共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥致病基因與乳腺癌易感性

張楠，車鑒，白松，吳爭，崔玉影，鄒偉,2

1 遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，大連 116029

2 遼寧師范大學(xué) 遼寧省生物技術(shù)和分子藥物研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，大連 116029

3 大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院放射科，大連 116011

ATM (Ataxia-telangiectasia mutated) 是共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張性癥 (Ataxia-telangiectasia, AT) 的突變基因，是一種腫瘤抑制基因，最初是在AT病中發(fā)現(xiàn)的。AT是一種罕見的常染色體隱性遺傳病，由AT基因突變所致。1995年，以色列遺傳學(xué)家Shiloh等確定AT病為單基因遺傳病，并將此致病基因命名為ATM基因[1]。

乳腺癌的發(fā)生是一個(gè)多階段、多因素參與的過程。研究發(fā)現(xiàn)，與乳腺癌易感性相關(guān)的基因很多，如CHEK2、NBS1、RAD50、BRIP1、PALB2、BRCA1、BRCA2和ATM等[2]。近年來，對AT病例流行病學(xué)的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，女性AT患者乳腺癌發(fā)病率較高，因而ATM基因與乳腺癌的關(guān)系逐漸成為研究熱點(diǎn)之一。以下僅就ATM基因的結(jié)構(gòu)和功能及與乳腺癌易感性的關(guān)系加以綜述。

1 ATM基因的結(jié)構(gòu)和功能

1.1 ATM基因結(jié)構(gòu)及其編碼蛋白

ATM基因位于染色體11q22.3，長度為150 kb，具有66個(gè)外顯子 (圖1)，第4外顯子為第一個(gè)編碼外顯子。ATM蛋白是ATM基因編碼的一種磷酸化的大分子核磷蛋白，含有3056個(gè)氨基酸，相對分子質(zhì)量為350.6 kDa，是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族的一員[1]。

圖1 ATM基因在人染色體上的定位Fig. 1 Locations of the ATM genes and the utilized microsatellite markers in chromosome11q21-q24.

ATM蛋白的C端包括FRAP、ATM和TRAPP區(qū)域 (又稱FATC區(qū)域)，含有35個(gè)高度保守的殘基。這部分區(qū)域在調(diào)節(jié) ATM激酶活性和結(jié)合其他調(diào)節(jié)蛋白上起著關(guān)鍵性的作用[3]。ATM蛋白的N端含有HEAT區(qū)域，這些區(qū)域缺乏特征性的螺旋結(jié)構(gòu)，無定向特性并遠(yuǎn)離激酶功能域，被認(rèn)為是一些酶的結(jié)合區(qū)域，故可能會影響 ATM和其他蛋白的相互作用。ATM中還有一些螺旋和超螺旋結(jié)構(gòu)的功能域，功能尚不明確[4]。

ATM是一種主要在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)的蛋白激酶，也有研究指出其在不同組織和細(xì)胞中有不同的定位：在增殖細(xì)胞中，ATM主要在核內(nèi)表達(dá)，而在卵母細(xì)胞、大腦神經(jīng)元等分化細(xì)胞中ATM則主要在胞漿內(nèi)表達(dá)[5]。

1.2 ATM基因與臨床表現(xiàn)

AT患者臨床表現(xiàn)為漸進(jìn)性小腦共濟(jì)失調(diào)、皮膚和眼部瘤樣小血管擴(kuò)張、染色體不穩(wěn)定以及射線敏感性增高等。臨床上，有大約1/3的AT病人患癌癥，大都為淋巴樣惡性腫瘤，包括白血病、淋巴瘤和乳腺癌等[6]。新近的臨床研究表明，ATM 基因突變還可能是骨髓癌的重要致病原因之一[7]。

1.3 ATM基因的功能

ATM 在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中主要參與激活細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)、調(diào)控DNA的損傷修復(fù)及調(diào)控細(xì)胞凋亡等[8]。

Bakkenist等[9]研究發(fā)現(xiàn)，未受輻射的細(xì)胞內(nèi)，ATM以二聚體或者更高級的多聚體形式保持失活狀態(tài)，其激酶域束縛在絲氨酸1981位點(diǎn)所包繞的一個(gè)區(qū)域內(nèi)，當(dāng)DNA雙鏈斷裂 (DSBs) 發(fā)生后，通過絲氨酸1981位分子間磷酸化和Tip60乙酰轉(zhuǎn)移酶的乙?；纬捎谢钚缘膯误w激酶。研究顯示 MRN (Mre11、Rad50、Nbs1) 復(fù)合物是ATM的激活的主要調(diào)控因子。其中，Mre11具有核酸外切酶活性，而Rad50和Nbs1的作用是激活Mre11的酶活性[10]。MRN復(fù)合物可以感應(yīng)斷裂的產(chǎn)生，并與其他解旋酶及核酸外切酶切割DNA斷裂端的5′末端，產(chǎn)生一段3′粘端的單鏈DNA，這段寡核苷酸刺激ATM的構(gòu)象發(fā)生改變，從而形成有活性的單體激酶[11]。最近也有研究表明，ATM是被單鏈DNA結(jié)合蛋白hSSB1所激活。DNA斷裂端被MRN切割成寡聚單鏈DNA后與hSSB1結(jié)合，而hSSB1蛋白在單鏈DNA上富集才能激活 ATM 激酶的活性。在 hSSB1突變的T117E細(xì)胞中，不能檢測到ATM的磷酸化，同時(shí)，基因組的穩(wěn)定性也被破壞[12]。

ATM作為起始調(diào)控DNA損傷反應(yīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)的核心分子，感受DNA損傷位點(diǎn)，并使其下游多種蛋白磷酸化，例如Chk2、p53、c-Abl和RPA等，它們參與細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)使受損的 DNA停滯于細(xì)胞周期檢測點(diǎn)并對其進(jìn)行修復(fù)[13]。Chk2是ATM下游的重要蛋白激酶，ATM激活后，磷酸化位于N末端的68位蘇氨酸而活化Chk2。Chk2激酶在G1/S、S和G2/M期均可被激活，通過磷酸酶Cdc25家族的活化而抑制不同細(xì)胞周期蛋白 Cyclin與CDK復(fù)合物的磷酸化作用，從而阻滯細(xì)胞周期中各個(gè)時(shí)期的進(jìn)程[14]。

DNA雙鏈斷裂 (DSBs) 是DNA損傷類型中較為嚴(yán)重的一種，細(xì)胞應(yīng)對 DSBs主要有兩種類型：同源重組修復(fù) (Homologous recombination repair，HR) 和非同源末端連接 (Non-homologous end joining，NHEJ)。ATM主要介導(dǎo)HR修復(fù)通路。ATM基因缺陷型的小鼠表現(xiàn)明顯的 HR修復(fù)障礙[15]。咖啡因抑制ATM后會顯著降低DSB誘導(dǎo)的HR通路的修復(fù)途徑[16]。

ATM 可以磷酸化 p53，并通過其下游的 Bcl-2介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。p53是一種抑癌蛋白，在細(xì)胞凋亡的調(diào)控中起重要的作用。p53可以誘導(dǎo)DNA損傷細(xì)胞進(jìn)入G1期，抑制細(xì)胞增殖，直到修復(fù)結(jié)束。如果修復(fù)失敗，p53則誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[17]。研究表明，乳腺癌細(xì)胞中，ATM可以磷酸化p14ARF。p14ARF是p53介導(dǎo)抑癌機(jī)制中的關(guān)鍵因子，其表達(dá)可使p53的15位絲氨酸磷酸化，激活p53活性，進(jìn)而抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖。RNAi干擾ATM表達(dá)后，p14ARF誘導(dǎo)的p53磷酸化程度顯著降低，表明ATM通過p14ARF調(diào)節(jié)p53活性[18]。

綜上所述，ATM對細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控有兩方面的作用：1) 啟動(dòng)細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)并介導(dǎo)其修復(fù)，使細(xì)胞恢復(fù)生理功能；2) 啟動(dòng)細(xì)胞凋亡進(jìn)程，使細(xì)胞免于惡性轉(zhuǎn)化。因此ATM基因功能的改變或缺失后，致使細(xì)胞周期檢測點(diǎn)和DNA損傷修復(fù)的異常、凋亡敏感性增加、染色體不穩(wěn)定及輻射敏感性增強(qiáng)，從而導(dǎo)致癌癥易感性增加。

2 ATM基因與乳腺癌

2.1 ATM在乳腺組織中的表達(dá)

乳腺結(jié)構(gòu)中有兩種不同的上皮細(xì)胞，其中一種為分泌導(dǎo)管上皮細(xì)胞，另一種為收縮性的肌上皮細(xì)胞。在正常乳腺組織中，ATM主要表達(dá)于乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞中，而在肌上皮細(xì)胞中幾乎檢測不到ATM的表達(dá)。但在硬化性乳腺病中，ATM在乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞和肌上皮細(xì)胞中均有表達(dá)。此外在30%~50%的擴(kuò)散性乳腺腫瘤上皮細(xì)胞中，ATM表達(dá)減少或缺失[19]。

ATM 蛋白的表達(dá)水平在乳腺癌中低于正常組織，可能是因?yàn)锳TM基因啟動(dòng)子區(qū)域發(fā)生了異常的甲基化[20]。另外，ATM的表達(dá)下調(diào)也可能與DNA-PK的表達(dá)下調(diào)有關(guān)。Peng等[21]在一些細(xì)胞中用 RNAi技術(shù)降低DNA-PK的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ATM的mRNA表達(dá)水平降低，從而導(dǎo)致ATM蛋白表達(dá)下調(diào)，但其具體機(jī)制尚未清楚。本研究室同樣利用RNAi技術(shù)，降低MCF10F細(xì)胞株中DNA-PK的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ATM蛋白的表達(dá)水平明顯低于對照組[22]。

2.2 ATM基因和乳腺癌的易感性

自ATM基因被克隆出時(shí)，研究者通過分子水平的研究后便指出，ATM基因有可能增加乳腺癌的易感性[1]。盡管不是所有的后續(xù)研究都能確定ATM基因和乳腺癌的關(guān)系[23]，但在 AT患者家族中乳腺癌的確有較高的患病風(fēng)險(xiǎn)。Thompson等[24]發(fā)現(xiàn)在AT患者家族中，乳腺癌的發(fā)病率是正常人群的2.23倍。Olsen等[25]對75例AT患者及其血緣親屬進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)乳腺癌的發(fā)病率較高地集中在生育 AT病患兒的母親中，而在其他女性親屬中并不明顯。他們提出這種現(xiàn)象可能的原因是生育一個(gè) AT患兒會增加其母親的乳腺癌患病風(fēng)險(xiǎn)。因此在乳腺癌的研究中，ATM一直作為熱點(diǎn)研究基因。

2.2.1 ATM基因突變和乳腺癌

近年來，許多研究組報(bào)道了關(guān)于ATM基因突變與乳腺癌易感性的關(guān)系。

Renwick等[26]在家族性乳腺癌中對ATM基因和乳腺癌的關(guān)系進(jìn)行研究，排除了 CHEK2、BRCA1和BRCA2乳腺癌易感基因突變的影響，在443例乳腺癌患者中檢測出12種ATM基因突變類型，而在521例對照組中只有2種突變類型，證明ATM是乳腺癌的易感基因，并指出ATM基因突變將會提高乳腺癌的發(fā)生率。Brunet等[27]在 43例未發(fā)生BRCA1和BRCA2基因突變的乳腺癌中研究了ATM基因的突變情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了34種ATM基因突變類型。通過計(jì)算機(jī)模擬分析，其中有些突變類型會影響外顯子的剪接和ATM蛋白的功能。因此，增加了乳腺癌的易感性。Paglia等[28]用增強(qiáng)型錯(cuò)配突變分析法(EMMA) 對 122例家族性乳腺癌患者基因進(jìn)行分析，篩選出了 28種 ATM基因的突變類型。其中c.7789G＞T的突變率在患者中為6.65%，而在對照組中僅為0.3%~0.6%。Tavtigian等[29]研究發(fā)現(xiàn)，一些低頻的 ATM基因錯(cuò)義置換會增加乳腺癌的易感性。他們認(rèn)為，這些錯(cuò)義置換破壞了 ATM蛋白中FAT、激酶和FATC結(jié)構(gòu)域的比例，致使ATM蛋白功能改變，從而增加乳腺癌易感性。這項(xiàng)研究采用元分析法，重新統(tǒng)計(jì)了曾經(jīng)發(fā)表的ATM基因突變與乳腺癌的相關(guān)性的數(shù)據(jù)結(jié)果，并在此基礎(chǔ)上增加了一些病例與對照組的研究，得出的結(jié)論解決了單一實(shí)驗(yàn)條件下對低頻錯(cuò)義置換基因結(jié)果統(tǒng)計(jì)的局限性問題[30]。

除了分析整個(gè)ATM基因編碼區(qū)之外，許多研究小組在乳腺癌病例對照組中分析單個(gè)ATM基因變異頻率。Stredrick等[31]曾發(fā)現(xiàn)，乳腺癌中 ATM 基因Ser49Cys錯(cuò)義突變率較高，尤其在50歲以下的女性患者中多見。美國和波蘭的兩個(gè)研究團(tuán)隊(duì)也得到了相似的結(jié)果。Bogdanova等[32]研究了東歐一些國家乳腺癌的病例，發(fā)現(xiàn)許多患者ATM基因E1978X位點(diǎn)發(fā)生了突變。進(jìn)一步分析表明，該位點(diǎn)的突變患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)比對照組高約5倍。這些結(jié)論均支持了ATM是乳腺癌的易感基因。

當(dāng)然不是所有的研究都指向ATM基因突變會增加乳腺癌的易感性。Dombernowsky等[33]在研究ATMSer49Cys基因的突變與癌癥的關(guān)系時(shí)指出，該位點(diǎn)的基因突變可能會增加其他類型癌癥的患病風(fēng)險(xiǎn)，但并不能增加患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)。

2.2.2 ATM基因多態(tài)性和乳腺癌

基因多態(tài)性通常是指單核苷酸多態(tài)性 (SNP)分析后，等位基因頻率 (MAF) 大于 5%的基因突變。乳腺癌病例除了與BRCA1、BRCA2等易感基因的突變有關(guān)之外，低外顯率的易感基因如代謝酶基因、DNA損傷修復(fù)基因、細(xì)胞因子以及抑癌基因等在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、治療與預(yù)后也起到了重要的作用[34-35]。

Angele 等[36]的 臨床 研究發(fā) 現(xiàn) ATMex39 5557G>A(D1853N) 可增加由射線誘導(dǎo)的乳腺癌的發(fā)病機(jī)率。Heikkinen等[37]對 ATMex39 5557G>A (D1853N) 及其順位基因 ATMivs38-8T>C多態(tài)性和乳腺癌的關(guān)系進(jìn)行研究時(shí)，推測這種復(fù)雜的等位現(xiàn)象在一定程度上會影響外顯子39的正確剪接。雖然沒有發(fā)生異常的轉(zhuǎn)錄激活現(xiàn)象，但這樣的雜合子患者淋巴母細(xì)胞中的 ATM蛋白表達(dá)水平比未攜帶雜合子的人低，而ATM蛋白的低表達(dá)會直接影響DNA的損傷應(yīng)答途徑，繼而影響基因組的穩(wěn)定性。因此，他們認(rèn)為5557G>A和ivs38-8T>C對乳腺癌的發(fā)病率有一定影響。Tommiska等[38]繼續(xù)研究ATMivs38-8T>C和 ATMex395557G>A(D1853N) 的多態(tài)性與乳腺癌的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者中ivs38-8T>C突變基因的攜帶者要略高于對照組 (攜帶組為 8.1%，對照組為 5.6%)。這些都說明，ATMivs38-8T>C和 ATMex395557G>A(D1853N) 的多態(tài)性與乳腺癌的易感性相關(guān)。

Lee等[39]通過測序確定了ATM基因中5個(gè)多態(tài)性位點(diǎn) (-5144A>T、IVS21+l049T>C、IVS33-55T>C、IVS34+60G>A、3393T>G)。他們認(rèn)為這5個(gè)位于非編碼區(qū)域的多態(tài)性位點(diǎn)，會在不同程度上影響外顯子11的正確連接，導(dǎo)致氨基酸殘基419位的截短。用Bayesian方法評價(jià)基因庫中的單倍型，發(fā)現(xiàn)病例組與對照組的單倍型頻率明顯不同。而且進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn) ATM 基因中的 IVS21+1049TC/CC、IVS34+60GA/AA、3393TG/GG基因型與絕經(jīng)前乳腺癌婦人患病風(fēng)險(xiǎn)的增加有關(guān)。

Ho等[40]研究了 131例乳腺癌患者，檢測出 51例患者存在ATM多態(tài)性基因型。與其余的80例患者相比，ATM多態(tài)性基因型患者表現(xiàn)出更高的輻射耐受性。結(jié)果表明ATM基因多態(tài)性可能會影響治療乳腺癌的輻射敏感性。

2.2.3 ATM基因甲基化和乳腺癌

隨著表遺傳學(xué) (Epigenetics) 的發(fā)展，近年來的研究發(fā)現(xiàn)，DNA甲基化的機(jī)制與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，DNA甲基化狀態(tài)的改變導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)和功能的異常。研究表明，DNA啟動(dòng)子區(qū)域甲基化對基因表達(dá)有抑制作用，經(jīng)常導(dǎo)致相關(guān)疾病和腫瘤的發(fā)生[41]。ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化與許多癌癥相關(guān)。Kim等[42]發(fā)現(xiàn)，射線輻射引起的ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化與直腸癌的易感性相關(guān)。Ai等[43]在研究中發(fā)現(xiàn)，頭頸扁平上皮癌中ATM基因啟動(dòng)子甲基化頻率較高。

由于甲基化是可逆的過程，可以通過去甲基化恢復(fù)基因的表達(dá)和功能。因而ATM基因甲基化與乳腺癌易感性已逐漸成為研究熱點(diǎn)。

Flanagan等[44]對雙側(cè)乳腺癌患者外周血液DNA中ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化進(jìn)行了研究，他們在英國乳腺癌研究中心的種族和年齡匹配的 190個(gè)病例對照組 (雙側(cè)乳腺癌-未患乳腺癌) 中，提取外周血液的DNA，通過焦磷酸測序研究了ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化，發(fā)現(xiàn)患者血液中該區(qū)域甲基化程度高于對照組。并且在啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化可變位點(diǎn)發(fā)生頻率較高。這項(xiàng)研究結(jié)果提示乳腺癌患者的外周血液中存在ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域甲基化現(xiàn)象。提示，外周血液中ATM基因去甲基化可能成為治療乳腺癌的新型方法之一。

但是乳腺癌中ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化還是存在爭議的。Brandes等[45]通過使用特異MSP引物設(shè)計(jì)的PCR方法檢測了乳腺癌中ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化。他們所設(shè)計(jì)的引物與Kim等和Ai等設(shè)計(jì)的不同。原因是Kim和 Ai設(shè)計(jì)的引物中缺少了非CpG島的胞嘧啶，因而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一定的影響。通過這樣的特殊引物設(shè)計(jì) Brandes認(rèn)為至少在他們所檢驗(yàn)的43例乳腺癌中沒有發(fā)現(xiàn)ATM基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化。

3 展望

ATM基因作為DNA修復(fù)通路的修復(fù)基因之一，在繼BRCA1、BRCA2、TP53和CHEK2之后被認(rèn)為是乳腺癌易感基因之一，其通過相應(yīng)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，介導(dǎo)特定的分子間相互作用，繼而激活或抑制相應(yīng)的細(xì)胞因子。雖然目前關(guān)于ATM基因與乳腺癌易感性的研究已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展，但關(guān)于其確切的關(guān)系，還存在一定的爭議，需在各種生理及病理?xiàng)l件下進(jìn)行更深入的研究。因此，對ATM基因突變、甲基化、多態(tài)性等諸方面與乳腺癌易感性的關(guān)系進(jìn)行進(jìn)一步了解與研究具有重要意義，并為乳腺癌的預(yù)防和治療提供新的思路和理論基礎(chǔ)。

目前，如何提高腫瘤細(xì)胞的放射敏感性，是人們致力解決的問題?！盎蚵?lián)合放射治療”為惡性腫瘤的放射治療提供了新的思路。ATM基因突變后的放射敏感性是其特點(diǎn)之一，但如果在乳腺癌的治療中用人工方法造成類似的 ATM 基因突變或抑制ATM基因功能來增加患者的放療敏感性，可能成為乳腺癌治療的一個(gè)良好策略。

基因甲基化在乳腺癌診斷中應(yīng)用的最大問題是確定候選靶基因。選取最具有乳腺癌代表性的基因是該項(xiàng)技術(shù)是否能得到充分應(yīng)用的最大門檻。盡管目前關(guān)于ATM基因甲基化與乳腺癌易感性的研究還處于發(fā)展階段，但隨著表遺傳學(xué)研究的深入，相信ATM基因甲基化在乳腺癌的診斷中一定會有可觀的應(yīng)用前景。

[1] Shiloh Y, Savitsky K, Bar Shira A, et al. A single ataxia telangiectasia gene with a product similar to PI-3 kinase. Science, 1995, 268(5218): 1749?1753.

[2] Walsh T, King M. Ten genes for inherited breast cancer. Cancer Cell, 2007, 11(2): 103?105.

[3] Jiang X, Sun Y, Chen S, et al. The FATC domains of PIKK proteins are functionally equivalent and participate in the Tip60-dependent activation of DNA-PKcs and ATM. J Biol Chem, 2006, 281(23): 15741?15476.

[4] Ahmed M, Rahman N. ATM and breast cancer susceptibility. Oncogene, 2006, 25(43): 5906?5911.

[5] Oka A, Takashima S. Expression of the ataxia-telangiectasia gene (ATM) product in human cerebellar neurons during development. Neurosci Lett, 1998, 252(3): 195?198.

[6] Sommer SS, Buzin CH, Jung M, et al. Elevated frequency of ATM gene missense mutations in breast cancer relative to ethnically matched controls. Cancer Genet Cytogenet, 2002, 134(1): 25?32.

[7] Austen B, Barone G, Reiman A, et al. Pathogenic ATM mutations occur rarely in a subset of multiple myeloma patients. Br J Haematol, 2008, 142(6): 925?933.

[8] Lazzaro F, Giannattasio M, Puddu F, et al. Checkpoint mechanisms at the intersection between DNA damage and repair. DNA Repair, 2009, 8(9): 1055?1067.

[9] Bakkenist CJ, Kastan MB. DNA damage activates ATM through intermolecular autophosphorylation and dimer dissociation. Nature, 2003, 421(6922): 499?506.

[10] Buis J, Wu Y, Deng Y, et al. Mre11 nuclease activity has essential roles in DNA repair and genomic stability distinct from ATM activation. Cell, 2008, 135(1): 85?96.

[11] Abraham RT. Cell cycle checkpoint signaling through the ATM and ATR kinases. Genes Dev, 2001, 15(17): 2177?2196

[12] Richard DJ, Bolderson E, Cubeddu L, et al. Single-stranded DNA-binding protein hSSB1 is critical for genomic stability. Nature, 2008, 453(7195): 677?681.

[13] Eastman A. Cell cycle checkpoints and their impact on anticancer therapeutic strategies. J Cell Biochem, 2004, 91(2): 223?231.

[14] Falck J, Mailand N, Sylju?sen RG, et al. The ATM-Chk2-Cdc25A checkpoint pathway guards against radioresistant DNA synthesis. Nature, 2001, 410(6830): 842?847.

[15] Barchi M, Mahadevaiah S, Di Giacomo M, et al. Surveillance of different recombination defects in mouse spermatocytes yields distinct responses despite elimination at an identical developmental stage. Mol Cell Biol, 2005, 25(16): 7203?7215.

[16] Wang H, Boecker W, Guan J, et al. Caffeine inhibits homology-directed repair of I-SceI-induced DNA double-strand breaks. Oncogene, 2004, 23(3): 824?834.

[17] Jiang H, Reinhardt HC, Bartkova J, et al. The combined status of ATM and p53 link tumor development with therapeutic response. Genes Dev, 2009, 23(16): 1895?1909.

[18] Li Y, Wu D, Chen B, et al. ATM activity contributes to the tumor-suppressing functions of p14ARF. Oncogene, 2004, 23(44): 7355?7365.

[19] Janet Hall. The Ataxia-telangiectasia mutated gene and breast cancer: gene expression profles and sequence variants. Cancer Lett, 2005, 227(2): 105?114.

[20] Vo QN, Kim WJ, Cvitanovic L, et al. The ATM gene is a target for epigenetic silencing in locally advanced breast cancer. Oncogene, 2004, 23(58): 9432?9437.

[21] Peng Y, Woods RG, Beamish H, et al. Deficiency in the catalytic subunit of DNA-dependent protein kinase causes down-regulation of ATM. Cancer Res, 2005, 65(5): 1670?1677.

[22] Zou W, Che J, Wang CJ, et al. DNA-PKcs silencing inhibit the DNA repair induced by low dose radiation on human breast epithelial cells. Chin J Biotech, 2009, 25(5): 727?732.鄒偉, 車鑒, 王崇杰, 等. DNA-Pkcs基因沉默抑制人乳腺上皮細(xì)胞對低劑量輻射損傷的修復(fù). 生物工程學(xué)報(bào), 2009, 25(5): 727?732

[23] Broeks A, Urbanus J, Floore A, et al. ATM-heterozygous germline mutations contribute to breast cancer-susceptibility. Am J Hum Genet, 2000, 66(2): 494?500.

[24] Thompson D, Duedal S, Kirner J, et al. Cancer risks and mortality in heterozygous ATM mutation carriers. J Natl Cancer Inst, 2005, 97(11): 813?822.

[25] Olsen JH, Hahnemann JM, B?rresen-Dale AL, et al. Breast and other cancers in 1445 blood relatives of 75 Nordic patients with ataxia telangiectasia. Br J Cancer, 2005, 93(2): 260?265.

[26] Renwick A, Thompson D, Seal S, et al. ATM mutations that cause ataxia-telangiectasia are breast cancer susceptibility alleles. Nat Genet, 2006, 38(8): 873?875.

[27] Brunet J, Gutiérrez-Enríquez S, Torres A, et al. ATM germline mutations in Spanish early-onset breast cancer patients negative for BRCA1/BRCA2 mutations. Clin Genet, 2008, 73(5): 465?473.

[28] Paglia LL, Laugé A, Weber J, et al. ATM germline mutations in women with familial breast cancer and a relative with haematological malignancy. Breast Cancer Res Treat, Doi: 10.1007/s10549-009-0396-z.

[29] Tavtigian SV, Oefner PJ, Babikyan D, et al. Rare, evolutionarily unlikely missense substitutions in ATM confer increased risk of breast cancer. Am J Hum Genet, 2009, 85(4):427?446.

[30] Milne RL. Variants in the ATM gene and breast cancer susceptibility. Genome Med, 2009, 1(1): 12.

[31] Stredrick DL, Garcia-Closas M, Pineda MA, et al. The ATM missense mutation p.Ser49CyG and the risk of breast cancer. Hum Mutat, 2006, 27(6): 538?544.

[32] Bogdanova N, Cybulski C, Bermisheva M, et al. A nonsense mutation (E1978X) in the ATM gene is associated with breast cancer. Breast Cancer Res Treat, 2009, 118(1): 207?211.

[33] Dombernowsky SL, Weischer M, Allin KH, et al. Risk of cancer by ATM missense mutations in the general population. J Clin Oncol, 2008, 26(18): 3057?3062.

[34] Han DF, Zhou X, Hu MB, et al. Polymorphisms of estrogen-metabolizing genes and breast cancer risk: a multigenic study. Chin Med J, 2005, 118(18): 1507?1516. [35] F?rsti A, Jin Q, Altieri A, et al. Polymorphisms in the KDR and POSTN genes: association with breast cancer susceptibility and prognosis. Breast Cancer Res Treat, 2007, 101(1): 83?93.

[36] Angèle S, Romestaing P, Moullan N, et al. ATM haplotypes and cellular response to DNA damage: association with breast cancer risk and clinical radiosensitivity. Cancer Res, 2003, 63(24): 8717?8725.

[37] Heikkinen K, Rapakko K, Karppinen SM, et al. Association of common ATM polymorphism with bilateral breast cancer. Int J Cancer, 2005, 116(1): 69?72.

[38] Tommiska J, Jansen L, Kilpivaara O, et al. ATM variants and cancer risk in breast cancer patients from Southern Finland. BMC Cancer, 2006, 6(16): 209?217.

[39] Lee KM, Choi JY, Park SK, et al. Genetic polymotphisms of ataxia telangiectasia mutated and breast cancer risk. Cancer Epidemiol Biomarkers Perv, 2005, 14(4): 821?825.

[40] Ho AY, Fan G, Atencio DP, et al. Possession of ATM sequence variants as predictor for late normal tissue responses in breast cancer patients treated with radiotherapy. Int J Radiat Oncol Biol Phys, 2007, 69(3): 677?684.

[41] Zilberman D, Gehring M, Tran RK, et al. Genome-wide analysis of Arabidopsis thaliana DNA methylation uncovers an interdependence between methylation and transcription. Nat Genet, 2007, 39(1): 61?69.

[42] Kim WJ, Vo QN, Shrivastav M, et al. Aberrant methylation of the ATM promoter correlates with increased radiosensitivity in a human colorectal tumor cell line. Oncogene, 2002, 21(24): 3864?3871.

[43] Ai L, Vo QN, Zuo C, et al. Ataxia-telangiectasia-mutated (ATM) gene in head and neck squamous cell carcinoma: promoter hypermethylation with clinical correlation in 100 cases. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2004, 13(1): 150?156.

[44] Flanagan JM, Munoz-Alegre M, Henderson S, et al. Gene body hypermethylation of ATM in peripheral blood DNA of bilateral breast cancer patients. Hum Mol Genet, 2009, 18(7): 1332?1342.

[45] Brandes JC, Carraway H, Herman JG, et al. Optimal primer design using the novel primer design program: MSP primer provides accurate methylation analysis of the ATM promoter. Oncogene, 2007, 26(42): 6229?6237.