冠心寧片中隱丹參酮和丹參酮ⅡA的含量測定

卞艷晶，馬 濤，王 建

（山東省濟寧市藥品檢驗所，山東 濟寧 272025）

冠心寧片是由丹參、三七等制成的復(fù)方制劑，具有活血化瘀、行氣止痛之功效，用于治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、心絞痛和冠狀動脈供血不足等癥，丹參是方中主藥。為進一步提高制劑質(zhì)量，確保臨床療效，筆者建立了可同時測定丹參中兩種主要有效成分含量的方法，報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀（美國安捷倫科技公司）。隱丹參酮對照品（批號為852-993），丹參酮ⅡA對照品（批號為110766-200416），均由中國藥品生物制品檢定所提供；冠心寧片（濟寧市脈管炎醫(yī)院）；甲醇（色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心），其他試劑（分析純）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Thermo BDS Hypesil C18柱（250 mm ×4.6 mm，5"m）；流動相：甲醇 -水（78 ∶22）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：270 nm；柱溫：20 ℃；進樣體積：10"L。

2.2 溶液制備

按制劑的處方工藝制備不含丹參的樣品，并按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。分別精密稱取經(jīng)減壓干燥24 h后的隱丹參酮對照品12.4 mg、丹參酮ⅡA對照品12.0 mg，置50 mL棕色量瓶中，加甲醇5 mL使溶解，加甲醇至刻度，搖勻后作為對照品儲貯備液，精密吸取3 mL，置25 mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻后作為對照品溶液。取樣品20片，精密稱定質(zhì)量，研細，取樣品約1.0 g，精密稱定，置磨口錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，加熱回流1 h，放冷后密塞，稱定質(zhì)量，用甲醇補足減損的質(zhì)量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性考察：2.2項下3種溶液，按上述色譜條件測定。結(jié)果陰性對照品對隱丹參酮和丹參酮ⅡA的含量測定無干擾（圖1）。

線性關(guān)系考察：取隱丹參酮、丹參酮ⅡA混合對照品溶液，分別進樣 4.0，8.0，12.0，16.0，20.0，24.0"L，測定峰面積。以進樣量為橫坐標 （X）、峰面積值為縱坐標（Y）繪制標準曲線，并進行線性回歸。結(jié)果隱丹參酮回歸方程為Y=5590.8 X+4.60，r=1.0000（n=6）；線性范圍為 0.119～0.714"g；丹參酮ⅡA回歸方程為Y=5122.2 X+6.54，r=1.0000（n=6），線性范圍為 0.115～0.691"g。

精密度試驗：精密吸取對照品溶液10"L，連續(xù)進樣5次。結(jié)果隱丹參酮、丹參酮ⅡA的平均峰面積分別為1671.31（RSD=0.11%）和2510.38（RSD=0.26%），表明精密度符合要求。

穩(wěn)定性試驗：取同一樣品，照2.2項下方法制備供試品溶液，分別在0，2，4，6，8 h時測定。結(jié)果隱丹參酮、丹參酮ⅡA的平均含量分別為 1.60 mg/g（RSD=0.46% ）和 2.63 mg/g（RSD=1.39% ），表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗：取同一批樣品5份，按2.2項下上述方法制備供試品溶液并測定含量。結(jié)果隱丹參酮、丹參酮ⅡA含量分別為1.600% （RSD=1.18% ）和 2.639% （RSD=1.00% ），表明方法重現(xiàn)性好。

圖1 高效液相色譜圖

加樣回收試驗：取已知含量的樣品5份，每份約0.5 g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入隱丹參酮對照品0.82 mg、丹參酮ⅡA對照品1.40 mg，按2.2項供試品溶液制備方法制備溶液并依法測定，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收試驗結(jié)果

2.4 樣品含量測定

取不同批號的樣品約1.0 g，精密稱定，按2.2項方法制備供試品溶液，分別測定并計算含量。結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果（mg/粒）

3 討論

采用2005年版《中國藥典（一部）》中丹參酮ⅡA的測定波長測定，隱丹參酮、丹參酮ⅡA的色譜分離度和靈敏度能滿足檢測要求，故選擇270 nm為檢測波長。

丹參脂溶性成分是丹參的主要有效成分之一，具有較強的生理活性[1]，其中丹參酮ⅡA、隱丹參酮含量較高，故以隱丹參酮和丹參酮ⅡA為指標，控制活血脈動膠囊中丹參的質(zhì)量。

山東產(chǎn)丹參的丹參脂溶性成分的含量較其他地區(qū)高，不同產(chǎn)區(qū)的丹參含量存在差異，為確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定，建立了上述簡便、快捷的含量測定方法。

[1]代云桃，秦雪梅，郭小青，等.不同產(chǎn)地不同品種丹參藥材內(nèi)在質(zhì)量評價[J]. 山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2006，37（7）：717-719.