芹菜對(duì)小鼠生育力及胎鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響

孫　冉　劉　鵬　成倩倩　李福輪　李　慧　李洪波　李芝蘭

【摘要】 目的 探討芹菜對(duì)雄性小鼠生殖能力及胎鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響。方法 160只成年健康SPF級(jí)昆明種雄性小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為7 d和56 d兩個(gè)時(shí)間組，各時(shí)間組隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每天定時(shí)給各劑量組小鼠以不同濃度的芹菜汁0．3 ml灌胃，對(duì)照組0．3 ml生理鹽水灌胃，灌胃結(jié)束后與同種同齡的健康雌性小鼠按雄雌1C∶C1合籠；次日起每日陰道涂片，以查到陰栓為孕0 d（合籠7 d未見(jiàn)陰栓者，以合籠第4天為孕0 d），并分籠飼養(yǎng)，分別在孕18 d剖腹取胎，記錄各組孕鼠受孕及子宮仔鼠著床情況，同時(shí)測(cè)定胎鼠身長(zhǎng)及體質(zhì)量。結(jié)果 各劑量組與對(duì)照組比較雌鼠受孕率、著床數(shù)、胎鼠身長(zhǎng)、體質(zhì)量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 芹菜對(duì)胎鼠生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)明顯影響，對(duì)雄鼠生育力的影響不能排除。

【關(guān)鍵詞】小鼠；胎鼠；受孕率；著床

お

Effect of celery on fertility of mice and growth and development of fetus

SUN Ran，LIU Peng，CHENG Qian-qian，et al.School of Public Health，Lanzhou University,Lanzhou City,Gansu 730000，China

【Abstract】 Objective To explore the effect of celery on the reproductive capacity of male mice and the growth and development of fetus.Methods 160 healthy adult male SPF mice of Kunming strain were divided randomly into 7 days and 56 days time groups.Each group was divided into 4 groups including control group，low-dose group，middle-dose group and high-dose group according to the body weight.Mice of each group were administered by gavage at a certain time every day，control group with 0．3 mililiters of normal saline and experimental groups with 0．3 mililiters of celery juice of different concentration.After intragastric administration，male mice were mated 1:1 with untreated females for 7 days (time for completion of one estrous cycle in mice).The daily vaginal smears were checked.The day that vaginal plug was found was considered day 0 of gestation.and then the male and female mice were separated into different cages.The fetal mice were obtained by caesarean on day 18 of gestation.The pregnant rate，embryonic nidation of each group and the length and weight of fetus were recorded.Results There were not statistical significances in pregnant rate of female mice，number of embryonic nidation，or length and weight of fetus among any group(P>0．05).Conclusion Celery had no significant effect on growth and development of fetal mice，but the effect on reproductive capacity of male mice can not be excluded.

【Key words】Mice;Pregnant rate;Fetus;Nidation

基金項(xiàng)目：蘭州大學(xué)高年級(jí)本科生創(chuàng)新能力支持項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：LZUXJ2007-58-83）《芹菜對(duì)小鼠生殖機(jī)能影響的研究》、甘肅省人口和計(jì)劃生育委員會(huì)人口基金項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：GS-RK-2006-03）《芹菜避孕作用研究》

作者單位：730000 蘭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院

據(jù)報(bào)道常吃芹菜能減少男性精蟲(chóng)的數(shù)量至難以受孕的程度，這種情況在停食16 周后又會(huì)恢復(fù)正常^[1]；芹菜可引起小鼠的精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)改變，尤以精子密度的變化較為明顯^[2]。本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)雄性小鼠給予不同時(shí)間、不同劑量的芹菜汁灌胃后，與正常雌性小鼠交配，觀察雌鼠受孕率及胎（仔）鼠生長(zhǎng)發(fā)育的各項(xiàng)指標(biāo)，旨在探討芹菜汁對(duì)雄性小鼠生殖能力的影響，從而為進(jìn)一步明確芹菜是否具有抗生育作用提供一定的線索。

1 材料和方法

1．1 主要設(shè)備儀器 JA3003N 電子秤(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；DK-600S型三用恒溫水浴箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；歐牌多功能榨汁機(jī)（佛山市順德區(qū)金一百實(shí)業(yè)有限公司）。

1．2 芹菜汁的制備 稱取市售的芹菜，摘取黃葉，洗凈、晾干、切碎、稱重（7025 g）后，采用榨汁機(jī)分次粉碎榨汁，用四層消毒紗布過(guò)濾菜汁，除去雜質(zhì)，共得芹菜汁4603 ml；然后將原液665 ml封存、冷凍備用，即為低劑量組（濃度約為1．53 g/ml）；將其余芹菜汁以20 ml為單位分別放入直徑9 cm的平皿中，然后將平皿置于50℃水浴箱中分別蒸發(fā)到原體積的1/2和1/4，待冷卻后封存、冷凍備用，即得中劑量組（濃度約為3．06 g/ml）和高劑量組（濃度約為6．12 g/ml）。

1．3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 成年健康SPF級(jí)昆明種雄鼠160只，雌鼠160只(由甘肅省中醫(yī)學(xué)院SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(甘)2004-0006-0000183),體質(zhì)量28~34 g。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按體質(zhì)量隨機(jī)分為7 d和56 d兩個(gè)時(shí)間組，各時(shí)間組隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。

1．4 實(shí)驗(yàn)方法 動(dòng)物飼養(yǎng)在甘肅省中醫(yī)學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室的SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)（實(shí)驗(yàn)室合格證號(hào)為：SCXK(甘)2004-0006-0000081）。每天定時(shí)給陰性對(duì)照組0．3 ml生理鹽水灌胃，各劑量組以0．3 ml不同濃度的芹菜汁灌胃。灌胃結(jié)束后與同種同齡的雌性小鼠（不做任何處理）按雄雌15C∶C1合籠。次日起每日陰道涂片，以查到陰栓為孕0 d（合籠7 d未見(jiàn)陰栓者，以合籠第4天為孕0 d），并分籠飼養(yǎng)，分別在孕18 d頸椎脫臼處死孕鼠，剖開(kāi)腹腔，暴露子宮角，剪開(kāi)子宮，將胎鼠按順序編號(hào)記錄，即從孕鼠左側(cè)子宮角上方開(kāi)始，到子宮頸再向右側(cè)子宮角依次計(jì)數(shù)，記錄總胎數(shù)，測(cè)量活胚胎的體長(zhǎng)并進(jìn)行稱重。

1．5 生育力指標(biāo)的測(cè)定 觀察孕鼠胚胎著床情況，記錄總胎數(shù)；測(cè)量胎鼠身長(zhǎng)、體質(zhì)量,計(jì)算窩平均身長(zhǎng)、體質(zhì)量和受孕率（雌鼠受孕率=受孕雌鼠數(shù)/總雌鼠數(shù)×100%）。

1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均錄入SPSS 13．0軟件，結(jié)果以構(gòu)成比及x±s表示，并應(yīng)用χ²檢驗(yàn)、方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2．1 雌鼠受孕率 灌胃7 d和56 d雄鼠與未處理雌鼠交配后，各實(shí)驗(yàn)組雌鼠受孕率均不同程度低于對(duì)照組。經(jīng)χ²檢驗(yàn)，7 d和56 d各組間受孕率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ²=2．257，P=0．521；χ²=2．967，P=0．397），見(jiàn)表1。

2．2 雌鼠子宮仔鼠著床數(shù) 灌胃7 d和56 d雄鼠與未處理雌鼠交配后，孕鼠子宮仔鼠著床數(shù)經(jīng)方差分析，各組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0．298，P=0．827；F=0．249，P=0．861），見(jiàn)表2。

2．3 胎鼠體長(zhǎng)、體質(zhì)量 灌胃7 d和56 d雄鼠與未處理雌鼠交配后，各組孕鼠所得胎鼠總數(shù)經(jīng)方差分析，各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0．929，P=0．433；F=0．249，P=0．861）；7 d和56 d各組胎鼠體質(zhì)量的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2．289，P=0．078；F=1．117，P=0．342）；7 d和56 d各組胎鼠身長(zhǎng)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2．283，P=0．079；F=0．208，P=0．891），見(jiàn)表3。

3 討論

性功能障礙是男性的一種常見(jiàn)病，據(jù)美國(guó)估計(jì)在 6 對(duì)夫婦中就有1對(duì)不孕，其中40%屬于男性問(wèn)題。濫用藥物、吸毒和接觸化學(xué)毒物可能是導(dǎo)致男性不育的主要原因^[3]。近年來(lái)大量研究對(duì)性功能的障礙有了更新一步的認(rèn)識(shí)和發(fā)展^[4-5]。本實(shí)驗(yàn)?zāi)M人接觸的實(shí)際情況，對(duì)雄性小鼠給予不同劑量、不同時(shí)間的芹菜汁灌胃，與同齡雌鼠交配，孕18 d處死雌鼠，觀察了芹菜對(duì)小鼠生殖能力和胚胎發(fā)育的影響。結(jié)果表明灌胃7 d和56 d雄鼠與未處理雌鼠交配后，各實(shí)驗(yàn)組雌鼠受孕率均不同程度低于對(duì)照組，盡管其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是本團(tuán)隊(duì)以往的研究證實(shí)芹菜可以降低小鼠的精子密度^[2]，筆者認(rèn)為芹菜對(duì)雄性小鼠生育力的影響尚不能排除，有必要進(jìn)一步研究探討。

化學(xué)毒物通過(guò)親代對(duì)配子、胚胎、胎兒的有些損傷會(huì)在下一代表現(xiàn)為某些系統(tǒng)功能異?；蚣膊?，這類情況通稱為傳代效應(yīng)，傳代效應(yīng)也屬于發(fā)育毒性之一?；瘜W(xué)毒物對(duì)生殖與發(fā)育損害的機(jī)制復(fù)雜，多數(shù)還不清楚。目前有①基因突變與染色體畸變；②干擾核酸功能和有絲分裂；③酶受抑制；④細(xì)胞凋亡；⑤干擾營(yíng)養(yǎng)；⑥性激素代謝受干擾；⑦產(chǎn)生活性氧^[6]，等多種致畸^[7]學(xué)說(shuō)。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，7 d和56 d各實(shí)驗(yàn)組孕鼠子宮仔鼠著床數(shù)與對(duì)照組基本相同，各實(shí)驗(yàn)組胎鼠體長(zhǎng)、體質(zhì)量與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示，以濃度2．03、4．06、8．12 g/ml芹菜汁灌胃7 d和56 d雄鼠與未處理雌鼠交配，對(duì)胎鼠的生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)明顯影響，即不存在發(fā)育毒性。

參 考 文 獻(xiàn)

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