參芎嗪注射液對大鼠腦缺血損傷血液流變學(xué)、腦含水量的影響

韓 輝,吳麗敏,楊文明,汪美霞,董 婷,汪 瀚,韓明向

腦卒中是一種常見疾病,根據(jù)發(fā)病原因不同,分為缺血性與出血性卒中,是發(fā)病率、病死率、致殘率和復(fù)發(fā)率很高的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,在我國人群中腦卒中發(fā)病率以缺血性卒中為主[1]。參芎嗪注射液由人參、川芎嗪兩味藥物組成,具有益氣活血的功效。本研究通過復(fù)制腦缺血損傷的大鼠模型,探討參芎嗪注射液對腦缺血損傷的干預(yù)作用。

1 材料與方法

1.1 一般材料 參芎嗪注射液由安徽天洋藥業(yè)公司提供。人參與川芎嗪按9∶1配置,每支40 mg(華北制藥廠生產(chǎn))。FA 2104上器電子天平:上海天平儀器廠;HP-8453紫外可見分光光度計:美國惠普公司;美國Beckmen-CX7全自動生化分析儀;BS-634血小板聚集儀;由北京生化儀器廠生產(chǎn)。

1.2 動物 健康成年W istar大鼠48只,雌雄各半,體重250 g～280 g,由河南醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。

1.3 動物分組 各組大鼠實驗前在動物室正常飼養(yǎng)1周。實驗時隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、川芎嗪注射液組(10 mg/kg)、參芎嗪注射液組(10mg/kg)。實驗時,各組動物均每日腹腔注射給藥1次,假手術(shù)組及模型組給予等體積生理鹽水,連續(xù)給藥2周,于末次給藥后24 h進(jìn)行各項指標(biāo)的檢測。

1.4 大鼠局灶性腦梗死模型復(fù)制[2]參照Zea Longa的線栓法建立fCIRI模型。鈍性分離、暴露左側(cè)或右側(cè)頸總動脈(common carotid artery,CCA)、頸外動脈(external carotid artery,ECA)及ECA的分支、頸內(nèi)動脈(internal carotid artery,ICA),結(jié)扎ECA及其分支。術(shù)后參考Zea longa的五分制評分標(biāo)準(zhǔn)對動物進(jìn)行神經(jīng)缺損癥狀評分。模型組大鼠和各治療組大鼠造模后≥1分,假手術(shù)組為0分,模型全部復(fù)制成功。

1.5 血液流變學(xué)和腦含水量的檢測 末次給藥24 h后,以氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉,由腹主動脈取血,使用血液流變儀檢測全血黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)等血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)。后斷頭處死,開顱取造模側(cè)腦組織,去除嗅腦、小腦、腦干后稱重,計算腦指數(shù)[腦指數(shù)=(腦重×100)/體重][3]。取大腦半球稱濕重,然后放入110℃烤箱中烤至恒重,稱其干重,計算腦含水量[腦含水量=(腦濕重-腦干重)/腦濕重×100%]。

2 結(jié) 果

2.1 參芎嗪注射液對腦缺血大鼠血液流變學(xué)的影響 模型組與假手術(shù)組比較,模型組的血液流變學(xué)指標(biāo)顯著上升(P＜0.01)。參芎嗪組低切全血黏度、高切全血黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、血漿黏度較模型組顯著下降(P＜0.05或P＜0.01),其中參芎嗪注射液組的血漿黏度下降較川芎嗪組低(P＜0.05)。詳見表1。

表1 參芎嗪注射液對腦缺血大鼠血液流變學(xué)的影響(±s)

表1 參芎嗪注射液對腦缺血大鼠血液流變學(xué)的影響(±s)

組別n 全血黏度(m Pa?s)低切高切血漿黏度mPa?s紅細(xì)胞聚集指數(shù)假手術(shù)組12 7.62±0.80 23.14±2.01 1.44±0.12 2.56±0.58模型組12 10.05±0.761)38.96±2.801)3.32±0.151)6.56±0.781)川芎嗪組12 8.92±0.513)34.97±1.672)2.19±0.302)3.77±0.453)參芎嗪組12 8.63±0.383)32.11±3.123)1.47±0.333)4)3.54±0.573)與假手術(shù)組相比,1)P＜0.01;與模型組相比,2)P＜0.05,3)P＜0.01;與川芎嗪組相比,4)P＜0.05

2.2 參芎嗪注射液對腦缺血大鼠的腦指數(shù)及腦含水量的影響腦缺血模型組腦指數(shù)及腦含水量與假手術(shù)組相比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01),提示腦缺血時腦含水量顯著增加;參芎嗪注射液組與腦缺血模型組相比,腦指數(shù)均顯著減少(P＜0.05或P＜0.01),與川芎嗪組相比腦指數(shù)及腦含水量也降低。詳見表2。

表2 腦缺血大鼠腦指數(shù)及腦含水量比較(±s)

表2 腦缺血大鼠腦指數(shù)及腦含水量比較(±s)

組別n腦指數(shù)(%)腦含水量(%)假手術(shù)組12 0.57±0.05 72.64±6.52模型組12 0.68±0.071)86.17±7.451)川芎嗪組12 0.61±0.052)76.82±5.583)參芎嗪組12 0.59±0.022)75.16±6.663)與假手術(shù)組相比,1)P＜0.01,與模型組相比,2)P＜0.05,3)P＜0.01

3 討 論

缺血性腦卒中臨床多表現(xiàn)為血瘀阻塞經(jīng)絡(luò)、清竅,使氣血運行受阻,肢體腦髓失養(yǎng)而出現(xiàn)半身不遂、不語等癥。痰濁、寒凝、氣虛、氣滯、陰虛均可造成血瘀。李杲在《醫(yī)學(xué)發(fā)明》中指出:“中風(fēng)者,非外來風(fēng)邪,乃本病氣也。凡人年逾四旬,氣衰者,多有此疾。壯歲之際,無有也。若肥盛,則間有之,亦形盛氣衰如此”。氣為血之帥,氣行則血行,氣不行則血瘀滯,氣不行者,或為氣虛,或為氣滯,缺血性腦卒中以氣虛血瘀最為常見。人參大補元氣、益氣生血;川芎活血化瘀,溫通血脈;川芎嗪為川芎的主要成分。本研究通過觀察以人參、川芎嗪組成的最簡單的益氣活血方對腦缺血的保護(hù)作用機(jī)制,進(jìn)一步證實益氣活血法在腦缺血治療中的重要作用。

血液流變學(xué)改變與腦梗死的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系[4]。以黏度為中心的血液流變學(xué)可以證明人體的許多病理改變,腦血栓形成以及其他部位大小血栓的產(chǎn)生、微循環(huán)障礙等都與血流改變有關(guān)[5]。決定血液流變學(xué)的主要因素包括全血和血漿黏度、紅細(xì)胞聚集性等[6]。紅細(xì)胞聚集指數(shù)及血漿黏度變化被認(rèn)為是用來指導(dǎo)治療腦缺血、判定藥物療效的重要參數(shù)之一[7]。血流動力學(xué)異常改變,則可導(dǎo)致血小板的黏滯和聚集,形成血液流變學(xué)的惡性循環(huán)[8],加重腦缺血損傷。因此迅速而有效地糾正血液流變學(xué)異常,是減輕腦缺血損傷的關(guān)鍵。本實驗中觀察到局灶性腦缺血狀態(tài)下,腦缺血模型組大鼠全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)明顯升高。參芎嗪注射液給藥后有一定程度的恢復(fù)。說明參芎嗪注射液具有改善血液流變學(xué)異常的作用,從而改善微循環(huán)。

腦水腫是缺血性腦血管病基本病理變化之一,是反映腦缺血的重要指標(biāo)[9]。腦含水量及腦指數(shù)在一定程度上能反應(yīng)腦水腫的情況[10]。本文采用線栓法復(fù)制大鼠腦缺血模型,由于組織嚴(yán)重缺氧,微循環(huán)血流障礙,最終導(dǎo)致供血區(qū)腦組織水腫,即腦組織含水量增加,進(jìn)而使腦指數(shù)增加,參芎嗪注射液給藥后能明顯降低腦指數(shù),減輕腦水腫,提示參芎嗪注射液具有減輕腦水腫的作用。

現(xiàn)代研究認(rèn)為,人參能增加腦缺血區(qū)血流量,減輕腦水腫,降低大鼠全血黏度、血漿黏度,并能抑制兔血小板聚集,降低血液凝固性[11],保護(hù)缺氧腦損傷;川芎嗪可擴(kuò)張腦血管,增加腦血流量,降低腦血管外周阻力[12],提高血小板中環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosinemonophosphate,cAM P)含量,降低血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)活性;降低血小板表面活性、抑制血小板聚集,使已聚集血小板解聚,保護(hù)神經(jīng)組織。本研究表明,參芎嗪注射液對大鼠局灶性腦缺血具有較好的保護(hù)作用,在降低血漿黏度效果優(yōu)于川芎嗪,說明在腦缺血治療方面,益氣活血法可能一定程度上優(yōu)于單用活血藥。

[1] 張林峰,楊軍,武陽豐,等.我國人群中缺血性和出血性腦卒中發(fā)病的相對比例[J].中華內(nèi)科雜志,2003,42(2):94-97.

[2] Zeallonga EL,Weinstein PR,Carlson,etal.Reversiblem iddle cereb ral artery occlusion withou t craniotomy in rats[J].Stroke,1987,17(4):195-196.

[3] 楊世方,閔寶珍.定量測量大鼠實驗性腦梗塞范圍的簡易方法[J].中國病理生理雜志,1996,12(1):103.

[4] 曹偉建,錢義兵.腦梗塞患者血液流變學(xué)變化[J].中國血液流變學(xué)雜志,2005,15(1):69.

[5] Velcheva I,An tonova N,Dim itrova V,et a l.Plasma lipids and blood viscosity in patients with cerebrovascular disease[J].Clin H emorheol M icrocirc,2006,35(1/2):155-157.

[6] 劉建璇,李會影,母英杰,等.芪根醒腦方對血小板聚集、體外血栓形成及血流變學(xué)的影響[J].中成藥,2008,30(5):756-758.

[7] 胡永紅,涂勝豪,楊芙蓉,等.奧扎格雷鈉對腦梗死血液流變學(xué)的影響[J].中國康復(fù),2002,17(4):211.

[8] 陳薇,田莉,吳翠華,等.心肌梗塞和腦梗塞患者血液流變學(xué)與血脂水平分析[J].武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2001,22(1):43.

[9] Macrac JM.New models of focal cerebral ischemia[J].Br C lin Pharmaco,1992,34(4):302-308.

[10] 屈文,彭仁秀,楊靜,等.復(fù)方纈芎滴丸對大鼠急性腦缺血的保護(hù)作用[J].武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2004,25(2):141.

[11] 劉力,徐華麗,曲紹春,等.人參果皂苷注射液對大鼠實驗性腦缺血的保護(hù)作用[J].中國老年學(xué)雜志,2006,9(26):1242-1244.

[12] 王京,史蔭綿,鄭惠民,等.川芎對腦血管血液動力學(xué)參數(shù)作用的實驗研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,1993,13(7):417.