小麥胚芽提取物的系統(tǒng)毒性研究和安全性評(píng)價(jià)

目的：研究小麥胚芽提取物的毒理安全性，指導(dǎo)業(yè)內(nèi)化妝品原料企業(yè)在進(jìn)行化妝品原料備案時(shí)的規(guī)范操作。

方法：根據(jù)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》對(duì)小麥胚芽提取物開(kāi)展急性經(jīng)皮毒性實(shí)驗(yàn)、急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)、細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)和體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行系統(tǒng)的毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)。

結(jié)果：小麥胚芽對(duì)家兔急性經(jīng)皮實(shí)驗(yàn)采取一次性限量法，劑量為 2000mg/kg·bw，未見(jiàn)毒性反應(yīng)亦無(wú)個(gè)體死亡現(xiàn)象； 小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)LD50>5000mg/kg·bw，根據(jù)急性經(jīng)口毒性分級(jí)，小麥胚芽提取物屬于與實(shí)際無(wú)毒級(jí)；Ames實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在加或不加S9的情況下，5個(gè)劑量組的細(xì)菌回變菌落數(shù)均未超過(guò)溶劑對(duì)照組的2倍，同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照組回變菌落數(shù)均為溶劑對(duì)照組的2倍以上；體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)中受試物各劑量組致畸變率均小于陽(yáng)性對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.005）。

結(jié)論：在以上實(shí)驗(yàn)條件下，小麥胚芽提取物作為化妝品原料具有良好的安全性。

【基金項(xiàng)目】抗衰類(lèi)化妝品產(chǎn)品及原料功效評(píng)估和安全性評(píng)價(jià)平臺(tái)建設(shè)（廣東省藥品檢驗(yàn)所2024ZDZ15）

【創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目】2024年廣東藥科大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目，Bio-gen A新型化妝品原料——開(kāi)啟細(xì)胞級(jí)科技抗衰時(shí)代（項(xiàng)目號(hào)：S202410573014X ）

關(guān)鍵詞：小麥胚芽提取物；系統(tǒng)毒性；化妝品原料

植物源化妝品原料是指利用植物資源開(kāi)發(fā)的植物提取物、從植物中提取的活性成分或按原料的活性結(jié)構(gòu)合成的化合物。近年來(lái)，隨著消費(fèi)者對(duì)化妝品功效性和安全性重視程度的提高，天然植物護(hù)膚以其天然、綠色、健康的理念深入人心[1]?；瘖y品中的植物活性成分不僅不良反應(yīng)小，而且功效溫和，以植物資源為原料開(kāi)發(fā)的化妝品越來(lái)越受到消費(fèi)者追捧。但是大多數(shù)的植物提取物的化學(xué)成分與其功效的對(duì)應(yīng)關(guān)系缺乏科學(xué)的數(shù)據(jù)支撐和權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)[2]。大部分的原料企業(yè)或化妝品企業(yè)僅依據(jù)經(jīng)驗(yàn)或同行交流進(jìn)行原料生產(chǎn)，這使得植物提取物的制備工藝合理性存疑，質(zhì)量一致性和穩(wěn)定性難以保證[3]?；瘖y品新原料安全是產(chǎn)品質(zhì)量安全的源頭，在2021年5月國(guó)家藥監(jiān)局制定發(fā)布了《化妝品新原料注冊(cè)備案資料管理規(guī)定》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)“《規(guī)定》”）。該法規(guī)中明確規(guī)定了化妝品新原料注冊(cè)備案的資料要求。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)該法規(guī)中新原料毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)要求對(duì)小麥胚芽提取物進(jìn)行了一系列的毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)[4]。

小麥作為中國(guó)主要膳食作物具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其生理活性成分主要集中在小麥加工副產(chǎn)品：胚芽、麩皮和次粉中[5]。小麥胚芽（Wheat Embryo）呈金黃色，占整個(gè)小麥籽粒的2%-3%，內(nèi)含豐富的生物所需的多種功能物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)、膳食纖維、不飽和脂肪酸以及多種生物活性成分，被稱(chēng)為“人類(lèi)天然的營(yíng)養(yǎng)寶庫(kù)”[6]。小麥胚芽提取物不僅可用于食療保健，在美容化妝品方面更具有不凡的魅力。小麥胚芽提取物主要有谷胱甘肽、胚芽蛋白、小麥胚芽油、小麥胚芽凝集素等[7]。已有研究發(fā)現(xiàn)，小麥胚芽油中富含的維生素E和黃酮類(lèi)化合物有助于提高皮膚的抗氧化能力、能刺激皮膚膠原蛋白的生成， 促進(jìn)皮膚細(xì)胞的修復(fù)和再生[8]。小麥胚芽提取物中的還原型谷胱甘肽，還參與清除自由基并抑制酪氨酸酶活性，從源頭抑制黑色素的形成[9]。故小麥胚芽提取物在化妝品行業(yè)具有巨大的開(kāi)發(fā)潛力。

1995年，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（FAO）提出，小麥?zhǔn)鞘澜?類(lèi)常見(jiàn)過(guò)敏食物之一。因小麥中含有豐富的蛋白質(zhì)[5]，如小麥中的清蛋白、球蛋白、谷蛋白、麥醇溶蛋白等可能會(huì)引起嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)，如乳糜瀉腸炎、職業(yè)哮喘、接觸性蕁麻疹等[10]。小麥胚芽提取物中同樣具有這些蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)在小麥胚芽提取物中也有可能會(huì)引起一些不良反應(yīng)。但目前卻缺乏小麥胚芽提取物作為化妝品新原料毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)的科學(xué)數(shù)據(jù)支撐，這依舊是化妝品安全的一個(gè)隱患。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)藥監(jiān)局發(fā)布的《規(guī)定》中新原料的備案要求，對(duì)小麥胚芽提取物進(jìn)行毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)，以期為小麥胚芽提取物作為化妝品原料在毒理學(xué)方面提供一定的理論基礎(chǔ)，指導(dǎo)業(yè)內(nèi)原料企業(yè)在新原料注冊(cè)備案時(shí)的規(guī)范操作。

Part 1材料與方法

1.1受試物

小麥胚芽提取物，批號(hào)：XM221024；由深圳中科欣揚(yáng)生物科技有限公司提供。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及菌株

急性經(jīng)皮實(shí)驗(yàn)用新西蘭白色家兔10只，雌雄各半，普通級(jí)，體重2.3kg～2.6kg。由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK （粵）2019-0035；急性經(jīng)口實(shí)驗(yàn)用健康無(wú)孕小鼠10只，雌雄各半，普通級(jí)，體重19.1g～21.4g。由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK （粵）2022-0002；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料按照標(biāo)準(zhǔn)由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心制定（見(jiàn)表1），使用SPF維持鼠料，符合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)鈷60輻照滅菌，適用于SPF級(jí)和無(wú)菌級(jí)成年大小鼠或生長(zhǎng)、繁殖階段以外的大小鼠。動(dòng)物飲水采用經(jīng)紫外線(xiàn)照射等處理后的純水。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)前在動(dòng)物房先適應(yīng)3天，檢疫合格后使用。動(dòng)物飼養(yǎng)溫度23℃-24℃，相對(duì)濕度45%-68%，自由采食和飲水。

Ames實(shí)驗(yàn)采用組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門(mén)氏菌突變菌株TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535。經(jīng)上海寶錄生物科技有限公司購(gòu)自美國(guó)Moltox公司，標(biāo)準(zhǔn)株源于Ames實(shí)驗(yàn)室，經(jīng)生物學(xué)檢定合格后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；體外哺乳動(dòng)物染色體畸變實(shí)驗(yàn)使用中國(guó)地鼠肺細(xì)胞株（CHL），來(lái)源于中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)，經(jīng)生物學(xué)鑒定無(wú)支原體污染后使用。

1.3試劑

Ames實(shí)驗(yàn)、體外染色畸變實(shí)驗(yàn)采用滅菌純化水為溶劑對(duì)照；哺乳動(dòng)物微粒體酶（S9；美國(guó)Moltox）；胰蛋白胨、牛肉浸膏（廣東環(huán)凱生物科技有限公司）；瓊脂粉（900-950g/cm2；廣東環(huán)凱生物科技有限公司）；瓊脂粉（1200g/cm2；上海如吉生物科技發(fā)展有限公司）；D-生物素、輔酶Ⅱ（氧化型）、葡萄糖-6-磷酸鈉鹽（上海源葉生物科技有限公司）；L-組氨酸（上海伯奧生物科技有限公司）；除菌濾膜（0.22μm，MTLLEX）；Dexon （Ehrenstorfer GmbH）；NaN3 （天津市福晨化學(xué)試劑廠(chǎng)）；絲裂霉素C （羅恩試劑公司）；2-氨基芴（Aladdin）；1，8-二羥蒽醌（Aladdin）；DMEM（GIBCO，賽默飛）；胎牛血清（Biological Industries Israel Beit Haemek LTD）；胰酶、環(huán)磷酰胺（麥克林）；秋水仙素（普西唐）；Giemsa染液（廣州和為化工有限公司）。

1.4儀器

LRH-250F型生化培養(yǎng)箱；MLS-3781型高壓滅菌器；BT125D電子天平；TW20型電熱恒溫震蕩水浴箱；ED53恒溫干燥箱；SANYO二氧化碳培養(yǎng)箱；OLYPUMS IX71倒置相差顯微鏡；HITACHI CR21離心機(jī)；Julabo恒溫水浴箱；蔡司染色體分析系統(tǒng)；METTLER電子天平。

1.5實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1家兔急性經(jīng)皮毒性實(shí)驗(yàn)

根據(jù)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》中急性經(jīng)皮毒性實(shí)驗(yàn)，本身低毒的受試物，可采用一次最大限度實(shí)驗(yàn)，受試物劑量為2000mg/kg。選取家兔10只，雌雄各半。試驗(yàn)前將家兔軀干背部被毛剪掉，剪毛過(guò)程不損傷皮膚表面。試驗(yàn)前先以純化水潤(rùn)濕家兔皮膚，取受試物粉末均勻涂敷于動(dòng)物背部皮膚染毒區(qū)，涂皮面積約為180cm2。用無(wú)刺激玻璃紙、紗布覆蓋，無(wú)刺激膠布固定。封閉接觸24h。染毒結(jié)束后，用純化水清除殘留受試物。染毒后觀(guān)察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的中毒表現(xiàn)和死亡情況，包括被毛和皮膚、眼睛和黏膜以及呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肢體運(yùn)動(dòng)和行為活動(dòng)等的改變。觀(guān)察期內(nèi)存活動(dòng)物每周稱(chēng)重、觀(guān)察期結(jié)束存活動(dòng)物應(yīng)稱(chēng)重，處死后進(jìn)行尸檢。

1.5.2小鼠急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)

本實(shí)驗(yàn)參照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)中一次最大限度試驗(yàn)法進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)時(shí)精密稱(chēng)取受試物3.2951g溶于純化水中，終體積為6.5mL。每組5只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（雌雄分開(kāi)），試驗(yàn)前禁食過(guò)夜，試驗(yàn)當(dāng)天采用經(jīng)口灌胃給予受試物溶液。體積為0.2ml/20g，給予的劑量為5069mg/kg，觀(guān)察期為14天。染毒后繼續(xù)禁食3h～4h。觀(guān)察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的中毒表現(xiàn)和死亡情況，觀(guān)察期內(nèi)存活動(dòng)物每周稱(chēng)重、觀(guān)察期結(jié)束存活動(dòng)物應(yīng)稱(chēng)重，處死后進(jìn)行尸檢。

1.5.3細(xì)菌回復(fù)突變（Ames）實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)參照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》中細(xì)菌回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)中平板滲入法進(jìn)行試驗(yàn)。以經(jīng)鑒定符合生物學(xué)要求的組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門(mén)氏菌TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535試驗(yàn)菌株進(jìn)行試驗(yàn)。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將樣品設(shè)置5個(gè)劑量組（加代謝活化系統(tǒng)（+S9）：64.96 、 32.48、16.24、8.12和4.06mg/皿；不加代謝活化系統(tǒng)（-S9）：32.48、16.24、8.12、4.06和2.03mg/皿）。同時(shí)設(shè)置3個(gè)對(duì)照組，分別為空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組（滅菌純化水）、陽(yáng)性對(duì)照組（ -S9：Dexon （50μg/皿）作為T(mén)A97a、TA98菌株的陽(yáng)性對(duì)照物；NaN3 （1.5μg /皿）作為T(mén)A100菌株的陽(yáng)性對(duì)照物；絲裂霉素C（0.5μg/皿）作為T(mén)A102菌株的陽(yáng)性對(duì)照物；NaN3 （ 0.5μg/皿）作為T(mén)A1535菌株的陽(yáng)性對(duì)照物； +S9：2-氨基芴（10μg/皿）作為 TA97a、TA98、TA100、TA1535菌株陽(yáng)性對(duì)照物；1，8-二羥蒽醌（60μg/皿）作為T(mén)A102菌株陽(yáng)性對(duì)照物）。

每個(gè)組別需要3個(gè)平行皿，計(jì)數(shù)每皿回變菌落數(shù)，并求平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)受試物回變菌數(shù)超過(guò)溶劑對(duì)照組菌數(shù)的2倍及以上，且存在劑量依賴(lài)性關(guān)系則結(jié)果為陽(yáng)性。試驗(yàn)在相同的情況下重復(fù)進(jìn)行3次。

1.5.4體外哺乳動(dòng)物染色體畸變實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)參照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》體外哺乳動(dòng)物染色體畸變實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。選用生物鑒定合格的CHL細(xì)胞株，根據(jù)細(xì)胞毒性（MTT法）的結(jié)果，在加與不加S9的情況下，受試物濃度為5000mg/L時(shí)細(xì)胞存活率均大于50%。本實(shí)驗(yàn)設(shè)5000、2500和1250mg/L 3個(gè)劑量組，并設(shè)置陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組。將CHL細(xì)胞按1×106mL的密度接種于6孔板中，置37℃二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h后，加入各組受試物。陰性對(duì)照組給予滅菌純化水（+S9/-S9）；陽(yáng)性對(duì)照組分別給予環(huán)磷酰胺（+S9） 20mg/L，絲裂霉素C （- S9） 2mg/L；+S9組均加入0.3mL S9混合物；-S9組均不加S9混合物。

將CHL細(xì)胞經(jīng)24-48小時(shí)培養(yǎng)后，棄其培養(yǎng)液，收獲細(xì)胞前4小時(shí)，加入秋水仙素溶液（終末濃度為1μg/ml），阻斷細(xì)胞于有絲分裂中期相。按常規(guī)方法消化、低滲、固定、制片和染色，每一處理組選100個(gè)分散良好的中期分裂相（染色體數(shù)為2n±2）進(jìn)行染色體分析。觀(guān)察記錄顯微鏡視野畸變類(lèi)型及畸變數(shù)目，計(jì)算染色體畸變細(xì)胞率。（裂隙和多倍體不作為畸變率統(tǒng)計(jì)）

畸變率/%=（染色異常細(xì)胞數(shù)-裂隙數(shù)-多倍體積）/100×100%

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料采用非參數(shù)統(tǒng)計(jì)法，并按動(dòng)物性別分別統(tǒng)計(jì)； 計(jì)量資料用單因素方差分析，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（ x ！±s） 表示，以 P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

Part 2結(jié)果

2.1 家兔急性經(jīng)皮毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

小麥胚芽提取物對(duì)2種性別家兔的進(jìn)行經(jīng)皮毒性試驗(yàn)，一次經(jīng)皮涂抹劑量為2000mg/kg·bw。由表2可知，家兔的體重變化符合動(dòng)物正常生長(zhǎng)規(guī)律。在14天的觀(guān)察期內(nèi)家兔毛發(fā)、皮膚、眼睛和黏膜、呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肢體運(yùn)動(dòng)和行為活動(dòng)等均未見(jiàn)異常。上述結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)條件下，小麥胚芽提取物在家兔急性經(jīng)皮實(shí)驗(yàn)時(shí)未觀(guān)察到皮膚毒性和個(gè)體死亡。

2.2小鼠急性經(jīng)口毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

小麥胚芽提取物對(duì)2種性別的小鼠進(jìn)行急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)，一次灌胃劑量達(dá) 5069mg/kg·bw。由表3可知，小鼠體重變化情況符合動(dòng)物正常生長(zhǎng)規(guī)律。在14天的觀(guān)察期內(nèi)小鼠毛發(fā)、皮膚、眼睛和黏膜、呼吸、循環(huán)、自主神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肢體運(yùn)動(dòng)和行為活動(dòng)等均未見(jiàn)異常。處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后檢查胸腹部主要臟器，包括肝臟、脾、胃、腸、心臟、腎臟、肺部、腦部和生殖系統(tǒng)，均未見(jiàn)任何明顯病理變化。上述結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)條件下，小麥胚芽提取物的小鼠急性經(jīng)口毒性L(fǎng)D50大于5000mg/kg，按照《化妝品安全技術(shù)規(guī)范（2015年版）》中經(jīng)口毒性分級(jí)，小麥胚芽提取物屬于實(shí)際無(wú)毒級(jí)。

2.3細(xì)菌回復(fù)突變（Ames）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

受試樣品小麥胚芽提取物對(duì)鼠傷寒沙門(mén)氏菌TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535等5種試驗(yàn)菌株的細(xì)菌回復(fù)突變結(jié)果顯示（表4、表5），在加或不加S9的情況下，5個(gè)劑量組的細(xì)菌回變菌落數(shù)均沒(méi)有超過(guò)溶劑對(duì)照組的2倍，同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照組回變菌落數(shù)均為溶劑對(duì)照組的2倍以上。因此，在本實(shí)驗(yàn)的受試物劑量和觀(guān)察條件下，小麥胚芽提取物未呈現(xiàn)致突變性。

2.4體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果

細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6：由表6可見(jiàn)，在加或不加S9的情況下，受試物濃度為5000mg/L時(shí)，細(xì)胞存活率均大于50%。故正式試驗(yàn)時(shí)受試物濃度選取了5000mg/L、2500mg/L、1250mg/L 3個(gè)劑量組。

由表7可知，陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組相比，在-S9/+S9條件下，染色體畸變細(xì)胞率均有顯著性差異（P<0.01）；小麥胚芽提取物與陰性對(duì)照組相比，在-S9/+S9條件下，染色體畸變細(xì)胞率均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。因此，在該試驗(yàn)條件下，小麥胚芽提取物的體外哺乳動(dòng)物染色體畸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性。

Part 3討論

小麥作為人類(lèi)主要的糧食作物，在世界各地都廣泛種植，具有悠久的食用歷史[11]。小麥具有豐富的蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸以及多種活性成分。小麥胚芽的充分利用將具有很高的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。隨著小麥胚芽功能性成分提取技術(shù)漸趨成熟，小麥胚芽提取物具有廣闊的開(kāi)發(fā)與利用前景。

目前小麥胚芽及其加工產(chǎn)品主要集中于食品和保健品領(lǐng)域[12]。隨著國(guó)內(nèi)對(duì)小麥胚芽的應(yīng)用研究逐漸加深，小麥胚芽提取物在醫(yī)藥和化妝品領(lǐng)域展現(xiàn)了極高的應(yīng)用價(jià)值[11]。同時(shí)小麥胚芽油因其豐富的營(yíng)養(yǎng)成分被廣泛用于化妝品領(lǐng)域， 小麥胚芽提取物可以提高皮膚的抗氧化能力、刺激膠原蛋白的生成， 促進(jìn)皮膚細(xì)胞的再生和修復(fù)[13]。Raghda Zakaria等[13]人連續(xù)3周使用摻入20%小麥胚芽油的藥膏可以使大鼠傷口直徑縮小90%， 傷口恢復(fù)50%。

雖然小麥胚芽提取物的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，但是目前仍缺乏小麥胚芽提取物的毒理學(xué)安全評(píng)價(jià)?；瘖y品安全性評(píng)價(jià)是化妝品新原料注冊(cè)備案的必備環(huán)節(jié)，主要以毒理學(xué)領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)研究為手段，通過(guò)對(duì)化妝品原料的毒性進(jìn)行全面系統(tǒng)的研究，掌握物質(zhì)有無(wú)毒性、毒性大小等，并依次推斷該原料是否可以作為化妝品新原料進(jìn)行注冊(cè)備案。

小麥胚芽提取物作為化妝品原料主要的暴露途徑是以經(jīng)皮涂抹的方式，也可能經(jīng)口攝入或被兒童誤食等情況，故先對(duì)小麥胚芽提取物進(jìn)行急性經(jīng)皮和急性經(jīng)口實(shí)驗(yàn)。采用一次限量法給藥，以期在短期內(nèi)了解小麥胚芽提取物是否對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體征產(chǎn)生損傷和是否導(dǎo)致動(dòng)物死亡等方面的毒性信息。獲取參數(shù)作為急毒分級(jí)的主要依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小麥胚芽提取物對(duì)家兔急性經(jīng)皮毒性經(jīng)過(guò)一次性給藥2000mg/kg·bw，未見(jiàn)皮膚毒性和個(gè)體死亡；小麥胚芽提取物對(duì)小鼠急性經(jīng)口實(shí)驗(yàn)的LD50>5000mg/kg·bw，根據(jù)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中經(jīng)口毒性分級(jí)，小麥胚芽提取物屬實(shí)際無(wú)毒。

遺傳毒性研究主要用于預(yù)測(cè)化合物潛在的遺傳毒性和致癌性[14]。目前遺傳毒性的檢測(cè)方法主要有基因突變檢測(cè)、對(duì)染色體和染色體組畸變檢測(cè)以及DNA損傷的檢測(cè)?！兑?guī)定》中明確規(guī)定化妝品原料在備案時(shí)必須要有遺傳毒性實(shí)驗(yàn)。因?yàn)樵险T發(fā)基因突變和染色體畸變的能力可能不一致，為避免單一實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到假陰性結(jié)果，故遺傳毒性實(shí)驗(yàn)最少應(yīng)包括一項(xiàng)基因突變實(shí)驗(yàn)和一項(xiàng)染色體畸變實(shí)驗(yàn)[15]。故本實(shí)驗(yàn)采取Ames實(shí)驗(yàn)和體外哺乳動(dòng)物染色體突變實(shí)驗(yàn)對(duì)小麥胚芽提取物進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。Ames實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在不加代謝活化系統(tǒng)的情況下，無(wú)論是否添加S9，5個(gè)劑量組的細(xì)菌回變菌落數(shù)均沒(méi)有超過(guò)溶劑對(duì)照組的2倍，同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照組回變菌落數(shù)均為溶劑對(duì)照組的2倍以上。因此，在本實(shí)驗(yàn)的受試物劑量和觀(guān)察條件下，小麥胚芽提取物未呈現(xiàn)致突變性；體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)中受試物各劑量組致畸變率均小于陽(yáng)性對(duì)照組，且具有顯著性差異（P<0.005）。

以上結(jié)果表明，在本實(shí)驗(yàn)的研究劑量和觀(guān)察條件下，小麥胚芽提取物在急性經(jīng)口毒性中屬于實(shí)際無(wú)毒物、無(wú)急性皮膚刺激性、無(wú)致基因突變毒性、亦無(wú)致染色體畸變毒性。本研究結(jié)果為小麥胚芽提取物作為化妝品原料的安全性評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

作者介紹

第一作者 陳琪：供職于廣東省藥品檢驗(yàn)所，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局化妝品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，從事藥物安全性評(píng)價(jià)及藥理毒理研究

通訊作者 顏林：供職于廣東省藥品檢驗(yàn)所，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局化妝品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，從事醫(yī)療器械/藥包材的檢驗(yàn)及標(biāo)準(zhǔn)化研究

盧麗，王琳：供職于廣東藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院

許姿敏，陳素珍：供職于廣東省藥品檢驗(yàn)所，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局化妝品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

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