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    含氟低聚殼聚糖對(duì)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)活性及除草活性研究

    2018-09-22 02:02:32姜賴(lài)優(yōu)美
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2018年18期
    關(guān)鍵詞:含氟牙根抑制率

    范 露,姜賴(lài)優(yōu)美

    (武漢設(shè)計(jì)工程學(xué)院食品與生物科技學(xué)院,湖北武漢 430205)

    殼聚糖是來(lái)源于甲殼類(lèi)動(dòng)物的甲殼素,經(jīng)過(guò)脫乙?;蟮漠a(chǎn)物[1]。殼聚糖能有效促進(jìn)植物根、莖、葉的生長(zhǎng),從而提高作物的產(chǎn)量,改善作物的品質(zhì)[2]。殼聚糖對(duì)植物病蟲(chóng)害還具備較強(qiáng)抑制作用,它可以誘導(dǎo)植物產(chǎn)生一系列防衛(wèi)反應(yīng),誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗毒素,提高對(duì)病原菌的抗性[3]。但由于殼聚糖自身理化性能的局限性,需對(duì)殼聚糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行化學(xué)修飾,改造其分子結(jié)構(gòu),改善理化性能,提高抑菌效果[4],大量研究者合成了眾多殼聚糖衍生物,研究了其抗菌性能,發(fā)現(xiàn)很多衍生物比殼聚糖具有更好的抗菌效果。氟特殊的理化性質(zhì)為其在農(nóng)藥中贏得了重要地位,近20年來(lái)已成為新型農(nóng)藥開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn),過(guò)去幾十年中含氟農(nóng)藥的數(shù)量增加了3倍多,表明氟在新農(nóng)藥發(fā)展中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在生物活性分子如殼聚糖等結(jié)構(gòu)-活性的設(shè)計(jì)過(guò)程中引入氟,在改變其生物活性達(dá)到增強(qiáng)化合物性能的同時(shí),又能降低對(duì)環(huán)境的影響。

    基于上述理論基礎(chǔ),以殼聚糖為骨架,通過(guò)?;磻?yīng)接入高活性基團(tuán)含氟化合物制備含氟低聚殼聚糖衍生物,以水稻和油菜為對(duì)象研究6種含氟低聚殼聚糖對(duì)植物生長(zhǎng)活性調(diào)節(jié)作用,以白圓葉莧和狗牙根為對(duì)象研究6種含氟低聚殼聚糖的除草活性,以期為含氟新型有機(jī)農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)提供支撐。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試作物:雙子葉作物選擇油菜(滬油21) 為代表,單子葉作物選擇水稻(金優(yōu)38) 為代表;供試雜草:雙子葉雜草選擇白圓葉莧為代表,單子葉雜草選擇狗牙根為代表。

    供試藥劑:化合物1:鄰氟低聚殼聚糖;化合物2:間氟低聚殼聚糖;化合物3:對(duì)氟低聚殼聚糖;化合物4:2,3-二氟低聚殼聚糖;化合物5:2,6-二氟低聚殼聚糖;化合物6:3,5-二氟低聚殼聚糖。上述6種含氟低聚殼聚糖由實(shí)驗(yàn)室合成,并經(jīng)紅外、核磁氫譜進(jìn)行了結(jié)構(gòu)表征確認(rèn)。

    1.2 儀器設(shè)備

    SPX-430型生化培養(yǎng)箱,寧波江南儀器廠產(chǎn)品;JJ-CJ-2FD型超凈工作臺(tái),蘇州市金凈凈化設(shè)備科技有限公司產(chǎn)品;DHG-9240型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司產(chǎn)品。

    1.3 試驗(yàn)方法

    采用室內(nèi)平皿法,研究6種化合物對(duì)植物的生長(zhǎng)活性影響。具體方法如下:用N,N-二甲基甲酰胺分別配制5,50,100,150,200 mg/L的含氟低聚殼聚糖溶液。移取5 mL上述溶液于鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中,選擇發(fā)芽一致的種子各10顆放入平皿中,每個(gè)濃度設(shè)重復(fù)2次,然后置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d,期間不斷補(bǔ)充水分。培養(yǎng)結(jié)束后測(cè)量各種子的成活株數(shù)、根長(zhǎng)、莖長(zhǎng),按下式計(jì)算校正成活率、校正根(莖)長(zhǎng)增長(zhǎng)率。

    校正成活率=處理組成活率-溶劑對(duì)照組成活率.莖(根)長(zhǎng)增長(zhǎng)率=

    死亡率、校正死亡率、莖(根) 長(zhǎng)抑制率和校正莖(根)長(zhǎng)抑制率計(jì)算方法同上。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 含氟低聚殼聚糖對(duì)水稻生長(zhǎng)活性的影響

    6種含氟低聚殼聚糖對(duì)水稻生長(zhǎng)活性的影響見(jiàn)表1。

    以成活率為指標(biāo)進(jìn)行分析,化合物1和化合物2可以抑制水稻的成活,其中化合物1處理的水稻成活率隨著質(zhì)量濃度的升高而降低,化合物2處理的水稻成活率隨著質(zhì)量濃度的升高而升高?;衔?在低質(zhì)量濃度(≤50 mg/L)時(shí)促進(jìn)水稻成活,而在高質(zhì)量濃度(≥100 mg/L)時(shí)抑制水稻的成活。化合物4,化合物5和化合物6可促進(jìn)水稻的成活,但成活率與質(zhì)量濃度間并沒(méi)有表現(xiàn)出一致的趨勢(shì)。

    表1 6種含氟低聚殼聚糖對(duì)水稻生長(zhǎng)活性的影響

    以莖長(zhǎng)增長(zhǎng)率為指標(biāo)進(jìn)行分析,化合物1抑制水稻莖的生長(zhǎng),化合物4和化合物5促進(jìn)水稻莖的生長(zhǎng)?;衔?和化合物3在低質(zhì)量濃度時(shí)促進(jìn)水稻莖的生長(zhǎng),高質(zhì)量濃度時(shí)抑制莖的生長(zhǎng)?;衔?在低質(zhì)量濃度(≤50 mg/L) 時(shí)促進(jìn)水稻莖的生長(zhǎng),高質(zhì)量濃度(≥100 mg/L)時(shí)抑制水稻莖的生長(zhǎng)。

    以根長(zhǎng)增長(zhǎng)率為指標(biāo)進(jìn)行分析,化合物1和化合物2抑制水稻根的生長(zhǎng)?;衔?在低質(zhì)量濃度時(shí)(≤100 mg/L)抑制水稻根的生長(zhǎng),高質(zhì)量濃度(≥150 mg/L) 促進(jìn)水稻根的生長(zhǎng)。化合物4,化合物5和化合物6均能有效促進(jìn)水稻根的生長(zhǎng)。

    “有錢(qián)人也賣(mài)里程啊。”粒粒一邊裝錢(qián)包,一邊小聲嘀咕一句。她以為只有自己這樣的窮人才會(huì)巴巴地在網(wǎng)上買(mǎi)里程積分,或者將多余的積分里程賣(mài)出去。

    綜合分析,化合物4和化合物5和低質(zhì)量濃度(≤50 mg/L)的化合物6有利于水稻的成活及生長(zhǎng)。

    2.2 含氟低聚殼聚糖對(duì)油菜生長(zhǎng)活性的影響

    6種含氟低聚殼聚糖對(duì)油菜生長(zhǎng)活性的影響見(jiàn)表2。

    以成活率為指標(biāo)進(jìn)行分析,化合物1,化合物2和化合物5可以抑制油菜的成活;化合物4和化合物6可促進(jìn)油菜的成活;化合物3在低質(zhì)量濃度(≤50 mg/L) 時(shí)促進(jìn)油菜成活,而在高質(zhì)量濃度(≥100 mg/L) 時(shí)抑制油菜的成活。

    表2 6種含氟低聚殼聚糖對(duì)油菜生長(zhǎng)活性的影響

    以莖長(zhǎng)增長(zhǎng)率為指標(biāo)進(jìn)行分析,化合物2和化合物3能夠抑制油菜莖的生長(zhǎng);而化合物1,化合物4,化合物5和化合物6能夠促進(jìn)油菜莖的生長(zhǎng)。

    以根長(zhǎng)增長(zhǎng)率為指標(biāo)進(jìn)行分析,化合物1和化合物2能夠抑制油菜根的生長(zhǎng);而化合物4和化合物5則能夠促進(jìn)油菜根的生長(zhǎng);化合物3在低質(zhì)量濃度(≤50 mg/L)時(shí)對(duì)油菜根的生長(zhǎng)沒(méi)有影響,而高質(zhì)量濃度(≥100 mg/L)時(shí)促進(jìn)油菜根的生長(zhǎng);化合物6在低質(zhì)量濃度(≤150 mg/L)時(shí)抑制油菜根的生長(zhǎng),高質(zhì)量濃度(≥100 mg/L)時(shí)對(duì)油菜根的生長(zhǎng)沒(méi)有影響。

    2.3 含氟低聚殼聚糖對(duì)白圓葉莧生長(zhǎng)活性的影響

    6種含氟低聚殼聚糖對(duì)白圓葉莧的生長(zhǎng)活性的影響見(jiàn)表3。

    以死亡率為指標(biāo)進(jìn)行分析,除了5 mg/L的化合物2和化合物5外,其余所有質(zhì)量濃度的化合物處理后白圓葉莧校正死亡率均為正值,表明除上述2個(gè)處理組外,其余處理組均能有效抑制白圓葉莧的存活。

    從表3可以看出,6種含氟低聚殼聚糖對(duì)白圓葉莧莖長(zhǎng)抑制率和根長(zhǎng)抑制率表現(xiàn)出相同的效果,在所試質(zhì)量濃度范圍內(nèi),6種含氟低聚殼聚糖均能有效抑制白圓葉莧的根和莖的發(fā)育,且抑制率隨著含氟低聚殼聚糖濃度的升高而上升。

    表3 6種含氟低聚殼聚糖對(duì)白圓葉莧的生長(zhǎng)活性的影響

    6種含氟低聚殼聚糖質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與白圓葉莧校正莖長(zhǎng)抑制率、校正根長(zhǎng)抑制率的相關(guān)性分析見(jiàn)表4。

    由表4可知,6種含氟低聚殼聚糖在不同質(zhì)量濃度下對(duì)白圓葉莧莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)抑制的IC50范圍在403.43~8 9321.05 mg/L。目標(biāo)化合物4在不同質(zhì)量濃度下對(duì)白圓葉莧莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)抑制的IC50質(zhì)量濃度低于750 mg/L,其余化合物則均高于800 mg/L,表明化合物4在不同質(zhì)量濃度下對(duì)白圓葉莧莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)的抑制效果較好。

    2.4 含氟低聚殼聚糖對(duì)狗牙根生長(zhǎng)活性的影響

    6種含氟低聚殼聚糖對(duì)狗牙根生長(zhǎng)活性的影響見(jiàn)表5。

    表4 6種含氟低聚殼聚糖質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與白圓葉莧校正莖長(zhǎng)抑制率、校正根長(zhǎng)抑制率的相關(guān)性分析

    表5 6種含氟低聚殼聚糖對(duì)狗牙根生長(zhǎng)活性的影響

    從表5可以看出,6種含氟低聚殼聚糖對(duì)狗牙根的存活率、根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)均有抑制效果,且這種抑制效果隨其質(zhì)量濃度升高而上升。

    其中,化合物5和化合物6在200 mg/L時(shí)對(duì)狗牙根成活抑制率皆為51.43%,個(gè)別化合物在低質(zhì)量濃度(5 mg/L) 時(shí)對(duì)狗牙根成活的影響較小,只有1.43%;化合物3對(duì)狗牙根莖長(zhǎng)的抑制作用是6種含氟低聚殼聚糖中最強(qiáng)的,對(duì)狗牙根莖長(zhǎng)抑制率達(dá)80.49%;化合物1對(duì)狗牙根根長(zhǎng)的抑制作用是6個(gè)含氟低聚殼聚糖中最強(qiáng)的,對(duì)狗牙根根長(zhǎng)抑制率達(dá)78.22%。

    6種含氟低聚殼聚糖濃度對(duì)數(shù)與狗牙根校正莖長(zhǎng)抑制率、校正根長(zhǎng)抑制率的相關(guān)性分析見(jiàn)表6。

    由表6可知,6種含氟低聚殼聚糖在不同質(zhì)量濃度下對(duì)狗牙根莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)抑制的IC50范圍2.51~8 103.08 mg/L;目標(biāo)化合物1,化合物2和化合物3在不同質(zhì)量濃度下對(duì)狗牙根根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)抑制的IC50質(zhì)量濃度在10.98~8 103.08 mg/L;化合物4,化合物和化合物6在不同質(zhì)量濃度下對(duì)狗牙根根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)抑制的IC50在2.51~181.27 mg/L??梢钥闯觯罢呋衔飳?duì)狗牙根的莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)的抑制作用弱于后者化合物;從目標(biāo)化合物4,化合物5和化合物6分析:化合物4和化合物5對(duì)狗牙根的根長(zhǎng)抑制效果較好IC50不高于185 mg/L(該質(zhì)量濃度下效果最佳),其中化合物5的IC50分別為41.22 mg/L和3.30 mg/L,對(duì)狗牙根的根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)抑制效果較好。

    表6 6種含氟低聚殼聚糖質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與狗牙根校正莖長(zhǎng)抑制率、校正根長(zhǎng)抑制率的相關(guān)性分析

    3 結(jié)論與討論

    6種含氟低聚殼聚糖對(duì)4種植物生長(zhǎng)活性對(duì)比分析見(jiàn)表7。

    從表7可以看出,試驗(yàn)研究的6種含氟低聚殼聚糖對(duì)4種植物的生長(zhǎng)活性表現(xiàn)出不同的作用。除了間氟低聚殼聚糖和2,6-二氟低聚殼聚糖的最低質(zhì)量濃度外,其余所有試驗(yàn)組化合物對(duì)白圓葉莧和狗牙根存活及生長(zhǎng)均表現(xiàn)出了較好抑制作用,表明上述6種含氟低聚殼聚糖具備較強(qiáng)的除草能力。而6種含氟低聚殼聚糖對(duì)水稻和油菜在不同質(zhì)量濃度時(shí)表現(xiàn)出不同程度的促進(jìn)或抑制作用。其中2,3-二氟低聚殼聚糖在所有質(zhì)量濃度下均對(duì)水稻和油菜的存活及生長(zhǎng)表現(xiàn)出促進(jìn)作用,鄰氟低聚殼聚糖和間氟低聚殼聚糖則整體表現(xiàn)出抑制作用,對(duì)氟低聚殼聚糖、2,6-二氟低聚殼聚糖和3,5-二氟低聚殼聚糖對(duì)水稻和油菜的存活及生長(zhǎng)表現(xiàn)取決于其質(zhì)量濃度。

    表7 6種含氟低聚殼聚糖對(duì)4種植物生長(zhǎng)活性對(duì)比分析

    目前針對(duì)新品農(nóng)藥生物活性研究,主要是探討其對(duì)植物病原菌和植物種子生長(zhǎng)活性的抑制或促進(jìn)效果。研究了6種含氟低聚殼聚糖對(duì)水稻紋枯病原菌等7種微生物的抑制作用,其對(duì)7種受試菌株都有不同程度的抑菌性,表明這6種含氟低聚殼聚糖有開(kāi)發(fā)成有機(jī)農(nóng)藥的可能性。李釗等人在苯甲?;螂寤衔镏幸敕?,合成了含氟苯甲?;螂?,當(dāng)其質(zhì)量濃度為100 mg/L時(shí),部分目標(biāo)產(chǎn)物對(duì)油菜和水稻種子具有較好的促生長(zhǎng)作用,岳霞麗等人的研究也得出類(lèi)似的結(jié)論,含氟化合物具有較好的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)活性。但質(zhì)量濃度對(duì)化合物活性影響較大,部分質(zhì)量濃度下合成的化合物能夠抑制油菜和水稻的根和莖生長(zhǎng),該研究結(jié)果與其有相似之處,質(zhì)量濃度對(duì)化合物活性有重要影響。

    綜合而言,2,3-二氟低聚殼聚糖既能有效抑制雜草的生長(zhǎng)同時(shí)又能促進(jìn)作物的生長(zhǎng),適合開(kāi)發(fā)有機(jī)農(nóng)藥。對(duì)氟低聚殼聚糖、2,6-二氟低聚殼聚糖和3,5-二氟低聚殼聚糖具有較好的除草活性,但在促進(jìn)作物生長(zhǎng)方面取決于其質(zhì)量濃度,可有條件地開(kāi)發(fā)有機(jī)農(nóng)藥。

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