獐牙菜三萜化學(xué)成分研究

南京市溧水縣人民醫(yī)院（211200）施能勝

獐牙菜Swertia bimaculata龍膽科（Gentianaceae）屬植物( Swertia）約有170多種, 我國占80多種[1]。 獐牙菜中獐牙菜苦苷、齊墩果酸等有效成分含量在同屬植物中含量較高，驗(yàn)證了民間的應(yīng)用[2]。本實(shí)驗(yàn)對該植物進(jìn)行了進(jìn)一步化學(xué)成分研究，為闡明其有效成分提供臨床依據(jù)。

1 儀器與實(shí)驗(yàn)材料

熔點(diǎn)測定使用XT4雙目鏡視顯微熔點(diǎn)儀測定（溫度計未校正）；紅外光譜用N ICOL ET Impact 410型紅外光譜儀測定（KB r 壓片）；核磁共振用BRU KER ACF–300/500 型核磁共振儀測定，CDCl3、CD3OD、C5D5N、DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo)；EI- MS（70eV），ESI- MS用MSO1SPC.System 型質(zhì)譜儀測定；所用薄層層析、柱層析硅膠均為青島海洋化工廠生產(chǎn)；高效薄層預(yù)制板為煙臺市化學(xué)工業(yè)研究所煙臺化工科技開發(fā)實(shí)驗(yàn)室廠生產(chǎn)；Sephadex LH -20為Pharmacia 公司產(chǎn)品。顯色劑用香草醛濃硫酸試劑和5%硫酸乙醇溶液;所用溶劑除注明外，均為分析純。獐牙菜購自安徽亳州，經(jīng)江蘇省中國科學(xué)院張涵慶研究員鑒定為Swertia bimaculata。

2 提取與分離

取獐牙菜10kg，粉碎后用85%乙醇加熱回流提取3次，減壓回收溶劑得流浸膏約300g，分別用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。取醋酸乙酯萃取物（180g）經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜（石油醚-醋酸乙酯和氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)）、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)）凝膠柱色譜得到化合物1（45mg,化合物 2（19mg），化合物 3（35mg），化合物4（20mg），化合物5（9mg），化合物6（9mg）。

3 鑒定

化合物1 白色無定型粉末, ESI-MS m / z：457 [M + H]+；1H-NMR （CDCl3, 500MHz）δ: 5.12（1H, s, H-12），3.99 （1H, m, H-3），2.10 （1H，dd，J = 3.0，10.8 Hz, H-18）, 1.08，0.91，0.86, 0.84，0.80，0.74，0.67（21H, 7×CH3）。與文獻(xiàn)[3]數(shù)據(jù)基本一致，確定為齊墩果酸。

化合物2 白色粉末（甲醇），mp 260～261 ℃。ESI-MS m / z 457 [M + H ]+。NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]對照，鑒定化合物1為烏蘇酸。

化合物3α -香樹脂醇乙酸酯(α-amyrin acetate白色針狀結(jié)晶（氯仿-醇），mp216 ～ 219 ℃, ESI-MS m / z: 469 [M + H ]+, 1H-NMR ( CDCl3 , 500M ) δ: 4. 51 ( 1H, dd, J =6. 0, 10. 2 Hz, H-3) , 5. 11 (1H, t, J = 4. 2 Hz, H-12) , 2. 05 ( 3H, s, COCH3 ) , 1.08, 1.02, 1.01,0.97, 0.93, 0.86, 0.82, 0.78 ( 24H, 8 ×CH3 ) ; 13 C-NMR（CDCl3, 150MHz）。與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致，確定為α-香樹脂醇乙酸酯。

化合物4 無色粉末, ESI-MS m / z: 425 [M +H ]+，447 [M +Na ]+，1H-NMR（CDCl3, 500M）δ: 5. 21 (1H, t, J = 4. 2 Hz, H-12) ,1.15, 1.10, 1.05, 1.03, 0.98, 0.88, 0.86, 0.83（24H, 8 ×CH3 ）；13C-NMR (CDCl3, 125 MHz)。與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致，確定為β-香樹脂酮。

化合物5 白色粉末(甲醇)，mp 122-123℃。ESI-MS m / z 473 [M + H ]+。1 H2NMR (C5D5N, 500MHz) δ: 5.58 ( 1H, br s, H-12) , 3.63 (1H, dd, Jaa =11.5 Hz, Jae = 5.2 Hz, H-1) , 3.40 (1H, dd, Jaa = 11.6Hz, Jae = 5.0 Hz, H-3) , 1.37，1.32，1.12，1.11，0.95（each 3H, s, 5-CH3 ) , 1109 (3H, d, J = 7.2 Hz, H-30) ,1.03（3H, d, J = 6.5 Hz, H229）。13 C-NMR（C5D5 N,125MHz）δ: 78.8（C-1）, 30.9（C-2），78.1（C-3），39.0（C-4），55.9（C-5）, 19.8（C-6），34.3（C-7），40.0（C-8），46.7（C-9），38.6（C-10），23.9（C-11），124.1（C-12）, 140.9（C-13），42.3（C-14，28.2（C-15），2612（C-16 )，48.2（C-17），52.8（C-18）, 39.4（C-19），39.8（C-20），31.0（C-21 , 37.5（C-22），28.4（C-23）, 16.6（C-24），18.5（C-25），17.7（C-26）, 24.8（C-27）, 180.3（C-28），18.5（C-29），22.6（C-30）。與文獻(xiàn)對照，鑒定為1β，3β-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸。

化合物6白色粉末(甲醇)，mp 283～285 ℃。ESI-MS m / z 505 [M + H ] + 。1H-NMR （CD3OD, 500MHz）δ: 5.30（1H, m, H.12）, 4.35 ～3.45（4H, m,H-23a, 23b, 3, 2）, 2.51 1H,s,H-18）, 1.30, 1.30,1.18, 1.05, 1.05,（each 3H, s, 5-CH3），0.92 (3H,d,J = 6.7 Hz, H-30)。13C-NMR （CD3OD, 125MHz）δ:44.4(C-1 ), 69.1(C-2 ), 82.8（C-3），43.4（C-4），50.1(C-5), 18.0(C-6 )，34.0（C-7）, 41.8（C-8），48.7（C-9）， 40.5(C-10), 27.4（C-11），130.0(C-12), 139.6（C-13）, 42.0 （C-14）, 29.7（C-15）, 27.6（C-16）, 49.9（C-17) , 55.4（C-18）, 74.4（C-19 ），43.3（C-20), 27.9 (C-21), 39.3(C-22), 67.3（C-23），25.1（C-24），18.8（C-25），14.4（C-26），24.9（C-27）， 182.5（C-28），25.3（C-29），16.9（C-30）。與文獻(xiàn)對照,鑒定為2α, 3β, 19α, 23-四羥基-12-烯-28-烏蘇酸。