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    中醫(yī)藥治療慢性瘡瘍實(shí)驗(yàn)研究概況

    2010-04-08 21:09:51卓燊,秦海洸
    環(huán)球中醫(yī)藥 2010年2期
    關(guān)鍵詞:瘡瘍生肌膠原

    慢性瘡瘍包括中醫(yī)所稱的“臁瘡”、“褥瘡”、“頑瘡”等疾患,是臨床難治性疾病之一。它的嚴(yán)重性和發(fā)病率的增加引起國內(nèi)外學(xué)者的高度重視。其主要病理機(jī)制是局部有效循環(huán)血量相對(duì)不足, 局部組織營養(yǎng)狀態(tài)差,抵抗力低下,在此基礎(chǔ)上出現(xiàn)反復(fù)感染形成惡性循環(huán),故創(chuàng)面難以愈合。中醫(yī)藥治療慢性難愈性潰瘍具有自身的優(yōu)勢和特點(diǎn),近年來很多學(xué)者對(duì)中藥治療瘡瘍的作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)性的研究,在揭示外用中藥愈創(chuàng)的機(jī)制方面已初見成效。

    1 促進(jìn)創(chuàng)面的血液循環(huán)和對(duì)血管生成的影響

    局部有效循環(huán)血量不足是慢性潰瘍難以愈合的直接原因,因而促進(jìn)創(chuàng)面的血液循環(huán)對(duì)于促進(jìn)創(chuàng)面愈合非常重要。

    張穎等[1]研究發(fā)現(xiàn)枳實(shí)提取物可以改善血液循環(huán),調(diào)和氣血的作用,有消滯散瘀、通經(jīng)止痛之功,從而有利于傷口愈合。洪曉華等[2]研究表明表明,歸知糖疽顆粒有促進(jìn)糖尿病大鼠皮膚潰瘍模型皮膚潰瘍創(chuàng)面愈合的作用,降低血糖、改善微循環(huán)障礙作用是其治療該病的關(guān)鍵。席建元等[3]通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)改善局部血液循環(huán),是象皮生肌散促進(jìn)家兔皮膚潰瘍模型生肌長皮作用的機(jī)理之一。闕華發(fā)等[4]探討補(bǔ)研究提示補(bǔ)益氣血方劑如四君子湯、四物湯和八珍湯均能上調(diào)血管內(nèi)皮因子表達(dá)水平,誘導(dǎo)血管新生,在一定程度上改善局部組織的缺血狀態(tài),促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)愈合。韓旭等[5]研究發(fā)現(xiàn),蜂蠟軟膏能明顯提高SD大鼠慢性皮膚潰瘍創(chuàng)面新生毛細(xì)血管數(shù),從而后改善創(chuàng)面微循環(huán),加速組織修復(fù)過程。

    2 對(duì)創(chuàng)面生長因子的作用

    表皮細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子-β、堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子等在創(chuàng)傷愈合過程具有重要的作用,它們可以影響創(chuàng)傷修復(fù)過程中細(xì)胞的增殖、遷移、細(xì)胞外基質(zhì)的合成和釋放等,生長因子含量的減少將影響愈合過程[6-8]。

    復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏,是唐漢鈞教授長期治療慢性皮膚潰瘍的經(jīng)驗(yàn)方,王林揚(yáng)等[9]探討了其對(duì)醋酸可的松造成SD大鼠慢性皮膚潰瘍模型堿性成纖維細(xì)胞生長因子mRNA的生成、表皮細(xì)胞生長因子mRNA表達(dá)水平的影響,結(jié)果表明其促進(jìn)慢性皮膚潰瘍創(chuàng)面修復(fù)的機(jī)制與其上調(diào)堿性成纖維細(xì)胞生長因子mRNA的生成、表皮細(xì)胞生長因子mRNA表達(dá)水平,促進(jìn)細(xì)胞增殖有關(guān)。裴憲武等[10]通過觀察不同創(chuàng)面的組織學(xué)變化、堿性成纖維細(xì)胞生長因子的表達(dá)和創(chuàng)面的愈合率來探討紫草油促進(jìn)創(chuàng)面愈合的分子生物學(xué)機(jī)制,結(jié)果提示紫草油可能是通過提高創(chuàng)面組織堿性成纖維細(xì)胞生長因子的表達(dá)來完成創(chuàng)面的修復(fù)過程。宋清華等[11]觀察到,積雪草主要成分積雪甙可以促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 mRNA的表達(dá),有利于傷口的愈合。王振宜等[12]用生肌化瘀方對(duì)SD大鼠背部全層皮膚缺損創(chuàng)面TGF-β1、TGF-β3水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)影響研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)生肌化瘀方有調(diào)節(jié)創(chuàng)面TGF-β1、TGF-β3分泌的作用,以益于加速創(chuàng)面愈合、減少瘢痕形成。溫腎健脾方由黃芪、茯苓、肉桂、當(dāng)歸、刺五加組成, 曹永清等[13]研究其對(duì)慢性創(chuàng)面愈合的影響及可能作用機(jī)制,結(jié)果提示:溫腎健脾方有促進(jìn)大鼠慢性難愈創(chuàng)面修復(fù)的作用,其機(jī)制與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期,上調(diào)EGF、TGF-β1細(xì)胞因子蛋白表達(dá)水平。

    3 對(duì)金屬蛋白酶及Ⅰ、Ⅲ型膠原的研究

    國內(nèi)外對(duì)慢性皮膚潰瘍治療的研究多著眼于各種生長因子,但是臨床試用的效果并不理想,其主要原因是慢性難愈性創(chuàng)面中有大量的蛋白酶,如金屬酶,分解了傷口細(xì)胞分泌的內(nèi)源性生長因子或給予的外源性生長因子。在創(chuàng)面組織愈合中,膠原代謝的結(jié)果直接影響創(chuàng)面的修復(fù)質(zhì)量,其中起主要作用的是Ⅰ、Ⅲ型膠原。Ⅰ型膠原起支架作用,Ⅲ型膠原決定膠原纖維的直徑大小和彈性好壞,Ⅰ、Ⅲ型膠原含量的比值關(guān)系到最終的修復(fù)結(jié)果[14]。

    董莉等[15]采用體外養(yǎng)創(chuàng)面肉芽組織成纖維細(xì)胞,以乳鼠皮膚成纖維細(xì)胞作對(duì)照,加入生肌方、化瘀方及生肌化瘀方大、小劑量藥物血清,檢測成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原的含量。結(jié)果表明,生肌方能夠明顯提高創(chuàng)面成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原含量;化瘀方能夠降低創(chuàng)面成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原含量,生肌化瘀方大、小劑量組Ⅰ、Ⅲ型膠原含量與正常組比較差異均無顯著性,因此認(rèn)為生肌化瘀方能夠促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù),其可能的作用機(jī)理是通過調(diào)節(jié)Ⅰ、Ⅲ型膠原的比值來調(diào)控Ⅰ、Ⅲ型膠原代謝,達(dá)到創(chuàng)面愈合及抑制瘢痕生長的目的。袁亮等[16]以生肌紅粉膏作為中醫(yī)祛腐生肌法的代表藥,對(duì)家兔創(chuàng)傷感染性創(chuàng)面模型進(jìn)行換藥,動(dòng)態(tài)對(duì)比觀察祛腐藥在換藥過程中對(duì)創(chuàng)面金屬蛋白酶-1,金屬蛋白酶-3(MMP-1、MMP-3)、細(xì)胞凋亡、創(chuàng)面溶菌酶含量的影響。觀察發(fā)現(xiàn):生肌紅粉膏能夠提高創(chuàng)面MMP-1、MMP-3、創(chuàng)面溶菌酶含量、并促進(jìn)創(chuàng)面成纖維細(xì)胞原位凋亡。從而認(rèn)為其祛腐生肌的可能機(jī)理是促進(jìn)金屬蛋白酶MMP-1、MMP-3的活性,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞溶菌酶作用以及刺激局部細(xì)胞凋亡等,促進(jìn)局部腐爛壞死組織的清除,從而達(dá)到祛腐作用。盛巡等[17]通過觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原含量及Ⅰ、Ⅲ型膠原比值,并觀察金屬蛋白酶-1、-13(MMP-1、-13)、金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)水平及MMP-1、-13與TIMP-1比值來研究瘍愈涂劑促進(jìn)糖尿病遲緩愈合傷口的修復(fù)作用及其分子機(jī)制,研究表明瘍愈涂劑可能通過調(diào)節(jié)影響膠原代謝的MMPs(金屬蛋白酶)、TIMPs(金屬蛋白酶抑制劑)表達(dá)平衡,促進(jìn)膠原的合成和沉積,從而加速創(chuàng)面的愈合。

    4 調(diào)控創(chuàng)面修復(fù)過程中TGF-β1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子修復(fù)基因Smad3等的表達(dá)

    生長因子(表皮細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子-β、堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子)參與調(diào)控創(chuàng)傷修復(fù)的全過程。生長因子通過與細(xì)胞膜上特定的高親和性受體結(jié)合而啟動(dòng)其活性,然后通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而發(fā)揮作用[18]。

    秦海洸等[19]采用改良付氏大鼠模型為研究對(duì)象, 研究補(bǔ)虛祛瘀法促進(jìn)慢性難愈性創(chuàng)面愈合的機(jī)理,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)動(dòng)物造模給藥第18天時(shí),復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏組TGF-β1表達(dá)明顯高于生理鹽水組,而修復(fù)蛋白Smad3分子的表達(dá)明顯低于生理鹽水組, 作者認(rèn)為復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏在瘢痕形成重塑期的是通過對(duì)TGF-β1→Smad3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控作用,來促進(jìn)創(chuàng)面的修復(fù)。闕華發(fā)等[20]以糖尿病大鼠背部全層皮膚缺損開放性創(chuàng)面為模型,探討益氣化瘀方(生黃芪、太子參、桃仁、地龍為主)對(duì)糖尿病潰瘍大鼠Smad3、Smad4表達(dá)的影響,蛋白質(zhì)印跡(Western blot)檢測結(jié)果顯示,益氣化瘀中藥能明顯促進(jìn)糖尿病潰瘍大鼠的創(chuàng)面愈合,下調(diào)Smad3、Smad4的表達(dá)水平是其作用機(jī)制之一。

    5 對(duì)纖維結(jié)合蛋白(fibronectin, FN)的影響

    FN是一種高分子糖蛋白, 與膠原具有特別的親和力,參與傷口愈合的全過程,F(xiàn)N含量的提高有利于創(chuàng)傷愈合。

    黃灶華等[21]通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),復(fù)黃膏可使創(chuàng)傷大鼠傷口愈合時(shí)間明顯縮短,還可顯著提高創(chuàng)傷大鼠血清及肉芽組織中纖維結(jié)合蛋白含量,提示該藥對(duì)血清及肉芽組織中FN含量有一定的調(diào)節(jié)作用,其提高血清及肉芽組織中的FN含量可能是促進(jìn)傷口愈合的機(jī)制之一。曹永清等[13]研究發(fā)現(xiàn), 溫腎健脾方亦可促進(jìn)間質(zhì)FN的表達(dá)。

    6 對(duì)創(chuàng)面氨基酸含量的影響

    創(chuàng)面營養(yǎng)對(duì)于愈合起一定作用,不可忽視。王林揚(yáng)[22]研究復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏促愈作用,發(fā)現(xiàn)復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏組肉芽組織中天冬氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、組氨酸、賴氨酸、精氨酸11種氨基酸含量與模型組相比, 差異有顯著性意義,提示復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏可能是通過影響肉芽組織中有關(guān)氨基酸的含量以促進(jìn)創(chuàng)面的良好愈合。

    7 調(diào)節(jié)創(chuàng)面免疫功能

    機(jī)體免疫功能的增強(qiáng)有利于創(chuàng)面的愈合.羅宇慧等[23]通過金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌感染所致的大鼠瘡瘍模型,證實(shí)祛腐生肌軟膏可增加補(bǔ)體C3、IgA及IgM的含量,增加膿性分泌物中溶菌酶含量,并增加胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù)的作用,從而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能,促進(jìn)創(chuàng)面的愈合。馬忠麗等[24]發(fā)現(xiàn),斂瘍散對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特異性免疫和非特異性免疫功能均具有增強(qiáng)作用,表現(xiàn)為巨噬細(xì)胞百分率和吞噬指數(shù)均明顯地提高,這是其對(duì)慢性皮膚潰瘍的修復(fù)的作用機(jī)制之一。

    8 對(duì)溶菌酶、pH值的影響

    鐘勇萍等[25]將實(shí)驗(yàn)性家兔進(jìn)行瘡瘍?cè)炷#接憦?fù)方蒼耳蟲油膏促進(jìn)瘡瘍愈合的機(jī)理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,復(fù)方蒼耳蟲油膏能有效地改善瘡面pH值,增加瘡面溶菌酶含量,加速愈合。昌蘭芳等[26]用黃及瘡瘍膏對(duì)大鼠瘡瘍模型進(jìn)行治療研究,觀察膿液溶菌酶的含量、膿液的變化及傷口的愈合情況,結(jié)果表明,黃及瘡瘍膏能顯著提高膿液溶菌酶的含量,促進(jìn)膿液排出,加速傷口愈合,為有效的瘍科外用藥。

    9 其它研究

    張甘霖等[27]研究發(fā)現(xiàn)血余蛋黃油能夠促進(jìn)表柔比星致小鼠皮膚潰瘍瘡面結(jié)痂,縮短愈合時(shí)間;其作用機(jī)制與其能夠促進(jìn)瘡面表皮細(xì)胞及膠原修復(fù),降低瘡面組織脂質(zhì)過氧化損傷,提高抗氧化能力有關(guān)。李萍[28]等觀察瘍愈涂劑對(duì)鏈脲佐菌素(STZ)引起的糖尿病大鼠傷口細(xì)胞增殖及體外對(duì)成纖維細(xì)胞增殖遷移的作用,與模型組相比,不同劑量的瘍愈涂劑均能明顯縮短STZ誘發(fā)糖尿病大鼠復(fù)合創(chuàng)傷后創(chuàng)面的愈合時(shí)間,提高創(chuàng)面愈合率,瘍愈涂劑細(xì)胞核增殖抗原(PCNA)表達(dá)明顯高于模型組,從而得出結(jié)論:瘍愈涂劑可能通過促進(jìn)糖尿病大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞的增殖,從而加速創(chuàng)面的愈合。董建勛等[29]采用“激素干預(yù)—皮膚缺損—細(xì)菌感染”復(fù)合因素疊加法制備慢性皮膚潰瘍大鼠模型。實(shí)驗(yàn)觀察大鼠一般生活行為,檢測創(chuàng)面分泌物溶菌酶含量,血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及血栓素B2(TXB2)含量及組織病理改變,結(jié)果發(fā)現(xiàn)與模型組比較,傳統(tǒng)回陽生肌膏及其脂質(zhì)體凝膠治療組創(chuàng)面分泌物溶菌酶含量顯著升高(P<0.05或P<0.01);血清中TNF-α和TXB2的含量顯著下降(P<0.05或P<0.01);創(chuàng)面肉芽組織增多,膠原合成旺盛,皮膚結(jié)構(gòu)趨于完整。

    10 結(jié)語

    縱觀上述文獻(xiàn),中醫(yī)藥促進(jìn)創(chuàng)面愈合等方面實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥創(chuàng)面愈合的主要作用機(jī)制可能是通過調(diào)控生長因子的合成和分泌,促進(jìn)細(xì)胞分裂增殖,刺激創(chuàng)面新生血管形成,改善創(chuàng)面的血液循環(huán),調(diào)控膠原的合成及代謝,調(diào)控創(chuàng)面修復(fù)過程中TGFβ1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子修復(fù)基因Smad3的表達(dá),調(diào)節(jié)創(chuàng)面修復(fù)基質(zhì)形成,營養(yǎng)創(chuàng)面等發(fā)揮其多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多層次的綜合調(diào)控作用,促進(jìn)創(chuàng)面愈合。研究資料表明,中醫(yī)藥具有肯定的促進(jìn)潰瘍面愈合的作用,為慢性瘡瘍的中醫(yī)藥防治研究開辟了新的途徑。但目前大多研究尚處于起步階段,中藥促進(jìn)潰瘍面愈合作用機(jī)制及其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚有待進(jìn)一步闡明,今后應(yīng)加強(qiáng)中醫(yī)藥促中醫(yī)藥促進(jìn)創(chuàng)面生理性修復(fù)及組織再生的研究,并從細(xì)胞學(xué)、分子學(xué)等多個(gè)水平作更為深入的研究和探討,以期全面闡明中藥治療瘡瘍的作用機(jī)理,為中醫(yī)藥臨床治療提供更多的科學(xué)實(shí)驗(yàn)根據(jù)。

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