甜玉米多酚類成分的測定

陳智毅，徐玉娟，尹 艷，劉學銘，李小琴

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工公共實驗室，廣東 廣州 510610；2.華南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院，廣東 廣州 510640)

甜玉米多酚類成分的測定

陳智毅1，徐玉娟1，尹 艷1，劉學銘1，李小琴2

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工公共實驗室，廣東 廣州 510610；2.華南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院，廣東 廣州 510640)

用高效液相色譜法測定甜玉米肉粒、芯、苞衣及須中的多酚類成分，采用Agilent ZORBAX SB-C18分析柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動相：A相乙腈、B相0.4%乙酸，0～40min為5% A～95% B，40～45min為25% A～75% B，45～50min為35% A～65% B，后運行時間5min，流速1.0mL/min；VWD檢測器，檢測波長280nm；柱溫30℃。在甜玉米粒中檢測到13種多酚類化學成分，其中包括龍膽酸、蘆丁、槲皮素、表兒茶素、綠原酸、香草酸、安息香酸、丁香酸、兒茶素、金絲桃苷、沒食子酸、咖啡酸、阿魏酸；而在在甜玉米苞衣和芯中檢測到12種多酚類成分，在甜玉米須中檢測到8種多酚類成分。

甜玉米；多酚；高效液相色譜法

甜玉米具有較好的口感，且含有豐富和均衡的營養(yǎng)成分，隨著人們生活水平的提高及膳食結構的改善，甜玉米已經(jīng)成為不可或缺的營養(yǎng)和保健食品之一。目前對甜玉米的營養(yǎng)成分研究報道較多[1-6]，而植物多酚主要存在于植物的皮、根、莖、葉、果中[7-10]，因其多樣的生理功能及藥理功能作用等而成為當前研究的熱點[11-12]，但對甜玉米及其副產(chǎn)物甜玉米芯、苞衣及須等的多酚類成分研究較少。為了對甜玉米進行有效開發(fā)和綜合利用，本實驗用HPLC測定甜玉米粒、玉米苞衣、玉米須、玉米芯的多酚類成分。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

甜玉米(Zea mays var. rugosa)品種農(nóng)甜88，由華南農(nóng)業(yè)大學李小琴提供。

丁香酸 Sigma公司；沒食子酸、龍膽酸、綠原酸、兒茶素、香草酸、咖啡酸、丁香酸、表兒茶素、阿魏酸、蘆丁、金絲桃苷、水楊酸、安息香酸、白

藜蘆醇、槲皮素 中國藥品生物制品檢定所；甲醇(色譜純) Fisher公司；甲醇(分析純)；屈臣氏純凈水。

1.2 儀器與設備

L C 1 2 0 0高效液相色譜儀、V W D檢測器Agilent公司；EYELA N-1001旋轉蒸發(fā)儀 東京理化器械株式會社。

1.3 方法

對照品溶液的制備：精密稱取減壓干燥至恒質量的對照品各10mg，用甲醇溶解后定容于10mL容量瓶中，用0.45μm微孔濾膜過濾，即得。

供試樣品的制備：新鮮甜玉米材料稱取約10g加入約50mL甲醇，超聲處理60min，濾渣再用甲醇洗滌2次，合并濾液，旋轉蒸發(fā)儀濃縮，加入甲醇定容50mL容量瓶中，搖勻，0.4 5μm濾膜過濾，即得。

色譜條件：色譜柱：ZORBAX SB-C18分析柱(4.6mm× 250mm，5μm)；流動相梯度洗脫：A相乙腈，B相0.4%乙酸，0～40min為5% A～95% B，40～45min為25% A～75% B，45～50min為35% A～65% B，后運行時間5min，流速1.0mL/min；VWD檢測器，檢測波長280nm；柱溫30℃。

2 結果與分析

本實驗用HPLC的方法分析測定甜玉米粒、苞衣、芯及須中的多酚成分(標準品HPLC色譜圖見圖1)，結果在甜玉米粒中檢測到13種多酚類化學成分，其中包括龍膽酸、蘆丁、槲皮素、表兒茶素、綠原酸、香草酸、安息香酸、丁香酸、兒茶素、金絲桃苷、沒食子酸、咖啡酸、阿魏酸(圖2，表1)。在甜玉米苞衣中則檢測到12種多酚類成分，其中包括表兒茶素、水楊酸、蘆丁、丁香酸、龍膽酸、金絲桃苷、安息香酸、槲皮素、香草酸、兒茶素、綠原酸、咖啡酸(圖3，表1)。在玉米芯中檢測到12種多酚類成分，其中包括龍膽酸、蘆丁、安息香酸、兒茶素、水楊酸、香草酸、金絲桃苷、阿魏酸、咖啡酸、丁香酸、槲皮素、表兒茶素(圖4，表1)。在甜玉米須中檢測到8種多酚類成分，其中包括安息香酸、槲皮素、綠原酸、香草酸、蘆丁、表兒茶素、丁香酸、沒食子酸(圖5，表1)。在甜玉米各部位化學成分中本實驗檢出有6種共同的成分，如安息香酸、槲皮素、香草酸、蘆丁、表兒茶素、丁香酸，其中以玉米粒含量豐富，玉米須含量較少。

按植物多酚的結構來分，本實驗在甜玉米中檢出的酸酚類有沒食子酸、龍膽酸、綠原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、阿魏酸、水楊酸、安息香酸，其中以甜玉米粒含有的總量(52.984mg/100g)顯著多于玉米芯(39.947mg/100g)、玉米苞衣(21.233mg/100g)、玉米須(26.190mg/100g)，而已經(jīng)檢出的甜玉米粒酸酚成分中龍膽酸占了79.82%，玉米芯中的龍膽酸占了42.30%，玉米須中的安息香酸占了56.51%，玉米苞衣中的水楊酸占了44.23%。本實驗在甜玉米中檢出類黃酮類有蘆丁、槲皮素、兒茶素、表兒茶素、金絲桃苷等，玉米苞衣含有的總量(36.318mg/100g)顯著高于玉米芯(18.199mg/100g)、甜玉米粒(20.403mg/100g)和玉米須(11.630mg/100g)，其中玉米苞衣中表兒茶素占了72.91%，玉米芯中蘆丁占了80.89%，甜玉米粒中蘆丁占了59.31%，而玉米須中，槲皮素和蘆丁合計占了75.82%。

圖1 酚類化合物標準品的HPLC色譜圖Fig.1 HPLC chromatogram of an aqueous solution of mixed polyphenol standards

圖2 甜玉米粒多酚類的HPLC色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram of the polyphenol extract from sweet corn kernels

圖3 甜玉米苞衣多酚類的HPLC色譜圖Fig.3 HPLC chromatogram of the polyphenol extract from sweet corn leafy husk

圖4 甜玉米芯多酚類的HPLC色譜圖Fig.4 HPLC Chromatogram of the polyphenol extract from sweet corn cob

圖5 甜玉米須多酚類的HPLC色譜圖Fig.5 HPLC Chromatogram of the polyphenol extract from sweet corn silk

表1 甜玉米多酚類成分的含量Table 1 Polyphenol composition of sweet corn kernels, cob, silk and leafy husk (mg/100 g, calculated on the basis of dry weight) mg/100g干物質

3 討 論

植物多酚是多羥基酚化合物的總稱，在蔬菜、水果、豆類、谷物類、茶等植物廣泛存在，具有多變的生物性質，參與植物生長繁殖過程、植物的色彩、植物的酸、甜、苦、辣的味道及抗逆性、抗病蟲害特性等[11-13]，同時多酚化合物還具有多種保健功能，如抗氧化性[14]、抗炎作用[15]、抗癌作用[16]、清除體內(nèi)自由基、舒張血管、抗菌消炎、抗過敏、產(chǎn)生癌細胞血管阻斷素、刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體、抑制磷脂酶、脂肪氧化酶、環(huán)加氧酶、黃嘌呤氧化酶等酶活性等生理作用[17]，同時多酚化合物還是有效的自由基捕獲劑[18]、金屬的鰲合劑[19]和脂過氧化的抑制劑[19]等。因此根據(jù)檢測出的多酚成分的藥理研究結果，參考相關資料[14-20]，推測甜玉米粒應該具有清除自由基、降血糖、降血脂、降血壓、抗血栓、升高白細胞、降低毛細血管通透性、抗病毒等作用以及清熱解毒、保肝利膽等多種藥理活性。玉米苞衣應該具有清除氧自由基、降血糖、降血脂、降血壓、降低毛細血管通透性、抗黏附、抗血栓、淡化色斑等效果，以及具有清熱解毒、止咳作用等多方面藥理活性。玉米芯應該具有降血脂、降低毛細血管通透性、抗病毒、抗氧化、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、改善微循環(huán)等作用，以及淡化色斑等效果，同時具有清熱解毒、止咳作用等多方面藥理活性。玉米須應該具有抗氧化、清除自由基、降血壓、降血脂、降血糖、抗血栓、抗黏附、升高白細胞、免疫調(diào)節(jié)、降低毛細血管通透性、抗病毒等作用，以及保肝利膽、清熱解毒等多方面藥理活性。說明甜玉米及副產(chǎn)物苞衣、玉米須、玉米芯等都具有一定的食用、藥用價值。

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Analysis of Polyphenol Composition of Different Parts of an Ear of Sweet Corn

CHEN Zhi-yi1，XU Yu-juan1，YIN Yan1， LIU Xue-ming1， LI Xiao-qin2
(1. Guangdong Open Access Laboratory of Agricultural Product Processing, Sericulture and Agri-Food Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510610, China；2. College of Agriculture, South China Agricultural University, Guangzhou 510640, China)

A HPLC method was developed for the analysis of polyphenol composition of different parts of an ear of sweet corn including kernels, cob, silk and leafy husk. The chromatographic separation was performed on an Agilent ZORBAX SB-C18 column (4.6 × 250 mm, 5μm) with a binary mobile phase composed of a mixture of 0.4% aqueous solution (phase A) of acetic acid and acetonitrile (phase B) leading to the following gradients: 0－40 min, phase A 5% + phase B 95%; 40－45 min, phase A 25% + phase B 75%; and 45－50 min followed by 5 min running, phase A 35% + phase B 65% at a flow rate of 1.0 mL/min. Column temperature was set at 30 ℃. The VWD detection was performed at a wavelength of 280 nm. Added together, 13 phenolic compounds were identified in sweet corn kernels, cob, silk and leafy husk, including gentisic acid, rutin, quercetin, picatechin, vanillic acid, benzoic acid, syringic acid, catechin, hyperoside, gallic acid, caffeic acid and ferulic acid, of which, 12 were identified in sweet cob or leafy husk and 8 in sweet silk.

sweet corn；polyphenols；HPLC

S513

A

1002-6630(2010)10-0235-04

2009-06-17

廣東省科技攻關項目(2006A20402001；2008A020100008)

陳智毅(1963—)，男，副研究員，碩士，主要從事農(nóng)產(chǎn)品加工研究。E-mail：fezychen@scut.edu.cn