○河北省保定市畜牧水產(chǎn)局 季曉明 盧冬梅
中醫(yī)學(xué)是中華醫(yī)學(xué)瑰寶,中藥不僅通過調(diào)理作用提高機(jī)體的免疫能力及疾病的抵抗力,而且在機(jī)體內(nèi)的殘留和毒副作用相對(duì)較小。中獸醫(yī)秉承中醫(yī)藥理,也非常強(qiáng)調(diào)“正氣”在動(dòng)物疾病治療學(xué)上的主導(dǎo)作用。中獸醫(yī)理論認(rèn)為,所謂“正氣”,就是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)在的抗病能力。因此,常用“扶正”的中草藥來扶持動(dòng)物機(jī)體的“正氣”,以增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能,從而達(dá)到抵御“外邪”侵襲的目標(biāo),是謂“扶正祛邪”。這對(duì)防治動(dòng)物疾病具有重要的指導(dǎo)意義。為了進(jìn)一步驗(yàn)證中草藥的抑菌和殺菌作用,為開發(fā)綠色藥品提供依據(jù),筆者通過大黃、黃芩、黃柏、大青葉、西紅柿汁、羊膽汁對(duì)大腸桿菌等幾種病原菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn),現(xiàn)將試驗(yàn)過程及結(jié)果報(bào)告如下:
1.試驗(yàn)用菌種。大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、綠膿桿菌。
2.藥品。大黃、黃芩、黃柏、大青葉、羊膽汁、西紅柿。
3.培養(yǎng)基的制備。除營(yíng)養(yǎng)肉湯是按常規(guī)制備外,其他如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、SS瓊脂都為市售。無菌羊血清及脫纖綿羊血均采自河北農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧教學(xué)基地羊群。
4.單味中藥的處理。稱取大黃100g,切細(xì)磨碎,加5~6倍水,加熱煮沸30min,過濾。藥渣再加同量水加熱煮沸30min,過濾。將兩次濾液合并后,蒸發(fā)濃縮到250mL備用。黃芩、黃柏、大青葉用同樣方法處理。
西紅柿汁的制作:將500g西紅柿洗凈,晾干,置于無菌操作臺(tái)上經(jīng)紫外線燈照射1h,然后在無菌操作臺(tái)內(nèi)剝皮、切塊,放入無菌豆?jié){機(jī)中絞碎,再用無菌紗布過濾,收集濾液備用。
5.細(xì)菌培養(yǎng)。將大腸桿菌接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯、營(yíng)養(yǎng)瓊脂和SS瓊脂;將金黃色葡萄球菌接種于含15%氯化鈉的營(yíng)養(yǎng)肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板;將鏈球菌接種于血清肉湯和血液瓊脂平板,綠膿桿菌接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂,然后置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。
6.藥敏片的制作。
(1)紙片的制備。將購(gòu)買的新華1號(hào)定性濾紙用打孔器打成直徑6mm的圓形小紙片,然后每50小片放入一個(gè)清潔干燥的青霉素空瓶?jī)?nèi),瓶口以單層牛皮紙包裹,15磅壓力20min高壓滅菌后,放在37℃恒溫箱中數(shù)天,使完全干燥后備用。
(2)藥敏片的制備。取大黃、黃芩、黃柏、大青葉的制備液,西紅柿汁及羊膽汁各0.25mL分別滴加到裝有50片小紙片的青霉素小瓶?jī)?nèi),并翻動(dòng)紙片以使各紙片充分浸透藥液。在瓶上貼好標(biāo)簽,并將瓶放入37℃恒溫箱內(nèi)過夜,干燥后進(jìn)行密封,待用。
7.藥敏試驗(yàn)。在酒精燈旁,從培養(yǎng)各細(xì)菌的培養(yǎng)基上挑取本菌,然后接種于同一類型的培養(yǎng)基上,再用滅菌小鑷子夾取已做好的各藥物的藥敏片,分別密貼于上述培養(yǎng)基表面并作好標(biāo)記。將貼好藥敏片的各細(xì)菌培養(yǎng)基放置于37℃恒溫箱內(nèi),放置時(shí)要使貼紙片的平板底部在下,培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。
8.藥敏試驗(yàn)判斷標(biāo)準(zhǔn)。抑菌圈直徑大于20mm以上,為極度敏感;抑菌圈直徑介于15~20mm,為高度敏感;抑菌圈直徑介于10~14mm,為中度敏感;抑菌圈直徑小于10mm,為低度敏感。
表1 細(xì)菌培養(yǎng)觀察記錄結(jié)果
1.細(xì)菌培養(yǎng)觀察記錄結(jié)果。見表1。
2.藥敏試驗(yàn)結(jié)果。見表2。
由表2可以看到,大黃、黃芩、黃柏、大青葉、西紅柿汁及羊膽汁對(duì)大腸桿菌、葡萄球菌、鏈球菌及綠膿桿菌都有不同程度的抑菌作用。它們對(duì)鏈球菌及綠膿桿菌基本表現(xiàn)為中度敏感。其中,大黃、大青葉、西紅柿汁對(duì)鏈球菌的抑菌圈直徑分別為15、14、13mm,抑菌作用較好。黃柏、黃芩、羊膽汁對(duì)鏈球菌的抑菌圈直徑分別為12.5、10、10mm,抑菌作用較弱。大黃、黃柏對(duì)綠膿桿菌的抑菌圈直徑都為12.5mm,黃芩、大青葉、西紅柿汁、羊膽汁對(duì)綠膿桿菌的抑菌圈直徑都為12mm,抑菌作用也較弱;對(duì)于大腸桿菌,除黃芩、西紅柿汁表現(xiàn)為高度敏感性外,其余都表現(xiàn)為中度敏感。
中藥不僅對(duì)動(dòng)物機(jī)體具有調(diào)養(yǎng)作用,可以從機(jī)體內(nèi)部著手提高機(jī)體的抗病能力,而且某些單味中藥對(duì)某些細(xì)菌或病毒有抑制或殺滅功能。也就是說,中藥可以從不同角度綜合發(fā)揮作用,從而提高動(dòng)物機(jī)體的免疫能力及疾病抵抗力。
另外,我國(guó)地域遼闊,中草藥資源豐富,易種易收,價(jià)格低廉且使用方便。中草藥是天然物質(zhì),保持了各種成分的自然性和生物活性,其成分易被吸收利用,不能被吸收的也能順利排出體外,在體外被細(xì)菌等分解,不會(huì)污染水環(huán)境。毒副作用小或無,動(dòng)物體不產(chǎn)生抗藥性、過敏性,而一般的化學(xué)藥物成分會(huì)蓄積在動(dòng)物體內(nèi)或長(zhǎng)期殘留于水中。有毒的中草藥經(jīng)過適當(dāng)?shù)呐谥萍庸ず?,毒性?huì)降低或消失;通過科學(xué)組方配伍,利用中藥之間的相互作用,提高了其防病治病的功效,減弱或消除了毒副作用。因此,采用先進(jìn)的技術(shù)和設(shè)備開發(fā)單味中藥或復(fù)方制劑作為抗菌或抗病毒藥物,并且廣泛運(yùn)用于臨床治療具有重要意義,上述試驗(yàn)可以為開發(fā)綠色藥品提供依據(jù)。