胃癌特異染色劑對(duì)早期胃癌的診斷價(jià)值

孫國(guó)慶， 孫 昊， 季晨博

胃癌的早期往往無(wú)癥狀，提高早期胃癌及癌前病變的檢出率需要內(nèi)鏡診斷技術(shù)的不斷發(fā)展[1]。早在1966年Marston等[2]就報(bào)道使用內(nèi)鏡下黏膜染色作為早期胃癌診斷的輔助方法，近年來(lái)，該方法在國(guó)外受到高度重視[3]，國(guó)內(nèi)也有部分報(bào)道[4-5]。黏膜染色是指應(yīng)用特殊染料(如甲苯胺藍(lán)、復(fù)方碘溶液、靛胭脂等) 對(duì)胃腸道黏膜染色,使黏膜結(jié)構(gòu)更加清晰，增強(qiáng)病變部位與周?chē)膶?duì)比。但目前使用的染色劑普遍存在對(duì)早期胃癌診斷缺乏特異性的問(wèn)題[6]。本研究旨在研究新型胃黏膜特異染色劑對(duì)早期胃癌及癌前病變的診斷價(jià)值，為臨床提供一種先進(jìn)的色素內(nèi)鏡診斷技術(shù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 隨機(jī)選取南京市第一醫(yī)院內(nèi)鏡中心2007年3月至2009年3月內(nèi)鏡下診斷并經(jīng)病理確診的早期和進(jìn)展期胃癌患者195例，其中男性114例，女性81例；年齡60～89歲，平均68.5歲。病理類(lèi)型：腺癌169例，黏液癌21例，腺鱗癌3例，髓樣癌2例。195例均行手術(shù)治療。

1.2 標(biāo)本采集及染色方法 為了模擬活體染色，于手術(shù)切除后立即采樣，分別制成5塊約2 cm×0.5 cm的組織標(biāo)本，置入裝有20 mL濃度分別為5%、10%、15%、20%、25%染色劑的燒杯中。染色劑為自配核染色劑，編號(hào)CTS-2009。肉眼觀察染色10 s、20 s、30 s、60 s、2 min及5 min時(shí)癌組織與癌周黏膜組織的染色情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)應(yīng)用Epidata建庫(kù)，SPSS16.0軟件包分析，采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

全部標(biāo)本在<15%濃度染色劑中均不著色。癌組織在≥15%濃度染色劑中均在短時(shí)間(≤30 s)內(nèi)著色，60 s及以后癌周胃黏膜組織才開(kāi)始著色，2 min及5 min時(shí)觀察標(biāo)本，整體雖然呈深淺不一著色情況，但癌組織與癌周胃黏膜組織邊界不易區(qū)分。從顯色時(shí)間上看癌組織的染色時(shí)間明顯早于癌周胃黏膜，P<0.01。

觀察中發(fā)現(xiàn)超過(guò)半數(shù)的腺癌、黏液癌、腺鱗癌組織在染色劑濃度為15%時(shí)就有顯著著色，而髓樣癌組織在20%濃度時(shí)才著色(詳見(jiàn)表1)，可見(jiàn)胃癌病理類(lèi)型不同所需染色劑的濃度略有區(qū)別。

表1 不同病理類(lèi)型胃癌在不同濃度染色劑下的 染色情況[例數(shù)(%)]

在對(duì)不同染色時(shí)間的觀察中還發(fā)現(xiàn)，不同病理類(lèi)型所需染色時(shí)間也略有不同(見(jiàn)表2)，從構(gòu)成比圖(圖1)上可以清晰看出94.36%的癌組織完成染色在15～20 s，98%的腺癌(高分化型)組織在染色15～25 s后顯示為紅色(圖2)。

表2 不同病理類(lèi)型胃癌在不同染色時(shí)間的 染色情況[例數(shù)(%)]

圖1 不同病理類(lèi)型胃癌在不同染色時(shí)間點(diǎn)染色構(gòu)成比

圖2 腺癌標(biāo)本染色濃度時(shí)間三維圖

3 討論

色素內(nèi)鏡學(xué)說(shuō)是1966年由日本學(xué)者Yamakawa創(chuàng)立，至20世紀(jì)末期，在染料選擇、顯色的生物學(xué)基礎(chǔ)及臨床應(yīng)用方面都取得很大發(fā)展，近年來(lái)國(guó)內(nèi)也逐漸地應(yīng)用于臨床，對(duì)早期胃癌和癌前病變的發(fā)現(xiàn)有著重大意義[7-8]。但因?yàn)榇饲把芯康南嚓P(guān)染料大多為非特異性地與癌組織結(jié)合，僅依靠改變胃癌組織存在處的凸起或凹陷使色素堆積的多寡而表現(xiàn)出色相的深淺[9]。因此，難以在臨床上廣泛開(kāi)展。

我們依據(jù)胃腫瘤生物學(xué)的特點(diǎn)，即腫瘤細(xì)胞核染色體均為異倍體，且從正常細(xì)胞到腸化、不典型增生(上皮內(nèi)瘤變)再到癌細(xì)胞其DNA含量逐漸增高的特征[10]，在核染色劑的配方中尋找到能與癌組織特異快速結(jié)合并顯色的染色劑。通過(guò)前期核染色劑的預(yù)實(shí)驗(yàn)，自配出編號(hào)為CTS-2009的核染色劑，并應(yīng)用于195例標(biāo)本中。結(jié)果顯示，全部標(biāo)本的癌組織均能在一定濃度(15%～25%)、短時(shí)間內(nèi)(≤30 s)染色，而癌周胃黏膜組織60 s及以后才開(kāi)始著色，在顯色時(shí)間上癌組織的染色時(shí)間明顯早于癌周胃黏膜，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，這提示此染色劑用于色素胃鏡診斷早期胃癌的可能性。自配染色劑經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)后，將進(jìn)一步開(kāi)展體內(nèi)試驗(yàn)，為臨床色素內(nèi)鏡診斷早期胃癌的臨床實(shí)驗(yàn)做開(kāi)創(chuàng)性的基礎(chǔ)工作。

本實(shí)驗(yàn)在比較癌組織與癌周胃黏膜組織染色的同時(shí)也考慮到不同病理類(lèi)型癌組織之間可能的差異性，增加不同類(lèi)型腫瘤之間的比較，也是為了更準(zhǔn)確地確定最佳的染色時(shí)間和濃度，以達(dá)到最佳的敏感度和特異度。通過(guò)腺癌標(biāo)本染色時(shí)間濃度三維圖像可以看出98%的腺癌(高分化型)在15%～20%濃度下，短時(shí)間內(nèi)(≤25 s)及以后時(shí)間內(nèi)顯示不同色差，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。低分化的黏液癌、腺鱗癌、髓樣癌的標(biāo)本均表現(xiàn)為在濃度加大(20%～25%)、時(shí)間延長(zhǎng)(25 s及以后)才逐漸顯色，與腺癌標(biāo)本的著色存在一定差異?？赡苁沁@些癌組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)與腺癌存在差異所致，但由于標(biāo)本較少，缺乏統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，僅顯現(xiàn)此染色劑在短時(shí)間內(nèi)，一定濃度下可以特異染色多種腫瘤組織，不同腫瘤組織存在上色時(shí)間和染色劑濃度的區(qū)別，均明顯區(qū)別于癌周組織。經(jīng)過(guò)分析我們大致確立了一個(gè)適合不同腫瘤組織的時(shí)間和濃度，為今后的進(jìn)一步研究提供了重要參考。

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