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    規(guī)?;膛pB(yǎng)殖區(qū)奶牛乳房炎的調(diào)查及病因分析

    2010-08-15 00:42:03李宏勝王正兵嚴(yán)作庭苗小樓陳炅然祁光紅肖俊武張繼良中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所新獸藥工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院甘肅荷斯坦奶牛繁育中心甘肅省白銀市白銀區(qū)獸醫(yī)局天水市秦城區(qū)動(dòng)物檢疫站
    中國乳業(yè) 2010年10期
    關(guān)鍵詞:鏈球菌病原菌乳房

    ■ 王 玲 李宏勝 王正兵 嚴(yán)作庭 苗小樓 陳炅然 祁光紅 肖俊武 張繼良中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所新獸藥工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 甘肅荷斯坦奶牛繁育中心 甘肅省白銀市白銀區(qū)獸醫(yī)局 天水市秦城區(qū)動(dòng)物檢疫站

    奶牛乳房炎是由物理、化學(xué)或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引發(fā)的一種炎癥反應(yīng),其中多種病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因,是危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)最嚴(yán)重的一種疾病,特別是隱性乳房炎,除導(dǎo)致奶牛產(chǎn)奶量和牛奶質(zhì)量下降,醫(yī)療費(fèi)用增加外,還可能傳染給其它奶牛,甚至導(dǎo)致慢性感染奶牛的淘汰和死亡[1~3]。由于奶牛隱性乳房炎的病因復(fù)雜,隱蔽性強(qiáng),因此對(duì)隱性乳房炎進(jìn)行監(jiān)測(cè)是奶牛場(chǎng)最重要的工作之一。

    我國對(duì)不同地區(qū)奶牛場(chǎng)的患牛奶樣進(jìn)行細(xì)菌分離與藥敏試驗(yàn),對(duì)奶牛乳房炎的防治起到了積極作用,但由于病原菌與環(huán)境和牛場(chǎng)管理密切相關(guān),因此各地區(qū)、不同時(shí)間及不同奶牛群的感染情況各不相同,分離菌的種類往往呈現(xiàn)地區(qū)差異[4~8]。本研究對(duì)部分省市成年泌乳牛進(jìn)行乳房炎病因及發(fā)病情況進(jìn)行了調(diào)查,并采集臨床患病奶牛的乳樣進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查,旨在為奶牛乳房炎的防治提供理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 調(diào)查時(shí)間及地點(diǎn)

    2009年7 月~2010年7月,對(duì)甘肅、寧夏、武漢各地的奶??萍紙@區(qū)、養(yǎng)殖小區(qū)、繁殖示范園區(qū)、奶產(chǎn)業(yè)核心區(qū)及部分農(nóng)戶的近3000頭奶牛進(jìn)行奶牛乳房炎發(fā)病情況調(diào)查,采集患牛奶樣,并查閱病牛記錄,統(tǒng)計(jì)發(fā)病情況,觀察飼養(yǎng)管理、擠奶衛(wèi)生、養(yǎng)殖環(huán)境狀況,了解飼養(yǎng)管理水平,詢問疾病防治措施及治療手段。

    1.2 試驗(yàn)對(duì)象

    采集臨床患病奶牛及部分泌乳期隱性乳房炎的奶樣,樣品采集參照本實(shí)驗(yàn)室制定的方法及步驟。臨床型乳房炎病牛選擇出現(xiàn)乳房發(fā)紅、發(fā)熱、腫脹、有痛感癥狀,且乳汁性狀發(fā)生改變、部分奶樣帶血的奶牛;隱性乳房炎病牛選擇LMT(蘭州乳房炎診斷試驗(yàn))診斷液檢測(cè)陽性的奶牛。采樣前病牛均未進(jìn)行過抗菌素藥物治療。

    1.3 采樣方法

    用溫水及消毒液(0.2%新潔爾滅等)洗凈乳房和乳頭,酒精棉球擦拭乳頭及手,棄去頭3把奶,以排除一些污染的雜菌。采集奶樣至無菌血瓊脂斜面采樣管中,每頭奶牛從同一個(gè)發(fā)病乳區(qū)取樣。標(biāo)明牛號(hào)、日期、牛場(chǎng),樣品至冰盒中儲(chǔ)存,盡快送檢。

    1.4 細(xì)菌分離、培養(yǎng)

    挑取少許奶樣接種營養(yǎng)肉湯,進(jìn)行增菌培養(yǎng),置37℃培養(yǎng)24h。生長良好者再涂劃綿羊血瓊脂平板,置37℃培養(yǎng)24h,記錄細(xì)菌菌落形態(tài)及溶血情況。挑取單個(gè)菌落,接種營養(yǎng)肉湯做純培養(yǎng),置37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h。一般細(xì)菌經(jīng)過24h培養(yǎng)后,均可生長良好,但諾卡氏菌、棒狀桿菌等,需要培養(yǎng)36h以上。當(dāng)乳腺出現(xiàn)明顯變化,乳汁異常,按此常規(guī)培養(yǎng),始終不見長菌,又沒有抗菌藥治療等干擾細(xì)菌因素存在時(shí),則應(yīng)考慮在CO2厭氧條件下培養(yǎng),或用其它培養(yǎng)基進(jìn)行支原體、真菌的檢驗(yàn)。

    將純培養(yǎng)得到的不同形態(tài)及生長特性的細(xì)菌菌液,涂片、革蘭氏染色、鏡檢,涂片純凈無雜菌者,血斜面保存。

    1.5 生化特性鑒定[9~10]

    1.5.1 葡萄球菌

    將在肉湯中生長渾濁一致、鏡檢結(jié)果為葡萄球菌屬的菌株,參考《奶牛乳房炎防治技術(shù)指南(試行)》規(guī)定中的4項(xiàng)生化培養(yǎng)鑒定指標(biāo):有氧甘露醇,無氧甘露醇,過氧化氫酶及兔血漿凝固酶試驗(yàn)做進(jìn)一步鑒定,判定結(jié)果。

    1.5.2 鏈球菌

    菌株接觸酶結(jié)果陰性,在血瓊脂平板中菌落較小、溶血,且鏡檢成不同程度鏈狀,擬定為鏈球菌屬。根據(jù)《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》,選擇如下生化試驗(yàn):七葉苷,馬尿酸鹽,0.1%牛乳美蘭,甘露醇,山梨醇,水楊苷,甘油,血清菊糖,6.5%高鹽肉湯,pH值為9.6的肉湯,膽汁,CAMP試驗(yàn),區(qū)分無乳鏈球菌、停乳鏈球菌和乳房鏈球菌。

    1.5.3 G—桿菌

    肉湯渾濁,菌落和菌體形態(tài)、顏色基本符合各屬細(xì)菌特征,且涂片純凈、不見雜菌時(shí),按G—菌的各項(xiàng)特征進(jìn)行生化鑒定。

    2 結(jié)果與分析

    絕大部分樣本都只分離到一種優(yōu)勢(shì)細(xì)菌,但少數(shù)乳房炎樣本能分離到2種細(xì)菌,為混合感染;無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和乳房鏈球菌的檢出率較高,其中以鏈球菌和金黃色葡萄球菌居多,約占病原菌總數(shù)的90%以上。其次是表皮葡萄球菌、化膿鏈球菌、乳鏈球菌等環(huán)境性病原菌,它們的檢出率也比較高,個(gè)別地區(qū)出現(xiàn)差異可能與奶牛場(chǎng)的衛(wèi)生條件和季節(jié)、氣候因素有關(guān)。

    本次流行病學(xué)調(diào)查地區(qū)包括甘肅蘭州、白銀、臨澤及甘州區(qū)、天水,湖北武漢黃陂區(qū),寧夏吳忠、中衛(wèi)、中寧、銀川等地奶牛養(yǎng)殖示范區(qū)。試驗(yàn)結(jié)果表明,鏈球菌、葡萄球菌和大腸桿菌仍是奶牛乳房炎的主要病原菌,該結(jié)果與Radostitsn OM[11~12]等描述的奶牛乳房炎主要病原菌一致,表明引起奶牛乳房炎的主要病原菌,其種類變化不明顯。但是在總體不變的情況下,不同地區(qū)及奶牛群還存在很大的地域差異性,如蘭州地區(qū)的3個(gè)奶牛場(chǎng),其中2個(gè)奶牛場(chǎng)以無乳鏈球菌感染為主,另1個(gè)以金黃色葡萄球菌和停乳桿菌為主,且細(xì)菌混合感染有上升趨勢(shì)。近幾年,該地區(qū)表皮鏈球菌、大腸桿菌、乳房鏈球菌的檢出率較以往有所增加,無乳鏈球菌較以往有所下降。這說明奶牛飼養(yǎng)的環(huán)境條件較差,使乳中細(xì)菌數(shù)量上升,影響牛奶的品質(zhì),對(duì)奶牛乳房炎的發(fā)生都會(huì)帶來直接或間接的影響。因此,乳房炎患牛乳樣中分離菌的種類分布呈現(xiàn)地方差異,很可能與各奶牛場(chǎng)優(yōu)勢(shì)菌群的流行病學(xué)差異性有關(guān),當(dāng)然與各奶牛場(chǎng)的衛(wèi)生管理及治療措施存在差異也有關(guān)。

    3 發(fā)病率及其影響因素

    3.1 病原菌感染分析

    隨著乳房炎綜合防治及各種治療藥物的廣泛使用,乳房炎主要病原菌區(qū)系分布也在不斷變化。據(jù)以往報(bào)道[13~17],我國新疆、上海、南寧、安徽、成都、石家莊等地區(qū)主要以金黃色葡萄球菌為主,無乳鏈球菌和大腸桿菌次之;甘肅、內(nèi)蒙古、天津等地以無乳鏈球菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌為主;湖北武漢東西湖地區(qū)以停乳鏈球菌的分離率最高,而湖北宜昌夷陵地區(qū)則以金黃色葡萄球菌和無乳鏈球菌為主;上海十一牧場(chǎng)報(bào)道了肺炎克雷伯氏菌引起的急性乳房炎,在短期內(nèi)蔓延至全牛群;大腸桿菌性乳房炎多見于高產(chǎn)奶牛及產(chǎn)后泌乳高峰期,臨床癥狀明顯。

    3.2 年齡和胎次

    隨著年齡和胎次的增加,奶牛乳房炎的發(fā)病率呈上升趨勢(shì),7~8歲時(shí)發(fā)病率達(dá)到高峰, 隨后呈下降趨勢(shì),以第三季度與第三四胎發(fā)病率最高。一般來說[18],乳房炎致病菌特別是無乳鏈球菌會(huì)隨著奶牛年齡的增加而增加,因此,7歲齡奶牛幾乎都有一個(gè)以上乳區(qū)患乳房炎。由于隨著奶牛年齡的增加,擠奶次數(shù)多、時(shí)間長,乳頭括約肌松弛,閉合不嚴(yán),病原微生物容易侵入,此時(shí)為產(chǎn)奶高峰,乳房負(fù)擔(dān)重,導(dǎo)致發(fā)病率增高。而7~8歲后隨著產(chǎn)奶量的逐漸降低,乳房負(fù)擔(dān)隨之減輕,因此發(fā)病率有下降趨勢(shì)。

    3.3 產(chǎn)奶量和泌乳時(shí)間

    奶牛乳房炎的發(fā)病率隨產(chǎn)奶量的增加、泌乳時(shí)間的延長而增高,并且乳房下垂者多發(fā)。第三、四泌乳月與第九泌乳月的奶牛易感性較強(qiáng)。泌乳時(shí)間長會(huì)導(dǎo)致奶牛的免疫力下降,乳房受損機(jī)會(huì)增加,同時(shí)易感染病原菌,因此使發(fā)病率升高。

    3.4 季節(jié)和環(huán)境因素

    奶牛乳房炎的發(fā)病率存在著季節(jié)性差異,不同季節(jié)和月份奶牛隱性乳房炎的發(fā)病差異極顯著。夏季氣溫高,濕度大,天氣悶熱,奶牛體質(zhì)下降,加之牛舍環(huán)境衛(wèi)生、通風(fēng)差,牛床潮濕,飼養(yǎng)密度高、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)所小,病原菌極易大量繁殖并傳播,故乳房炎發(fā)生率明顯高于其它季節(jié);而冬季氣候寒冷,細(xì)菌不易繁殖,乳房炎發(fā)病率相對(duì)較低。同一季節(jié),華中地區(qū)較西北地區(qū)乳房炎的發(fā)病率高。因此,保持牛舍內(nèi)外清潔、牛體的衛(wèi)生,避免擠奶過程中的交叉感染,是預(yù)防乳房炎的重要措施。

    3.5 擠奶技術(shù)

    擠奶技術(shù)不當(dāng)會(huì)使乳頭粘膜及上皮受到損傷,機(jī)器擠奶時(shí)間過長,負(fù)壓過高或抽動(dòng)過速,也能損傷乳頭皮膚和粘膜。擠奶前未洗凈手,乳房內(nèi)蓄積未擠凈乳汁等都能給細(xì)菌侵入乳房創(chuàng)造條件。調(diào)查表明,機(jī)器擠奶的發(fā)病率較手工擠奶發(fā)病率高,這是因?yàn)闄C(jī)器的清洗消毒不徹底或機(jī)器性能不穩(wěn)定引起,如頻率或壓力忽高忽低,更容易損傷乳房。因此機(jī)器擠奶前應(yīng)嚴(yán)格做好擠奶機(jī)的管道、乳杯及其內(nèi)鞘的清洗消毒,先擠健康奶牛,后擠患病牛;手工擠奶應(yīng)盡量縮短擠奶時(shí)間。掌握擠奶技術(shù)、熟練擠奶和按規(guī)范程序操作十分重要。

    3.6 其它

    奶牛乳房炎發(fā)病率與乳區(qū)、飼養(yǎng)管理方式、遺傳因素等也有相關(guān)性;其它包括乳頭及乳房外傷,臨床型乳房炎未能采取有效的藥物治療,未能及時(shí)淘汰久治不愈的慢性臨床型乳房炎奶牛。因此,及早發(fā)現(xiàn)并治療奶牛乳房炎,減少傳染源,定期進(jìn)行隱性乳房炎監(jiān)測(cè)也是很重要的。

    4 預(yù)防和治療建議

    奶牛乳房炎的防治是一個(gè)系統(tǒng)工程,在采取科學(xué)治療的同時(shí),必須堅(jiān)持積極的綜合性防治措施。

    4.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,搞好環(huán)境衛(wèi)生

    環(huán)境的清潔是預(yù)防乳房炎的關(guān)鍵。保持牛舍清潔干燥,做到定期清掃和消毒,牛床墊草定期更換、消毒,保持干燥,運(yùn)動(dòng)場(chǎng)保持平整、干燥、排水通暢[19]。夏季、多雨季節(jié)要及時(shí)消除積水,增加消毒次數(shù),消滅蚊蠅;高溫季節(jié)要注意防暑降溫,保證牛舍通風(fēng)。要保持牛體清潔,特別注意保持后肢、尾部和乳房的衛(wèi)生。根據(jù)奶牛的營養(yǎng)需要,注意規(guī)范化飼養(yǎng),以奶定料,維持機(jī)體最佳生理功能,保持內(nèi)外環(huán)境穩(wěn)定,南方地區(qū)應(yīng)控制泌乳期奶牛青飼料和多汁飼料的飼喂量。

    4.2 注意擠奶衛(wèi)生,規(guī)范擠奶操作

    定期消毒和維修擠奶設(shè)備,減少各種外傷因素和應(yīng)激反應(yīng)。遵守?cái)D奶衛(wèi)生程序,擠奶前認(rèn)真按摩乳房,擦洗乳房用的溫水要勤換,保持清潔;擠奶后用毛巾擦干,消毒乳頭,每次都要把奶擠凈,以減少乳房負(fù)擔(dān)。每次擠奶前后進(jìn)行藥浴,藥浴乳頭是控制乳房炎較有效的措施,在環(huán)境衛(wèi)生較差的牛場(chǎng)實(shí)行這一程序更為必要。常用藥物有洗必泰、新潔爾滅等,以0.3%~0.5%的洗必泰效果最佳。北方地區(qū)冬季擠奶后,可用乳頭用消毒油膏(如當(dāng)歸護(hù)乳膏)涂擦乳頭,不僅能消毒,還可防止乳頭凍傷。

    4.3 監(jiān)測(cè)泌乳期牛群,加強(qiáng)科學(xué)飼養(yǎng),減少應(yīng)激

    應(yīng)用乳房炎快速診斷液(LMT)定期檢測(cè)泌乳牛群,對(duì)患隱性乳房炎的強(qiáng)陽性乳區(qū)及時(shí)給予治療,避免繼發(fā)臨床型乳房炎;不定期地采集乳房炎病乳進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查、鑒定,并依據(jù)主要致病菌的藥物敏感結(jié)果,選擇敏感的藥物和消毒劑對(duì)癥治療,可顯著提高乳房炎防治效果;及時(shí)淘汰久治不愈的臨床性乳房炎病牛,以減少傳播途徑。在飼養(yǎng)過程中要注意微量元素和維生素的添加,如每天每頭奶牛日糧中補(bǔ)硒2mg或維生素E 0.74mg,以提高奶牛的抗病能力和生產(chǎn)能力,有效控制和降低乳房炎的發(fā)生。

    4.4 接種疫苗,注意干奶期乳房炎的防治

    接種奶牛乳房炎多聯(lián)苗能有效預(yù)防乳房炎,并且無藥物殘留。疫苗免疫對(duì)預(yù)防乳房炎有一定的作用,但由于現(xiàn)階段研發(fā)的疫苗多為單苗,對(duì)多種病原菌引起的乳房炎的免疫效果不理想,因此,應(yīng)加強(qiáng)高效、多價(jià)乳房炎疫苗的研究。干奶牛治療是目前乳房炎控制方案中消除感染最有效的方式,干奶期是治療乳房炎的最佳時(shí)期,此時(shí)奶牛無泌乳負(fù)擔(dān),可以往乳房內(nèi)注射各種藥物,且不受注射抗生素限制。停奶時(shí)在乳室中注入廣譜抗菌藥物,能有效預(yù)防干奶期乳房炎和產(chǎn)后乳房炎的發(fā)生,消除炎癥隱患,避免泌乳期復(fù)發(fā)乳房炎。對(duì)患臨床型乳房炎的奶牛應(yīng)先治愈后再停奶。

    4.5 中西結(jié)合,靈活用藥

    導(dǎo)致奶牛乳房炎的病原菌種類較為復(fù)雜,一類為環(huán)境致病菌,另一類為傳染性病原菌。從本次調(diào)查及其它單位的研究報(bào)告來看,我國大型奶牛場(chǎng)主要病原菌主要以傳染性鏈球菌(乳房鏈球菌除外)和葡萄球菌感染為主,其傳播主要通過擠奶過程,如經(jīng)擦洗乳房用的毛巾、水、擠奶員的手及機(jī)器擠奶杯等接觸傳播。目前,市場(chǎng)上治療乳房炎的藥物復(fù)雜多樣,抗生素依然是奶牛場(chǎng)治療乳房炎的首選藥物。應(yīng)制定科學(xué)合理的用藥方案,挑選具有抗菌譜廣,抗菌活性強(qiáng),體內(nèi)分布廣泛,副作用小,與其它抗菌藥無交叉耐藥性等特點(diǎn)的藥物,并應(yīng)注意交換和更替藥物的使用,同時(shí)可用中藥配合治療,治療時(shí)需靈活掌握。患牛一般經(jīng)兩三次治療,抗生素殘留時(shí)間可達(dá)6~7天,因此,用同一種抗生素時(shí),連續(xù)用藥不要超過7天,防止產(chǎn)生耐藥性。同時(shí),還應(yīng)積極研發(fā)藥源廣泛,抗菌作用強(qiáng),毒副作用小的創(chuàng)新抗菌藥物,以開辟新的治療途徑,從而有效控制并防止細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生和蔓延。

    本次調(diào)查僅對(duì)奶牛乳房炎主要致病菌做了探討,由于乳房炎常見病原區(qū)系分布是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過程,因此,奶牛乳房炎細(xì)菌學(xué)檢查將是一個(gè)長期的工作。為了全面掌握我國不同地區(qū)奶牛乳房炎的發(fā)病規(guī)律及病原特點(diǎn),需進(jìn)一步對(duì)細(xì)菌血清型、耐藥性、致病性及免疫原性作深入研究,以便為指導(dǎo)臨床合理用藥,研制奶牛乳房炎多聯(lián)苗等生物制劑奠定基礎(chǔ)??傊?,奶牛乳房炎病因復(fù)雜,臨床變化多樣,臨床治療藥品繁多,在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)當(dāng)貫徹“預(yù)防為主,防重于治,防治結(jié)合”的方針,最大限度地減少乳房炎對(duì)奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成的損失。同時(shí),在奶牛乳房炎研究上要樹立復(fù)雜多變的觀念,注重獸醫(yī)臨床研究與實(shí)踐,這將是今后提高奶牛乳房炎防治效果的可行之路。在今后的工作中,對(duì)乳房炎的誘因和發(fā)病機(jī)制還需要進(jìn)行更深入的研究,操作簡便、快捷、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法與療效顯著、特異性強(qiáng)、無藥物殘留的基因工程藥物是控制乳房炎的發(fā)展方向。■

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