益生菌對酒精性肝損傷保護(hù)作用的研究進(jìn)展

韓春嬋，蔣永生，左偉，邱國仕，陳熠媛，劉彥隆，楊國燦，謝龍騰

1 酒精性肝損傷

1.1 肝的功能 肝是人體五大臟器之一，具有去氧化，儲存肝糖，分泌性蛋白質(zhì)的合成等功能，肝臟也可產(chǎn)生膽汁。肝臟主要通過乙醇脫氫酶（ADH）、微粒體乙醇氧化酶系統(tǒng)（MEOS）體中過氧化氫酶系統(tǒng)進(jìn)行氧化代謝。乙醇經(jīng)過 ADH代謝為乙醛，乙醛進(jìn)一步經(jīng)過線粒體中的ALDH2和胞質(zhì)中的ALDH代謝為乙酸。

1.2 酒精的代謝途徑 消化道黏膜上的乙醇脫氫酶（ADH）把少部分酒精轉(zhuǎn)化為乙醛；大部分酒精進(jìn)入肝臟，通過肝臟的ADH轉(zhuǎn)化為乙醛；乙醛依靠乙醛脫氫酶（ALDH）和肝內(nèi)的P450把乙醛氧化為無毒的 CO2和水排出體外。飲酒后，乙醇被ADH和細(xì)胞色素P450 2E1（CYP2E1）氧化為乙醛，乙醛由ALDH轉(zhuǎn)換為乙酸，導(dǎo)入三羧酸循環(huán)生成乙酰輔酶A。酒精代謝的幾個步驟都會產(chǎn)生非常有害的活性氧，它會抑制肝細(xì)胞的抗氧化能力，降低過氧化氫酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽或增加脂質(zhì)過氧化和加合物的形成。酒精增加腸黏膜通透性和通過激活Toll樣蛋白4（TLR4）激活枯否細(xì)胞（kupffer細(xì)胞）產(chǎn)生內(nèi)毒素[1]。

1.3 酒精性肝病 酒精性肝?。ˋLD）是一種臨床常見的肝損傷形式。最新流行病調(diào)查發(fā)現(xiàn)，ALD在全世界范圍內(nèi)依然成為嚴(yán)重危害公眾健康的常見疾病之一，并呈逐年上升趨勢[2]。我國嗜酒者逐年增多，由酒精所致肝損傷的發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢，酒精已成為繼病毒性肝炎之后導(dǎo)致肝損害的第二大病因[3]。嚴(yán)重酗酒時可誘發(fā)廣泛肝細(xì)胞壞死，甚至肝功能衰竭。酒精性肝病是我國常見的肝臟疾病之一，嚴(yán)重危害人民健康。ALD是由于長期大量飲酒導(dǎo)致的肝臟疾病。ALD發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，氧化應(yīng)激與脂質(zhì)過氧化作用是ALD中最重要的發(fā)病機(jī)制。此外，內(nèi)毒素及各種細(xì)胞因子在ALD免疫機(jī)制中的作用、遺傳因素、各類肝炎病毒和營養(yǎng)狀態(tài)等均是發(fā)病因素[3]。邱萍的研究表明，乙醇代謝酶CYP2E1除參與乙醇的代謝外，還參與許多肝毒性因子的活化、自由基的產(chǎn)生、谷胱甘肽的耗竭和異源性物質(zhì)的生成。長期飲酒會引起腸源性內(nèi)毒素血癥IETM加重氧化應(yīng)激，致使在脂肪肝基礎(chǔ)上發(fā)生炎癥、壞死和纖維化[4]。酸性鞘磷脂酶（ASMase）在酒精導(dǎo)致的ALD中也發(fā)揮重要作用。它能引起線粒體內(nèi)膽固醇的積聚，破壞線粒體的結(jié)構(gòu)和功能，使肝細(xì)胞更容易受到ERS，氧化應(yīng)激及炎性因子的破壞[5]。有研究表明ALD的發(fā)病機(jī)制可能與還原型輔酶Ⅰ/輔酶Ⅰ（NADH/NAD+）比值增高所致代謝紊亂有關(guān)[6]。乙醇在肝內(nèi)氧化為乙醛，乙醛還可以影響線粒體、微管的功能，可以與各種蛋白質(zhì)結(jié)合形成乙醛復(fù)合體，成為一個新的抗原刺激，使肝細(xì)胞受損[7]。劉國濤等[8]在近期的研究表明，蛋氨酸代謝失衡、過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARs)表達(dá)改變、纖溶系統(tǒng)失衡也是ALD的重要發(fā)病機(jī)制。

2 益生菌

益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。益生菌可抑制腸內(nèi)產(chǎn)胺的腐敗菌，降低腸內(nèi)酸度和血中內(nèi)毒素含量。服用益生菌可明顯改善腹瀉人群腸道菌群失調(diào)狀況，且較大劑量服用時，對腸道易激綜合征（IBS）患者腸道菌群失調(diào)狀況的改善快速而持久[9-10]。益生菌能增強非特異性免疫的功能，包括固有免疫細(xì)胞的吞噬活性和NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性[11]。緩解不耐乳糖癥狀，乳桿菌可幫助人體分解乳糖，緩解腹瀉、脹氣等不適癥狀，可與牛奶同食[12]。益生菌可以通過刺激腸道內(nèi)的免疫機(jī)能，將過低或過高的免疫活性調(diào)節(jié)至正常狀態(tài)。益生菌這種免疫調(diào)節(jié)的作用也被認(rèn)為有助于抗癌與抑制過敏性疾病[13]。

3 益生菌對肝損傷的保護(hù)作用

大量實驗證明，益生菌對酒精性肝損傷具有一定的保護(hù)作用。如肖麗霞等[14]在實驗中發(fā)現(xiàn)新疆傳統(tǒng)乳制品馬奶酒中篩選獲得的嗜熱鏈球菌grx02對急性酒精性肝臟損傷具有良好的保護(hù)作用，肝臟脂質(zhì)過氧化各指標(biāo)接近于空白組，而優(yōu)于藥物組。遲菲菲等[15]通過對小鼠的研究發(fā)現(xiàn)鼠李糖乳桿菌 Z7（L.rhamnosus Z7）和植物乳桿菌 N31（L.plantarum N31）對酒精性肝損傷有良好的緩解作用。還有研究發(fā)現(xiàn)鼠李糖乳桿菌 LGG-s能保護(hù)酒精肝損傷；乳桿菌GG能減少慢性飲酒導(dǎo)致的肝損傷[16-17]。Lv等[18]在大鼠實驗中發(fā)現(xiàn)使用乳桿菌LI01或戊糖片球菌LI05能改善D-galactosamine所致急性肝損傷大鼠。Tian等[19]研究表明喂食攝入的CCFM1107可能有利于酒精誘發(fā)肝脂肪變性和損傷的預(yù)防和改善,此外喂食CCFM1107可以恢復(fù)和改善腸道平衡,增加乳酸桿菌和雙歧桿菌而減少 enterococci和腸桿菌屬，這將進(jìn)一步降低血清內(nèi)毒素的水平。梁惠等[20]在對碧悠酸奶的實驗中發(fā)現(xiàn)益生菌能通過調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)紊亂，改善腸道屏障功能，對大鼠酒精性肝損傷發(fā)揮保護(hù)作用。王楠等[21]的研究表示枳椇乳酸菌發(fā)酵飲料可以顯著降低小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門東氨酸氨基轉(zhuǎn)移（AST）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC） 的含量和肝臟中丙二醛（MDA）含量，顯著升高小鼠肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）活力和谷胱甘肽（GSH）含量，枳椇飲料能保持肝臟細(xì)胞整齊排列及結(jié)構(gòu)完整。因此枳椇乳酸菌飲料對小鼠酒精性肝損傷具有一定保護(hù)作用。

4 益生菌對肝損傷的保護(hù)機(jī)制

4.1 益生菌對酒精攝入引起的腸道黏膜屏障破壞具有一定修復(fù)作用 D-LA是細(xì)菌發(fā)酵的代謝產(chǎn)物，二胺氧化酶（DAO）是哺乳動物腸黏膜上層絨毛細(xì)胞中具有高度活性的細(xì)胞內(nèi)酶，二者在腸黏膜細(xì)胞遭到破壞時均可釋放入血，從而成為腸道屏障功能檢測血清學(xué)敏感評價指標(biāo)。FOXO4是叉頭框蛋白轉(zhuǎn)錄因子O亞家族的一員，研究表明，腸黏膜組織中FOXO4表達(dá)降低與腸黏膜屏障功能障礙密切相關(guān)[22]。梁惠等[20]實驗檢測結(jié)果顯示，補充益生菌可明顯改善小腸組織超微結(jié)構(gòu)損傷狀況，血清D-LA和DAO水平明顯降低，F(xiàn)OXO4表達(dá)則明顯增多；這表明益生菌干預(yù)對酒精攝入引起的腸道黏膜屏障破壞具有一定修復(fù)作用。此外，武巖峰等[23]的實驗指出LGG通過減輕酒精引起的氧化應(yīng)激以維持腸道正常的屏障功能，從而抑制腸道通透性過高和酒精性脂肪性肝炎。梁惠等[24]指出益生菌對大鼠酒精性肝損傷具有一定保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與益生菌糾正腸道菌群結(jié)構(gòu)紊亂，修復(fù)腸道屏障功能,改善腸道內(nèi)環(huán)境有關(guān)。

4.2 益生菌補充對恢復(fù)腸道菌群正常狀態(tài)具有一定調(diào)節(jié)作用 酒精損傷使腸道菌群多樣性有所降低，而益生菌對恢復(fù)菌群多樣性具有一定調(diào)節(jié)作用。張鵬海[25]等發(fā)現(xiàn)對其收治的晚期胃腸道腫瘤患者進(jìn)行益生菌干預(yù)治療。結(jié)果經(jīng)益生菌干預(yù)后研究組雙歧桿菌、乳酸桿菌及酵母菌數(shù)量明顯較干預(yù)前增加，大腸桿菌、葡萄球菌、腸球菌及消化鏈球菌數(shù)量明顯較干預(yù)前減少，臨床總有效率為92.0%。這些都說明經(jīng)益生菌干預(yù)能夠有效糾正道菌群紊亂。

4.3 益生菌對降低血清內(nèi)毒素水平具有一定作用 益生菌一方面可以通過調(diào)節(jié)腸道菌群來減輕對肝臟的損傷，另一方面也可以減少內(nèi)毒素引起的炎癥反應(yīng)，在肝臟疾病方面發(fā)揮著重要的作用。益生菌可以抑制內(nèi)毒素的轉(zhuǎn)移，進(jìn)而抑制內(nèi)毒素所引起的炎癥反應(yīng)，使益生菌治療成為比較經(jīng)濟(jì)安全的治療方法。Bing等[26]在小鼠酒精肝模型中，發(fā)現(xiàn)益生菌可以減少內(nèi)毒素水平，下調(diào)TNF-的表達(dá)。

4.4 益生菌對減弱氧化應(yīng)激具有一定作用 遲菲菲等[15]的研究表明益生菌的干預(yù)能夠通過降低小鼠血清中ALT、AST和 -谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（ -GT）的水平，降低血清和肝勻漿中的脂肪（TG和T-CHO）含量起到保肝護(hù)肝的作用，同時降低肝勻漿中 MDA的濃度，提高谷胱甘肽（GSH）、（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）的含量，從而顯著改善機(jī)體的氧化水平，從而達(dá)到保肝、護(hù)肝的作用。

綜上所述，益生菌主要通過保護(hù)腸道菌群、保護(hù)腸道黏膜及降低內(nèi)毒素等機(jī)制以達(dá)到保護(hù)肝臟的作用。探尋能夠保護(hù)肝臟的益生菌，并探究其保護(hù)機(jī)制，能夠為研發(fā)保肝護(hù)肝的藥品和保健品提供前期研究基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 于洋,吳高峰,胡建民.酒精性肝病的內(nèi)毒素信號通路研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2014,11：42-44.

[2] 肖達(dá)民,李丹青,吳艷華.酒精性肝病的中醫(yī)臨床研究進(jìn)展[J].中藥新藥與臨床藥理,2018 2018,29(1)：118-122．

[3] 竇慧馨,張得鈞.酒精性肝病機(jī)制研究進(jìn)展[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué),2016,35(7)：1643-1647.

[4] 邱萍,李相,孔德松,等.酒精性肝病發(fā)病機(jī)制研究的新進(jìn)展[J].中國藥理學(xué)通報,2014,30(2)：160-163.

[5] 丁文斌,戴佳敏,張峰,等.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在肝臟相關(guān)疾病中的研究進(jìn)展[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2018,38(2)：260-264.

[6]Zhang R,Miao Q,Wang C,etal.Genomewide DNAmethylation analysisin alcohol dependence[J].Addict Biol,2013,18(2)：392-403.

[7] Dunn W,Shah V.Pathogenesis of Alcoholic Liver Disease[J].Clinicsin Liver Disease,2016,20(3)：445-456.

[8] 劉國濤,朱玉翠,張濤,等.酒精性肝病研究進(jìn)展[J].世界華人消化雜志,2017,25(15)：1382-1388.

[9] 趙蘭.腸易激綜合征患者腸道菌群分析及應(yīng)用益生菌療效觀察[J].深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志,2016,26(7)：10-12.

[10]畢紫娟,張仕晟,袁建業(yè).益生菌與腸易激綜合征[J].醫(yī)學(xué)綜述,2017,23(1)：125-128.[11]蘇麗婭,蘇秀蘭.益生菌的免疫調(diào)節(jié)作用及其相關(guān)應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中華臨床醫(yī)師雜志,2015,9(23)：159-163.

[12]Dimidi E,Christodoulides S,Fragkos K,etal.Theeffect of probioticson functional constipation inadults：asystematic review and meta-analysis of randomized controlled trials[J].The American Journal of Clinical Nutrition,2014,100(4)：1075-1084.

[13]任大勇.益生乳酸桿菌的黏附及免疫調(diào)節(jié)作用研究[D].吉林大學(xué),2013.

[14]肖麗霞,王慧晶,顧瑞霞,等.乳酸菌對小鼠急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用[J].揚州大學(xué)學(xué)報,2008,29(4)：37-41.

[15]遲菲菲,田豐偉,王剛,等.植物乳桿菌LP1001緩解小鼠酒精性肝損傷的研究[J].中國乳品工業(yè),2012,40(9)：4-7.

[16]Wang T,Liu Y,Kirpich I,etal.Lactobacillus rhamnosus GG reduces hepatic TNF production and inflammation in chronic alcohol-induced liver injury[J].Journal of Nutritional Biochemistry 2013,24(9)：1609-1615.

[17]Wang Y,Liu Y,Sidhu A,etal.Lactobacillus rhamnosus GG culturesupernatant ameliorates acute alcohol-induced intestinal permeability and liver injury[J].American Journal of Physiology Gastrointest Liver Physiolojy,2012,303(1)：32-41.

[18]Lv L,Hu X,Qian G,et al.Lidministration of Lactobacillus salivarius LI01 or Pediococcuspentosaceus LI05 improvesacute liver injury induced by D-galactosamineinrats[J].Applied Microbiology&Biotechnology,2014,98(12)：5619-5632.

[19]Tian F,Chi F,Wang G,etal.Lactobacillus rhamnosus CCFM1107 treatment ameliorates alcohol-induced liver injury in a mousemodelof chronic alcoholfeeding[J].Journal of Microbiology,2015,53(12)：856-863.

[20]梁惠,呂銳,傅泳,等.益生菌對大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].中國藥理學(xué)通報,2016,32(7)：991-997.

[21]王楠,杜雙奎,馮憲超,等.枳椇乳酸菌發(fā)酵飲料對小鼠酒精肝損傷的保護(hù)作用[J].現(xiàn)代食品科技,2016,8：28-33.

[22]Chang B,Sang L,Wang Y,etal.Theroleof FoxO4 in therelation ship between alcohol-induced intestinal barrier dysfunction and liver injury[J].International Journal of Molecular Medicine,2013,31(3)：569-576.

[23]武巖峰.鼠李糖乳桿菌通過調(diào)整腸道正常菌群緩解慢性酒精性肝損傷的研究[D].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),2016.

[24]梁惠,呂銳,傅泳,等.益生菌對大鼠酒精性肝損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].中國藥理學(xué)通報,2016,32(7)：991-997.

[25]張鵬海,朱佩禎,陳銀巧,等.晚期胃腸道腫瘤患者腸道菌群紊亂及益生菌干預(yù)作用的臨床研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2017,55(6)：16-18.

[26]Bing C,Sang L,Ying W,et al.The protective effect of VSL 3 on intestinal permeability in a rat model of alcoholic intestinal injury[J].Bmc Gastroenterol,2013,13(39)：6699-6702.