連翹抗病毒的研究進展

肖會敏，王四旺，王劍波，謝艷華，楊 倩

（第四軍醫(yī)大學藥學系藥物研究所，陜西西安 710032）

連翹為木犀科植物 Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的果實，味苦，無毒，性微寒，歸肺、心、膽經(jīng)，為中醫(yī)常用的清熱解毒藥。連翹主產(chǎn)于我國山西、陜西、河南、山東等地，以山西產(chǎn)連翹為道地藥材[1]。近年來連翹抗病毒的研究報道逐年增多，本文對其研究進行綜述。

1 抗病毒成分

趙文華等[2]對連翹抗流感病毒膠囊有效部位的進行分離鑒定，鑒定了其中的8種，分別為Forsythoside D（Ⅰ）、咖啡酸（Ⅱ）、連翹苷（Ⅲ）、（+）松脂素-β-D-葡萄糖苷（Ⅳ）、Forsythoside C（Ⅵ）、β-Hydroxyacteoside（V）、蘆?。╒II）、連翹酯苷（Ⅷ），證實苯乙醇苷類、黃酮類及木脂素類成分是連翹抗流感病毒膠囊抗流感病毒作用的主要物質基礎之一。石鉞等[3]對銀翹散抗流感病毒有效部位群化學成分進行了分離與鑒定，分離得到11種成分包括連翹苷（Ⅱ）與連翹酯苷（Ⅲ）等成分。王棟等[4]證明連翹酯苷的細胞毒性較低，可以較高濃度的大量應用，對實驗所選的合胞病毒、腺病毒3型和7型、柯薩奇病毒B組3型和7型均有一定的抑制作用，抑制濃度分別為 0.39、1.56、1.56、0.78、3.13 mg/ml，其中，對合胞病毒、柯薩奇病毒3亞型和副流感病毒3型無體外抑制作用。含有連翹酯苷成分的中藥復方針劑雙黃連粉針的體外抑病毒作用較強，尤其對呼吸道最主要常見病毒合胞病毒，濃度約0.01 mg/ml即可體外抑制其生長。

2 揮發(fā)油

馬振亞[5]藥理實驗證明，連翹用水蒸氣蒸餾提取的揮發(fā)油具有對流感病毒感染小鼠有保護作用，在雞胚內(nèi)能抑制流感病毒亞甲型、副流感仙臺株的增殖。

3 水提物

張欣等[6]在中草藥連翹、白芍水煎劑的抗病毒作用研究中證明連翹水煎劑在HeP-2細胞上有明顯抑制HSV-1的作用。實驗顯示連翹與HSV-1及甲型流感病毒直接接觸具有抑制病毒的作用?？赡苁撬幬镏苯悠茐牧瞬《颈砻娼Y構使之不能吸附，或是連翹有類抗體樣的物質使病毒滅活，用藥物處理細胞后再感染病毒，結果連翹對HSV-1病毒有一定的預防作用，說明連翹可能改變病毒包膜的功能或封閉了細胞的受體及藥物進入細胞后阻止病毒在細胞內(nèi)的增殖。至于連翹對HSV-1及連翹對甲型流感的治療作用則說明，這種藥能進入細胞內(nèi)，或促進溶酶體的產(chǎn)生而使病毒降解或是阻礙核酸的生物合成。董杰德等[7]證明連翹水煎劑在細胞外抑制COXB2V及ECH019V的作用很明顯，為治療病毒性心肌病及其他病毒性疾病提供了用藥依據(jù)。于起福等[8]證明連翹水煎劑具有抗柯薩奇B5病毒，連翹在先加藥后加病毒組、感染病毒同時加藥組、感染病毒后加藥組中，均有一定的抗病毒作用。雞胚體外試驗證明連翹對亞洲甲型流感病毒、鼻病毒-17型等也有抑制作用[9]。在Hela細胞上連翹和病毒唑的分別為 7.25 mg/ml和 2.30 mg/ml；EC50分別為 0.15 mg/ml和17.27 μg/ml；治療指數(shù)（TI）分別為 48.33 和 133.18，并且對呼吸道合胞病毒抑制作用存在明顯的劑量效應關系，連翹對RSV的抑制率隨著劑量的增加而增加，呈現(xiàn)出明顯的正相關。另外對不同給藥時間與療效關系的研究表明，于感染RSV后0、2、4、6、8 h加藥，均有明顯的抑制RSV活性的作用。在感染病毒的最初1～1.5 h為其復制周期的吸附和穿人階段，早期加入藥物能抑制RSV活性，一般認為是通過抑制病毒吸附和穿人細胞而起作用的；在感染RSV后4 h加藥，如果還能表現(xiàn)出抑制RSV活性作用，一般認為其是通過抑制未感染RSV的細胞與已感染RSV的合胞體結合而達到抗病毒作用。因此，上述結果表明，連翹抑制RSV活性作用可能是通過抑制合胞體的形成來實現(xiàn)的[10]。Shuang-Cheng Ma等[11]采用連翹水提物測得RSV半數(shù)抑毒濃度為50.0 μg/ml，半數(shù)細胞毒濃度為1000 μg/ml。

4 醇提物

Han-Chieh Ko等[12]用95%乙醇、50%乙醇和水提取連翹的提取物分別考察了在感染H1N1的人類支氣管上皮細胞A549后調(diào)節(jié)活化正常T細胞表達和分泌因子（RANTES）及單核細胞趨化蛋白1（MCP-1）的表達水平的效果，結果顯示連翹包含有抑制與促進分泌RANTES和MCP-1兩方面的作用。

5 連翹水煮醇沉物質

劉穎娟等[13]將中藥連翹水煮醇沉后，提取得到17種成分，加入不同的有機溶劑，經(jīng)初步篩選后選擇6、7、8、9號部位的有效成分，將4個有效成分粉劑用二甲基亞砜溶解，制成濃度為 45、50、40、50 μg/ml的 4 種溶液，對其抗單純皰疹病毒的作用進行研究。4個不同部位有效成分抗病毒效果的評價是通過比較連翹4個不同部位有效成分的ED50、TD50、治療指數(shù)（TI＝TD50/ED50藥物的安全范圍 ED95-TD5）來評價它們的抗病毒效果。結果認為，中藥連翹的4個不同部位的有效成分均能抑制單純皰疹病毒在Hep-2細胞中的復制，且抑制率隨藥物濃度的增加而增強，藥物劑量和CPE（細胞病變效應）抑制率存在正相關性。

6 中藥復方

銀翹藥對由金銀花和連翹兩味藥組成，金銀花和連翹1∶1醇提所得物可降低血凝效價，有效抑制甲型流感病毒FM1株，其抑制作用可從1 h持續(xù)到24 h，對病毒的抑制作用隨著藥物濃度的降低而減弱；在400、200、100 mg/ml時，對感染流感病毒雞胚具有預防和治療作用[14]。銀翹藥對有抑制呼吸道合胞病毒的作用，且藥對的含藥血清對細胞的保護作用要遠強于兩個單味藥的含藥血清[15]。盛玲燕等[16]采用中藥主方為貫眾30 g、百花蛇舌草 30 g、連翹 l0 g、黃芪 10 g、板蘭根 30 g、金銀花 10 g、黃芩 10 g、黨參 20 g、荊芥 6 g、薄荷 6 g、當歸 15 g、生甘草3 g治療單純皰疹病毒，取得了一定的療效。甄玉珍[17]采用大青連翹湯治療帶狀皰疹23例，效果滿意。彭文等[18]使用四季抗病毒合劑（魚腥草、桔梗、桑葉、連翹、荊芥、紫蘇葉、苦杏仁等）佐治小兒肺炎20例，結果治療組總有效率為95%，對照組總有效率為83.3%，兩組比較，治療組在縮短發(fā)熱時間、緩解咳嗽、氣促癥狀、改善肺部體征方面與對照組有顯著性差異。

7 小結

連翹提取物主要是用連翹的水提物、醇提物、揮發(fā)油等，主要成分是苯乙醇苷類、黃酮類及木脂素類?？共《緦嶒炛饕轻槍粑到y(tǒng)的病毒如合胞病毒（RSV）、腺病毒7型（Ad7）、柯薩奇 B 組病毒 3 型（CB3）、流感病毒甲 3 亞型（Fa3）、副流感病毒Ⅲ型（PF3）、?？虏《镜纫约皢渭儼捳畈《尽Ｒ虼?，把連翹開發(fā)成呼吸系統(tǒng)抗病毒新藥，具有廣泛的理論基礎與應用前景。

[1]謝宗萬.古今藥用品種的延續(xù)與變遷[J].中醫(yī)藥研究,1992,(3):37.

[2]趙文華,石任兵,劉斌,等.連翹病毒清膠囊抗病毒有效部位化學成分的研究[J].北京中醫(yī)藥大學學報,2005,27(4):449-453.

[3]石鉞,石任兵,劉斌,等.銀翹散抗流感病毒有效部位群化學成分的分離與鑒定[J].中國中藥雜志,2003,28(1):42-47.

[4]王棟,胡克杰,徐凱建,等.連翹酯甙體外抗病毒作用的實驗研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2001,8(2):89.

[5]馬振亞.連翹種子揮發(fā)油抗流感病毒等病原微生物作用的實驗研究[J].陜西新醫(yī)藥,1980,9(11):51.

[6]張欣,任中原.中草藥連翹、白芍水煎劑的抗病毒作用研究[J].天津醫(yī)學院學報,1990,14(1):35-38.

[7]董杰德,陳晨華,于修平,等.四種中草藥抗柯薩奇及?？虏《镜膶嶒炑芯縖J].山東中醫(yī)學院學報,1993,17(4):46-48.

[8]于起福,孫非.四種中草藥水煎劑抗柯薩奇B5病毒的細胞學實驗研究[J].吉林中醫(yī)藥,1995,(1):35.

[9]張諱,張漢明,郭美麗.連翹的藥理學研究[J].中國現(xiàn)代應用藥學雜志,2000,17(1):7-10.

[10]田文靜,李洪源,姚振江,等.連翹抑制呼吸道合胞病毒作用的實驗研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學學報,2004,38(5):421-423.

[11]Shuang-Cheng Ma,Jiang Du,Paul Pui-Hay But,et al.Antiviral Chinese medicinal herbs against respiratory syncytial virus[J].Journal of Ethnopharmacology,2002,(79):205-211.

[12]Han-Chieh Ko,Bai-Luh Wei,Wen-Fei Chiou.The effect of medicinal plants used in Chinese folk medicine on rantrs secretion by virus-infectedhumanepithelial cells[J].Journal ofEthnopharmacology,2006,(107):205-210.

[13]劉穎娟,揚占秋,肖紅,等.中藥連翹有效成分體外抗單純皰疹病毒的實驗研究[J].湖北中醫(yī)學院學報,2004,6(3):36-38.

[14]潘翌翌,王雪峰,岳志軍,等.金銀花、連翹配伍提取物體外抗甲型流感病毒FM1株的實驗研究[J].甘肅中醫(yī)學院學報,2007,24(2):528.

[15]莫紅纓,賴克方,江永南,等.雙黃連及其拆方抗呼吸道合胞病毒作用的藥效學研究[J].中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志,2005,11(3):194-196.

[16]盛玲燕,劉家泉.中藥治療單純皰疹病毒感染分析黑龍江醫(yī)藥,2008,21(4):103-104.

[17]甄玉珍.大青連翹湯治療帶狀皰疹23例[J].山東中醫(yī)雜志,2008,27(l2):824.

[18]彭文,陳竹,袁戈,等.四季抗病毒合劑佐治小兒肺炎20例[J],陜西中醫(yī),2008,29(7):813.