氣相色譜法同時測定活絡酊中樟腦、薄荷腦的含量

王天亮， 諸葛俊

(浙江天一堂藥業(yè)有限公司浙江金華321100)

活絡酊由生川烏、防己、延胡索、樟腦、薄荷腦、水楊酸甲酯、冰片等十二味組成，具有舒筋祛寒，活血止痛功效，用于筋骨痛，急性扭傷，肌肉疼痛及風濕痛，肝區(qū)疼痛等癥。原標準［1］只對其進行了定性鑒別，未制訂含量測定項目?，F(xiàn)對活絡酊中樟腦、薄荷腦的含量測定進行研究，參照文獻［2-7］建立了氣相色譜儀測定樟腦、薄荷腦含量的方法，為該制劑的質量控制提供參考。具體方法學內容如下:

1 儀器與試藥

HP6890氣相色譜儀。樟腦、薄荷腦對照品，由中國藥品生物制品檢定所提供(供含量測定用，批號分別為:747-20005、0728-9304)。正十四烷，由Fluck公司提供。活絡酊由本公司制備(批號為:20081203、20081204、20081205、20081206)。試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適應性

色譜條件:聚合/交聯(lián)聚乙二醇毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，氫火焰檢測器。程序升溫:初始90℃，每分鐘7℃升至200℃，保持5 min;載氣流速:1.5 mL/min;分流進樣，分流比:5∶1;以正十四烷為內標。在此色譜條件下樟腦、薄荷腦與相鄰色譜峰均能基線分離，同時樣品溶液與陰性對照液相比，陰性對照溶液無干擾，結果見圖1～6。

圖1 正十四烷色譜圖

圖2 樟腦對照品色譜圖

圖3 薄荷腦對照品色譜圖

圖4 活絡酊供試品色譜圖(加內標)

圖5 缺樟腦陰性樣品色譜圖

圖6 缺薄荷腦陰性樣品色譜圖

2.2 內標溶液、對照品溶液與供試品溶液制備

內標溶液的制備 取正十四烷適量，精密稱定，加無水乙醇溶解并稀釋成每1 mL含4 mg的溶液，即得。

對照品溶液的制備 取樟腦、薄荷腦對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1 mL分別含2.9 mg、2.2 mg的混合溶液，即得。

供試品溶液制備 精密量取樣品1 mL，置25 mL量瓶中，精密加入內標溶液2 mL，搖勻，即得。

2.3 線性關系考察

分別精密量取樟腦、薄荷腦混合對照品溶液1、2、5、7、10 mL置25 mL量瓶中，各精密加入正十四烷內標溶液2 mL，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。分別取2 μL注入氣相色譜儀，以對照品與內標濃度的比值為橫坐標，對照品與內標峰面積的比值為縱坐標，得樟腦對照品線性回歸方程:Y=0.822 9X，r=1.000 0，薄荷腦對照品線性回歸方程:Y=0.862 5X+0.000 2，r=1.000 0，顯示樟腦進樣量在207～2 066 ng范圍內，薄荷腦進樣量在149～1 486 ng范圍內，有良好的線性關系。

2.4 精密度試驗

取供試品溶液，按2.1項所述色譜條件，重復進樣6次，測定樟腦、薄荷腦的峰面積，計算樟腦、薄荷腦內標峰面積的比值，結果RSD均為0.1%(n=6)，見表1。

2.5 穩(wěn)定性試驗

取供試品與對照品溶液，按2.1項所述色譜條件，間隔一定時間進樣一針，測定樟腦、薄荷腦的峰面積，計算樟腦、薄荷腦與內標峰面積的比值，顯示對照品溶液與供試品溶液穩(wěn)定，結果見表2。

2.6 重復性試驗

分別精密量取同一批號樣品(20081203)6份，制成供試品溶液，測定峰面積并計算樟腦、薄荷腦含量，結果樟腦的平均含量為14.28 mg/mL，RSD=0.3%(n=6);薄荷腦的平均含量為 11.02 mg/mL，RSD=0.5%(n=6)，見表 3。

表1 樟腦、薄荷腦精密度試驗結果

表2 樟腦、薄荷腦穩(wěn)定性試驗結果

表3 樟腦、薄荷腦重復性試驗結果

2.7 回收率試驗

精密量取已知含量樣品(20081203)6份，精密加入樟腦、薄荷腦對照品適量，制成供試品溶液，測得峰面積并計算含量，結果顯示樟腦平均回收率為102.1%，RSD=0.7%(n=6)，薄荷腦平均回收率為103.0%，RSD=0.6%(n=6)見表 4、5。

表4 樟腦回收率試驗結果

表5 薄荷腦回收率試驗結果

2.8 樣品測定與限度制定

測定樣品3批，結果見表6，根據(jù)測定結果折算出每1 mL的含量(見表6)，限度暫訂為每1 mL含樟腦(C10H16O)不得少于11.2 mg，薄荷腦(C10H20O)不得少于8.4 mg。

表6 樟腦、薄荷腦樣品測定結果(n=2)