癢病的防治措施與朊病毒

韓天龍，王 敏，紅 敏，薩其仍貴，查干其其格，黃國成

（赤峰市農(nóng)牧科學(xué)研究院，內(nèi)蒙古赤峰 024031）

美國科學(xué)家Stanley B.Prusiner對朊病毒的發(fā)現(xiàn)，及其對朊病毒致病機理的研究方面做出的開拓性貢獻使他榮獲了1997年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎[1]。朊病毒作為一種新型的蛋白侵染因子，沒有DNA或RNA，其本質(zhì)是具有傳染性的蛋白質(zhì)，由宿主染色體基因編碼[1-2]?？梢砸鹑祟惡蛣游锏闹袠猩窠?jīng)系統(tǒng)發(fā)生退行性病變，從而產(chǎn)生癡呆、共濟失調(diào)、震顫和瘙癢等癥狀[1-3]。例如人類的克-雅氏病（Creutzfeldt-Jakob Disease，CJD）、庫魯?。↘uru Disease）、格斯特曼綜合癥（Gerstmann Dyndrome，GSS）及致死性家族性失眠癥（Fatal Familial Insomnia，F(xiàn)FI）， 動 物 的 綿 羊 癢 病（Scrapie）、瘋牛病（Bovine Spongiform Encephalopathy，BSE）、麋鹿慢性消耗性疾 病 （Chronic Wasting Disease，CWD），貓海綿狀腦?。‵eline Spongiform Encephalopathy，F(xiàn)SE） 以及傳染性雪貂白質(zhì)腦?。═ransmissible Mink Encephalopathy，TME）等。朊病毒病因其相似的臨床特性和神經(jīng)元細胞病理變化，被統(tǒng)稱為傳染性海綿狀腦?。═ransmissible Spongiform Encephalopathy，TSE）。其中綿羊癢病是最早的一種朊病毒病，早在18世紀(jì)已經(jīng)在冰島發(fā)現(xiàn)，并被重視[1，4]。

1 朊病毒

1.1 病毒特性

朊病毒（Prion）又稱朊蛋白（Prion Protein，PrP）是由蛋白酶K抗性蛋白組成的多聚體，分子量為27×103~30×103，故稱 PrP 27~30，屬于疏水性糖蛋白[2，4]。PrP 存在兩種構(gòu)型，即細胞型朊蛋白（PrP-cellular，PrPc）和癢病型朊蛋白（PrP-scrapie，PrPsc），二者氨基酸組成一致，區(qū)別在于構(gòu)象的改變[1，4]。PrPc是人及動物的腦組織中神經(jīng)細胞的正常組成成分，其功能尚不清楚，但這種構(gòu)象時對機體無害[1]。PrPc轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPsc時，即有致病性和感染性[2]。然而這種轉(zhuǎn)變發(fā)生的頻率非常低[3]。

1.2 感染途徑

朊病毒存在變異和跨種族感染，具有大量的潛在感染來源，主要為牛、羊等反芻動物，未知的潛在宿主可能很廣，傳播的潛在危險性不明，很難預(yù)測和推斷[1，5]。朊病毒可通過食源性（如動物食用肉骨粉飼料）和醫(yī)源性（如使用激素、硬腦膜移植、輸血等）等多途徑感染，并可感染多個器官[4，6]。

1.3 致病機理

PrPsc凝聚成電鏡下可見的癢病相關(guān)纖維（SAF），SAF在腦組織內(nèi)形成神經(jīng)元空斑（PrP斑），導(dǎo)致海綿狀損傷及神經(jīng)元功能喪失[5]。病毒大量存在于受感染者的腦、脊髓、脾、淋巴結(jié)和胎盤中；使生物體產(chǎn)生認知和運動功能的嚴(yán)重衰退直至死亡[1，6]。

2 癢病概述

農(nóng)業(yè)部于2008年12月11日發(fā)布的我國一類動物疫病共17種，有5種屬于羊病范疇，其中就有癢?。⊿crapie）。癢病又稱慢性傳染性腦炎（Chronic Infectious Encephalitis）、震顫病、搖擺病、驢跑病、瘙癢病、摩擦病，是由朊病毒侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)引起的綿羊和山羊的慢性致死性疫病。以潛伏期長、劇癢、共濟失調(diào)、不發(fā)熱、病程長和高致死率為主要臨床特征[5-6]。本病主要發(fā)生于綿羊，山羊較少發(fā)病，人可因接觸病羊或食用感染癢病因子的肉品而感染本病[6]。

2.1 流行病學(xué)特點

各品種、性別的羊均可發(fā)生本病。主要感染2～5歲的綿羊，18月齡以下的幼羊很少表現(xiàn)臨床癥狀。因首先可在病羊消化道淋巴組織中查到病原，因此消化道可能是自然感染門戶。本病可經(jīng)口腔、黏膜等水平傳播，也可經(jīng)子宮垂直傳播給胎兒。通常呈散發(fā)流行，只有少數(shù)羊發(fā)病，傳播緩慢；發(fā)病率可達5%～20%或更高，死亡率幾乎達100%[6-7]。

2.2 臨床癥狀

本病潛伏期長，一般為2～5年或以上，因此1歲以下的羊極少出現(xiàn)臨床癥狀，潛伏期長短受宿主遺傳特性和病原株系等許多因素影響。本病發(fā)作十分隱匿，起初在行為上表現(xiàn)一些細微變化，如易驚、輕恐、頭頸抬起、斜視或凝視、行走時步態(tài)高舉、大膽圍在人的周圍、頭頸或腹肋部肌肉發(fā)生頻細震顫等；發(fā)展期表現(xiàn)共濟失調(diào)、走路笨拙、步態(tài)不穩(wěn)、步幅大、耳下垂等；而后病羊出現(xiàn)瘙癢，瘙癢部位大多在頭頸部、頸脊部、腹部、臀部、尾根部等，常兩側(cè)對稱。病羊?？幸А⒌盘咦陨戆l(fā)癢部位，或在堅實固定的物體上摩擦皮膚，造成大面積掉毛和皮膚損傷，甚至破潰出血。用手抓搔其腰背部，常發(fā)生伸頸、搖頭、縮唇、舔舌等反射。病羊體溫正常，采食量正常，但日漸消瘦；有時大小便失禁。病羊常不能跳躍，遇溝坡、土堆、門檻時，反復(fù)跌倒。病程持續(xù)幾周或數(shù)月，常死亡[6]。

2.3 病理變化

病死羊只剖解后觀察，內(nèi)臟器官常無明顯可見異常，主要是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的顯微變化。腦干灰質(zhì)中，神經(jīng)節(jié)元的樹突和軸突內(nèi)形成大空泡，空泡數(shù)增多；神經(jīng)元變性和消失，大空泡在腦干和延腦中尤為多見，星狀膠質(zhì)細胞增生，微小膠質(zhì)細胞的形成以及致病型蛋白積累，出現(xiàn)淀粉樣斑。最終導(dǎo)致灰質(zhì)海綿狀變性；包括腦干和脊髓神經(jīng)元兩側(cè)對稱性空泡變性。無免疫反應(yīng)[2，6]。

2.4 診斷要點

根據(jù)臨床癥狀特征和羊群的病史可作初步診斷，確診需結(jié)合腦和脊髓的組織學(xué)檢查，以及更進一步的實驗室診斷方法。

由于朊病毒不含核酸，用常規(guī)的PCR技術(shù)還無法檢測出來。在電鏡下檢測SAF的存在是診斷癢病的標(biāo)準(zhǔn)之一，但若沒有檢測出SAF，也不意味著動物未被癢病感染，需做進一步診斷。對腦組織各部以及脊髓進行組織切片，在腦髓、腦橋、中腦和丘腦中可見明顯病變。用PrP抗體對腦組織各部作免疫組化染色觀察，或用腦組織抽提液或腦脊液作免疫轉(zhuǎn)印均可確診。對生前樣本或在癥狀出現(xiàn)之前，尚無成熟的檢測方法。

3 癢病的綜合防治措施

本病作為人獸共患疾病，它的流行不僅給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失，同時也給人類健康帶來嚴(yán)重威脅。但因其病原的特殊性質(zhì)，以及科技水平有限，目前尚無有效的疫苗和藥物治療本病，亦無徹底消滅本病的具體措施。只能通過科學(xué)管理，及時采取有效措施預(yù)防本病的發(fā)生和控制本病的流行。

3.1 加強飼養(yǎng)管理，提高綿羊自身抗病能力

根據(jù)當(dāng)?shù)卣嚓P(guān)政策制定合理的飼養(yǎng)管理規(guī)范，實行標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)模式。配制全價營養(yǎng)飼料，并保證飼料優(yōu)質(zhì)、飲水清潔；合理搭配飼草料，飼料更換過程要逐漸完成，禁止喂食霉變及劣質(zhì)飼料。勤檢查圈舍是否損壞，及時維修，以便防雨及防寒。換季降溫，應(yīng)加厚墊草，及時補飼，并做好保暖通風(fēng)工作。盡量減少應(yīng)激，搞好衛(wèi)生防疫工作等，從而減少其它疾病的發(fā)生和本病的繼發(fā)感染。

3.2 改善環(huán)境衛(wèi)生，保持圈舍清潔

羊群居性強，喜干燥；因此應(yīng)經(jīng)常保持羊舍寬敞通風(fēng)、干燥潔凈；積極改善羊舍及其活動場所的環(huán)境衛(wèi)生條件，使羊群能夠健康充滿活力地發(fā)展壯大。尤其夏季高溫多濕，羊放牧歸來后，活動范圍變小，容易造成圈舍的潮濕和環(huán)境不良，往往會引起疾病的發(fā)生，因此更要注意羊舍的環(huán)境衛(wèi)生，注意通風(fēng)和防潮，保持羊舍清潔干爽，飼喂用具也要經(jīng)常保持干凈。

3.3 做好藥浴和驅(qū)蟲工作

蜱螨的活動可以給本病的傳播創(chuàng)造有利條件，因此預(yù)防本病的主要措施之一就是滅蜱除螨。在蜱螨活躍季節(jié)，對羊群進行藥浴，并對圈舍進行噴霧殺蟲；或每年的5—6月份剪毛后，于天氣溫暖的上午對羊群實施藥浴，會取得滿意效果。另外每年春秋兩次定期驅(qū)蟲，也可有效防止本病的傳播。

3.4 對圈舍進行定期消毒

癢病病毒是一種弱抗原物質(zhì)，不能引起免疫應(yīng)答，無誘生干擾素性能，也不受干擾素影響。因其本質(zhì)是蛋白質(zhì)顆粒，不含核酸，所以許多足以殺滅病毒及其他微生物的化學(xué)藥物（核酸滅活劑等）或環(huán)境及物理因素（紫外線、γ射線等）對PrPsc無效，本病毒對福爾馬林和高熱亦有較強的耐受性[6]。但其感染性可因一些酶如蛋白酶K、胰酶等的溶解而減弱；一些使蛋白質(zhì)變性的制劑均可降低其傳染性。因此，利用特定方法定期消毒亦可在一定程度上預(yù)防本病的發(fā)生。常用的消毒方法有：焚燒、5%NaOH溶液作用1 h、5%NaClO溶液作用2h、于3%十二烷基磺酸鈉溶液中煮沸10min等[7]。碘酊、90%苯酚、6mol/L尿素等對該病毒也有很強的滅活作用。

3.5 加強檢疫檢驗工作，阻止病原流通

嚴(yán)禁從存在本病的國家或地區(qū)引進種羊、羊的精液、胚胎、羊肉、羊奶以及相關(guān)動物性產(chǎn)品。加強對屠宰場和市場肉類的檢驗，檢出的病羊產(chǎn)品必須銷毀，更不得食用。禁止給羊群飼喂反芻動物蛋白質(zhì)飼料。一旦發(fā)現(xiàn)病羊或疑似病羊，應(yīng)迅速做出確診，并立即撲殺全群，實施深埋或焚燒銷毀等無害化處理。禁止用病羊肉尸加工飼料或喂狗、貓等動物。

因本病的潛伏期過長及羊群的流動性太大，許多消滅該病的計劃都難以執(zhí)行。冰島曾采取徹底銷毀患病羊群，使牧場空置數(shù)年，而后引進健康無病羊只，重建健康羊群。此方法雖好，但其他各國難以實施。目前可效仿美國采取“確認健康羊群”計劃，即經(jīng)鑒定的健康羊群允許流動，否則不行，以此措施控制本病的流行[5]。

[1]Prusiner，S B.Prion disease and the BSE crifis[J].Science，1997，278:245-251.

[2]Supattapone S，Bosque P，Muramoto T，et al.Prion protein of 106 residues creates an artificial transmission barrier for prion replication in transgenic mice[J].Cell，1999，96:869-878.

[3]Liu H，F(xiàn)arr-Jones S，Ulyanov N B，et al.Solution structure of Syrian hamster prion protein rPrP（90-231）[J].Biochemistry，1999，38:5362-5377.

[4]賈小明，許于飛.朊病毒研究進展[J].畜牧與獸醫(yī)，2002，34（9）:40-42.

[5]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[M].3版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2001:574-579.

[6]Pugh D G.綿羊和山羊疾病學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2004:224-238.

[7]王建辰，曹光榮.羊病學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2002:131-133.