管氏腫腿蜂替代寄主黃粉甲培育條件標(biāo)準(zhǔn)化探討

薛金龍，徐志強(qiáng)，陳偉

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)昆蟲學(xué)系，北京 100193)

管氏腫腿蜂Scleroderma guani Xiao et Wu屬膜翅目Hymenoptera腫腿蜂科Bethylidae，是防治農(nóng)林蛀干害蟲尤其是天牛類的有效天敵之一，在防治季節(jié)需要大量釋放［2-3］。黃粉甲Tenebrio molitor系腐食性、粉食性昆蟲，食性雜，其幼蟲、蛹、成蟲含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪和多種微量元素［4-6］，可利用麥秸、麥麩、玉米秸、豆秸等原料進(jìn)行人工飼養(yǎng)。近年來有諸多關(guān)于利用黃粉甲作為替代寄主繁育管氏腫腿蜂的報(bào)道，主要集中在最適繁育條件、寄生行為、蜂種復(fù)壯、黃粉甲低溫預(yù)處理等方面［7-13］，已證明它是一種良好的繁蜂用替代寄主，可獲得較高的寄生率與寄生成功率，可用做工廠化繁育商品蜂的原材料。

工廠化繁育商品蜂包括諸多生產(chǎn)環(huán)節(jié)，如培育替代寄主、預(yù)處理、接蜂、繁育、出蜂、種蜂保藏、蜂種復(fù)壯等，這些環(huán)節(jié)的規(guī)范化操作對于實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)必不可少。近年來隨著研究的不斷深入，一些難題得以解決，但其中替代寄主的培育環(huán)節(jié)操作過于粗放且不受重視，往往出現(xiàn)寄主大量死亡，發(fā)育進(jìn)度難以掌握，難以保證高效、穩(wěn)定地獲得適寄生的替代寄主材料，保證生產(chǎn)的計(jì)劃性等問題，因此本研究將黃粉甲的培育條件標(biāo)準(zhǔn)化。在改進(jìn)黃粉甲飼料配方上，有研究指出用麥麩加10%黃粉蟲粉［14］或用蒸餾水加麥麩及0．1 M NaCl萃取的豆粕蛋白培育的黃粉甲接蜂繁育效果較好［15］。本研究以工廠化繁蜂為背景全面考慮黃粉甲培育條件對繁蜂效果的影響，制定出獲得適寄生黃粉甲的標(biāo)準(zhǔn)化培育條件，旨在為工廠化繁蜂技術(shù)提供系統(tǒng)的基本資料。

1 試驗(yàn)

1.1 材料黃粉甲幼蟲購自北京市西苑早市，室溫培育3 d后，用10目篩篩選出個(gè)體接近的健康幼蟲，試驗(yàn)前停喂1 d。管氏腫腿蜂種蜂(以下簡稱雌蜂)來自中國農(nóng)業(yè)大學(xué)系統(tǒng)與進(jìn)化昆蟲學(xué)研究室，羽化后11℃儲(chǔ)藏25 d。麥麩購自北京市西苑早市(同批含水量相同，購置后陽光下曬干，室溫密封儲(chǔ)藏);大白菜和土豆10℃儲(chǔ)藏備用。試驗(yàn)用具及儀器有木質(zhì)培育盒(42 cm×30 cm×10 cm)、10目篩，60目篩、透明塑料培育盒(16 cm×10．5 cm×7 cm)、HANGPING JA5003分析天平、搪瓷盤、滅菌指形管(5 cm×1 cm)、滅菌棉花塞、中科美菱YC-300L醫(yī)用冷藏箱、上海培因MGC-300人工氣候箱等。

1.2 方法考慮到工廠化繁蜂的實(shí)際需求、規(guī)模及成本控制，試驗(yàn)按照二因素(飼料和密度)多水平大樣本設(shè)計(jì)。飼料設(shè)6個(gè)水平:A組麥麩，B組白菜葉，C組土豆片，D組麥麩+白菜葉，E組麥麩+土豆片，F(xiàn)組麥麩+白菜葉+土豆片(混合);前期試驗(yàn)證明培育密度過高會(huì)出現(xiàn)較嚴(yán)重的自相殘殺現(xiàn)象，而培育密度過低則不能充分利用空間及飼料資源，因此設(shè)計(jì)了2，4，6頭/cm23個(gè)較為接近的密度，即每培育盒投入健康幼蟲336頭、672頭和1008頭。試驗(yàn)共18個(gè)處理，每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，在夏季室溫下進(jìn)行，白天為自然陰面光照，夜間無光照，試驗(yàn)時(shí)間30 d。繁育試驗(yàn)條件為溫度(28±1)℃，RH 65%±5%，無光照，時(shí)間約28 d。青飼料(白菜葉、土豆片)與精飼料(麥麩)比例控制在1∶3左右，各處理每次投喂的青飼料大致等量，控制在試蟲每天能取食完90%左右。每天早晨除去殘余青飼料，添加新鮮青飼料，觀察培育盒內(nèi)試蟲的取食情況并及時(shí)添加飼料，避免試蟲饑餓，用60目篩篩除蟲糞及蛻皮，揀出死亡蟲體和新化蛹并計(jì)數(shù)，待大量化蛹時(shí)稱重。將稱完重的蛹于2℃冰箱內(nèi)預(yù)處理2 d［16］后取出，用雌蜂接蜂，蜂蟲比3∶1，每處理接30管，共90管，置于設(shè)定好條件的人工氣候箱內(nèi)繁育。期間觀測統(tǒng)計(jì)各繁蜂參數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)指標(biāo)

存活率(%)=存活數(shù)/總幼蟲數(shù)×100

幼蟲歷期(d)=初化蛹日-試驗(yàn)開始日+1

日化蛹率(%)=日化蛹數(shù)/總幼蟲數(shù)×100

化蛹率(%)=化蛹數(shù)/總幼蟲數(shù)×100

可用蛹率(%)=蛹完好數(shù)/總幼蟲數(shù)×100

百頭蛹重(g)

寄生率(%)=成功產(chǎn)卵管數(shù)/總接蜂管數(shù)×100

寄生成功率(%)=成功出蜂管數(shù)/總接蜂管數(shù)×100

平均單管出蜂量=總出蜂數(shù)/總接蜂管數(shù)

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析所得數(shù)據(jù)用SPSS 20．0統(tǒng)計(jì)分析軟件分析。以存活率、幼蟲歷期、化蛹率、可用蛹率、百頭蛹重、寄生率、寄生成功率、平均單管出蜂量為因變量，以飼料組合類型和培育密度為自變量，進(jìn)行方差分析，采用Duncan法進(jìn)行平均數(shù)差異顯著性比較。以各處理日化蛹率為因變量，以培育天數(shù)為自變量作折線圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同飼料組合和不同密度對黃粉甲存活率的影響精飼料與青飼料適時(shí)適量搭配飼喂能顯著提高幼蟲存活率，而含水量過低的麥麩、過高的白菜及土豆都不利于幼蟲的生長。其原因是飼料含水量過低或過高易使黃粉甲幼蟲患干枯病或軟腐病，因而存活率低。3個(gè)密度組之間無顯著差異。在4頭/cm2密度下采用麥麩+白菜組合飼料培育的黃粉甲，幼蟲存活率最高(表1)。

2.2 不同飼料組合和不同密度對黃粉甲幼蟲歷期的影響3個(gè)飼料組對幼蟲歷期影響效果差不多，而不同培育密度能顯著影響幼蟲歷期，其中4頭/cm2培育幼蟲歷期最短。在4頭/cm2密度下采用麥麩+白菜組合飼料培育，幼蟲歷期最短(表2)。由于前3組未化蛹或化蛹很少，為便于方差分析和多重比較，只對后3組進(jìn)行分析。

表1 不同飼料組合和不同密度培育的黃粉甲存活率(mean±SD) %

表2 不同飼料組合和不同密度培育的黃粉甲幼蟲歷期及化蛹率(mean±SD)

2.3 不同飼料組合和不同密度培育對黃粉甲日化蛹率的影響在4頭/cm2密度下采用麥麩+白菜組合培育，日化蛹率最高。日化蛹高峰期主要集中在培育后的16～19 d，17～18 d達(dá)最高峰，24～26 d再次迎來化蛹高峰(圖1)。因此，生產(chǎn)中須在黃粉甲分級培育得到9齡左右幼蟲后的16 d內(nèi)以足量麥麩+白菜的組合飼喂，之后可適減。

圖1 不同飼料組合和不同密度培育的黃粉甲日化蛹率

2.4 不同飼料組合和不同密度培育對黃粉甲化蛹率的影響不同飼料組合飼喂與不同密度培育均能顯著影響化蛹率，在4頭/cm2密度下采用麥麩+白菜組合培育，化蛹率最高(表2)。

2.5 不同飼料組合和不同密度培育對黃粉甲可用蛹率的影響不同飼料組合飼喂與不同密度培育均能顯著影響可用蛹率。密度過高導(dǎo)致自相殘殺率高，可用蛹率過低;密度過低，可用蛹率反而低，亦不能保證充足的原材料供應(yīng)。在4頭/cm2密度下采用麥麩+白菜組合培育，可用蛹率最高(表3)。

表3 不同飼料組合和不同密度培育的黃粉甲可用蛹率及百頭蛹重(mean±SD)

2.6 不同飼料組合和不同密度培育對黃粉甲百頭蛹重的影響不同飼料組合能顯著影響百頭蛹重，青飼料中，幼蟲更喜食白菜葉。白菜葉能滿足幼蟲生長所需的水分及營養(yǎng)，更重要的是其含有較高的硫代葡萄糖苷可刺激幼蟲取食［17］，盒中分布面積大利于取食，而土豆片則相對不利于取食。因此，麥麩+白菜組合飼喂幼蟲發(fā)育最快，百頭蛹最重。不同培育密度能顯著影響百頭蛹重，隨著培育密度的提高，個(gè)體攝取的營養(yǎng)變少，百頭蛹重越來越小。采用2頭/cm2密度培育，百頭蛹重最大，但化蛹率低且浪費(fèi)培育空間、加大飼料成本和管理上的難度，總體效率必然不及4頭/cm2。因此，在4頭/cm2密度下采用麥麩+白菜組合培育，最適宜(表3)。

2.7 不同飼料組合和不同密度培育對繁蜂效果的影響不同飼料組合對寄生率、寄生成功率無顯著影響，對平均單管出蜂量有顯著影響，麥麩+白菜組合飼喂的平均單管出蜂量最大。不同培育密度能顯著影響寄生率、寄生成功率和平均單管出蜂量，其中2頭/cm2與4頭/cm2差異不顯著，與6頭/cm2差異較顯著，這與對百頭蛹重的影響結(jié)果一致，說明不同飼料組合和不同密度培育影響了寄主大小進(jìn)而影響了平均單管出蜂量(表4)。一定范圍內(nèi)，寄主越大，營養(yǎng)物質(zhì)含量越高，越利于雌蜂的寄生和子代蜂的生長發(fā)育;寄主越小，雌蜂愿意確認(rèn)并在其體表產(chǎn)卵的機(jī)率越小，即便產(chǎn)卵也會(huì)影響子代蜂的生長發(fā)育。

表4 不同飼料組合和不同密度培育的黃粉甲繁育管氏腫腿蜂的寄生率、寄生成功率、平均單管出蜂量(mean±SD)

3 結(jié)論與討論

綜合考慮對存活率、幼蟲歷期、化蛹率、可用蛹率、百頭蛹重、繁蜂效果的影響，最適飼料為麥麩+白菜，最適培育密度為4頭/cm2。采用該組合能夠獲得來源穩(wěn)定、充足的黃粉甲蛹，而且能夠保證其適寄生性從而獲得最適的總體繁蜂效果，保證商品蜂的質(zhì)量，最有利于工廠化繁蜂。

根據(jù)以上研究結(jié)論及實(shí)際繁蜂經(jīng)驗(yàn)，對工廠化繁育管氏腫腿蜂中黃粉甲的標(biāo)準(zhǔn)化培育技術(shù)總結(jié)如下:1)寄主來源。市售幼齡(9齡左右，體長12～14 mm［18］)黃粉甲幼蟲最適宜。要求個(gè)體整齊，爬動(dòng)活躍，間節(jié)色深，體壁光滑。2)培育條件。要求培育室能防鼠、防鳥、防壁虎，并能防止陽光直射，保持相對黑暗，通風(fēng)良好。夏季溫度控制在33℃以下，冬季溫度保持在20℃以上，溫度過高易導(dǎo)致幼蟲死亡，溫度過低幼蟲生長緩慢，不能滿足生產(chǎn)的需求。另外，培育室內(nèi)應(yīng)配有紫外燈(30 W，在1 m處的強(qiáng)度＞70μW/cm2，照射時(shí)間不少于30 min)，定期對培育室進(jìn)行消毒處理。當(dāng)寄主的培育量較大時(shí)，每日所需的青飼料量較大，為了保障青飼料的供給還應(yīng)配有低溫設(shè)備。培育盒可利用舊木料自行制作，常用規(guī)格為42 cm×30 cm×10 cm，在內(nèi)壁四周幼蟲活動(dòng)范圍以上應(yīng)附有3 cm寬的光滑鐵條，并保證培育盒四周、底部及連接處無孔洞，防止幼蟲逃逸。也可將培育盒底部改造成鏤空的鐵絲網(wǎng)面，不僅利于散發(fā)熱量、漏除蟲糞，還節(jié)省人力。分離篩60目即可。3)分級培育。同批購置的幼蟲個(gè)體一般較一致無需分級培育，如遇個(gè)體差異較大則需分級培育，用10目分離篩即可分級。幼蟲分級后分別放入培育盒中，培育密度4頭/cm2。培育盒內(nèi)幼蟲厚度控制在1 cm左右，約168 g(培育盒底面積1053 cm2)，集中于培育室內(nèi)培育。4)培育管理。麥麩要新鮮，在陽光下曬干后室溫密封儲(chǔ)存即可，但不宜長時(shí)間放置，以免變質(zhì)。大白菜應(yīng)去除受傷葉和病葉，儲(chǔ)存溫度為10℃，以保持新鮮，防止腐爛。麥麩可1次加足量(2～3倍)，亦可1次加適量，每天觀察取食進(jìn)度再適量補(bǔ)充。大白菜2～3 d投喂1次，最好使用新鮮白菜葉，投喂前先擦干菜葉表面水分再室溫放置幾分鐘以避免溫度過低傷害蟲體。每次投喂適量，分布均勻，夜晚最好不喂。每天觀察取食情況，及時(shí)添加飼料，避免出現(xiàn)饑餓。可用表面光滑的60目分離篩篩除蟲糞及蛻皮，先檢查分離篩表面是否光滑，篩孔是否完好，若出現(xiàn)漏洞及時(shí)更換;再將幼蟲、蟲糞和剩余飼料一并倒入分離篩內(nèi)，將分離篩稍微傾斜，用口輕輕吹除蛻皮再篩除蟲糞。操作人員需佩戴口罩避免吸入。每3～5 d篩除1次蟲糞，去除蛻皮視情況而定，若幼蟲生長較快，可每隔1～2 d清理1次，一般情況下與篩除蟲糞同時(shí)進(jìn)行。早晚各清理1次，清理時(shí)采用鈍頭鑷子，小心挑出死蟲，注意不要傷及其他幼蟲，同時(shí)及時(shí)清除變質(zhì)的青飼料，適量補(bǔ)充新鮮的青飼料。5)改善措施。除采用以上培育條件外還要注意應(yīng)在分級培育得到9齡左右幼蟲后的16 d內(nèi)以足量麥麩+白菜的組合飼喂;要特別注意及時(shí)撿蛹，在化蛹后1 h內(nèi)及時(shí)揀出的蛹體，體壁都會(huì)保持未破損、未老化的完好狀態(tài)，具有良好的適寄生性。另外，工廠化繁蜂中受雌蜂及其它原材料的供應(yīng)情況、勞力安排、繁育空間等因素的限制，不能做到將所有可用的寄主材料及時(shí)接蜂、轉(zhuǎn)入繁育室內(nèi)繁育，因此如何控制好寄主的發(fā)育進(jìn)度，使其能夠滿足工廠化繁蜂的計(jì)劃要求頗為重要，可分別在分級培育后的1～16 d，20～23 d這兩個(gè)時(shí)間段將寄主幼蟲連同培育盒放入低溫冰箱內(nèi)儲(chǔ)藏(常用溫度10℃，幼蟲發(fā)育遲緩呈休眠狀態(tài))，注意應(yīng)加入適量麥麩(仍可少量進(jìn)食)。但此條件下儲(chǔ)藏時(shí)間一般不超過30 d，若超過30 d，取出培育后適應(yīng)期內(nèi)死亡率較高，恢復(fù)正常生長速度較慢，短期儲(chǔ)藏下幼蟲仍有少量化蛹，可滿足一定的繁蜂需求。

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