通陽(yáng)活血顆粒的薄層色譜鑒別

霍鉆云　陳淑映

【摘要】 目的 建立通陽(yáng)活血顆粒中主要成分的定性鑒別方法，為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。方法 采用薄層色譜法(TLC法)對(duì)顆粒中的黃芪、紅花兩種有效成分進(jìn)行定性分析。結(jié)果 供試品與對(duì)照品，對(duì)照藥材薄層圖譜斑點(diǎn)相同并清晰，均能鑒別出黃芪、紅花。結(jié)論 薄層色譜專屬性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，可用于通陽(yáng)活血顆粒的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】顆粒；薄層色譜；鑒別；黃芪；紅花

TLC identification of granular preparation of tongyanghuoxue

HUO Zuan-yun，CHEN Shu-ying.ChineseTraditionalMedicalHospitalofFoshan，Guangdong 528000,China

【Abstract】 Objective Providing scientific basis for quality standards established by establishing the qualitative analysis of the most effective composition in the granular preparation of Tongyanghuoxue.Methods Effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali were identified by TLC.Results In the TLC of the testing samples，same color spots were noted at the corresponding sites of the reference substances and effective compositions of Flos Carthami and Radix Astragali can be identified by TLC.Conclusion The reproducibility and the specialization of the TLC were good.The method was simple and convenient，which can be used for quality control of the granular preparation of Tongyanghuoxue.

【Key words】Granular preparation; TLC; Identification；Radix astragali；Flos carthami

通陽(yáng)活血顆粒是本院的一種中藥制劑，由黃芪、紅花、地龍等中藥材制成，具有益氣活血，除痰通絡(luò)的功效。主要用于氣虛痰瘀證，如強(qiáng)直脊椎炎，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，增生性骨關(guān)節(jié)炎及坐骨神經(jīng)痛。癥見疼痛日久，肢體麻木，骨節(jié)僵硬等，亦用于中風(fēng)之半身不遂，口眼歪斜等。經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的臨床應(yīng)用，通陽(yáng)活血顆粒對(duì)上述癥狀有明顯的療效，為了更好地保證該制劑的質(zhì)量，對(duì)顆粒中的君藥黃芪、紅花進(jìn)行薄層色譜鑒別，為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)儀器、原料與試劑

ZF-90型電暗箱式紫外線燈投射儀(上海顧村電光儀器廠)；超聲波清洗器；萃取裝置；回流提取裝置；硅膠G(青島海洋化工有限公司)；玻璃點(diǎn)樣毛細(xì)管(華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠)；黃芪對(duì)照藥材(批號(hào)：20080110)；紅花對(duì)照藥材(批號(hào)： 20080221)；黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品均

購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；所用中藥材由廣州致信藥業(yè)有限公司提供；試劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 黃芪薄層色譜鑒別［1-2］

2.1.1 供試品制備 取本品3 g，研細(xì)，加甲醇40 ml，超聲處理20 min，放冷,濾過,濾液蒸干,殘?jiān)铀?5 ml,分次溶解,加乙醚提取2次,每次15 ml,棄去乙醚液,水液用水飽和的正丁醇振搖提取2次,每次15 ml,合并正丁醇提取液,加氨試液提取2次,每次20 ml,棄去氨液,將正丁醇水浴蒸干,殘?jiān)蛹状? ml溶解,作為供試品溶液。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)品制備方法 取黃芪甲苷對(duì)照品,加甲醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。

2.1.3 對(duì)照藥材溶液制備 取黃芪對(duì)照藥材適量，加甲醇20 ml,加熱回流1 h，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱(100~120目，5 g，內(nèi)徑10~15 mm)上，用40%甲醇100 ml洗脫，收集洗脫夜，蒸干，殘?jiān)铀?0 ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20 ml，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次20 ml，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5 ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液用。

2.1.4 陰性液制備 按通陽(yáng)活血顆粒處方去除黃芪,其他按供試品制備方法制成陰性液。

2.1.5 薄層層析 照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄V IB)試驗(yàn),吸取上述四種溶液各10、 20 μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶1∶1∶1)為展開劑,展開,取出,晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘約5 min,至斑點(diǎn)顯色清晰,取出。

2.1.6 測(cè)定結(jié)果 供試品色譜中,在與標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點(diǎn)，陰性液無(wú)干擾(見圖1)。

2.2 紅花薄層色譜鑒別［3-4］

2.2.1 供試品制備 取本品適量，加80%丙酮溶液20 ml，密塞，超聲處理10 min，過濾，濾液作為供試品溶液。

2.2.2 對(duì)照藥材溶液的制備 取紅花適量，加水煎煮2次(1 h，0.5 h)，每次20 ml,過濾，合并濾液，加乙醇使之含醇70%，放置6 h，過濾，濾液回收乙醇至干，殘留物加20 ml水溶解后按供試品溶液制備項(xiàng)下方法制成紅花對(duì)照藥材溶液1 ml。

2.2.3 陰性對(duì)照品的制備 取不含紅花的通陽(yáng)活血顆粒適量，溶解，再按供試品溶液制備項(xiàng)下方法制成空白對(duì)照液1 ml。

2.2.4 薄層層析 照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄V IB)實(shí)驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5 μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素為粘合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7∶2∶3∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾干。

2.2.5 測(cè)定結(jié)果 供試品色譜中與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，日光下顯相同紅褐色的斑點(diǎn)，陰性液無(wú)干擾 (見圖2)。

3 討論

3.1 用TLC法鑒別通陽(yáng)活血顆粒，均能檢測(cè)到主藥黃芪和紅花的成分，色譜斑點(diǎn)清晰，附近無(wú)雜質(zhì)斑點(diǎn)干擾，方法簡(jiǎn)便、快速、可行性及重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，可用于該制劑質(zhì)量控制中的定性分析。

3.2 本實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是選擇適宜的試驗(yàn)條件、合適的分離提純方法及展開條件。在對(duì)黃芪中有效成份黃芪甲苷的提取中選取合適的提取溶劑，以獲得純的黃芪甲苷成份。在測(cè)定黃芪甲苷含量過程中發(fā)現(xiàn)展開劑的選擇及配比對(duì)測(cè)定結(jié)果影響較大,傳統(tǒng)的氯仿∶甲醇∶水(13∶7∶2)和正丁醇∶冰醋酸∶水(4∶1∶1)對(duì)于本制劑的分離效果都不理想,在多次比較篩選后本實(shí)驗(yàn)確定選用正丁醇∶醋酸乙酯∶甲醇∶水(4∶1∶1∶1)為展開劑。

3.3 通陽(yáng)活血顆粒作為復(fù)方中藥制劑，原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只是對(duì)某一類物質(zhì)進(jìn)行理化鑒別，專屬性不強(qiáng)，為了更準(zhǔn)確地控制其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，故在原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上增加了對(duì)制劑中黃芪、紅花的薄層色譜鑒別，為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù)，確保臨床用藥的安全和有效。

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