毛細管氣相色譜法測定硫酸長春新堿中有機溶劑殘留量的方法學(xué)

饒　平　楊秀顏

[摘要]目的：建立測定硫酸長春新堿有機溶劑殘留的毛細管氣相色譜法。方法：采Agilent DB-WAX彈性石英毛細管柱（0.320 mm×30 m×0.23 μm）,測定硫酸長春新堿中的甲苯、三氯甲烷、乙醇三種有機溶劑殘留量。結(jié)果：甲苯、三氯甲烷及乙醇三種有機溶劑的極性相差較大，在有限的時間內(nèi)不易同時測定，采用梯度洗脫方法可在15 min內(nèi)全部分離測定，且分離度、精密度、回收率等均符合要求。結(jié)論：本方法簡便快捷，可用于測定硫酸長春新堿中的甲苯、三氯甲烷、乙醇等有機溶劑殘留量的檢測。

[關(guān)鍵詞]長春新堿；氣相色譜法；有機溶劑殘留量；甲苯；三氯甲烷；乙醇

[中圖分類號] R927.11[文獻標識碼]A [文章編號]1674-4721（2009）05（a）-０27－０2

長春新堿是由英竹桃科植物長春花中提取的生物堿，在臨床抗癌治療中應(yīng)用十分廣泛，尤其在白血病、淋巴癌、腎腫瘤和神經(jīng)母細胞瘤治療中經(jīng)常使用[1]。本文采用毛細管氣相色譜法對3種有機溶劑進行測定和驗證，方法簡便，精密度較高[2]。

1資料與方法

1.1 儀器與試藥

島津GC-14C型氣相色譜儀、GHL-300型氫氣發(fā)生器，WJK-6型全自動凈化空氣源。甲苯、三氯甲烷、乙醇（廣州化學(xué)試劑廠，分析純）、二甲亞砜（DMSO）（色譜純，TEDIA COMPANY，INCUSA）。硫酸長春新堿(海南長春花藥

業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號20051110、20051105、20051115)。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱：Agilent DB-WAX彈性石英毛細管柱(0.320 mm×30 m×0.23 μm)，檢測器：氫火焰離子化檢測器(FID)，溫度240 ℃，載氣氮氣，進樣口溫度220 ℃，柱前壓200 kPa，進樣量：1μl。程序升溫：35℃保持4.6 min，以20 ℃/min升至155 ℃，保持3 min，再以20 ℃/min升溫至190 ℃，保持1 min。

2.2 對照品溶液的配制

精密量取甲苯0.346 4 g、三氯甲烷0.022 2 g、乙醇1.975 0 g，分別置25 ml量瓶中，加二甲基亞砜（DMSO）稀釋至刻度，分別量取5 ml，置同一50 ml量瓶中，加DMSO稀釋至刻度，為混合對照品溶液0號。

2.3 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗

取對照品溶液按“ 2.1”項下條件測定，3種溶劑峰的分離度良好。

2.4線性試驗

精密量取“2.2”項下0號混合對照品溶液適量，按下表分別以DMSO稀釋制成系列濃度的標準溶液，依法測定，結(jié)果見表1。

以各組分濃度C (mg/ml)為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標，繪制標準曲線。結(jié)果見表2。

結(jié)果表明甲苯、乙醇、三氯甲烷在相應(yīng)的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5精密度試驗

取“2.4”項下的2號混合對照溶液, 重復(fù)進樣6次,結(jié)果見表3。

結(jié)果精密度符合中國藥典[3]的有關(guān)要求。

2.6回收率試驗

取本品約0.4 g，精密稱定，置10 ml量瓶中，分別加入上述 “2.4”項下的5號對照品溶液4、5、6 ml，以DMSO溶解并稀釋至刻度，制成三種不同濃度的溶液。每種濃度的溶液各制3份。分別進樣測定，按外標法以峰面積計算得3種有機溶劑的平均回收率，結(jié)果見表4。

2.7 最低檢出限

取上述 “2.4”項下的4號混合對照溶液,按不同稀釋倍數(shù)稀釋至各對照品響應(yīng)值為基線噪音響應(yīng)值的2~10倍，測定并計算乙醇、三氯甲烷及甲苯3倍于噪音響應(yīng)值時的最低檢出限，結(jié)果見表5。

根據(jù)中國藥典有關(guān)規(guī)定，藥物原料中甲苯、三氯甲烷及乙醇的殘留限度為不得過0.089%、0.006%及0.5%[3]。按樣品溶液制備方法（0.4 g相當(dāng)于5.0 ml）折算成規(guī)定樣品溶液濃度（g/ml）分別為不得過71.2 μg/ml、4.8 μg/ml及400 g/ml，除三氯甲烷的規(guī)定限度僅為檢出限的2.2倍而無法定量測定外,乙醇和甲苯的規(guī)定限度均遠高于檢測

限,并符合定量檢測要求（即響應(yīng)值應(yīng)為噪音響應(yīng)值的10倍以上）。

3討論

3.1溶劑的選擇

待測的有機溶劑既有水溶性溶劑又有水難溶性溶劑，如以水為溶劑需要大量地稀釋并超聲波助溶處理[4]。經(jīng)試驗，本品及殘留的有機溶劑在DMSO中均能很好溶解，因此采用DMSO為溶劑。

3.2色譜柱的選擇

甲苯、三氯甲烷及乙醇三種有機溶劑的有機溶劑的極性相差較大，在有限的時間內(nèi)不易同時測定[5]，采用梯度洗脫方法可在15 min內(nèi)全部分離測定，且分離度、精密度等均符合要求。

[參考文獻]

[1]肖春英,梁孝印,付孟莉.長春新堿臨床研究進展[J].社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志,2004,2（5）:33-44

[2]孫傳經(jīng).氣相色譜分析原理與技術(shù)[M].2版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社會，1993：252.

[3]中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005: 54.

[4]王衛(wèi). 藥品中有機溶劑殘留量及其測定[J].天津藥學(xué),2001,13(3):26.

[5]韓海.毛細管氣相色譜法檢查麥參注射液中殘留乙醇和乙酸乙酯限量[J].暨南大學(xué)學(xué)報,2005, 26（3）：446-449.

（收稿日期：2009-03-09）