氯噻嗪標準品37.5 mg、硝苯地平標準品30.5 mg，分別置于3個50 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，作為標準品溶液。分別精密量取上述3種標準品溶液適量，置于同一50 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，作為混合標準品溶液。

3.4.3 供試品溶液的制備。取30片樣品，混勻，研細，精密稱取一定量的樣品細粉于50 mL容量瓶中，加流動相適量，經(jīng)超聲波提取并時時振搖使溶解，冷卻至室溫，加流動相定容，搖勻，過濾，取濾液10 mL，置于50 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

3.4.4 空白溶液的制備。按處方配比制備不含3主藥的空白樣品，按“3.4.3”項下方法制備成空白溶液。

3.4.5 專屬性試驗。分別量取混合標準品、供試品、空白溶液，按“3.4.1”項下色譜條件進樣測定。結(jié)果表明，輔料不干擾測定，色譜見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.空白；B.混合標準品；C.供試品；1.阿替洛爾；2.氫氯噻嗪；3.硝苯地平Fig 1 HPLC chromatographyA.blank substance；B.mixture reference substance；C.sample；1.atenolol；2.hydrochlorothiazide；3.nifedipine

3.4.6 標準曲線的制備。分別精密吸取標準品溶液0.2、0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、5.0 mL置于25 mL容量瓶中，加流動相定容，制備成系列濃度溶液，按“3.4.1”項下色譜條件進樣，以峰面積（A）對濃度（C）進行線性回歸，求得阿替洛爾、氫氯噻嗪、硝苯地平線性方程分別為A＝5 014.7C+3 728.2（r＝0.999 4）、A＝8 316.7C－738.1（r＝0.999 6）、A＝10 253.3C+593.5（r＝0.999 2）。結(jié)果，阿替洛爾、氫氯噻嗪、硝苯地平檢測濃度的線性范圍分別為10～250、6～150、5～125 μg·mL－1。

3.4.7 精密度試驗。取標準品溶液，按“3.4.1”項下色譜條件測定，進樣6次。結(jié)果，阿替洛爾、氫氯噻嗪、硝苯地平的RSD分別為1.41%、1.55%、1.38%。

3.4.8 回收率試驗。分別取3種標準品溶液適量，加入到已知含量的樣品中，按“3.4.9”項下方法測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗結(jié)果（n＝3）Tab 1 Result of recovery test（n＝3）

3.4.9 樣品含量測定。精密吸取供試品溶液20 μL，按“3.4.1”項下色譜條件測定，按外標法定量，用回歸方程求得樣品含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Results of determination of samples（n＝3）

3.5 體外釋放度試驗

取樣品，按2005年版《中國藥典》溶出度測定方法第二法[3]，以0.5%吐溫-80/鹽酸溶液（9→1 000 mL）1 000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r·min－1，溫度為（37±0.5）℃，間隔一定時間（1、2、3、4、6、8 h）取5 mL樣品溶液（同時補加等量同溫的溶出介質(zhì)），過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液，按“3.4.9”項下方法測定，用回歸方程求得相應(yīng)濃度，計算體外累積釋放度（Q）。測定結(jié)果用Higuchi動力學(xué)方程擬合[4]，表明藥物體外釋放行為符合Higuchi方程，8 h累積釋放度＞80%。3批樣品體外釋放度測定結(jié)果詳見表3。

表3 體外累積釋放度測定結(jié)果（n＝3）Tab 3 In vitro accumulative dissolution rate of samples（n＝3）

4 討論

試驗曾考察了不同溶出介質(zhì)、不同轉(zhuǎn)速對緩釋片的溶出度影響。結(jié)果顯示，在吐溫-80/鹽酸溶液（9→1 000 mL）、吐溫-80水溶液、鹽酸溶液（9→1 000 mL）3種溶出介質(zhì)中，樣品釋放度有一定差異，以吐溫-80/鹽酸溶液（9→1000 mL）介質(zhì)中樣品的3種組分溶出度最理想?？疾炀忈屍谵D(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速分別為50、75、100 r·min－1時的溶出度，結(jié)果表明，轉(zhuǎn)速對釋放度結(jié)果影響不大。故選擇吐溫-80/鹽酸溶液（9→1 000 mL）為溶出介質(zhì)、轉(zhuǎn)速為50 r·min－1作為釋放度測定的條件。

采用紫外分光光度計，在200～450 nm波長內(nèi)進行紫外掃描。由光譜顯示，阿替洛爾特征吸收峰為276 nm、氫氯噻嗪為270 nm，硝苯地平為274 nm，為了兼顧這3種組分，選擇了272 nm作為檢測波長。

因硝苯地平遇光極不穩(wěn)定，放置一段時間后進行檢測，即可見檢出硝苯地平分解物峰。因此，試驗過程中應(yīng)避光操作，并使用棕色容量瓶配制，且配制好的溶液應(yīng)于暗處放置。

綜上所述，該制劑制備工藝簡便，緩釋效果理想，質(zhì)量可控。

[1]王中彥，唐星，侯景剛，等.HPLC法測定硝苯地平阿替洛爾緩釋雙層片中2組分含量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2002，9（1）：38.

[2]賀國芳，郭小梅，丁玉峰，等.氫氯噻嗪緩釋片的制備及體外釋放考察[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2004，24（9）：526.

[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：299、406、709，附錄5、73.

[4]奚念珠主編.藥劑學(xué)[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：456.

Preparation and Quality Control of Compound Xueyaan Sustained-release Tablets

SHEN Xian-ling，WU Chang-fu，XIAO Feng（The First People’s Hospital of Jingzhou in Hubei Province，Jingzhou 434000，China）

OBJECTIVE：To prepare Compound Xueyaan sustained-release tablet and establish a method for its quality control. METHODS：Compound Xueyaan sustained-release tablet was prepared with hydroxy propyl methyl cellulose as main adjuvants and atenolo，hydrochlorothiazide and nifedipine as main ingredients.The content of three main ingredients and in vitro dissolution were determined by HPLC.RESULTS：The preparation manifested faint yellow tablet and its identification and test was in line with standards specified inChinese Pharmacopeia（2005 edition）.The linear ranges of atenolol，hydrochlorothiazide and nifedipine in Compound Xueyaan sustained-release tablet were 10～250 μg·mL－1（r＝0.999 4），6～150 μg·mL－1（r＝0.999 6）and 5～125 μg·mL－1（r＝0.999 2），respectively.The mean recovery of all compounds were 99.95%（RSD＝1.41%），99.68%（RSD＝1.55%）、99.42%（RSD＝1.38%），respectively.CONCLUSION：The preparation technology is simple and convenient.The preparation assumed satisfied sustained-release and controllable in quality.

Compound Xueyaan sustained-release tablet；Preparation；Quality control；HPLC

R927. 2；R972+.4

A

1001-0408（2010）01-0064-03

2009-02-17

2009-04-16）

＊主管藥師，碩士。研究方向：醫(yī)院制劑、臨床藥學(xué)。電話：0716-8112790。E-mail：sxlzizi@sina.com