伏立康唑與羥丙基－β－環(huán)糊精包合常數(shù)的測(cè)定

趙 慶，朱春霞

（1.江蘇省南京市藥品檢驗(yàn)所，江蘇 南京 210015； 2.南京圣和藥業(yè)有限公司，江蘇 南京 210038）

伏立康唑（voriconazole）是高親脂性三唑類(lèi)廣譜抗真菌藥物，在水中溶解度為0.2mg/mL（pH=3）且不穩(wěn)定（其水解逆羥醛產(chǎn)物可重組為一種不活潑的對(duì)映體），因此難以開(kāi)發(fā)成注射劑。筆者采用相溶解度法測(cè)定了伏立康唑與羥丙基-β-環(huán)糊精（HP-β-CD）的包合常數(shù)，旨在為國(guó)內(nèi)醫(yī)藥企業(yè)研發(fā)伏立康唑靜脈給藥制劑和HP-β-CD的應(yīng)用提供參考。

1 儀器與試藥

UV2401型紫外分光光度計(jì)（日本島津）；BS200S型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）。伏立康唑?qū)φ掌罚兌葹?9.9％，自制）和原藥（純度為 99.5％，自制）；HP-β-CD（批號(hào)為20030520，西安德立生物化工有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 相溶解度法原理

環(huán)糊精包合物的包合常數(shù)（K值）是決定環(huán)糊精包合性質(zhì)的一個(gè)重要參數(shù)，通過(guò) K值的測(cè)定能對(duì)包合平衡作出定量描述，K值的大小反映了環(huán)糊精（CD）與藥物分子（G）形成包合物（CD-G）時(shí)的結(jié)合能力強(qiáng)弱[1-2]。環(huán)糊精和藥物在水溶液中的包合是一個(gè)平衡過(guò)程，符合質(zhì)量作用定律。環(huán)糊精與藥物形成1∶1包合物的平衡過(guò)程可用公式Ⅰ表示：

CD+G?CD-G

K=[CD-G]/[CD][G] （公式Ⅰ）

式中[CD-G]，[CD]，[G]分別代表平衡時(shí)包合物、游離環(huán)糊精和藥物的濃度。環(huán)糊精和藥物的起始濃度[CD]0和[G]0，可表示為：

[CD]0=[CD]+[CD-G]=[CD]+K[CD][G] （公式Ⅱ）

[G]0=[G]+[CD-G]=[G]+K[CD][G] （公式Ⅲ）

用相溶解度法測(cè)定 K值目前在藥學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用較廣泛。假設(shè)環(huán)糊精與藥物分子形成1∶1的包合物，在無(wú)環(huán)糊精時(shí)藥物的固有溶解度為S0；藥物被環(huán)糊精包合后溶解度增加，即[CD-G]=[G]0-S0。由公式Ⅰ～Ⅲ可得：

K=（[G]0-S0）/｛[CD]0-（[G]0-S0）｝S0（公式Ⅳ）

[G]0=KS0/（1+KS0）[CD]0+S0（公式Ⅴ）

以[G]0對(duì)[CD]0作圖，其斜率為 K S0/（1+K S0），截距為S0，故得：

K=斜率/截距（1-斜率） （公式Ⅵ）

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取伏立康唑適量，分別用甲醇稀釋成含伏立康唑5，10，20，30，40，60μg/mL的溶液，于255 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以質(zhì)量濃度對(duì)吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（見(jiàn)圖1），回歸方程為 Y=0.022 8X+ 0.001 9，r=0.999 9（n=6）。

圖1 伏立康唑標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.3 包合常數(shù)測(cè)定

將HP-β-CD配成質(zhì)量濃度為200 g/L的水溶液，備用。分別稱(chēng)取100mg伏立康唑，置8個(gè)10mL具塞試管中，依次加入相同質(zhì)量濃度、不同體積的HP-β-CD水溶液（1，2，3，4，5，6，7，8 mL），用蒸餾水定容，將定容過(guò)的過(guò)飽和溶液超聲30 min，靜置24h，待固液平衡后過(guò)濾，取濾液1mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋定容，取上述溶液2.5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋定容。于255 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算出伏立康唑的溶解度，以HP-β-CD的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、伏立康唑溶解度為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為 Y=0.255 3X+2.109 3，r=0.998 6（n=8）。結(jié)果見(jiàn)表1及圖2。因此，K=斜率/截距（1-斜率）=0.255 3/[0.002 109 3（1-0.255 3）]=162.5 L/mol。

表1 相溶解度研究測(cè)定值

圖2 伏立康唑與HP-β-CD的相溶解度曲線圖

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，伏立康唑與HP-β-CD的相溶解度曲線呈AL型，說(shuō)明伏立康唑與HP-β-CD形成了1∶1的包合物，故按穩(wěn)定性常數(shù)計(jì)算公式 K=斜率/S0（1-斜率）計(jì)算，伏立康唑的環(huán)糊精包合穩(wěn)定性常數(shù)為162.5 L/mol，且伏立康唑的相溶解度與HP-β-CD的摩爾濃度成正比。

由包合常數(shù)可知，將伏立康唑制備成注射劑所需的HP-β-CD用量較大，而目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)可供注射用的HP-β-CD，因此制藥企業(yè)應(yīng)該制訂嚴(yán)格的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，以保證產(chǎn)品的安全性。

[1]謝伯泰，楊國(guó)武，謝薇梅.羥丙基-β-環(huán)糊精特性及其在醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用與安全性[J].國(guó)外醫(yī)藥·合成藥、生化藥、制劑分冊(cè)，2002，23（5）：302-306.

[2]丁平田，吳雪梅.藥物制劑的新劑型輔料——羥丙基-β-環(huán)糊精[J].國(guó)外醫(yī)藥·合成藥、生化藥、制劑分冊(cè)，1996，17（2）：107-111.