落新婦苷固體分散體的制備及理化鑒別

何 燕， 聶金媛， 徐孟文， 梁敏儀， 賴小平

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州510006;2.廣州醫(yī)藥工業(yè)研究院，廣東廣州510240)

落新婦苷(astilbin)是一種從傳統(tǒng)中藥土茯苓(Rhizoma Smilacis Glabrae)中提取的二氫黃酮類化合物，為土茯苓的有效成分之一［1］。具有抑制輔酶A還原酶，抑制醛糖還原酶，保護(hù)肝臟，鎮(zhèn)痛，抗水腫［2］等多種生物學(xué)活性，并且具有選擇性免疫抑制作用［3］?？梢宰鳛橐环N新的免疫抑制劑用于免疫相關(guān)疾病的治療。但落新婦苷為水難溶性藥物(溶解度為0.1 mg/mL，幾乎不溶或不溶)，不易被機(jī)體吸收，在臨床應(yīng)用上受到了一定限制。固體分散體技術(shù)是近年來(lái)藥劑學(xué)研究中的熱點(diǎn)，不僅可以改善難溶性藥物的溶出、提高藥物的生物利用度，還改善物料性質(zhì)和增加藥物的穩(wěn)定性［4-5］。本實(shí)驗(yàn)制備了落新婦苷固體分散體，并對(duì)其進(jìn)行物相鑒別［6］。

1 材料與儀器

差示掃描量熱儀(DSC 204，德國(guó)NETZSCH公司)，X射線衍射儀(D/max-3A，德國(guó)NETZSCH公司)，智能溶出試驗(yàn)儀(ZRS-4，天津無(wú)線電廠)，雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(UV-1901，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，圖像分析系統(tǒng)(BX41電子顯微鏡，日本Olympus公司;DP71采集頭，日本Olympus公司;IPP圖像采集分析軟件，Media Cybernetics公司)。

落新婦苷(自制，含量＞98%);聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30(ISP公司)，吐溫80(化學(xué)純，廣州化學(xué)試劑廠 )，正辛醇(分析純，廣州化學(xué)試劑廠)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 固體分散體的制備 采用溶劑法，按質(zhì)量比1∶1.5∶3精確稱量落新婦苷和吐溫80、PVPK30。先將落新婦苷和吐溫80混合后，加入95%乙醇溶解，再與PVPK30乙醇溶液混合均勻，置于蒸發(fā)皿中，加熱揮干溶劑，析出物于真空干燥器中干燥24 h，取出，研磨，過(guò)60目篩，制得落新婦苷與PVPK30固體分散體，置干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 溶解度實(shí)驗(yàn) 取自制固體分散體適量于玻璃小瓶中，分別加入水，使之呈過(guò)飽和狀態(tài)。溫度保持(25±1)℃，攪拌約24 h使達(dá)溶解平衡，將飽和溶液用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液進(jìn)行UV法測(cè)定，計(jì)算固體分散體中落新婦苷在水中的平衡溶解度。

2.3 表觀油/水分配系數(shù)的測(cè)定 采用正辛醇-水經(jīng)典搖瓶法來(lái)測(cè)定落新婦苷及落新婦苷固體分散體的表觀油水分配系數(shù)。取pH 2.2、4.5、6.8、7.4緩沖溶液5 mL與落新婦苷正辛醇貯備溶液5 mL混合，置于錐形瓶中。在(25±1)℃，150 r/min恒溫振蕩24 h，離心分離兩相。取油相，當(dāng)稀釋2倍后，用紫外分光度法測(cè)定，計(jì)算的Cw。

2.4 溶出度試驗(yàn) 按《中國(guó)藥典》2005年版相關(guān)規(guī)定，采用溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典2005版二部附錄XD小杯法)。取適量SD樣品，置小杯中，釋放介質(zhì)為蒸餾水，體積為100 mL，轉(zhuǎn)速(100±2)r/min，水浴溫度(37 ±1)℃，分別于15、30、45、60、90、120 min取樣2 mL，過(guò)0.22 μm微孔濾膜，同時(shí)補(bǔ)充等體積同溫新鮮介質(zhì)，取續(xù)濾液UV法測(cè)定落新婦苷的含量，計(jì)算累積溶出率。

2.5 固體分散體的物相鑒別

2.5.1 顯微鏡法 將原藥粉末和落新婦苷固體分散體用甘油分散于載玻片上，蓋上蓋玻片后，置于顯微鏡下觀察。

2.5.2 X-射線衍射 取落新婦苷、吐溫 80-PVPk30、物理混合物、固體分散體，進(jìn)行X-射線衍射分析。工作條件:銅靶 Kα1，電壓35 kV;電流 25 mA;發(fā)散、散射和接受狹縫分別為 1°、1°、0.3 mm;2θ范圍:3°～60°;檢測(cè)依據(jù):轉(zhuǎn)靶多晶體 X-射線衍射方法通則JY/T009-1996。

2.5.3 差示掃描量熱法(DSC) 取落新婦苷、吐溫80-PVPk30、物理混合物、固體分散體，進(jìn)行DSC分析。工作條件:氣氛為N2，20 mL/min;掃描程序，從室溫以10℃/min升溫至23℃，記錄升溫曲線。

3 結(jié)果與討論

3.1 溶解度實(shí)驗(yàn) 落新婦苷和固體分散體中落新婦苷的溶解度分別為0.198 mg/mL、6.28 mg/mL。結(jié)果顯示固體分散體中落新婦苷的溶解度有顯著提高。

3.2 表觀油/水分配系數(shù)的測(cè)定 見(jiàn)圖1，可知固體分散體的油/水分配系數(shù)與落新婦苷相比有顯著性差異，說(shuō)明將落新婦苷制備成固體分散體后，即提高了藥物的溶解度和溶出速度，同時(shí)又提高了藥物分子的親脂性，提示將落新婦苷制備成固體分散體可以促進(jìn)藥物的體內(nèi)吸收。

圖1 落新婦苷及落新婦苷固體分散體在不同pH溶液的表觀油水分配系數(shù)圖

3.3 溶出度試驗(yàn) 見(jiàn)圖2，結(jié)果顯示落新婦苷原藥1 h時(shí)累積溶出仍不到45%，而落新婦苷固體分散體1 h時(shí)的累積溶出可達(dá)86%，表明落新婦苷固體分散體的溶出速率比原藥有顯著性提高。

圖2 固體分散體的累積溶出曲線圖

3.4 固體分散體的物相鑒別

3.4.1 顯微鏡法 結(jié)果顯示原藥材呈方狀晶體，而固體分散體中的落新婦苷以微晶態(tài)存在，雙折射現(xiàn)象較弱，見(jiàn)圖3～4。

圖3 落新婦苷顯微鏡圖像(×400)

圖4 固體分散體顯微鏡圖像(×400)

3.4.2 X-射線衍射 結(jié)果見(jiàn)圖5～8，可見(jiàn)落新婦苷在7°～44°之間有多個(gè)強(qiáng)的結(jié)晶衍射峰，吐溫80-PVPk30在11°和20°處有2個(gè)強(qiáng)的衍射峰;物理混合物的譜線中落新婦苷和吐溫80-PVPk30的各特征峰均一定程度上減弱;而在固體分散體譜線中，落新婦苷在7°～22°之間特征峰明顯減弱或部分消失，在23°～44°之間特征峰明顯消失，說(shuō)明落新婦苷在吐溫80-PVPk30固體分散體中部分以分子狀態(tài)分散，部分以微晶狀態(tài)分散。

圖5 落新婦苷的X-射線衍射圖

圖6 Tween 80-PVPk30的X-射線衍射圖

圖7 物理混合物的X-射線衍射圖

圖8 固體分散體的X-射線衍射圖

圖9 落新婦苷DSC曲線圖

3.4.3 差示掃描量熱法(DSC)DSC曲線圖結(jié)果見(jiàn)圖9～12。可知吐溫80-PVPk30的DSC曲線顯示在62.3℃有一個(gè)吸熱峰，落新婦苷有2處特征吸熱峰(119.0℃，179.3℃)，物理混合物有2處特征吸熱峰(68.5℃，168.4℃)，固體分散體有三處特征吸熱峰(68.9℃，153.6℃，186.9℃)。固體分散體的DSC曲線圖中顯示，藥物原來(lái)的吸熱峰已經(jīng)完全消失，但在附近均有較弱的吸熱峰生成，說(shuō)明落新婦苷在吐溫80-PVPk30固體分散體中藥物結(jié)晶減少。

圖10 吐溫80-PVPk30DSC曲線圖

圖11 物理混合物DSC曲線圖

圖12 固體分散體DSC曲線圖

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