維吾爾藥羅勒對(duì)環(huán)氧化酶的影響

江國華　依巴代提　阿布力孜　盛　磊

（1.新疆醫(yī)科大學(xué) 藥理教研室；2.新疆醫(yī)科大學(xué) 科研中心，新疆 烏魯木齊 830054）お

摘 要：目的：探討維吾爾藥羅勒醇提物在體外對(duì)環(huán)氧化酶的影響，從而研究羅勒抗血栓的作用機(jī)制。方法：測(cè)定人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PGE2 的含量。結(jié)果：羅勒對(duì)環(huán)氧化酶-1（COX-1）和環(huán)氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用。在劑量相同時(shí)，羅勒醇提物對(duì)COX-2的抑制率大于COX-1。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)從底物的角度證實(shí)了羅勒醇提物對(duì)COX-1 和COX-2 的作用,抗血栓部分機(jī)理可能是由于抑制環(huán)氧化酶而介導(dǎo)的。

關(guān)鍵詞：羅勒；環(huán)氧化酶-1；環(huán)氧化酶-2；抗血栓

中圖分類號(hào)：R973文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-2197（2009）01-0037-01オ

羅勒是維吾爾醫(yī)應(yīng)用歷史悠久的常用藥材之一,是唇形科羅勒屬植物Ocimum basilicum L^[1，2]。主要成分：全草，羅勒的化學(xué)成分主要為揮發(fā)油、黃酮、香豆素、甾體化合物等,其中揮發(fā)油的含量最大^[3]。本研究是通過羅勒在體外對(duì)環(huán)氧化酶（COX-1和COX-2）活性的影響來探討羅勒抗血栓的作用機(jī)制，給臨床選藥組方提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

CO₂培養(yǎng)箱,全自動(dòng)酶標(biāo)儀,生物顯微鏡,超凈操作臺(tái)。

羅勒，阿司匹林，吲哚美辛；脂多糖(LPS)、花生四烯酸(AA);DMEM干粉；RPMI1640；小牛血清（四季青）；MTT、胰蛋白酶；6-keto-PGF1α和PGE2ELISA試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 在體外對(duì)COX-1的影響

按文獻(xiàn)方法制備內(nèi)皮細(xì)胞COX-2模型^[4]。將培養(yǎng)至第4代的內(nèi)皮細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板中生長(zhǎng)融合，再加入羅勒提取液,使其終濃度分別為0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL,或非選擇性環(huán)氧化酶抑制劑陽性對(duì)照阿司匹林(終濃度10-6mol/L)、COX-2抑制劑陽性對(duì)照吲哚美辛(終濃度10-7mol/L)或陰性對(duì)照溶媒。37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h,取出每孔加入底物花生四烯酸,使其終濃度為10μmol/L,37℃繼續(xù)培養(yǎng)20min。收集上清液,-20℃凍存待測(cè)^[5]，用ELISA法測(cè)定樣品中6-keto-PGF1α。

1.2.2 在體外對(duì)COX-2的影響

按文獻(xiàn)方法制備巨噬細(xì)胞COX-2模型^[6]，將細(xì)胞接種于24孔板中生長(zhǎng)融合，再加入一定濃度的羅勒提取液,終濃度分別為0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL，或陽性對(duì)照品阿司匹林(終濃度10-6mol/L)、吲哚美辛(終濃度10-7mol/L)或溶媒。37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h,取出,每孔加入底物花生四烯酸(終濃度10μmol/L),37℃繼續(xù)培養(yǎng)20min。收集上清液,-20℃凍存待測(cè)。用ELISA法測(cè)定樣品中的PGE2。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件處理,所有結(jié)果用±s表示,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和方差分析。

2 結(jié)果

羅勒在體外對(duì)環(huán)氧化酶的影響，羅勒對(duì)環(huán)氧化酶-1（COX-1）和環(huán)氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用，另外,隨著劑量的增加抑制率也增大,存在一定的量效關(guān)系。結(jié)果見表1。

注：與DMSO比較:*P < 0.05，**P<0.01。

3 討論

環(huán)氧化酶(COX) 是花生四烯酸合成前列腺素過程中一個(gè)重要的限速酶,其催化的產(chǎn)物前列腺素H2是各種前列腺素的共同中間體,在各組織和器官中前列腺素H2 被不同的前列腺素合成酶作用生成各種前列腺素,以自分泌或旁分泌方式和靶細(xì)胞的前列腺素受體結(jié)合發(fā)揮各種各樣的生理功能^{[7］ 。隨著COX-2 的發(fā)現(xiàn),現(xiàn)在普遍認(rèn)為COX-1負(fù)責(zé)維持身體的正常機(jī)能,而COX-2 則是一種誘導(dǎo)酶,參與炎癥反應(yīng),抑制COX-2 可以發(fā)揮抗血栓作用[8] 。本實(shí)驗(yàn)表明,羅勒在3 個(gè)劑量都對(duì)COX-2 有抑制作用,并隨劑量的增加而作用增強(qiáng),抑制環(huán)氧化酶可能是其抗血栓的作用機(jī)制之一。}

參考文獻(xiàn)：

［1］ 茹克婭木.維吾爾醫(yī)常用藥材學(xué)(上)(維吾爾文)［M］.烏魯木齊:新疆人民衛(wèi)生出版社,1993：426-429.

［2］ 新疆維吾爾自治區(qū)衛(wèi)生廳.維吾爾藥材標(biāo)準(zhǔn)［S］.烏魯木齊：新疆科技衛(wèi)生出版社，1993：183-187.

［3］ 汪濤，崔書亞，胡曉黎.羅勒揮發(fā)油成分的研究［J］.中國中藥雜志，2003,28(8):740-742.

［4］ 侯琦,胡玉芳,郭穎,等.非普拉宗對(duì)環(huán)氧酶活性的影響［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào),2000,35(7):481.

［5］ 龍啟才,邱建波.雷公藤、防己醇提取物對(duì)淋巴細(xì)胞和環(huán)氧化酶的影響［J］.中藥材,2004,27(11):851.

［6］ 胡玉芳,程桂芳.環(huán)氧酶選擇性抑制劑篩選模型的建立［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào),2000,35(5):343.

［7］ Funk C D. Prostaglandins and leukotrienes： advances in eicosanoidbiology［J］. Science， 2001， 294 (5548)： 1871.

［8］ Marx J . Anti-inflammatories inhibit cancer growth but how［J］. Science，2001， 291 (5504)： 581.

（責(zé)任編輯：姜付平）