和胃消痞合劑的制備與質(zhì)量控制方法研究Δ

梅全喜，曾聰彥，黃穎思，鐘希文，吳惠妃（廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院，中山市 528400）

和胃消痞合劑是我院臨床使用多年的有效經(jīng)驗(yàn)方，由白芍、三七、延胡索（醋）、香附、黃芩、郁金、柴胡等14味中藥組成，具有疏肝和胃、行氣消脹、止痛之功。經(jīng)我院多年臨床觀察，和胃消痞合劑合用西藥治療慢性胃炎效果優(yōu)于單純西藥治療效果[1]。該制劑初為煎劑，為改進(jìn)傳統(tǒng)中藥煎煮過(guò)程煩瑣的缺點(diǎn)，現(xiàn)改制成合劑。為保證該制劑質(zhì)量，筆者對(duì)和胃消痞合劑的制備工藝進(jìn)行了研究，對(duì)其質(zhì)量控制方法進(jìn)行了初步探討。

1 材料

1.1 儀器

KQ3200E型醫(yī)用超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；Good see-Ⅰ型薄層色譜(TLC)攝影儀（上?？普苌萍加邢薰荆?；JA1203型電子天平（上海天平儀器廠）；TLC SCANN-ERⅢ型薄層掃描儀、TLC SAMPLER 4型自動(dòng)點(diǎn)樣儀（瑞士卡瑪公司）；PBQ-Ⅱ型薄層自動(dòng)鋪板器（重慶南岸實(shí)驗(yàn)電器廠）。

1.2 試藥

和胃消痞合劑（批號(hào)：20060804、20060809、20060815）由廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院制劑室提供；三七對(duì)照藥材（批號(hào)：120941-200506）、白芍對(duì)照藥材（批號(hào)：905-9204）、蒲公英對(duì)照藥材（批號(hào)：826-9804）、延胡索乙素對(duì)照品（批號(hào)：726-9004）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；所用試劑均為分析純。

2 處方組成與制備工藝

2.1 處方組成

白芍、三七、延胡索（醋）、香附、黃芩、郁金、柴胡等14味藥材。

2.2 工藝路線的選擇

根據(jù)處方中每味中藥材的化學(xué)成分、藥理作用與臨床療效的不同，確定本方中三七與延胡索（醋）宜采用醇提，其余藥材采用水提醇沉并收集揮發(fā)油為宜。

2.3 成型制備工藝

取方中香附、黃芩、郁金、白芍、柴胡、蒲公英等12種藥材，加10倍量水，加熱煎煮2次，每次1.5 h，并收集揮發(fā)油另器貯藏，合并2次煎液，濾過(guò)，藥液濃縮至相對(duì)密度1.05～1.10（60℃），放冷，緩慢加入乙醇使含醇量至70%，攪勻，靜置過(guò)夜，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味并濃縮至相對(duì)密度約1.05～1.10（60℃），備用。

另取三七和延胡索（醋），粉碎成粗顆粒，用70%乙醇回流提取3次，每次6倍量，提取時(shí)間分別為1.5、1、1 h，藥液濾過(guò)，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度約1.05～1.10（60℃），備用。

取上述所有提取濃縮液及揮發(fā)油，混合，攪勻，加入單糖漿200 mL、苯甲酸鈉3 g，混勻，用蒸餾水調(diào)節(jié)體積至1000 mL，靜置過(guò)夜，收集上清液，灌裝于100 mL潔凈無(wú)菌塑料瓶中，包裝，檢驗(yàn)，即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為棕褐色的混懸液體；氣微香，味苦。

3.2 薄層鑒別

3.2.1 三七的TLC鑒別：取本品20 mL，水浴蒸至近干，加硅藻土適量，拌勻，加水飽和的正丁醇30 mL，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液濃縮至約2 mL，作為供試品溶液；取缺少三七的其余藥材制成陰性樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液；另取三七對(duì)照藥材0.5 g，加水飽和的正丁醇20 mL，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液濃縮至約2 mL，作為對(duì)照藥材溶液。照TLC法[2]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10、5、10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）10 ℃以下放置的上層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾。三七的TLC見(jiàn)圖1。

3.2.2 白芍的TLC鑒別：取“3.2.1”項(xiàng)下的供試品溶液；取缺少白芍的其余藥材制成陰性樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液；另取白芍對(duì)照藥材0.5 g，加入水飽和的正丁醇20 mL，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液濃縮至約2 mL，作為對(duì)照藥材溶液。照TLC法[2]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10、5、10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾。白芍的TLC見(jiàn)圖2。

3.2.3 蒲公英的TLC鑒別：取本品20 mL，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液；取缺少蒲公英的其余藥材制成陰性樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液；另取蒲公英對(duì)照藥材0.5 g，加乙酸乙酯20 mL，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照TLC法[2]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10、5、10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（9∶5∶1）為展開(kāi)劑，飽和20 min，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾。蒲公英的TLC見(jiàn)圖3。

3.2.4 延胡索的TLC鑒別：取本品20 mL，加濃氨試液調(diào)pH至11，加乙醚振搖提取2次，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液；取缺少延胡索的其余藥材制成陰性樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照TLC法[2]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10、5、10 μL，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉制備的硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮（9∶2）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置碘缸中約3 min后取出，揮盡板上吸附的碘，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性對(duì)照無(wú)干擾。延胡索的TLC見(jiàn)圖4。

圖1 三七的TLC1.三七對(duì)照藥材；2～4.供試品；5.陰性對(duì)照Fig 1 TLC of P.notoginseng1.Radix Rhizoma Notoginseng；2～4.test sample；5.negative control

圖2 白芍的TLC1.白芍對(duì)照藥材；2～4.供試品；5.陰性對(duì)照Fig 2 TLC of P.lactiflora1. Rhizoma Atractylodis Macrocephalae；2～4.test sample；5.negative control

3.3 檢查

相對(duì)密度暫定≥1.05；pH值暫定5.0～7.0；其他應(yīng)符合合劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定[2]。

3.4 總固體物檢測(cè)

精密量取本品25 mL，置稱定質(zhì)量的蒸發(fā)皿中，于水浴上加熱蒸干，在105℃干燥3 h，稱定質(zhì)量，3批測(cè)定結(jié)果分別為9.05%、9.09%、9.67%。根據(jù)上述樣品測(cè)定結(jié)果，暫定本品總固體物不得少于5%。

3.5 穩(wěn)定性考察

3.5.1 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)：取本制劑3批（批 號(hào) ：20060804、20060809、20060815），于（40±2）℃、相對(duì)濕度（75±5）%的條件下，分別在當(dāng)月及放置1、2、3、6個(gè)月各考察1次。結(jié)果，樣品性狀、鑒別、檢查、裝量及微生物檢查等各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化。

3.5.2 常溫穩(wěn)定性試驗(yàn)：取本制劑3批（批 號(hào) ：20060804、20060809、20060815），分別于室溫下在當(dāng)月及放置3、6、9、12個(gè)月各考察1次。結(jié)果，樣品性狀、鑒別、檢查、裝量及微生物檢查等各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化。

圖3 蒲公英的TLC1.蒲公英對(duì)照藥材；2～4.供試品；5.陰性對(duì)照Fig 3 TLC of T.mongolicum1.Herba Taraxaci；2～4.test sample；5.negative control

圖4 延胡索的TLC1.延胡索乙素對(duì)照品；2～4.供試品；5.陰性對(duì)照Fig 4 TLC of C.yanhusuo1.Rhizoma Corydalis；2～4.test sample；5.negative control

4 討論

本制劑按本方案改成合劑后，克服了原煎劑臨時(shí)煎煮、服用不便的弊端。由于本制劑是由14味中藥組成的復(fù)方制劑，成分較為復(fù)雜，TLC鑒別過(guò)程中對(duì)提取方法及展開(kāi)劑的選擇有較高要求。在三七、白芍、蒲公英、延胡索的TLC條件試驗(yàn)過(guò)程中，筆者基本都參照2005年版《中國(guó)藥典》（一部）[2]TLC鑒別方法，只在提取溶劑和展開(kāi)劑方面作了稍微調(diào)整和更改，使結(jié)果更穩(wěn)定，且方法簡(jiǎn)便易行，斑點(diǎn)分離清晰，陰性對(duì)照無(wú)干擾。此外，筆者尚對(duì)方中香附、黃芩、郁金、柴胡、陳皮、厚樸、法半夏和枳實(shí)進(jìn)行了薄層鑒別研究，均因陰性干擾較大，故未列入正文。同時(shí)，筆者還對(duì)該制劑總固體物和制劑穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)定和考察，為制劑質(zhì)量控制提供了實(shí)用的方法。至于定量方面，將是筆者下一步工作的重點(diǎn)，以使該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)趨于完善。

[1]黃穎思，劉 敏，林 屹，等.和胃消痞合劑治療慢性胃炎的臨床觀察[J].新中醫(yī)，2008，40（5）：49.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：10、68、94、244、附錄9、附錄31.