定性檢測飼料中三聚氰胺便捷方法的探討

晉中職業(yè)技術(shù)學(xué)院 郭春燕 楊繼生

三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，是有機化工原料，簡稱三胺（又叫氰尿酰胺、三聚氰酰胺）。性狀為純白色單斜棱晶體，無味，呈弱堿性，能夠與各種酸反應(yīng)生成三聚氰胺鹽；在強酸或強堿液中，胺基逐步被羥基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸，三氯氰胺具有弱毒性。

由于目前采用的凱氏定氮法估測食品和飼料中蛋白質(zhì)含量方法存在缺陷，三聚氰胺被不法廠商摻進食品或飼料中，以提升食品或飼料中蛋白質(zhì)含量的檢測值。自三聚氰胺事件后，高效液相色譜法（GB/T 2-22308088；倪沁顏，2008）、氣相色譜法（王征，2008）、試劑盒等多種方法被推出，然而這些方法都需要特定的檢測設(shè)備，在基層使用推廣存在很大困難。因此，本實驗探討采用簡單的實驗方法進行三聚氰胺最小含量的檢測，具有成本低、操作簡單等特點，為基層單位三聚氰胺的檢測提供可行的方法依據(jù)。

1 實驗原理

三聚氰胺與三聚氰酸并用，會在水中結(jié)合成異氰尿酸蜜胺鹽，異氰尿酸蜜胺鹽不溶性水，是白色沉淀物，形成乳濁液，白色物在溶液中的比例可以反映出異氰尿酸蜜胺鹽的多少，最后確定三聚氰胺的含量。

2 材料與方法

2.1 實驗設(shè)計 本實驗分為兩個實驗，每個實驗設(shè)3個處理，各處理添加不同濃度的三聚氰胺，具體見表1。

2.2 操作過程

2.2.1 實驗一 水溶液組：吸取10 mL蒸餾水于試管中，按照比例添加純品三聚氰胺，漩渦振蕩混勻，6000 r/min離心5 min，吸取5 mL上清液轉(zhuǎn)移到另一試管中，向上清液中滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

魚粉組：稱取樣品5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺，加熱煮沸30 min，放置過濾，吸取10 mL濾液，6000 r/min離心20 min；吸取上清液5 mL入試 管中，加入三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

豆粕組：稱取樣品5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺，加熱煮沸30 min，放置過濾，吸取10 mL濾液，6000 r/min離心20 min；吸取上清液5 mL入試管中，加入三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

表1 實驗一和實驗二不同處理組中三氯氰胺的含量

2.2.2 實驗二 水溶液組：吸取10 mL蒸餾水于試管中，按照比例添加純品三聚氰胺；準(zhǔn)確吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸鉛溶液（2.2%）加入試管中，漩渦振蕩混勻10 min，6000 r/min離心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

魚粉組：稱取魚粉5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺；準(zhǔn)確吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸鉛溶液（2.2%）加入試管中，漩渦振蕩混勻10 min，6000 r/min離心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

豆粕組：稱取豆粕5 g于燒杯中，加入室溫蒸餾水75 mL，按照比例添加純品三聚氰胺；準(zhǔn)確吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸鉛溶液（2.2%）加入試管中，漩渦振蕩混勻10 min，6000 r/min離心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸飽和液5滴，觀察。

3 結(jié)果與分析

3.1 實驗一沉淀結(jié)果 見表2。

表2 實驗一組的沉淀現(xiàn)象

由表2可知，在水溶液組中，滴加5滴三聚氰酸飽和液后，1.1 mg/100 mL試管立即出現(xiàn)渾濁，隨著濃度增加渾濁度增加，0.1 mg/100 mL試管顯示不明顯。1 h后1.1 mg/100 mL試管底部出現(xiàn)白色沉淀，0.1 mg/100 mL試管仍無顯示。2 h后試管底部沉淀增多，上部溶液開始出現(xiàn)澄清，0.1 mg/100 mL試管仍無顯示。5 h后試管底部沉淀，上部溶液澄清，0.1 mg/100 mL試管無沉淀現(xiàn)象。由此可見，三聚氰胺在水溶液中含量為1.1 mg/100 mL時，用三聚氰酸飽和液滴定有沉淀現(xiàn)象產(chǎn)生。

實驗一的魚粉組和豆粕組滴加三聚氰酸后，魚粉組中三氯氰胺含量為50 mg/kg時，試管有較淡的分層界面；1 h后，可見200 mg/kg和250 mg/kg試管有明顯渾濁懸浮物，50 mg/kg到100 mg/kg試管可見分層面；12 h后160 mg/kg到250 mg/kg試管渾濁下沉，上部溶液開始澄清；36 h后渾濁全部沉淀至底部，但是50 mg/kg和100 mg/kg試管無沉淀。滴加到豆粕組后不顯示，0.5 h后200 mg/kg和250 mg/kg試管液面上層出現(xiàn)渾濁；5 h后 160 mg/kg到250 mg/kg試管液面上層出現(xiàn)明顯渾濁；36 h后140 mg/kg到250 mg/kg試管底部出現(xiàn)明顯沉淀晶體，但100 mg/kg試管無沉淀。結(jié)果表明，未經(jīng)三氯乙酸處理的魚粉在160 mg/kg有沉淀現(xiàn)象，豆粕在140 mg/kg有沉淀現(xiàn)象。

3.2 實驗二沉淀結(jié)果 見表3。

由表3可見，此組實驗中水溶液處理組的沉淀現(xiàn)象與實驗一的水溶液組一致。三聚氰胺在經(jīng)三氯乙酸和乙酸鉛處理的水溶液中含量為1.1 mg/100 mL時，可用三聚氰酸飽和液滴定有沉淀現(xiàn)象顯示。

表3 實驗二組的沉淀現(xiàn)象

采用三氯乙酸和乙酸鉛處理的魚粉組滴加三聚氰酸飽和液后，無明顯顯示，僅見110 mg/kg試管有輕微分層界面。18 h后可見70 mg/kg到110 mg/kg試管均有渾濁分層面。豆粕組滴加后無明顯顯示，僅110 mg/kg試管有輕微分層界面。0.5 h后，60 mg/kg試管開始出現(xiàn)上層混濁物。1 h后60 mg/kg到110 mg/kg試管均出現(xiàn)上層混濁物。18 h后液面分層不明顯，但是可見試管底部有少許沉淀生成。因此，經(jīng)三氯乙酸和乙酸鉛處理的樣品，魚粉和豆粕分別在70 mg/kg和60 mg/kg有沉淀現(xiàn)象產(chǎn)生。

4 小結(jié)

通過本實驗得知：在使用三氯乙酸和乙酸鉛處理樣品時，可在一定程度上去除樣品中的干擾因素，提高反應(yīng)的靈敏度。當(dāng)魚粉和豆粕中三氯氰胺含量≥70 mg/kg和≥60 mg/kg時，可簡便快捷的定性測出。

[1]GB/T 2-22308088.原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法[J].生命科學(xué)儀器，2008，6.

[2]倪沁顏.高校液相色譜法測定飼料中三聚氰胺的含量[J].福建分析測試，2008，7（1）：57 ～59.

[3]王征.GC法測定動物食品中三聚氰胺[J].福建分析測試，2008，7（2）：1～4.