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    康萊特注射液與光動力療法聯(lián)合治療大鼠胰腺移植瘤

    2009-11-28 07:32:24劉艷虹賈林潘錦瑤羅維國
    中華胰腺病雜志 2009年2期
    關(guān)鍵詞:抑瘤率康萊特胰腺癌

    劉艷虹 賈林 潘錦瑤 羅維國

    康萊特注射液與光動力療法聯(lián)合治療大鼠胰腺移植瘤

    劉艷虹 賈林 潘錦瑤 羅維國

    目的探討康萊特注射液與光動力療法(PDT)聯(lián)合應(yīng)用對裸鼠胰腺癌移植瘤生長的抑制作用。方法將人胰腺癌細(xì)胞株SW1990移植至裸鼠皮下制備皮下移植瘤模型。60只荷瘤鼠按隨機(jī)數(shù)字法分為6組:對照組,不予任何治療;康萊特1組,激光照射前一天開始從尾靜脈注射康萊特注射液1.25 g/kg體重,連續(xù)10 d;康萊特2組,同上法注射康萊特注射液2.5 g/kg體重;光動力(PDT)組,腹腔內(nèi)注射Photosan 2 mg/kg體重,48 h后予激光照射;聯(lián)合1組,治療方法采用康萊特1組+ PDT組;聯(lián)合2組,治療方法為康萊特2組+PDT組。每組10只。每周2次測量腫瘤大小。PDT后14 d處死動物,取瘤塊稱重,計算抑瘤率。結(jié)果對照組、康萊特1組、康萊特2組、PDT組、聯(lián)合1組和聯(lián)合2組治療后14 d的瘤體積分別為(550.08±52.46)mm3、(519.71±46.44)mm3、(405.29±38.67)mm3、(199.27±37.37)mm3、(107.47±14.13)mm3和(75.58±12.53)mm3;瘤重分別為(0.82±0.08)g、(0.77±0.06)g、(0.61±0.06)g、(0.41±0.05)g、(0.28±0.04)g和(0.16±0.04)g。2個聯(lián)合組的腫瘤體積和瘤重明顯小于其他各組(Plt;0.05);聯(lián)合1組抑瘤率從PDT組的50%上升到65.9%,聯(lián)合2組上升到80.5%。結(jié)論康萊特與PDT聯(lián)合應(yīng)用可明顯抑制移植瘤體積,有協(xié)同增效作用。

    胰腺腫瘤; 光化學(xué)療法; 康萊特注射液

    我們以往的研究結(jié)果顯示,單用光動力療法(photodynamic therapy, PDT)治療胰腺癌的作用有限,聯(lián)合化療既可增強(qiáng)PDT的腫瘤殺傷作用,還可以抑制轉(zhuǎn)移灶的生長,有望成為一種有前景的抗腫瘤療法[1-2]??等R特注射液為中藥薏苡仁中提取的天然抗癌活性物質(zhì),是我國自行研發(fā)的中藥二類抗腫瘤新藥,近年來廣泛用于肝癌、乳腺癌、大腸癌等腫瘤的臨床治療。迄今尚未見中藥與PDT聯(lián)合治療胰腺癌的研究報道。本實驗比較康萊特和PDT單用及聯(lián)合應(yīng)用對裸鼠皮下胰腺癌移植瘤生長的影響,旨在探討康萊特與PDT治療胰腺癌是否有協(xié)同增效作用。

    材料和方法

    一、實驗動物、細(xì)胞株和藥物

    選用5~6周的BALB/c nu/nu雄性裸鼠,體重約17~19 g,SPF級,由中山大學(xué)動物實驗中心提供和飼養(yǎng)。高轉(zhuǎn)移人胰腺癌細(xì)胞株SW1990從美國引進(jìn);光敏劑Photosan(光療素)和PDT 630半導(dǎo)體激光機(jī)由德國 Diolitec 藥廠生產(chǎn),愛斯康(亞洲)有限公司惠贈;康萊特由浙江康萊特藥業(yè)有限公司提供。

    二、模型制備及分組治療

    胰腺癌皮下移植瘤模型的制備方法見文獻(xiàn)[1]和[2]。制模后按隨機(jī)數(shù)字法分為6組,每組10只。對照組,不予任何治療;康萊特1組,激光照射前一天開始從尾靜脈注射康萊特注射液1.25 g/kg體重,連續(xù)10 d;康萊特2組,同上法注射康萊特注射液2.5 g/kg體重;光動力(PDT)組,腹腔內(nèi)注射Photosan 2 mg/kg體重,48 h后予激光照射;聯(lián)合1組,治療方法采用康萊特1組+ PDT組;聯(lián)合2組,治療方法為康萊特2組+PDT組。采用630 nm、120 J/cm2的激光照射20 min。

    三、觀察指標(biāo)

    激光照射前和照射后3、7、10、14 d測量腫瘤大小。照射后14 d頸椎脫位術(shù)處死裸鼠,取出瘤體稱重。計算瘤體體積(V),V=3/4·π·(b/2)2·a/2,式中a和 b分別代表腫瘤的長徑和與之垂直的短徑。分析抑瘤率,抑瘤率=[1-(治療組平均瘤重/對照組平均瘤重)] ×100%。

    四、統(tǒng)計學(xué)分析

    結(jié) 果

    一、胰腺癌移植瘤體積的變化

    對照組與康萊特1組各時段移植瘤體積相比,無統(tǒng)計學(xué)差異(Pgt;0.05);與對照組和康萊特1組比較,康萊特2組在治療后10 d起,腫瘤體積縮小,有統(tǒng)計學(xué)差異(Plt;0.05),但裸鼠尾靜脈炎比較嚴(yán)重,發(fā)生率為100%;PDT組在激光照射后,瘤體表面出現(xiàn)不同程度的局部壞死,1周后部分壞死組織脫落、結(jié)痂,壞死邊緣呈火山樣瘤體隆起。治療后7 d開始,PDT組的腫瘤體積顯著低于對照組和康萊特1組(Plt;0.05);聯(lián)合組從治療后3 d開始,瘤體體積明顯縮小,較其他各組有統(tǒng)計學(xué)差異(Plt;0.05)。治療后7 d開始,聯(lián)合2組的移植瘤體積又較聯(lián)合1組明顯縮小(Plt;0.05,表1)。

    表1 各種療法對胰腺癌生長的影響

    注:與對照組和康萊特1組比較,*Plt;0.05;與PDT組比較,#Plt;0.05;與聯(lián)合1組比較,△Plt;0.05

    二、胰腺癌瘤重和抑瘤率的變化

    對照組、康萊特1組、康萊特2組、PDT組、聯(lián)合1組和聯(lián)合2組的瘤重分別為(0.82±0.08)g、(0.77±0.06)g、(0.61±0.06)g、(0.41±0.05)g、(0.28±0.04)g和(0.16±0.04)g;抑瘤率分別為0、6.1%、25.6%、50.0%、65.9%和80.5%。PDT組的瘤重顯著輕于對照組和2個康萊特組(Plt;0.05);聯(lián)合組瘤重又明顯輕于PDT組(Plt;0.05)。聯(lián)合1組使PDT組50%的抑癌率上升到65.9%;聯(lián)合2組使PDT組50%的抑瘤率上升到80.5%。

    討 論

    光動力療法具有毒性低、腫瘤靶向性較好和廣譜抗腫瘤等優(yōu)點,多用于食管癌、膀胱癌等空腔臟器腫瘤的臨床治療。1981年Holyke開創(chuàng)PDT治療胰腺癌以來,有關(guān)學(xué)者進(jìn)行了PDT治療胰腺癌的實驗研究[1-3]。2002年,Bown等[4]將帶激光光纖的針經(jīng)皮插入胰腺癌組織,首次開展PDT治療晚期胰腺癌的I期臨床試驗,結(jié)果顯示PDT治療后絕大多數(shù)腫瘤發(fā)生壞死和縮小,患者中位生存期為9.5個月,44%患者生存時間超過1年,PDT有望成為胰腺癌姑息治療的有效手段。

    鑒于光敏劑在體內(nèi)分布不理想,加上激光照射深度有限以及腫瘤界限不清,單用PDT療效有限,對深部及較大體積的實體瘤也難獲良效。2008年,我們發(fā)現(xiàn)聯(lián)合應(yīng)用小劑量吉西他濱使單純PDT的抑瘤率從58.2%上升到84.4%,顯著強(qiáng)于單用PDT治療,既明顯增強(qiáng)PDT的殺傷效應(yīng),又有助于減少化療藥物劑量和降低不良反應(yīng)[1-2]。

    康萊特注射液是我國自行研發(fā)的中藥抗腫瘤新藥代表,與放、化療結(jié)合治療腫瘤取得了良好療效,主要治療原則是西醫(yī)攻邪,中醫(yī)扶正[5-7]。實驗和臨床研究表明,康萊特能呈時間和濃度依賴性地明顯抑制人胰腺癌細(xì)胞生長[5];與5-FU或健擇聯(lián)合可明顯提高抗實驗性胰腺癌的療效[6-7];此外,康萊特聯(lián)合低劑量順鉑和5-FU治療12例晚期胰腺癌患者,總有效率達(dá)16.7%,臨床受益反應(yīng)率為58.3%[8]。本實驗結(jié)果證實,康萊特確可顯著增強(qiáng)PDT的抗腫瘤作用,且與康萊特劑量呈量-效關(guān)系,為其應(yīng)用胰腺癌的臨床治療提供理論依據(jù)。

    [1] 賈林,劉艷虹.光動力療法對胰腺癌移植瘤的療效及其時-效關(guān)系.中華胰腺病雜志,2008,8:95-99.

    [2] 賈林,劉艷虹.吉西他濱聯(lián)合光動力療法治療人胰腺癌裸鼠移植瘤的研究.中華消化雜志,2008,28:314-317.

    [3] Kirveliene V,Grazeliene G,Dabkeviciene D,et al.Schedule-dependent interaction between Doxorubicin and mTHPC-mediated photodynamic therapy in murine hepatoma in vitro and in vivo.Cancer Chemother Pharmacol,2006,57:65-72.

    [4] Bown SG,Rogowska AZ,Whitelaw DE,et al.Photodynamic therapy for cancer of the pancreas.Gut,2002,50:549-557.

    [5] 鮑英,夏璐,姜華,等.康萊特誘導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞凋亡的實驗研究,上海醫(yī)學(xué),2004,27:421-424.

    [6] 王偉,金建光.康萊特聯(lián)合5-FU治療人胰腺癌PC-3裸鼠皮下移植瘤的實驗研究,西安交通大學(xué)學(xué)報,2005,26:473-476.

    [7] 梁智勇,王文澤,高潔,等.康萊特注射液合并健擇對移植于裸鼠的人胰腺癌的療效初步研究.中華腫瘤防治雜志,2006,13:177-180.

    [8] 李青山,高旭紅,劉蘭芳,等.康萊特注射液聯(lián)合低劑量順鉑和5-氟尿嘧啶治療晚期胰腺癌的臨床觀察.腫瘤,2004,24:184-185.

    2008-12-10)

    (本文編輯:呂芳萍)

    Effectofphotodynamictherapypluskanglaiteontransplantedpancreaticcancer

    LIUYan-hong,JIALin,PANJin-yao,LUOWei-guo.

    DepartmentofChineseMedicine,FirstPeople′sMunicipalHospitalofGuangzhou,Guangzhou510180,China

    JIALin,Email:Email:jialin@medmail.com.cn

    ObjectiveTo investigate the anti-tumor effects of a combination of Kanglaite injection (KI) and photodynamic therapy (PDT) on human pancreatic cancer SW1990 xenograft in nude mice.MethodsThe animal model of human pancreatic cancer was developed by suturing small pieces of SW1990 tumors into the dorsum of nude mice. 60 rats were randomly divided into six groups: group A (control group without treatment), group B (receiving 1.25g/kg KI via the tail vein prior to PDT and continuously for 10 days), group C (receiving 2.5g/kg KI via the tail vein continuously for 10 days), group D (PDT group, 2 mg/kg Photosan 48h prior to laser irradiation), group E (group B + group D), group F (group C+group D) with 10 rats in each group. The tumor sizes were measured twice per week. The mice were sacrificed on the 14th day of PDT treatment. The tumor was took out and weighted and the tumor inhibitory rate was analyzed.ResultsThe tumor volumes of group A to F were 9550.08±52.46)mm3, (519.71±46.44)mm3, (405.29±38.67)mm3, (199.27±37.37)mm3, (107.47±14.13)mm3and (75.58±12.53)mm3, the weight of group A to F were (0.82±0.08)g, (0.77±0.06)g, (0.61±0.06)g, (0.41±0.05)g, (0.28±0.04)g and (0.16±0.04)g, respectively. The tumor volumes and tumor weights of the two combined groups were significantly smaller than those in the other groups (Plt;0.05). The combination group of 1.25 g/kg KI increased the tumor inhibitory rate from 50% in PDT group to 65.9%. The combination group of 2.5 g/kg KI increased the tumor inhibitory rate to 80.5%.ConclusionsKI had attenuated effect on PDT therapy, and the combination of KI and PDT could significantly inhibit the tumor growth.

    Pancreatic neoplasms; Photochemotherapy; Kanglaite injection

    10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2009.02.008

    2006年廣東省中醫(yī)藥管理局課題(1060049)

    510180 廣州,廣州市第一人民醫(yī)院中醫(yī)科(劉艷虹、潘錦瑤、羅維國),消化內(nèi)科(賈林)

    賈林,Email: jialin@medmail.com.cn

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