黃精提取液對老齡小鼠心、腦SOD和MDA含量的影響

韋素珍 ，黃艷蓮 ，陸貽遜 ，黃桂雄 ，趙善民 ，晉 玲 ，黃彥峰

（右江民族醫(yī)學(xué)院，廣西百色 533000）

隨著社會逐漸步入老齡化階段，中國已經(jīng)成為一個典型的“未富先老”的國家，衰老及老年群體的健康問題已成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱門。大量資料表明，黃精含有皂苷、黃精參、多糖、醌類、氨基酸及微量元素等多種生物活性物質(zhì)[1-2]，對機(jī)體具有一定的降血壓、血脂等作用，也有部分研究表明黃精具有抗衰老作用[3-5]，但目前相關(guān)深入研究不多。為此，本實驗研究不同濃度的黃精提取液對老齡小鼠心、腦組織中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的影響，以進(jìn)一步探討黃精的抗衰老作用，為黃精的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

昆明種小白鼠24只（由右江民族醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供），均為雌性。鼠齡13~15周，體重30~42 g，隨機(jī)分為黃精提取液高劑量組、中劑量組、低劑量組和對照組，每組6只，分籠飼養(yǎng)。

1.2 黃精提取液的制備

稱取100 g黃精干品（產(chǎn)地廣西，購于南寧生源中藥飲品有限責(zé)任公司，批號090903），用自來水浸泡12 h，加自來水至500 ml，煮沸30 min，自然冷卻至室溫后過濾，保存濾液，將自來水加入濾渣至500 ml，再次煮沸30 min后過濾。合并2次濾液再加入95%乙醇50 ml醇提，水浴加熱使乙醇完全揮發(fā)，幷濃縮至100 ml，制成1.0 g/ml的黃精提取液，4℃低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 實驗方法

從第1天起，全部小鼠給予正常飼料和飲水，將黃精提取液濃度15、10、5 g/kg依次給高劑量組、中劑量組、低劑量組灌胃，對照組給予生理鹽水5 g/kg灌胃，每天灌胃1次，連續(xù)21 d，室溫控制在25~28℃，濕度為50%。第22天采取頸椎脫臼法處死小鼠，迅速取出其心、腦組織，用冰凍生理鹽水洗凈，濾紙吸干。稱重后制備成10%和1%的組織勻漿，分別測定組織勻漿中的SOD、MDA含量。

1.4 10%和1%組織勻漿的制備

取組織塊在冰凍生理鹽水中漂洗，濾紙吸干稱重，放入勻漿管中剪碎并加入該組織塊重量9倍的4℃冰凍生理鹽水，用勻漿機(jī)勻漿（15 000 r/min，連續(xù)3~5次）并制備成10%的組織勻漿液，再將其中一部分10%的組織勻漿液用生理鹽水按1∶9稀釋成1%的組織勻漿液，最后用10%勻漿液和1%勻漿液分別加藥并離心（3 000 r/min，10 min）。

1.5 氧自由基的測定

心、腦組織勻漿中SOD、MDA含量的測定均按南京建成生物工程研究所提供的試劑盒說明書方法進(jìn)行操作，組織中蛋白含量的測定采用四川省邁克科技有限責(zé)任公司提供的總蛋白Doumas法檢測試劑盒的說明書進(jìn)行操作，測定儀器用722型分光光度計（上海第三分析儀器廠）。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用 SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，組間比較采用方差分析法（LSD法），P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 黃精提取液對小鼠心、腦組織SOD含量的影響

結(jié)果顯示，除高劑量組腦組織SOD含量升高不明顯外，其余各黃精提取液實驗組心、腦SOD含量均較對照組明顯升高（P＜0.01），其中以低量組變化最明顯，結(jié)果見表1。

表1 黃精提取液對小鼠心、腦組織SOD、MDA含量的影響（x±s）

2.2 黃精提取液對小鼠心、腦組織MDA含量的影響

結(jié)果顯示，黃精提取液實驗組心、腦組織中MDA含量與對照組相比均有所降低，其中中劑量組明顯降低（P＜0.01），高劑量組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），低劑量組變化不明顯，結(jié)果見表1。

3 討論

在生命活動的新陳代謝過程中，自由基是生命活動過程中生物化學(xué)反應(yīng)的中間產(chǎn)物。在健康機(jī)體內(nèi)自由基的形成和清除處于一種動態(tài)平衡，一旦這種動態(tài)平衡遭到破壞，自由基積累過量時就會造成對組織的損害，引起衰老以及多種疾病的發(fā)生[6]。超氧陰離子自由基是機(jī)體代謝過程中的一種活性氧[7]，它可以攻擊生物膜上的不飽和脂肪酸，并發(fā)生一系列連鎖反應(yīng)，生成脂質(zhì)過氧化物——MDA，MDA可以攻擊蛋白質(zhì)、核酸大分子等，最終引起細(xì)胞代謝及功能障礙，導(dǎo)致細(xì)胞衰老死亡。因此，通過測定MDA含量的高低可以間接反映組織細(xì)胞的損傷程度[8-9]。SOD是一種清除氧自由基的關(guān)鍵酶[10-11]，能夠清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，檢測SOD含量的高低可以間接反映機(jī)體清除自由基的能力。因此，通過測定組織中SOD和MDA含量可了解機(jī)體的生理狀態(tài)。大量研究表明，SOD含量與物種壽命呈正相關(guān)，在保護(hù)心、腦功能及延緩衰老方面發(fā)揮重要作用。隨著年齡的增加，體內(nèi)SOD的活性降低，MDA含量增加。隨著社會步入老齡化階段，衰老問題已受到社會的普遍關(guān)注。因此，研究清除氧自由基的抗氧化劑用于保護(hù)細(xì)胞和組織免受損傷或減輕其受損程度具有重要意義，并可為保健及延緩衰老提供一些重要的依據(jù)。

實驗結(jié)果顯示，服用黃精提取液3周后，除高劑量組腦組織SOD含量升高不明顯外，其余各黃精提取液實驗組心、腦SOD含量均較對照組明顯升高（P＜0.01），其中以低量組變化最明顯。MDA含量均低于正常對照組，其中以中劑量組降低最明顯（P<0.01），高劑量組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），表明黃精提取液中的某種生物活性物質(zhì)在參與清除自由基或間接增強(qiáng)機(jī)體其他清除自由基系統(tǒng)的功能中起重要作用。在本實驗中，實驗組小鼠心、腦組織SOD含量均高于對照組，但以低劑量組最明顯，說明低劑量組所對應(yīng)的黃精提取液的濃度抗自由基損傷的能力較強(qiáng)。實驗組小鼠心、腦組織的MDA含量均低于對照組，中劑量組降低最明顯（P<0.01），低劑量組MDA下降不明顯。這可能是因為黃精提取液中的生物活性物質(zhì)在提高機(jī)體對抗超氧陰離子能力上較明顯，而對如羥自由基、過氧化氫等自由基的清除能力較弱。所以同一濃度的黃精提取液其抗自由基損傷能力較強(qiáng)，但其清除自由基的能力不一定較強(qiáng)，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。本實驗結(jié)果提示，服用黃精提取液對機(jī)體抗氧化及延緩衰老有良好的作用，這與民間常用黃精來強(qiáng)身健脾、補(bǔ)中益氣、延長壽命一致。

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