自擬中藥方劑對(duì)雞傳染性支氣管炎的防治效果評(píng)價(jià)

摘 要：試驗(yàn)旨在研究自擬的中藥方劑對(duì)雞傳染性支氣管炎（IB）防治效果。將480只雛雞分為4組，設(shè)為預(yù)防組、治療組、陽(yáng)性對(duì)照組（21 d攻毒，不使用任何藥物）、空白對(duì)照組（不攻毒不使用任何藥物），其中預(yù)防組和治療組均設(shè)有高、中、低劑量組，每梯度60只。預(yù)防組高、中、低劑量組對(duì)19日齡肉雞分別按照1%、0.5%、0.25%比例拌料飼喂，連用2 d，到21日齡后，肉雞采用滴鼻感染胚毒0.2 mL/只；治療組對(duì)21日齡肉雞均采用滴鼻感染胚毒0.2 mL/只，當(dāng)攻毒后出現(xiàn)明顯雞傳染性支氣管炎癥狀后，高、中、低劑量組分別按照1%、0.5%、0.25%比例拌料飼喂，連用7 d。通過(guò)對(duì)各組肉雞臨床表現(xiàn)記錄、免疫器官指數(shù)、血清細(xì)胞因子INF-?、TNF-β水平測(cè)定來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)。試驗(yàn)顯示，在攻毒IBV前使用中藥制劑拌料可大大降低發(fā)病率，與對(duì)照組相比差異顯著（Plt;0.05），高、中劑量組差異與低劑量組相比差異顯著（Plt;0.05）。攻毒IBV后，采用中藥制劑治療各組治愈率均達(dá)到60%以上，其中高、中劑量組治愈率分別為92%、83%，與低劑量組相比差異顯著（Plt;0.05）；感染雞支氣管炎后對(duì)雞只的胸腺、腎臟和法氏囊免疫器官均造成了一定的損傷，但使用該自擬中藥后有一定的修復(fù)增強(qiáng)作用，數(shù)據(jù)表明，28 d時(shí)各組指標(biāo)均顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（Plt;0.05），其中以治療高劑量組效果為佳；無(wú)論是預(yù)防組還是治療組，各用藥組人工感染后雛雞血清中的INF-?、TNF-β質(zhì)量濃度均隨著用藥劑量的增加而升高，且均顯著高于空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），預(yù)防組在25 d（即攻毒5 d）時(shí)，雛雞血清中的INF-?質(zhì)量濃度達(dá)到最高值，治療組在28 d（即攻毒后8 d），濃度達(dá)到峰值，說(shuō)明該方劑對(duì)兩種細(xì)胞因子有誘生作用。綜上所述，該中藥方劑對(duì)IB有很好的防治效果，且以高、中劑量防治效果為佳。

關(guān)鍵詞：中藥方劑；雞傳染性支氣管炎；防治

中圖分類(lèi)號(hào)：S853.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1673-1085（2025）04-0023-06

雞傳染性支氣管炎（IB）是由雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）引起雞的一種急性高度接觸性呼吸道傳染病，以氣管啰音、咳嗽、打噴嚏、幼雞流鼻涕、產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋量減少和蛋的品質(zhì)下降為特征，感染雞常因呼吸道、腎臟或消化道感染而引起死亡[1]。目前，該病在養(yǎng)雞行業(yè)廣泛流行，臨床上以疫苗預(yù)防為主，但由于該病毒變異速度較快，免疫失敗及其他免疫抑制引起的發(fā)病仍層出不窮；而且在西藥治療中，由于大劑量使用抗生素，造成家禽對(duì)抗生素逐漸出現(xiàn)耐藥性。根據(jù)相關(guān)研究表明[2-3]，中藥能夠抑制或阻止病毒吸附細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，增加機(jī)體胸腺、脾臟和腔上囊的重量，促進(jìn)機(jī)體免疫器官發(fā)育，提升白細(xì)胞水平，增強(qiáng)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)功能，還可通過(guò)對(duì)下丘腦-垂體-腎上腺軸的影響抑制炎癥介質(zhì)來(lái)發(fā)揮抗炎作用，通過(guò)誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生，促進(jìn)免疫監(jiān)視、免疫自身穩(wěn)定和免疫防疫用來(lái)預(yù)防和治療雞傳染性支氣管炎。因此，筆者通過(guò)對(duì)不同單味中藥的配伍和劑量研究，成功研制出一種原材料來(lái)源廣泛、成本低廉、副作用小、使用效果好的中藥組方，并通過(guò)對(duì)雛雞采用不同處理方式進(jìn)一步研究了其對(duì)雞傳染性支氣管炎的防治效果。

1" 試驗(yàn)材料

1.1" 試驗(yàn)動(dòng)物

1日齡AA肉仔雞480只，購(gòu)自山東省菏澤市某孵化場(chǎng)。SPF雞胚，購(gòu)自北京勃林格殷格翰維通生物技術(shù)有限公司。

1.2" 試驗(yàn)毒株

本試驗(yàn)供試病毒為IBV-M41，由菏澤學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室提供。將IBV病毒懸液作10倍系列稀釋?zhuān)∵m宜稀釋度，加入青霉素1 000 U/mL、鏈霉素1 mg/mL，按照每胚0.2 mL接種10日齡雞胚尿囊腔。從最高稀釋度開(kāi)始接種，每個(gè)稀釋度接種6枚，同時(shí)設(shè)生理鹽水作為對(duì)照，37 ℃恒溫培養(yǎng)一周，每天照蛋2～3次。觀察記錄雞胚的死亡數(shù)或病變情況，若出現(xiàn)胚體蜷縮不動(dòng)、血管纖細(xì)脫落可判定為死亡胚；若血管粗大、胚體自然增大可判定為成活胚。根據(jù)記錄分別計(jì)算出各稀釋度死亡或出現(xiàn)病變的雞胚的百分率，按 Reed-Muench 法計(jì)算出該IBV-M41的半數(shù)致死量（ELD50）為10-6.5/0.1 mL。

1.3" 試驗(yàn)藥物

自擬發(fā)明的一種中草藥配方，主要由以下原料組成：金銀花25～30 g，黃芩20～25 g，連翹20～25 g，黃連25～28 g，梔子25～30 g，黃芪18～20 g，苦杏仁20～22 g，桔梗26～28 g，浙貝18～21 g，黨參15～16 g，甘草15～20 g，白頭翁15～20 g，黃柏12～15 g，魚(yú)腥草10～12 g。將所有中藥材原料取最高質(zhì)量上限混合后通過(guò)高速粉碎機(jī)超微處理后，將原生藥材的細(xì)胞壁完全打破，得到直徑達(dá)到納米級(jí)的藥粉備用。

1.4" 試驗(yàn)儀器

恒溫箱、超凈工作臺(tái)、微量移液器、離心機(jī)、渦旋震蕩儀、低溫冰箱、分光光度計(jì)等。

2" 試驗(yàn)方法

2.1" 動(dòng)物分組及處理

將480只1日齡無(wú)IB抗體的AA肉仔雞，使用全價(jià)肉雛雞飼料（購(gòu)自菏澤市）常規(guī)飼養(yǎng)，飼料中不含任何抗菌藥物，自由采食飲水，飼養(yǎng)至19日齡備用，期間不接種傳染性支氣管炎疫苗。隨機(jī)將480只肉仔雞分為4組，I組為預(yù)防試驗(yàn)組（180只），Ⅱ組為治療試驗(yàn)組（180只），Ⅲ組為陽(yáng)性對(duì)照組（60只），Ⅳ組為空白對(duì)照組（60只），均置于飼養(yǎng)條件完全相同的情況下隔離籠養(yǎng)。預(yù)防試驗(yàn)組：將180只19日齡肉仔雞分為3組，每組60只，將自擬中藥制劑按照高、中、低不同劑量（1%、0.5%、0.25%）拌料飼喂，連用2 d，到21日齡后，對(duì)3組肉雞采用滴鼻感染IBV胚毒0.2 mL/只。治療試驗(yàn)組：將180只21日齡肉仔雞分為3組，每組60只，采用滴鼻感染IBV胚毒0.2 mL/只，當(dāng)攻毒后出現(xiàn)明顯雞傳染性支氣管炎癥狀后，開(kāi)始使用中藥配方按照高、中、低3種不同劑量（1%、0.5%、0.25%）治療，連續(xù)拌料飼喂7 d。陽(yáng)性對(duì)照組：同治療組攻毒方式和劑量一致，但不進(jìn)行藥物處理。空白對(duì)照組：既不攻毒也不進(jìn)行藥物處理。

2.2" 評(píng)價(jià)指標(biāo)

2.2.1" 臨床表現(xiàn)指標(biāo)" 發(fā)病率：各組出現(xiàn)雞傳染性支氣管炎典型癥狀發(fā)病的雞只占該組試驗(yàn)雞只的比例；死亡率：臨床及病理解剖確診為感染雞傳染性支氣管炎病毒并死亡的雞只占該組試驗(yàn)雞只的比例；保護(hù)率：未出現(xiàn)雞傳染性支氣管炎典型癥狀發(fā)病的雞只占該組試驗(yàn)雞只的比例；治愈率：出現(xiàn)雞傳染性支氣管典型癥狀，使用該中草藥制劑給藥后，精神狀態(tài)、食欲、典型呼吸癥狀等恢復(fù)正常的雞只占該組試驗(yàn)雞只的比例。

2.2.2" 免疫器官" 指數(shù)將雛雞飼養(yǎng)至第25、30日齡時(shí)，各組隨機(jī)選取5只，然后剖殺、摘取胸腺、脾臟和法氏囊，用濾紙吸取器官表面水分后進(jìn)行稱(chēng)重，并分別計(jì)算其指數(shù)。免疫器官指數(shù)=免疫器官重量（mg）/體重（g）。

2.2.3" 細(xì)胞因子檢測(cè)" 于25、28、30日齡從各組隨機(jī)抽取5只進(jìn)行翅下采血，放置4 ℃冰箱析出血清，用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒的測(cè)定步驟進(jìn)行INF-?、TNF-β細(xì)胞因子質(zhì)量濃度的測(cè)定。

2.3" 數(shù)據(jù)分析

用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素方差分析比較各組間的數(shù)據(jù)差異性，使用最小顯著差數(shù)法（LSD）來(lái)兩兩比較，顯著水平為Plt;0.05（雙尾檢驗(yàn)）。

3" 試驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1" 臨床觀察及治療效果與分析

自擬中藥制劑對(duì)雞傳染性支氣管炎臨床防治效果見(jiàn)表1。從表1可以看出，I組：在攻毒IBV前，采用高、中、低3種不同比例中藥制劑拌料預(yù)防，傳染性支氣管炎發(fā)病率顯著低于對(duì)照組（Plt;0.05），預(yù)防效果明顯；不同劑量組間相比，低劑量組發(fā)病率明顯高于高、中劑量組（Plt;0.05），但高、中組間差異不顯著，說(shuō)明自擬中藥制劑預(yù)防用藥量對(duì)雞傳染性支氣管發(fā)病率的影響較大。Ⅱ組：攻毒IBV后用中藥制劑治療，治愈率為60%～92%，其中高、中劑量組治愈率較高，分別為92%、83%，低劑量組治療效果最差（Plt;0.05），說(shuō)明治療劑量對(duì)雞傳染性支氣管病毒抑制作用影響較大，以高、中劑量治療效果為佳。

3.2" 免疫器官指數(shù)測(cè)定結(jié)果與分析

自擬中藥制劑對(duì)各組雞只免疫器官指數(shù)的影響結(jié)果見(jiàn)表2。

3.2.1" 對(duì)胸腺指數(shù)的影響" 25 d：各給藥組胸腺指數(shù)均顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），顯著低于空白對(duì)照組（P＜0.05），但各用藥組間無(wú)明顯差異。30 d：各給藥組胸腺指數(shù)均顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），且治療高劑量組的胸腺指數(shù)明顯高于其他各組（P＜0.05），治療組各組的胸腺指數(shù)顯著高于預(yù)防組中、低劑量組（P＜0.05），其它組間差異不顯著。隨著日齡的增加，各組的胸腺指數(shù)均有所升高，但除了治療高劑量組前后差異較為顯著，其余各組差異不顯著，說(shuō)明隨著日齡增加，雞自身免疫指數(shù)數(shù)值雖會(huì)有一定上升，但高劑量用藥對(duì)機(jī)體胸腺指數(shù)的提升影響較為明顯。綜上，說(shuō)明該中藥制劑對(duì)雞傳染性支氣管炎有一定預(yù)防和治療作用，且以高劑量用藥效果最顯著。

3.2.2" 對(duì)脾臟指數(shù)的影響" 25 d：除了預(yù)防中、低劑量組外，其余各給藥組的脾臟指數(shù)顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），各給藥組與空白對(duì)照組之間差異不顯著（P＞0.05），但治療高劑量組脾臟指數(shù)顯著高于中、低治療組（P＜0.05）。30 d：除了預(yù)防低劑量組外，各給藥組的脾臟指數(shù)均顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05），除治療高、中劑量組外，其他用藥組均顯著低于空白對(duì)照組（P＜0.05），治療高劑量組脾臟指數(shù)顯著高于低治療組（P＜0.05）。隨著給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，明顯發(fā)現(xiàn)，30 d不同劑量治療組的脾臟指數(shù)比25 d均有所增高，而預(yù)防組脾臟指數(shù)下降，且預(yù)防高劑量脾臟指數(shù)顯著低于25d，說(shuō)明該中藥制劑作為治療用藥要比預(yù)防用藥的效果更好，且用藥劑量越多，效果越佳。

3.2.3" 對(duì)法氏囊指數(shù)的影響" 用藥期間，各給藥組的法氏囊指數(shù)顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05）。25 d：不同劑量預(yù)防用藥組間差異顯著（P＜0.05），預(yù)防高劑量組顯著高于空白對(duì)照組（P＜0.05），治療組間差異不顯著。30 d：預(yù)防高劑量組法氏囊指數(shù)顯著高于預(yù)防低劑量組（P＜0.05），與中劑量組無(wú)明顯差異；治療高劑量組法氏囊指數(shù)顯著高于治療中、低劑量組，其余各組差異不顯著（P＞0.05）；隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，預(yù)防中、低劑量組法氏囊指數(shù)均有所增加。說(shuō)明試驗(yàn)雞接種IBV后法氏囊功能受損，但使用高劑量中藥制劑對(duì)法氏囊有一定的恢復(fù)作用，起到了很好的治療效果，而且預(yù)防用藥的效果也較為理想。

3.3" 血液中細(xì)胞因子的測(cè)定結(jié)果與分析

自擬中藥制劑對(duì)各組雞只細(xì)胞因子影響結(jié)果見(jiàn)表3。

從表3中可以得出，無(wú)論是預(yù)防組還是治療組，各用藥組人工感染后雛雞血清中的IFN-γ質(zhì)量濃度均隨著用藥劑量的增加而升高，且均顯著高于空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（P＜0.05）。預(yù)防組在25 d（即攻毒5d）時(shí)，雛雞血清中的IFN-γ質(zhì)量濃度達(dá)到最高值，而治療組在28 d（即攻毒后8 d）時(shí)，濃度達(dá)到峰值。人工感染后雛雞血清中的TNF-β質(zhì)量濃度與血清中的IFN-γ質(zhì)量濃度趨勢(shì)表現(xiàn)基本一致。說(shuō)明，該試驗(yàn)中所用中藥方劑可促使雛雞血清中的INF-?和TNF-β質(zhì)量濃度不斷升高，且在藥物使用結(jié)束后達(dá)到最高數(shù)值，說(shuō)明該方劑對(duì)兩種細(xì)胞因子均有誘生作用。

4" 討論

李俊賢等[4]采用雞胚培養(yǎng)方法對(duì)抗雞傳染性支氣管炎病毒中藥進(jìn)行了篩選，結(jié)果顯示桔梗、魚(yú)腥草、宣肺敗毒方、絞股藍(lán)、蒲公英、甘草對(duì)IBV增殖均有抑制作用，其中以桔梗抑制效果最佳。黃中利等[5]建立雞人工混合感染雞副嗜血桿菌和傳染性支氣管炎病毒模型，并通過(guò)試驗(yàn)觀察中藥抗病毒沖劑的治療效果，結(jié)果顯示該藥具有抗病毒消炎作用，能用于治療由IBV和雞副嗜血桿菌引起的呼吸道病。吳德峰等[6]研制的魚(yú)腥草抗病毒合劑對(duì)人工攻毒引起的禽法氏囊炎有很好的治療作用，可以不斷增強(qiáng)小白鼠的巨噬細(xì)胞吞噬功能，促進(jìn)淋巴細(xì)胞玫瑰花結(jié)形成，并能不斷誘導(dǎo)抗生素產(chǎn)生，增強(qiáng)動(dòng)物的免疫能力。李劍勇等[7]指出，魚(yú)腥草、甘草和黃芪都能誘導(dǎo)產(chǎn)生抗生素，促使T細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞在病毒感染的部位大量聚集，釋放IFN-γ、IFN-α并形成足夠的濃度，從而在基因轉(zhuǎn)錄、翻譯兩個(gè)水平上抑制病毒大分子的合成，并誘導(dǎo)鄰近正常細(xì)胞建立抗病毒狀態(tài)。莫紅芳等[8]使用1.2%金銀花提取物作為抗病毒藥物，可有效減輕肉鴿NDV對(duì)器官組織造成的損傷，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，不斷提高機(jī)體抗氧化能力。

本研究中，自擬的中藥方劑根據(jù)組成藥物的性能，有目的地配伍使用，方中君臣佐使協(xié)同作用，取長(zhǎng)補(bǔ)短，具有清熱解毒、止咳化痰、宣肺平喘之功，其中金銀花、連翹為君藥，既是辛涼透邪清熱功效，又具有芳香辟穢解毒之功，輔以黃連、黃芩為臣藥，助君藥增強(qiáng)清熱解毒之功效，黃芩清熱涼血，梔子清熱化痰、開(kāi)郁散結(jié)，黃芪、黨參扶正固本，提高免疫力，苦杏仁止咳平喘。桔梗宣肺利咽祛痰，甘草清熱解毒，且桔梗及甘草能解胸膈之結(jié)而上行，配之浙貝、白頭翁、黃柏和魚(yú)腥草的消癰排膿、活血、利尿通淋之功效，為佐使藥。

本文通過(guò)人工攻毒建立雞傳染性支氣管炎模型，采用此中藥方劑高、中、低三種不同添加濃度，用臨床表現(xiàn)、免疫器官指數(shù)、細(xì)胞因子水平三種指標(biāo)驗(yàn)證了對(duì)IB的預(yù)防和治療效果。研究表明，該中草藥處方利用各味中藥良好的清熱解毒、抗病毒、宣肺化痰、止咳止喘、扶正固本作用，可提高雞只機(jī)體非特異性免疫力，抗感染作用明顯；減少抗藥性和毒副作用，促進(jìn)機(jī)體免疫器官發(fā)育，胸腺、脾臟和腔上囊的重量增加，也提升白細(xì)胞水平，治療效果好；增加雞只成活育成率、抗應(yīng)激能力以及調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝的特點(diǎn)，其中高、中劑量對(duì)雞傳染性支氣管炎起到很好的預(yù)防和治療作用，可大大降低雞只發(fā)病率、死亡率，提高治愈率。

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