紅花注射液對阿霉素所致大鼠心肌損傷保護作用

李學(xué)斌　王　凱

[摘要] 目的 觀察紅花注射液對阿霉素誘導(dǎo)大鼠心肌損傷的保護作用和抗氧化作用。方法 選用阿霉素誘導(dǎo)大鼠心肌損傷模型。SD大鼠60只,隨機分為3個組,每組20只,分別為對照組、損傷組、治療組。對照組:實驗第1～9天注射生理鹽水,每天3mL/kg,l次/d。治療組:實驗第1～9天注射紅花注射液,每天2g/kg,1次/d,第4天注射阿霉素,隔天1次,連用3次,用生理鹽水配置成lmg/mL,每次3mg/kg。損傷組:實驗1～9天注射生理鹽水,每天3mL/kg,1次/d。第4天注射阿霉素,以后隔天1次、連用3次,用生理鹽水配置成1mg/mL,每次3mg/kg。實驗結(jié)束測定血清CK,SOD活性及心肌勻漿MDA含量、AST活性,并進行心肌病理檢查。結(jié)果 經(jīng)阿霉素損傷后,血清CK活性及心肌勻漿MDA含量增高,AST活性增高,SOD活性降低,與正常組比較有極顯著性差異(P<0.01); 心肌MDA含量降低,CK及AST活性降低,SOD活性升高,與損傷組比較均有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論 紅花注射液有抗氧化作用和對阿霉素所引起的心臟毒性具有保護作用,為臨床尋找有效的阿霉素所致心肌損傷保護藥物提供良好的客觀依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 阿霉素;心肌損傷;紅花注射液;抗氧化

[中圖分類號] R285.5 [中圖分類號] A[文章編號] 1673-9701(2009)24-45-02

Protective Effect of Honghua Injection on Myocardium Injury Induced by Adriamycin in Rats

LI XuebinWANG Kai

Nanyang Central Hospital of Henan Province,Henan 473000,China

[Abstract] Objective To observe the protective effect and antioxidative effect of Honghua injection(HHI) on the myocardiam injury induced by adriamycin(ADM) in rats. Methods Sixty SD rats(weighing 200～220g) were randomly divided into three groups. In the control group,normal saline was ip injected at a dose of 3mL/kg once a day for 9 days. The injury group was given ip injection of ADM at a dose of 3mg/kg from the 4th day,once every other day for 3 times and normal saline at a dose of 3 mL/kg once a day for 9 days. The therapy group was given ip injection of ADM at a dose of 3mg/kg from the 4th day,once every other day for 3 times and HHI at a dose of 2g/kg once a day for 9 days.The activity of superoxided lsmutase(SOD), serum creatine phosphokinase activity(CK) and the level of malondialdehyde(MDA) were assayed,and at the same time,the rat myocardial pathomorphism was detected. Results Compared with the injury group,the serum SOD activity was higher(P<0.01),and the serum MDA activity was lower in therapy group(P<0.01). The protection of myocardial pathological damage in therapy group was improved(P<0.01). Conclusion The HHI has protective effect and antioxidative effect on the myocardium injury induced by adriamycin in rats.

[Key Words] Adriamycin;Myocardium injury;Honghua injection;Antioxidative effect

阿霉素(adriamycin,ADM)是蒽環(huán)類抗腫瘤藥物,具有抗瘤譜廣、作用強的特點,臨床上廣泛用于治療各種惡性腫瘤。但是,由于阿霉素具有明顯的心肌毒性,因而使其臨床應(yīng)用受到限制。對阿霉素所致的心肌損害,目前尚缺乏理想的防治方法。紅花注射液(honghua injection,HHI)具有保護心肌、清除自由基、抗脂質(zhì)過氧化和改善心功能等作用[1,2]。本實驗選用ADM誘導(dǎo)大鼠心肌損傷模型,觀察HHI的抗氧化作用及心肌保護作用。

1材料與方法

1.1動物

SD大鼠60只,均為雄性,體重200～220g,由鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物所提供。

1.2藥品

阿霉素,批號為20060122,浙江海門制藥公司產(chǎn)品,溶于生理鹽水,冰箱保存?zhèn)?紅花注射液,吉林諾氏制藥有限公司生產(chǎn),批號20060410。

1.3實驗方法

實驗動物用隨機數(shù)字表分組編號,分為3個組,每組20只,分別為對照組、損傷組、治療組。動物模型的制作:對照組:實驗第1～9天注射生理鹽水,1次/d,每天3mL/kg。治療組:實驗第1～9天注射紅花注射液,每天3mL/kg,第4天注射阿霉素,3mg/kg。損傷組:實驗1～9天注射生理鹽水,1次/d,每天3mL/kg。第4天注射阿霉素,3mg/kg,以后隔天1次,連用3次。藥物均腹腔注射,2min注射完。第10天將大鼠斷頭取血,分離血清,3000 r/min,離心10 min,-20℃以下保存,待測。采血后迅速解剖,取出心臟,甲醛固定,蘇木精伊紅染色,光鏡觀察。

1.4檢測指標(biāo)

血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性的測定、心肌肌酸激酶(CK)活性測定、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,試劑盒由南京建成生物工程研究所提供,嚴(yán)格按說明書進行操作。

1.5心肌病理

計分光鏡下心肌損傷病變包括心肌空泡變性,心肌肌原纖維變性或凝固性壞死。按心肌病變范圍分為:0分,無損傷;1分,輕度損傷,病變累及范圍小于心肌全層的100%;2分,中度損傷,病變累及范圍占心肌全層10%～50%;3分,重度損傷,病變累及范圍超過心肌全層的50%。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法

采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS13.0對數(shù)據(jù)進行處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用t檢驗,病理記分比較采用兩兩秩和檢驗。P<0.05,有顯著差異。

2結(jié)果

2.1紅花注射液對阿霉素心肌損傷大鼠CK、AST、SOD、MDA的影響

與對照組相比,損傷組AST、CK活性明顯升高,而治療組明顯低于損傷組(P<0.01);與對照組相比,損傷組MDA含量明顯升高,而治療組明顯低于損傷組(P<0.01);與對照組相比,損傷組SOD活性明顯降低,而治療組明顯高于損傷組(P<0.01)。見表1。

2.23組大鼠心肌損傷病理計分情況

兩兩秩和檢驗結(jié)果:損傷組與對照組比較,有顯著差異(P<0.01);損傷組與治療組比較有非常顯著性差異(P<0.01)。見表2。

3討論

蒽環(huán)類抗癌藥物于60年代開始應(yīng)用于臨床,是應(yīng)用最廣泛的抗癌藥物之一,因其抗癌譜廣、抗瘤活性強,故在腫瘤化療中獲得很高評價[3]。臨床上應(yīng)用的最早的蒽環(huán)類化合物為阿霉素,研究表明,阿霉素的濃度、峰值或用藥方法分別與癥狀緩解及腫瘤消退有關(guān)。這些研究表明增高起始的血藥濃度可提高藥物的有效率,而蒽環(huán)類藥物均可導(dǎo)致急性或者慢性心臟毒性,且阿霉素引起心臟損傷的原因尚未完全清楚,目前認為與氧自由基有關(guān),氧自由基所導(dǎo)致的氧化損傷是阿霉素引起心臟毒性的主要原因,而線粒體呼吸鏈又是自由基產(chǎn)生的主要部位,故其本身易成為自由基損傷的主要靶點。一般認為,SOD對維護OZ的低水平是必要的,而GSH則對防止體內(nèi)自由基引起的膜脂質(zhì)過氧化尤其重要[4]。在體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧自由基,可逐漸消耗機體內(nèi)的抗氧化酶,超氧化物歧化酶是體內(nèi)重要的自由基——超氧自由基的天然清除劑,是免除自由基損傷的主要防御酶[5]使其活性下降,機體抗氧化能力下降,使心肌細胞膜系統(tǒng)的不飽和脂質(zhì)過氧化,導(dǎo)致心肌損傷。

本實驗觀察,給大鼠阿霉素造模后,引起心肌自由基代謝紊亂,MDA含量增高,SOD活性下降,心肌病理檢查發(fā)現(xiàn)心肌細胞變性,肌原纖維變性或凝固性壞死。MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)終產(chǎn)物,脂質(zhì)過氧化反應(yīng)是發(fā)生在多聚不飽和脂肪酸上的系列自由基反應(yīng)。脂質(zhì)過氧化是氧自由基造成組織細胞損傷和主要途徑之一,測定脂質(zhì)過氧化發(fā)生的程度,可作為判斷自由基致細胞損傷的指標(biāo),證實ADM心臟毒性作用與自由基有關(guān)。

紅花注射液主要成分為紅花黃色素,其主要藥理作用為活血通經(jīng),祛瘀止痛,有輕度興奮心臟、降低冠脈阻力、增加冠脈流量、心肌營養(yǎng)性血流量和降低血管外周阻力的作用,抑制氧自由基生成和抗脂質(zhì)過氧化的作用,能提高血清SOD和過氧化氫酶活性,并能降低脂質(zhì)過氧化物的含量,可使離體豚鼠心臟的心肌收縮力增強,冠脈流量增加,抑制心肌組織中磷酸肌酸激酶的釋放,降低血清磷酸肌酸激酶水平,保護心肌組織超氧化物歧化酶活性,減少MDA生成,防止心肌細胞脂質(zhì)過氧化及改善脂肪酸代謝,改善心肌代謝,保護心肌細胞[6-8]。

本實驗中,紅花注射液治療組顯著降低阿霉素所致心肌損傷中AST和CK活性,能提高阿霉素心肌損傷后心肌的SOD活性,顯著降低心肌內(nèi)MDA含量。能夠保護阿霉素引起的大鼠心肌多方面損傷。紅花注射液對阿霉素所致的心肌損害有明顯的改善保護作用和抗氧化作用,為臨床應(yīng)用提供了一定的理論基礎(chǔ)。

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(收稿日期:2009-03-17)