• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    飼糧硒來(lái)源及添加水平對(duì)仔豬組織中細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶基因mRNA表達(dá)的影響

    2010-04-17 00:42:08王秀娜耿忠誠(chéng)劉勝軍武志敏
    關(guān)鍵詞:飼糧酸鈉腎臟

    王秀娜 耿忠誠(chéng)* 王 燕 劉勝軍 武志敏

    (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,大慶 163319;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,哈爾濱 150030)

    飼糧硒來(lái)源及添加水平對(duì)仔豬組織中細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶基因mRNA表達(dá)的影響

    王秀娜1耿忠誠(chéng)1*王 燕2劉勝軍1武志敏1

    (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,大慶 163319;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,哈爾濱 150030)

    本文旨在研究飼糧中硒來(lái)源及添加水平對(duì)仔豬細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX 1)m RNA表達(dá)的影響,為合理利用各種硒源提供一定的理論基礎(chǔ)。選擇35日齡體重相近的三江白豬仔豬90頭,隨機(jī)分為10組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3頭豬。分別在9個(gè)試驗(yàn)組飼糧中添加納米硒、酵母硒、亞硒酸鈉,其劑量以硒計(jì),添加量分別為0.1、0.3、0.5m g/kg 3個(gè)水平,對(duì)照組飼糧中不另添加硒。試驗(yàn)期為35 d,試驗(yàn)結(jié)束后采用反轉(zhuǎn)錄RT-PCR技術(shù)測(cè)定仔豬肝臟、腎臟、脾臟、肌肉組織中GPX 1 m RNA的表達(dá)量。結(jié)果表明:1)在肝臟組織中,0.5 mg/kg納米硒組GPX 1m RNA表達(dá)量顯著高于亞硒酸鈉組(P<0.05),0.5mg/kg納米硒組和0.3 mg/kg酵母硒組顯著高于對(duì)照組(P<0.05);2)在腎臟組織中,各試驗(yàn)組之間GPX1 m RNA表達(dá)量差異均不顯著(P>0.05);3)在脾臟組織中,0.5 mg/kg納米硒組GPX 1m RNA表達(dá)量顯著高于酵母硒組和亞硒酸鈉組(P<0.05),0.5 mg/kg納米硒組和0.3 mg/kg酵母硒組顯著高于對(duì)照組(P<0.05);4)在肌肉組織中,0.5mg/kg納米硒組GPX 1m RNA表達(dá)量顯著低于亞硒酸鈉組和對(duì)照組(P<0.05)。由此可見(jiàn),在飼糧中添加0.5 mg/kg納米硒能夠提高仔豬肝臟、脾臟中GPX 1m RNA的表達(dá)量,而肌肉組織中的表達(dá)水平則低于亞硒酸鈉組和對(duì)照組。

    硒;GPX 1;mRNA

    硒是動(dòng)物機(jī)體必需的微量元素之一,與抗氧化密切相關(guān)。硒依賴(lài)性的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)是硒發(fā)揮抗氧化功能的主要形式,能清除組織中有害的過(guò)氧化物,保護(hù)生物膜和生物大分子免受氧化損傷[1]。GPX家族主要包括細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX 1)、胃腸谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX 2)、血漿谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX 3)等。其中GPX 1被證明是機(jī)體抗氧化的主要含硒蛋白[2],其活性水平常被用于測(cè)定人與動(dòng)物的硒需要量。飼糧中硒水平與GPX 1活性和GPX 1 m RNA調(diào)控有關(guān)[3]。高劑量(0.50 mg/kg)納米硒作為硒源調(diào)控肉雞肝臟組織GPX 1m RNA穩(wěn)定性的能力更強(qiáng)[4],硒蛋白基因在甲狀腺和腦垂體中的表達(dá)不受硒不足或過(guò)量的影響[5],這說(shuō)明硒蛋白在組織中的表達(dá)具有特異性[6]。在生產(chǎn)中為了滿(mǎn)足仔豬健康生長(zhǎng)對(duì)硒的需要量,在飼糧中通常添加一定量的外源性硒。目前主要以注射劑、粉劑及口服液形式應(yīng)用亞硒酸鈉進(jìn)行補(bǔ)硒,但使用中存在吸收率低、過(guò)氧化作用以及有潛在污染等問(wèn)題[7]。酵母硒是硒富集在生長(zhǎng)酵母的細(xì)胞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)生產(chǎn)的有機(jī)硒。納米硒是以蛋白質(zhì)為核,紅色元素硒為膜,蛋白質(zhì)為分散劑的納米粒子,尺寸為20~60 nm。具有較高的生物活性、安全性、抗氧化性和較高的吸收率等特點(diǎn),在動(dòng)物生產(chǎn)中有廣泛的應(yīng)用前景[8]。本試驗(yàn)在仔豬飼糧中分別添加納米硒、酵母硒、亞硒酸鈉,研究不同硒源及添加水平對(duì)仔豬不同組織中GPX 1 m RNA表達(dá)量的影響,為合理利用各種硒源提供一定的理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

    選擇35日齡體重相近的三江白仔豬90頭,隨機(jī)分為10組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3頭豬。分別在9個(gè)試驗(yàn)組飼糧中添加納米硒、酵母硒、亞硒酸鈉,各硒源同配合料倍比稀釋,逐級(jí)放大混勻。其劑量以硒計(jì),添加量分別為0.1、0.3、0.5 mg/kg 3個(gè)水平,對(duì)照組飼糧中不另添加硒。飼糧以玉米、豆粕為主,參照NRC(1998)標(biāo)準(zhǔn)及中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 65—2004《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》,配合而成粉狀飼料,飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

    表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Tab le 1 Com position and nutrient levels of the experim ental diet(air-d ry basis) %

    1.2 樣品采集

    試驗(yàn)期為35 d,試驗(yàn)結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)屠宰1頭仔豬,取肝臟、腎臟、脾臟、肌肉組織樣,迅速投入液氮中冷凍,-80℃保存。

    1.3 GPX1基因mRNA表達(dá)豐度的測(cè)定

    1.3.1 主要試劑

    Trizol總RNA提取試劑盒(Invitrogen),反轉(zhuǎn)錄試劑盒(東洋紡科技),TaqDNA聚合酶(TaKa-Ra),dNTPMix(TaKaRa),DNA Marker DL 2000(TaKaRa)。

    1.3.2 引物設(shè)計(jì)

    根據(jù)GenBank中公布的豬GPX 1(NM 214201)和β-actin(U07786)的基因序列設(shè)計(jì)引物,GPX 1基因上游引物為 5′-CCCACGCTCGGTGTATGCCT-3′,下 游 引 物 為 5′-AGAAAGCGACGGCTGTACCTG-3′,β-actin 內(nèi)參基因上游引物為 5′-CGGGACCTGACCGACTACCT-3′,下游引物為 5′-GGCCGTGACTCCTTCTGC-3′,引物由上海生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。

    1.3.3 總RNA提取

    按Trizo l總RNA提取試劑盒試驗(yàn)操作步驟提取肝臟、腎臟、脾臟、肌肉組織中的總 RNA,用紫外分光光度計(jì)測(cè)定總RNA濃度,并在260和280 nm下測(cè)吸光度A值,計(jì)算OD260/OD280的值。此值在1.8~2.0時(shí),表示提取的RNA純度較高,適宜進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

    1.3.4 cDNA的合成

    根據(jù)反轉(zhuǎn)錄試劑盒步驟合成cDNA,具體過(guò)程如下:RNA 2 μg、Oligo(dT)1 μL,用 RNase Free H 2O補(bǔ)足到12μL,放入65℃水浴鍋5m in,立即置于冰上2~3m in,繼續(xù)向EP管中添加5×RTBuffer 4 μL、dNTP 2 μL、RNase Inhibitor 1 μL、Rever Tra Ace 1μL,然后依次42℃20m in、85℃5m in、4℃5m in,最后瞬間離心,于-20 ℃保存。

    恩替卡韋聯(lián)合水飛薊素對(duì)乙型病毒性肝炎失代償期肝硬化患者炎癥指標(biāo)及氧化應(yīng)激水平的影響 ……… 李 珂等(1): 98

    1.3.5 PCR

    GPX 1和 β-actin基因進(jìn)行同管PCR,25μL反應(yīng)體系為:10×PCR buffer 2.5μL,dNTP 2μL,βactin上游引物(10μm ol/L)0.5μL,β-actin下游引物(10μm)0.5μL,GPX 1上游引物(10μm)0.5μL,GPX 1下游引物(10μm)0.5μL,cDNA 1μL,Tap DNA聚合酶0.2μL,去離子水17.3μL。優(yōu)化最佳退火溫度和最佳循環(huán)數(shù),確定PCR反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性5m in,94℃變性30 s,63℃退火30 s,72℃延伸1 m in,31個(gè)循環(huán),72℃延伸10 m in,4℃保存。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    電泳結(jié)束后,用全自動(dòng)凝膠分析系統(tǒng)拍照,紫外分析系統(tǒng)(Gel-Pro IMAGER 60-2502CE)進(jìn)行表達(dá)強(qiáng)度的分析,計(jì)算各基因條帶的積分光密度(IOD),并以IOD(GPX 1)/IOD(β-actin)的值表示目的基因的相對(duì)表達(dá)量。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel整理,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SAS 9.0軟件包中的ANOVA程序進(jìn)行方差分析,差異顯著時(shí)采用Duncan氏方法對(duì)各組間平均數(shù)進(jìn)行多重比較,以P>0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

    2 結(jié) 果

    2.1 RNA凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果

    由圖1可以看出,3條電泳條帶(28S、18S和5S)清晰整齊,表明總RNA的提取效果較好,可以進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

    圖1 總RNA樣本電泳結(jié)果Fig.1 Electrophoresis result of total RNA samp le

    2.2 PCR產(chǎn)物電泳檢測(cè)結(jié)果

    由圖2可以看出,530 bp GPX 1目的基因和411 bpβ-actin內(nèi)參2條擴(kuò)增片段條帶清晰整齊,可以進(jìn)行積分光密度分析。

    圖2 PCR產(chǎn)物電泳檢測(cè)結(jié)果Fig.2 The electrophoresis test results of the PCR products

    2.3 肝臟、腎臟、脾臟、肌肉組織中GPX1 mRNA的表達(dá)量比較

    2.3.1 肝臟中GPX 1基因m RNA表達(dá)量比較

    圖3顯示了不同硒源及添加水平對(duì)仔豬肝臟中GPX 1 mRNA表達(dá)的影響。由該圖可知,對(duì)不同硒源而言,當(dāng)以亞硒酸鈉為硒源時(shí),不同添加水平組之間GPX 1 m RNA表達(dá)量沒(méi)有顯著差異(P>0.05);當(dāng)以酵母硒為硒源時(shí),0.3 mg/kg添加水平組的表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05);當(dāng)以納米硒為硒源時(shí),0.5mg/kg添加水平組的表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。對(duì)不同添加水平而言,0.1和0.3mg/kg 2個(gè)添加水平下各個(gè)硒源組間 GPX 1 m RNA表達(dá)量差異均不顯著(P>0.05);在0.5mg/kg的添加水平下,納米硒組GPX 1m RNA表達(dá)量顯著高于亞硒酸鈉組和對(duì)照組(P<0.05)。

    圖3 不同硒源及添加水平對(duì)仔豬肝臟中GPX1 mRNA表達(dá)量的影響Fig.3 Ef fects of different selenium sources and leve ls on the expression level of GPX 1 m RNA in piglet liver

    2.3.2 腎臟組織中GPX 1基因m RNA表達(dá)量比較

    在腎臟組織中GPX 1基因mRNA表達(dá)量,由圖4可以看出,各試驗(yàn)組之間以及試驗(yàn)組與對(duì)照組之間GPX 1 m RNA表達(dá)量差異均不顯著(P>0.05)。

    2.3.3 脾臟組織中GPX 1基因m RNA表達(dá)量比較

    脾臟組織中GPX 1基因m RNA表達(dá)量,由圖5可以看出,對(duì)不同硒源而言,不同添加水平的亞硒酸鈉組GPX 1 m RNA表達(dá)量之間沒(méi)有顯著差異(P>0.05);酵母硒組0.3 m g/kg添加水平顯著高于各試驗(yàn)組和對(duì)照組(P<0.05);納米硒組0.5 mg/kg添加水平組顯著高于各試驗(yàn)組和對(duì)照組(P<0.05)。對(duì)于不同添加水平而言,3種硒源間在0.1 mg/kg添加水平下GPX 1 mRNA表達(dá)量差異均不顯著(P>0.05);0.3m g/kg添加水平下,酵母硒組的GPX 1 m RNA表達(dá)量顯著高于亞硒酸鈉組(P<0.05);0.5 m g/kg添加水平下,納米硒組的GPX 1 m RNA表達(dá)量顯著高于酵母硒組、亞硒酸鈉組和對(duì)照組(P<0.05)。3種硒源間表達(dá)量差異均不顯著(P>0.05);在0.5mg/kg添加水平下,納米硒組GPX 1m RNA表達(dá)量顯著低于亞硒酸鈉組(P<0.05),也顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

    2.3.4 肌肉組織中GPX 1基因m RNA表達(dá)量比較

    肌肉組織中GPX 1基因m RNA表達(dá)量,由圖6可以看出,在0.1~0.3 mg/kg添加范圍內(nèi),同一硒源的不同添加水平間差異均不顯著(P>0.05)。對(duì)不同硒源而言,在0.1和0.3m g/kg 2個(gè)添加水平,

    圖6 不同硒源及添加水平對(duì)仔豬肌肉中GPX1 mRNA表達(dá)量的影響Fig.6 Ef fects of different selenium sources and levels on the expression level of GPX 1 mRNA in pigletmuscle

    3 討 論

    Lei等[9]和Kevin等[10]等研究了以亞硒酸鈉為硒源,不同硒水平對(duì)大鼠肝臟GPX 1m RNA表達(dá)的影響,結(jié)果表明硒不影響GPX 1 m RNA的生成量,但影響m RNA的穩(wěn)定性,大鼠體內(nèi)硒缺乏時(shí),GPX 1 mRNA穩(wěn)定性降低,GPX 1 m RNA水平也隨之降低。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,以亞硒酸鈉為硒源時(shí),不同添加水平的亞硒酸鈉組之間GPX 1 m RNA表達(dá)量沒(méi)有差異,這與上述研究結(jié)果一致。胥保華[4]研究發(fā)現(xiàn),給雞飼喂0.5 mg/kg水平的硒時(shí),納米硒組肝臟 GPX 1 m RNA豐度比亞硒酸鈉組高31.25%(P<0.05)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,0.5 mg/kg納米硒組的肝臟組織中GPX 1 m RNA表達(dá)量顯著高于0.5 mg/kg亞硒酸鈉組(P<0.05)。這與胥保華研究結(jié)果一致。

    腎臟是動(dòng)物主要的排泄及分泌器官,也是機(jī)體中含硒量最高的器官,硒缺乏對(duì)腎臟影響極大。腎臟對(duì)硒代謝起重要作用,腎臟病變直接波及硒元素變化。各試驗(yàn)組腎臟組織GPX 1 m RNA表達(dá)量差異不顯著,說(shuō)明不同硒源以及0~0.5 mg/kg的不同添加水平并不影響腎臟組織中GPX 1 m RNA表達(dá)量。Zhou等[5]以豬為試驗(yàn)對(duì)象對(duì)GPX 1、硒蛋白W 1(SepW 1)、GPX 2等基因表達(dá)的研究表明,在垂體和甲狀腺組織中這些基因的表達(dá)并不受硒不足或過(guò)量的影響,GPX 1 m RNA在腎臟中的表達(dá)可能具有和垂體、甲狀腺組織表達(dá)類(lèi)似的規(guī)律;這也可能和GPX 1在腎臟硒代謝中的重要性有關(guān),GPX 1在腎臟組織中活性較高,硒能維持機(jī)體活化免疫應(yīng)答,提高腎小球?yàn)V過(guò)率,減輕炎癥發(fā)生。硒在腎臟組織中的重要性決定了其必有一套復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制,所以飼料中硒的劑量高低并不能對(duì)GPX 1 m RNA表達(dá)造成影響。關(guān)于不同硒源和水平對(duì)豬腎臟組織GPX 1 m RNA表達(dá)量的影響還需進(jìn)一步探討。

    脾臟是機(jī)體的重要免疫器官,而硒能促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖及動(dòng)物免疫球蛋白的合成,提高免疫反應(yīng)[11]。GPX 1 m RNA在脾臟中的表達(dá)特征類(lèi)似于肝臟。筆者在以往的研究中發(fā)現(xiàn)仔豬血清免疫指標(biāo)IgG、IgA、IgM、C3水平均以0.5 mg/kg納米硒組最高,均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其中0.5 mg/kg納米硒組的IgG、IgM、C3水平顯著高于0.5mg/kg酵母硒組和亞硒酸鈉組(P<0.05)[12]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),0.5 mg/kg納米硒組脾臟中GPX 1m RNA表達(dá)量顯著高于酵母硒組和亞硒酸鈉組(P<0.05),這一結(jié)果表明飼糧中添加0.5 mg/kg納米硒可提高機(jī)體抗氧化能力,進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。

    肌肉組織中,0.5 m g/kg納米硒組的GPX 1 m RNA表達(dá)量顯著低于0.5 mg/kg亞硒酸鈉組和對(duì)照組肝臟組織中GPX 1m RNA的表達(dá)量。Peter等[6]報(bào)道,在大鼠各組織中進(jìn)行硒蛋白m RNA表達(dá)量的研究,得出硒蛋白表達(dá)具有組織特異性。Evenson等[13]報(bào)道,在各種組織中GPX 1 m RNA表達(dá)明顯不同,肝和脾GPX 1m RNA表達(dá)都比肌肉高。這可能是肌肉組織GPX 1 m RNA表達(dá)量與肝臟組織GPX 1m RNA表達(dá)量相反的原因,關(guān)于這方面的研究還少有報(bào)道,有待于進(jìn)一步研究。

    4 結(jié) 論

    在飼糧中添加0.5 mg/kg的納米硒可以提高仔豬肝臟、脾臟中GPX 1m RNA的表達(dá)量。

    [1] REGINA B F.Tissue-specific functions of indixidual glutathione peroxidases[J].Free Radical Biology&Medicine,1999,27:951-965.

    [2] CHENG W H,COMBS G F,LEI X G.Knockout of cellular glutathione peroxidase affects seleniumdependent param eters sim ilarly in m ice fed adequate and excessive dietary selenium[J].Biofactors,1998,7:311-321.

    [3] 黃艷玲,呂林,張億一,等.飼糧錳、鋅、硒對(duì)動(dòng)物基因表達(dá)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,19:475-480.

    [4] 胥保華.納米硒對(duì)Avian肉雞的生物學(xué)效應(yīng)及其分子機(jī)理研究[D].博士學(xué)位論文.杭州:浙江大學(xué),2003:87-88.

    [5] ZHOU JC,ZH AO H,LIJG,et al.Selenop rotein gene expression in thyroid and pituitary of young pigs is not affected by dietary selenium deficiency or excess[J].The Journalof Nutrition,2009,139(6):1061-1066.

    [6] PETER R H,SIMONE C H,PING A L,et al.The selenoproteome exhibits w idely varying,tissuespecific dependence on selenoprotein P for selenium supply[J].Nucleic Acids Research,2007,3:1-11.

    [7] MAHAN D C,PARRETT N A.Evaluating the e fficacy of selenium-enriched yeast and sodium selenite on tissue selenium retention and serum glutathione peroxidase activity in grower and finisher sw ine[J].Journal of Animal Sc ience,1996,74(12):2967-2974.

    [8] 高建忠,黃克和.動(dòng)物硒蛋白研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī),2004,36(7):39-42.

    [9] LEI X G,JACQUELINE K E,KEV IN M,et al.G lutathione peroxidase and phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase are differentially regulated in rats by dietary selenium[J].The Journal of Nutrition,1995,125:1438-1446.

    [10] KEVIN B H,ROGER A S.Selenium regulation of thioredoxin reductase activity and m RNA levels in rat liver[J].Journal of Nutritional Biochem istry,2001,12:693-702.

    [11] COMBSG F,COMBSSB.The role of selenium in nutrition[M].New York:Academ ic Press,1986:78-81.

    [12] 王秀娜,耿忠誠(chéng),武志敏,等.不同硒源對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能及體液免疫指標(biāo)的影響[J].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào),2010,22(1):61-64.

    [13] EVENSON JK,WHEELER A D,BLAKE SM,et al.Selenop rotein m RNA is exp ressed in b lood at levels comparable to major tissues in rats[J].The Journal of Nutrition,2004,134:2640-2645.

    *Correspond ing au thor,p rofessor,E-m ail:gzcheng1950@163.com

    (編輯 尚彬如)

    Effects of Sources and Levels of Dietary Selenium on the Expression Levelof mRNA of Celluar Glutathione Peroxidase Gene in Piglets

    WANG Xiuna1GENG Zhongcheng1*WANG Yan2LIU Shengjun1WU Zhim in1

    (1.College of Animal Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Daqing163319,China;2.College of Animal Science and Technology,Nor theast Agricultural Un iversity,Harbin150030,China)

    This experiment was conducted to study the effects of sources and levels of dietary selenium on the expression level of mRNA of celluar glutathione peroxidase gene in pig lets,and to provide a theoretical basis for the rational app lication of various selenium sources.NinetySanjiangWhite piglets of 35 days old with sim ilar body weight were selec ted in the experiment.They were random ly divided into 10 groups with 3 replicates per group and 3 piglets per rep licate.Piglets in the 9 experim ental groups were fed nano-selenium,yeast selenium and sodium selenite at0.1,0.3 and 0.5 mg/kg(by selenium content),respec tively.No extra selenium w as added to the diet of the controlgroup.Theexperimental period was 35 days.RTPCR was used to determ ine the expression level ofm RNA of GPX 1 gene in the liver,kidney,spleen,andm uscle tissues of the piglets.The results showed as follows:1)in the liver tissue,the expression level of GPX 1 mRNA in nano-selenium group was significantly higher than that in sodium se lenite group at0.5m g/kg addition level(P<0.05),and the expression level in 0.5 mg/kg nano-selenium group and 0.3mg/kg yeast selenium group was significantly higher than that in the control group(P<0.05);2)in the kidney tissue,the dif ferences of the expression level of GPX 1m RNA in allexperimental groups were not significant(P>0.05);3)in the sp leen tissue,the expression level of GPX1 mRNA in the nano-selenium group at 0.5 mg/kg w as significantly higher than that in the sodium selenite group and the yeast selenium group(P<0.05),and the expression level in 0.5 mg/kg nano-selenium group and 0.3 mg/kg yeastselenium group w as significantly higher than that in the con trol group(P<0.05);4)in the muscle tissue,the GPX 1 m RNA expression level in the nano-selenium group at 0.5 mg/kg w as significantly low er than that in the sodium selenite group and the control group(P<0.05).It is concluded that dietary addition of 0.5 mg/kg nano-selenium can increase the expression level of GPX 1 m RNA in the liver and sp leen tissues of piglets,but in themuscle tissue,the expression level w as lower than that in the sodium selenite group and the controlgroup.[Chinese Journal of Animal Nutrition,2010,22(6):1630-1635]

    selenium;GPX 1;m RNA

    S828

    A

    1006-267X(2010)06-1630-06

    10.3969/j.issn.1006-267x.2010.06.024

    2010-05-13

    黑龍江省農(nóng)墾總局資助項(xiàng)目(HNKX IV-08-03-01);黑龍江省科技廳資助項(xiàng)目(PC 06S06)

    王秀娜(1983—),女,黑龍江伊春人,碩士研究生,研究方向?yàn)閱挝竸?dòng)物營(yíng)養(yǎng)。E-mail:xiuna320@163.com

    *通訊作者:耿忠誠(chéng),教授,碩士生導(dǎo)師,E-mail:gzcheng1950@163.com

    猜你喜歡
    飼糧酸鈉腎臟
    飼糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)肉雞消化酶活性及能量、蛋白質(zhì)代謝的影響
    保護(hù)腎臟從體檢開(kāi)始
    中老年保健(2022年3期)2022-08-24 02:58:10
    3種冠狀病毒感染后的腎臟損傷研究概述
    阿侖膦酸鈉聯(lián)用唑來(lái)膦酸治療骨質(zhì)疏松
    哪些藥最傷腎臟
    憑什么要捐出我的腎臟
    特別健康(2018年9期)2018-09-26 05:45:46
    不同物理有效纖維水平飼糧制粒對(duì)山羊養(yǎng)分表觀消化率的影響
    硫酸鈉在蛋雞飼糧中的安全性評(píng)價(jià)
    丙戊酸鈉對(duì)首發(fā)精神分裂癥治療增效作用研究
    氣浮法脫除模擬鋅浸出液中的油酸鈉
    金屬礦山(2013年6期)2013-03-11 16:53:57
    一个人看的www免费观看视频| 久久久久国产网址| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 欧美三级亚洲精品| 97超视频在线观看视频| 一区二区三区乱码不卡18| 97精品久久久久久久久久精品| 中文在线观看免费www的网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久久久久九九精品二区国产| 美女国产视频在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 晚上一个人看的免费电影| 97超碰精品成人国产| 国产黄片美女视频| 精品人妻视频免费看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲av免费高清在线观看| 内地一区二区视频在线| 色网站视频免费| 中文字幕av成人在线电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久久色成人| 性色av一级| 免费观看的影片在线观看| 最近最新中文字幕免费大全7| 1000部很黄的大片| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 少妇 在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 伦理电影免费视频| 亚洲欧美精品专区久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲av中文av极速乱| 国产黄频视频在线观看| 在线看a的网站| 国产黄片美女视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 蜜臀久久99精品久久宅男| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产精品久久久久久久电影| 久久99精品国语久久久| 精品一区二区免费观看| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲无线观看免费| 少妇人妻一区二区三区视频| 嫩草影院新地址| 欧美丝袜亚洲另类| 伦精品一区二区三区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 日本一二三区视频观看| 免费人成在线观看视频色| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 中国三级夫妇交换| 我要看黄色一级片免费的| 伊人久久国产一区二区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 各种免费的搞黄视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品蜜桃在线观看| .国产精品久久| www.色视频.com| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产精品久久久久久久久免| 色综合色国产| 国产成人免费观看mmmm| 国产精品一二三区在线看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 亚洲经典国产精华液单| 中国三级夫妇交换| 国产 精品1| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产黄色免费在线视频| 久久青草综合色| 干丝袜人妻中文字幕| 18+在线观看网站| 黄色日韩在线| 蜜桃在线观看..| 视频区图区小说| 婷婷色麻豆天堂久久| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 欧美日韩综合久久久久久| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品99久久久久久久久| 午夜视频国产福利| 久久久久久久久久久丰满| 国产日韩欧美亚洲二区| 精品一品国产午夜福利视频| 一级爰片在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 免费人成在线观看视频色| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 在线天堂最新版资源| 日韩av在线免费看完整版不卡| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲国产av新网站| 成人特级av手机在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 久久午夜福利片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产精品伦人一区二区| 国产又色又爽无遮挡免| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲怡红院男人天堂| 五月玫瑰六月丁香| av天堂中文字幕网| 国产男女超爽视频在线观看| 一区二区av电影网| 97在线视频观看| 性色avwww在线观看| 久久精品久久久久久久性| 国产成人精品一,二区| 国产爽快片一区二区三区| 国产伦精品一区二区三区四那| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 人妻 亚洲 视频| 人体艺术视频欧美日本| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲国产av新网站| 成人特级av手机在线观看| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日本一二三区视频观看| 亚洲国产精品专区欧美| 天堂8中文在线网| 日韩一区二区三区影片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产色爽女视频免费观看| kizo精华| 亚洲av中文av极速乱| 有码 亚洲区| 亚洲精品日本国产第一区| 国产一区有黄有色的免费视频| 内射极品少妇av片p| 中文天堂在线官网| 如何舔出高潮| 久久精品国产亚洲av天美| 91狼人影院| av女优亚洲男人天堂| 亚洲美女搞黄在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲熟女精品中文字幕| 青春草亚洲视频在线观看| 日本欧美国产在线视频| 亚洲av综合色区一区| 精品一区二区三卡| 成人亚洲精品一区在线观看 | 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲欧洲日产国产| 国产免费视频播放在线视频| 妹子高潮喷水视频| 在线观看免费视频网站a站| 中文资源天堂在线| 亚洲av日韩在线播放| 成人国产麻豆网| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产精品伦人一区二区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 日本免费在线观看一区| 久久精品国产自在天天线| 少妇人妻久久综合中文| 观看美女的网站| 男人爽女人下面视频在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 精品久久久噜噜| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 国产精品国产三级专区第一集| 我的女老师完整版在线观看| 国产视频首页在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 简卡轻食公司| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久久久久久久久成人| 国产精品.久久久| 男女边摸边吃奶| 最新中文字幕久久久久| 多毛熟女@视频| 97热精品久久久久久| 如何舔出高潮| h视频一区二区三区| 国产毛片在线视频| www.av在线官网国产| 免费人妻精品一区二区三区视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲av.av天堂| 偷拍熟女少妇极品色| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 午夜精品国产一区二区电影| 日韩欧美一区视频在线观看 | 国产成人freesex在线| 精品人妻偷拍中文字幕| 26uuu在线亚洲综合色| 日本av手机在线免费观看| 97精品久久久久久久久久精品| 高清在线视频一区二区三区| 国产淫语在线视频| 在线观看免费视频网站a站| 久久久a久久爽久久v久久| 熟女av电影| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久久久久人妻| 中文字幕久久专区| 欧美+日韩+精品| 我的老师免费观看完整版| 边亲边吃奶的免费视频| 成人毛片60女人毛片免费| 欧美精品一区二区免费开放| 精品久久久久久久久av| 亚洲精品国产av成人精品| 国产v大片淫在线免费观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 午夜视频国产福利| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲精品,欧美精品| 我的女老师完整版在线观看| 欧美一区二区亚洲| 女性被躁到高潮视频| 国产精品久久久久久精品古装| 丝瓜视频免费看黄片| 直男gayav资源| 中文字幕久久专区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲欧洲国产日韩| 一级毛片电影观看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 水蜜桃什么品种好| av在线老鸭窝| 不卡视频在线观看欧美| 国产永久视频网站| 一本色道久久久久久精品综合| 久久影院123| 春色校园在线视频观看| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲欧美成人精品一区二区| 夫妻性生交免费视频一级片| 午夜日本视频在线| 亚洲综合色惰| 久久6这里有精品| 韩国高清视频一区二区三区| 国产免费又黄又爽又色| 免费大片黄手机在线观看| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲av.av天堂| 一区二区三区乱码不卡18| 极品教师在线视频| 97超碰精品成人国产| 日韩欧美 国产精品| 精品一区在线观看国产| 三级国产精品片| 国产精品伦人一区二区| 中文字幕亚洲精品专区| 午夜免费观看性视频| 成人免费观看视频高清| 高清视频免费观看一区二区| 欧美区成人在线视频| 亚洲成人av在线免费| 五月伊人婷婷丁香| 搡老乐熟女国产| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 亚洲av国产av综合av卡| 精品午夜福利在线看| 亚洲va在线va天堂va国产| 如何舔出高潮| 人妻一区二区av| freevideosex欧美| 一级a做视频免费观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 最近手机中文字幕大全| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 丰满人妻一区二区三区视频av| 一区二区三区免费毛片| 国产大屁股一区二区在线视频| h日本视频在线播放| 中文欧美无线码| 夫妻午夜视频| 午夜激情福利司机影院| 午夜免费男女啪啪视频观看| 91久久精品电影网| 亚洲精品色激情综合| 免费观看的影片在线观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产一区二区三区av在线| 天美传媒精品一区二区| 内地一区二区视频在线| 九九在线视频观看精品| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 中文字幕制服av| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲内射少妇av| 美女高潮的动态| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲av.av天堂| 少妇人妻精品综合一区二区| 不卡视频在线观看欧美| 欧美日韩视频精品一区| 免费观看性生交大片5| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 欧美97在线视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 一个人免费看片子| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 深爱激情五月婷婷| 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久人妻熟女aⅴ| 搡老乐熟女国产| 亚洲美女搞黄在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看 | videossex国产| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| av播播在线观看一区| 欧美性感艳星| 熟妇人妻不卡中文字幕| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 我要看日韩黄色一级片| 久久久久久久久久久丰满| 国产乱人视频| 免费观看性生交大片5| 99热这里只有是精品50| 国产精品成人在线| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲丝袜综合中文字幕| 99热国产这里只有精品6| 五月天丁香电影| 色5月婷婷丁香| 最近最新中文字幕免费大全7| 精品人妻熟女av久视频| 久久鲁丝午夜福利片| 一级毛片 在线播放| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲精品456在线播放app| 99视频精品全部免费 在线| 一级毛片电影观看| av线在线观看网站| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产成人a∨麻豆精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲怡红院男人天堂| 国产中年淑女户外野战色| 老司机影院毛片| 成人漫画全彩无遮挡| 久久久久久人妻| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 国产精品久久久久久久电影| 精品一区在线观看国产| 一区二区三区乱码不卡18| 日韩视频在线欧美| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 日韩伦理黄色片| 一本一本综合久久| 国产毛片在线视频| 亚洲伊人久久精品综合| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久鲁丝午夜福利片| 黑人高潮一二区| 亚洲av免费高清在线观看| 国产精品国产av在线观看| 国产 一区精品| a级毛片免费高清观看在线播放| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲精品一二三| 最新中文字幕久久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 免费人妻精品一区二区三区视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产91av在线免费观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久99热这里只频精品6学生| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国模一区二区三区四区视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产黄频视频在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲精品亚洲一区二区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 男女无遮挡免费网站观看| 久久久午夜欧美精品| 插阴视频在线观看视频| 91狼人影院| 99热网站在线观看| 日韩一区二区三区影片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 欧美高清性xxxxhd video| 99精国产麻豆久久婷婷| 免费大片18禁| 精品亚洲成a人片在线观看 | 一级毛片我不卡| 尾随美女入室| 久久久久精品久久久久真实原创| 女性被躁到高潮视频| 日韩国内少妇激情av| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 亚洲精品视频女| 少妇人妻 视频| 最后的刺客免费高清国语| 午夜视频国产福利| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日韩成人伦理影院| 99久久中文字幕三级久久日本| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美最新免费一区二区三区| 我要看日韩黄色一级片| av线在线观看网站| 午夜日本视频在线| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 免费看光身美女| xxx大片免费视频| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 男女无遮挡免费网站观看| 精品久久久久久久久av| 国产成人午夜福利电影在线观看| av在线播放精品| 网址你懂的国产日韩在线| 丰满少妇做爰视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 少妇熟女欧美另类| 少妇丰满av| 国产高清三级在线| 久久ye,这里只有精品| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 成人毛片60女人毛片免费| 免费在线观看成人毛片| 少妇丰满av| tube8黄色片| 欧美另类一区| 日韩,欧美,国产一区二区三区| av国产久精品久网站免费入址| 国产免费一级a男人的天堂| 三级国产精品片| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲人成网站高清观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 久久精品国产a三级三级三级| 五月玫瑰六月丁香| 久久av网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲成人中文字幕在线播放| 少妇精品久久久久久久| 91久久精品国产一区二区三区| 国产欧美亚洲国产| 在现免费观看毛片| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 777米奇影视久久| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 好男人视频免费观看在线| 日韩欧美 国产精品| 亚洲av综合色区一区| 亚洲综合色惰| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产一级毛片在线| 国产成人免费观看mmmm| 欧美高清成人免费视频www| 国产黄片视频在线免费观看| 高清午夜精品一区二区三区| 人妻系列 视频| 亚洲欧洲国产日韩| 精品一品国产午夜福利视频| 一区二区三区四区激情视频| 黄色配什么色好看| 免费观看无遮挡的男女| 大香蕉久久网| 激情五月婷婷亚洲| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲va在线va天堂va国产| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 午夜免费鲁丝| 国产欧美亚洲国产| 毛片一级片免费看久久久久| 最近中文字幕2019免费版| 一本久久精品| 天堂中文最新版在线下载| 国产精品久久久久成人av| 九九在线视频观看精品| 热99国产精品久久久久久7| 国产免费一级a男人的天堂| 国产美女午夜福利| 男人舔奶头视频| 麻豆乱淫一区二区| 久久精品人妻少妇| 久久99热6这里只有精品| av在线观看视频网站免费| 热re99久久精品国产66热6| 国产 一区精品| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 91精品国产九色| 国产一区二区在线观看日韩| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美极品一区二区三区四区| 视频区图区小说| 国产久久久一区二区三区| 亚洲av.av天堂| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 免费黄频网站在线观看国产| 久久久久视频综合| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 色哟哟·www| 在线播放无遮挡| 嫩草影院新地址| 久久久久久久久久久免费av| 一区二区三区免费毛片| 精品熟女少妇av免费看| 国产淫片久久久久久久久| 久久精品人妻少妇| 熟妇人妻不卡中文字幕| 激情五月婷婷亚洲| 最近中文字幕2019免费版| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲精品色激情综合| 十八禁网站网址无遮挡 | 啦啦啦啦在线视频资源| 精华霜和精华液先用哪个| 久久久久视频综合| 麻豆成人午夜福利视频| 久久热精品热| 国产老妇伦熟女老妇高清| 午夜福利高清视频| 久久久久精品性色| 日韩欧美 国产精品| 少妇人妻精品综合一区二区| 日本av免费视频播放| 久久久久久久大尺度免费视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 在线观看人妻少妇| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 天堂8中文在线网| 国产一区二区三区综合在线观看 | 欧美成人午夜免费资源| 成人国产av品久久久| 日本色播在线视频| 青春草视频在线免费观看| 久久97久久精品| 国产高潮美女av| 国产爽快片一区二区三区| 激情五月婷婷亚洲| 全区人妻精品视频| 欧美 日韩 精品 国产| 夫妻午夜视频| 欧美区成人在线视频| 成人二区视频| 国产精品欧美亚洲77777| 99精国产麻豆久久婷婷| 一级av片app| 一级a做视频免费观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 三级经典国产精品| 青春草国产在线视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲色图av天堂| 韩国高清视频一区二区三区| 一级片'在线观看视频| av福利片在线观看| 亚洲av综合色区一区| 一级a做视频免费观看| 插逼视频在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 精品一区在线观看国产| 天堂中文最新版在线下载| 99热这里只有精品一区| 亚洲国产精品一区三区| 永久免费av网站大全| 高清在线视频一区二区三区| 嫩草影院新地址| 亚洲精品视频女| 老女人水多毛片| 国产免费视频播放在线视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 男人添女人高潮全过程视频| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看|