熱毒寧注射液與６種輸液配伍時(shí)的綠原酸穩(wěn)定性考察

摘要 目的：考察熱毒寧注射液中綠原酸在6種常用輸液中的穩(wěn)定性，為臨床用藥提供依據(jù)。方法：采用高效液相色譜法測(cè)定熱毒寧注射液中綠原酸在6種常用輸液中12 h內(nèi)的含量變化，觀察溶液顏色，測(cè)定pH變化。結(jié)果：熱毒寧注射液加入6種輸液后放置12 h，顏色無明顯變化，未見沉淀生成，pH改變不大，綠原酸含量變化不顯著。結(jié)論：熱毒寧注射液在6種常用輸液中12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

關(guān)鍵詞 熱毒寧注射液 綠原酸 穩(wěn)定性 HPLC

中圖分類號(hào)：R942 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1006—1533(2009)08-0373-03

熱毒寧注射液是中成藥注射劑復(fù)方劑型，由青蒿、金銀花、梔子組成，不含動(dòng)物藥和礦物藥，具有清熱解毒、疏風(fēng)解表的作用，臨床用于上呼吸道感染(外感風(fēng)熱證)所致的高熱、微惡風(fēng)寒、頭痛、咳嗽、痰黃等證。目前，熱毒寧注射液廣泛應(yīng)用于臨床，以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液和0.9％氯化鈉注射液等常用輸液稀釋后靜脈滴注給藥。但筆者未見有關(guān)該液與各種輸液配伍的穩(wěn)定性研究的報(bào)道。筆者以配伍后混合溶液外觀、pH值及注射液中的主要成分綠原酸為指標(biāo)，考察了熱毒寧注射液與5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化鈉注射液、復(fù)方氯化鈉注射液、木糖醇注射液和縮合葡萄糖氯化鈉注射液這6種常用輸液中放置12 h后的配伍穩(wěn)定性。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

美國Agilent HP1100系列高效液相色譜儀(Aglient G1310A單元泵，Aglient G1316A柱溫箱，Aglient G1314A可變波長檢測(cè)器，威馬龍工作站)；隔膜真空泵(天津市騰達(dá)過濾器件廠)；10萬分之一電子天平(Ohaus)；PHS－25數(shù)顯pH計(jì)(上海精科雷磁儀器廠)；SD：3200超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司)。

1.2 藥品與試劑

綠原酸對(duì)照品(廣西醫(yī)科大學(xué)精制，批號(hào)：20071210)，純度98.7％；熱毒寧注射液(江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格：10 mL／支，批號(hào)：080601)；5％葡萄糖注射液(武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)：080807—104)，10％葡萄糖注射液(武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)：080806—101)，0.9％氯化鈉注射液(武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)：080803103)，復(fù)方氯化鈉注射液(武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限公司，批號(hào)：080528102)；木糖醇注射液(安徽環(huán)球藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：A080107—9)；縮合葡萄糖氯化鈉注射液(重慶大新藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：08010004—1)；乙腈(色譜純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：T20070718)；甲醇、冰醋酸均為色譜純；水為重蒸水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱SinoChrom ODS—AP(4.6 mm×250mm，5岬)，流動(dòng)相：乙腈－水－冰醋酸(13：87：0.2)；流速：0.8mL／min；檢測(cè)波長：327mm；柱溫30℃；進(jìn)樣量20uL。

2.2 溶液配制

2.2.1 對(duì)照品溶液的配制

精密稱取綠原酸對(duì)照品25.0 mg，置于50 mL容量瓶中，用50％甲醇溶解并稀釋至刻度，制成0.5mg／mL的對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制

按熱毒寧注射液說明書的配制要求，將熱毒寧注射液10 mL分別加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化鈉注射液(c)、復(fù)方氯化鈉注射液(D)、木糖醇注射液(E)和縮合葡萄糖氯化鈉注射液(F)250 mL中配成樣品溶液，搖勻。精密吸取各樣品溶液1mL，置10mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋定容，即得。

2.2.3 陰性對(duì)照液的配制

按處方比例和配方，制得不含金銀花的陰性對(duì)照樣品。按2.2.2項(xiàng)下方法制成陰性對(duì)照液。

2.2.4 專屬性實(shí)驗(yàn)

分別取綠原酸對(duì)照品溶液、各樣品制成的供試品溶液和陰性對(duì)照液進(jìn)樣20uL測(cè)定色譜圖。結(jié)果表明：陰性對(duì)照液中其它成分對(duì)樣品的測(cè)定無干擾。

2.3 線性關(guān)系考察

分別精密吸取對(duì)照品溶液適量，分別加流動(dòng)相稀釋至綠原酸10.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100.ug／mL系列濃度，分別進(jìn)樣20汕進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積(A)，并以濃度(c，ug/mL)對(duì)吸收峰面積(A)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程為：A=6 521C-9.660 2(r=0.999 5)。結(jié)果表明，綠原酸在濃度范圍10～100ug/mL內(nèi)線性良好。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取綠原酸對(duì)照品溶液20uL，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定綠原酸峰面積，計(jì)算綠原酸峰面積平均值為4 108 924，RSD為0.3％(n=6)。結(jié)果表明，儀器精密度良好。

2.5 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

將熱毒寧注射液在5％葡萄糖注射液中的樣品按照2.2.2項(xiàng)下供試品的配制方法，分別配制6份，測(cè)定綠原酸含量基本相同，RSD為0.2％，結(jié)果表明，本法重復(fù)性好。

2.6 加樣回收率試驗(yàn)

精密取相同熱毒寧注射液1 mL共6份，分別精密加入綠原酸對(duì)照品適量，按照2.2.2項(xiàng)下樣品溶液的制備方法制得低、中、高這3種不同濃度的供試液，并按上述色譜條件測(cè)定峰面積并計(jì)算回收率。結(jié)果見表1，平均回收率為101.2％。RSD為1.3％(n=6)。

2.7 配伍穩(wěn)定性考察

2.7.1 綠原酸的測(cè)定

按熱毒寧注射液說明書的配制要求，將熱毒寧注射液10 mL分別加入到5％葡萄糖注射液(A)、10％葡萄糖注射液(B)、0.9％氯化鈉注射液(c)、復(fù)方氯化鈉注射液(D)、木糖醇注射液(E)和縮合葡萄糖氯化鈉注射液(F)各250mL中配成樣品溶液，搖勻。于0、1、2、4、8、12 h精密吸取各樣品液1 mL，用流動(dòng)相稀釋定容至10 mL，進(jìn)樣20uL，測(cè)定峰面積，計(jì)算綠原酸含量，結(jié)果見表2。

2.7.2 配伍溶液的制備與穩(wěn)定性考察

按熱毒寧注射液說明書的配制要求，將熱毒寧注射液適量，分置于6個(gè)量瓶中，分別以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、0.9％氯化鈉注射液、復(fù)方氯化鈉注射液、木糖醇注射液和縮合葡萄糖氯化鈉注射液稀釋制成4％(mL／mL)的溶液，混勻，室溫放置，于0、1、2、4、8、12 h作外觀、pH值檢查。

熱毒寧注射液與6種輸液配伍后，經(jīng)室溫放置，各配伍液未見明顯變化，未出現(xiàn)沉淀、氣泡等，pH值測(cè)定結(jié)果見表3。

3 討論

熱毒寧注射液與各輸液配伍、室溫放置，各配伍液綠原酸含量變化不顯著，說明在上述實(shí)驗(yàn)條件下熱毒寧注射液與6種常用輸液配伍12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。

3.1 檢測(cè)波長的選擇

本品中含有綠原酸和桅子苷兩個(gè)成分，《中華人民共和國藥典》2005年版一部收載了單個(gè)組分的測(cè)定條件。紫外掃描結(jié)果表明，綠原酸在327mm波長處有較強(qiáng)的紫外吸收，故選定327 mm作為綠原酸的檢測(cè)波長。

3.2 流動(dòng)相的選擇

金銀花是熱毒寧注射液的主要成分之一，綠原酸是金銀花的主要有效成分，它的含量主要是以綠原酸的含量來計(jì)算的。筆者通過對(duì)綠原酸的含量測(cè)定，考察其配伍后含量有無降低來衡量熱毒寧注射液加入到6種常用輸液中的穩(wěn)定性。

由于熱毒寧注射液中綠原酸與梔子苷的性質(zhì)有些相似，當(dāng)流動(dòng)相極性較大時(shí)，色譜峰疊加無法將兩種物質(zhì)分離開，造成測(cè)得的綠原酸含量比實(shí)際含量偏高，所以降低流動(dòng)相的極性。但極性太低時(shí)，保留時(shí)間明顯移后。實(shí)驗(yàn)中比較篩選了多種不同比例流動(dòng)相體系，最后選定乙腈一水一冰醋酸(13：87：0.2)為流動(dòng)相，流速為0.8 mL／min時(shí)。綠原酸的分離效果最好，保留時(shí)間適中。

參考文獻(xiàn)

1 董曉莉，熱毒寧注射液致過敏反應(yīng)0例[J]，中國誤診學(xué)雜志，2009，19(7)：1528

2 國家藥典委員會(huì)，中華人民共和國藥典[M]，北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：152—153