摘要 [目的]提高多粘類芽孢桿菌產(chǎn)孢和產(chǎn)IAA能力以及對(duì)花生的促生效果。[方法]選擇LB、YD和YDC" 3種發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行條件優(yōu)化,并通過盆栽試驗(yàn)測(cè)定多粘類芽孢桿菌不同發(fā)酵液拌種對(duì)花生發(fā)芽率、根長和鮮重的影響。[結(jié)果]多粘類芽孢桿菌在LB、YD和YDC" 3種發(fā)酵培養(yǎng)基中產(chǎn)孢和產(chǎn)IAA能力存在顯著差異。YDC培養(yǎng)基(馬鈴薯200 g、玉米粉25 g、黃豆粉25 g、葡萄糖5 g、茶餅粉10 g、水 1 000 mL)更有利于芽孢和IAA的產(chǎn)生,芽孢數(shù)達(dá)57.62×108 CFU/mL,是LB、YD培養(yǎng)基中芽孢數(shù)量的9.29倍和5.85倍;IAA含量為3.08 μg/mL,較LB和YD發(fā)酵培養(yǎng)基分別增加了52.48%和22.71%;盆栽試驗(yàn)顯示,多粘類芽孢桿菌各發(fā)酵液對(duì)花生的發(fā)芽率、根長和鮮重均有一定的促生效果,能夠有效促進(jìn)花生種子的萌發(fā)和幼苗的生長,且YDC發(fā)酵液促生效果優(yōu)于其他處理;此外相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),芽孢數(shù)、IAA含量與花生發(fā)芽率、根長等呈顯著正相關(guān)。[結(jié)論]多粘類芽孢桿菌能夠有效促進(jìn)花生種子的萌發(fā)和幼苗生長,且該菌在YDC發(fā)酵培養(yǎng)基更有利于多粘類芽孢桿菌芽孢的形成和IAA的產(chǎn)生。
關(guān)鍵詞 多粘類芽孢桿菌;芽孢;IAA;發(fā)酵;花生
中圖分類號(hào) S 144.9" 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A
文章編號(hào) 0517-6611(2025)04-0129-04
doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2025.04.026
開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識(shí)碼(OSID):
Effects of Different Media on Spore Production of Paenibacillus polymyxa,IAA Content and Peanut Growth
FANG Yu,ZHENG Fen,MA Lei" et al
(Hefei Gao’er Life and Health Science Research Institute Co.,Ltd.,Hefei,Anhui" 230088)
Abstract [Objective] To improve the ability of Bacillus polymyxoides to produce spores and IAA and to promote the growth of peanut.[Method] LB,YD and YDC fermentation medium were selected to optimize the conditions,and the effects of different fermentation solution of Bacillus polymyces on peanut germination rate,root length and fresh weight were determined by pot experiment.[Result]There were significant differences in the ability of P.polymyxa to produce spores and IAA in LB,YD and YDC fermentation medium.YDC medium (potato 200 g,corn flour 25 g,soybean flour 25 g,glucose 5 g,tea cake powder 10 g,water 1 000 mL) was more conducive to the production of spores and IAA,the number of spores reached 57.62×108 CFU/mL,which was 9.29 times and 5.85 times of that in LB and YD medium.IAA content was 3.08 μg/mL,which was increased by 52.48% and 22.71% compared with LB and YD medium.The pot experiment showed that each fermentation broth of P.polymyxa had certain promoting effect on the germination rate,root length and fresh weight of peanut,which could effectively promote the germination of peanut seeds and the growth of seedlings,and the growth promotion effect of YDC fermentation broth was better than other treatments.In addition,the correlation analysis showed that spore number and IAA content were significantly positively correlated with peanut germination rate and root length.[Conclusion]Bacillus polymyxis can effectively promote peanut seed germination and seedling growth,and it is more conducive to the formation of" P.polymyxa spores and the production of IAA in YDC fermentation medium.
Key words Paenibacillus polymyxa;Spore; IAA;Fermentation;Peanut
基金項(xiàng)目 合肥市自主創(chuàng)新政策“借轉(zhuǎn)補(bǔ)”項(xiàng)目(J2020049);合肥市科技攻關(guān)項(xiàng)目(2021GJ080)。
作者簡介 方宇(1994—),男,安徽桐城人,農(nóng)藝師,碩士,從事健康栽培和病蟲害防治研究。*通信作者,研究員,從事健康栽培和病蟲害防治研究。
收稿日期 2024-04-15
花生(Arachis hypogaea)又名落花生,屬于豆科落花生屬,作為我國食用油的重要來源之一,近年來種植面積穩(wěn)中有升,基本維持在466.67萬hm2左右,產(chǎn)量達(dá)1 799.3萬t,是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物和油料作物[1]。隨著花生主產(chǎn)區(qū)可耕種面積的局限性,糧食作物與油料作物的土地資源沖突日趨嚴(yán)重,且花生連作現(xiàn)象嚴(yán)重,使得土壤質(zhì)量惡化、病蟲害加劇、花生產(chǎn)量和質(zhì)量下降等問題突出[2-4]。其中,夏花生種植方式在一定程度上緩解了糧油作物爭(zhēng)地矛盾,緩解花生連作障礙[5-6]。但夏花生與春花生相比普遍存在生育期短和適應(yīng)環(huán)境能力差等問題,引起花生苗期生長量不足、花芽分化和有效花數(shù)量少以及單株飽果率低等現(xiàn)象,是限制夏花生高產(chǎn)的重要因素[7]。合理施肥是彌補(bǔ)上述缺陷的重要手段,其中施用化肥是重要的方式之一,化肥的使用雖然能夠增加作物產(chǎn)量,但同時(shí)也會(huì)對(duì)作物品質(zhì)、生態(tài)環(huán)境和養(yǎng)分利用率等產(chǎn)生一定的負(fù)面影響。因此,尋求綠色可持續(xù)、對(duì)環(huán)境友好并具一定增質(zhì)提效作用的施肥管理措施是目前研究的重要方向。近年來,研究表明植物促生細(xì)菌(plant growth promoting bacteria,PGPB)在改善土壤質(zhì)量、調(diào)節(jié)根際微生態(tài)環(huán)境、輔助作物營養(yǎng)吸收、提高作物抗逆性以及促進(jìn)作物生長等方面發(fā)揮重要作用,已逐漸成為新型生物肥料發(fā)展的重要來源[8-9]。
多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)為芽孢桿菌科(Bacillaceae)、類芽孢桿菌屬(Paenibacillus)的革蘭氏陽性細(xì)菌,是一種重要的植物促生細(xì)菌,不僅能夠作為微生物菌肥促進(jìn)作物生長,提高產(chǎn)量;其產(chǎn)生的殺鐮孢菌素、多粘菌素和十三肽素等脂肽類化合物還能夠有效抑制植物病原真菌和細(xì)菌的生長[10-11]。王建[12]從蘋果根際土壤中分離得到的多粘類芽孢桿菌GRY-11對(duì)串珠鐮孢菌、層出鐮孢菌、腐皮鐮孢菌和尖孢鐮孢菌的抑制率均達(dá)70%以上,且能夠顯著促進(jìn)平邑甜茶幼苗根系的生長;劉曄等[13]從花生根際土壤中篩選得到的彎曲芽孢桿菌(Bacillus flexus)具有固氮、解磷解鉀以及產(chǎn)IAA能力,其中產(chǎn)IAA能力達(dá)40.96 mg/L,并通過盆栽試驗(yàn)證明能夠顯著提高花生植株根總長、根表面積和生物量,對(duì)花生具有良好的促生效果。
植物激素對(duì)植物的生長發(fā)育、營養(yǎng)吸收以及對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性具有重要影響,其中IAA是植物體內(nèi)普遍存在的一種內(nèi)源生長激素,能夠有效促進(jìn)植物根系生長和愈傷組織的形成。研究表明,枯草芽孢(Bacillus subtilis)[14]、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)[15]、檸檬酸桿菌(Citrobacter)[16]和側(cè)孢短芽孢桿菌(Brevibacillus laterosporus)[17]等大部分植物促生細(xì)菌均具有合成生長素(IAA)的能力,能夠通過調(diào)節(jié)植物體內(nèi)IAA濃度水平直接或間接地影響植物的生長發(fā)育。吳曉青等[18]研究發(fā)現(xiàn)多粘類芽孢桿菌具有產(chǎn)吲哚乙酸(IAA)活性,能夠顯著提高辣椒根鮮重和地上部分鮮重,促進(jìn)辣椒幼苗生長。同時(shí),芽孢含量也是影響生物菌劑抑菌和促生效果的關(guān)鍵因素,目前大部分微生物菌劑生產(chǎn)應(yīng)用過程中普遍存在活菌含量低、防效不穩(wěn)定等問題。而目前針對(duì)多粘類芽孢桿菌的研究大多集中在其抑菌和促生機(jī)制上,而對(duì)于產(chǎn)芽孢和IAA能力的條件優(yōu)化鮮見報(bào)道,因此,筆者在前人研究基礎(chǔ)上對(duì)多粘類芽孢桿菌的產(chǎn)芽孢和IAA能力進(jìn)行探究,并通過室內(nèi)發(fā)芽盆栽試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證多粘類芽孢桿菌對(duì)花生的促生效果,旨在提高多粘類芽孢桿菌產(chǎn)芽孢和IAA能力,提高生防促生活性,為花生產(chǎn)業(yè)的增質(zhì)提效奠定技術(shù)基礎(chǔ)和提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)菌株
多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa)由安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所提供,于青島海域海泥中分離(GenBank 登錄號(hào):KM891591)得到。
1.2 試驗(yàn)材料與設(shè)備
LB液體培養(yǎng)基:胰蛋白胨10 g、酵母提取物5 g、NaCl 10 g、水1 000 mL;YD液體培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、玉米粉25 g、黃豆粉25 g、葡萄糖5 g、水1 000 mL;YDC液體培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、玉米粉25 g、黃豆粉25 g、葡萄糖5 g、茶餅粉10 g、水1 000 mL。
IAA標(biāo)準(zhǔn)品(分析純)購自上海安譜璀世標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司;甲醇(分析純)購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;乙酸乙酯(分析純)購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;冰醋酸(分析純)購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;25 g/L咯菌腈懸浮種衣劑(浙江天豐生物科學(xué)有限公司生產(chǎn))。
島津LC20高效液相色譜儀;色譜柱為 ShimNex UP C18 ( 4.6 mm×50 mm×5.0 μm);恒溫?fù)u床(THZ-100);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(N-1100-D)。
1.3 種子液制備
挑取已經(jīng)活化的純培養(yǎng)菌株于100 mL LB液體培養(yǎng)基中,于(35±1)℃、150 r/min條件下?lián)u床振蕩培養(yǎng)72 h,即為種子液。
1.4 發(fā)酵液的制備與培養(yǎng)
準(zhǔn)確量取10 mL上述種子液,按5%的接種量依次接種至LB、YD和YDC 3種200 mL液體培養(yǎng)基中,置于37 ℃、150 r/min的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)72 h,即獲得3種不同培養(yǎng)基發(fā)酵液,每處理3次重復(fù)。
1.5 產(chǎn)芽孢能力測(cè)定
采用血球計(jì)數(shù)法對(duì)各發(fā)酵液中的芽孢數(shù)量進(jìn)行測(cè)定。準(zhǔn)確量取不同發(fā)酵液1 mL,稀釋100倍后使用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)1 mL發(fā)酵液中芽孢數(shù),每個(gè)處理進(jìn)行3次重復(fù)計(jì)數(shù)。
1.6 不同發(fā)酵液中IAA含量測(cè)定
1.6.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。精確稱取吲哚乙酸標(biāo)準(zhǔn)品10 mg,用甲醇定容至10 mL容量瓶中,此標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度為1 g/L。用流動(dòng)相分別稀釋為0、2.50、5.00、10.00 μg/mL的IAA標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
1.6.2 色譜條件。流動(dòng)相:甲醇-0.01 %醋酸水溶液(體積比45∶55)用前經(jīng)0.45 μm濾膜過濾;流速:1.0 mL/min;紫外波長:254 nm;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:10.00 μL。
1.6.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作。將配制好的吲哚乙酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液于上述色譜條件下進(jìn)行測(cè)定,以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性范圍。
1.6.4 樣品前處理。準(zhǔn)確量取10 mL各發(fā)酵液于分液漏斗中,加入10 mL水混勻后再加入等體積(20 mL)乙酸乙酯劇烈振蕩5 min后靜置10 min,待兩相分層,收集乙酸乙酯相于燒瓶中,下層溶液繼續(xù)倒入等體積乙酸乙酯進(jìn)行2次萃取,收集乙酸乙酯相,如此反復(fù)進(jìn)行3次,合并乙酸乙酯,于45 ℃下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),待乙酸乙酯蒸發(fā)至近干時(shí),用流動(dòng)相溶解,定容至10 mL,過0.45 μm濾膜過濾,進(jìn)行上機(jī)檢測(cè),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各發(fā)酵液中IAA含量。
1.7 各發(fā)酵液對(duì)花生的促生效果
將花生種子置于20% H 2O 2溶液中浸泡30 min進(jìn)行表面消毒后,使用蒸餾水反復(fù)清洗并浸泡12 h,待種子稍加晾干后置于上述3種發(fā)酵液(稀釋成1×108 CFU/mL)中進(jìn)行2 h浸種處理,同時(shí)以25 g/L咯菌腈懸浮種衣劑為化學(xué)藥劑對(duì)照(CA),并以清水浸種作為空白對(duì)照(CK)。浸種完成后將20?;ㄉN子播種在φ 20 cm×20 cm的花盆中,每處理3次重復(fù),每重復(fù)10盆,于可控日光溫室中28 ℃培養(yǎng)。在培養(yǎng)3 d時(shí)調(diào)查種子發(fā)芽率,培養(yǎng)10 d時(shí)調(diào)查發(fā)芽率并測(cè)量根長和鮮重;播種30 d調(diào)查花生株高和分枝數(shù)。
1.8 數(shù)據(jù)處理 使用Excel 2019和SPSS 23.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析,使用Origin 2018軟件進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)圖的制作。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同發(fā)酵液對(duì)多粘類芽孢桿菌產(chǎn)芽孢的影響
利用不同培養(yǎng)基對(duì)多粘類芽孢桿菌進(jìn)行振蕩培養(yǎng),測(cè)定該菌株在不同液體培養(yǎng)基中的芽孢數(shù)量。由圖1可知,多粘類芽孢桿菌在3種液體培養(yǎng)基中的產(chǎn)芽孢數(shù)量存在顯著差異,在LB培養(yǎng)基、YD培養(yǎng)基和YDC培養(yǎng)基中的芽孢數(shù)量依次為6.20×108、9.85×108和57.62×108 CFU/mL,YDC培養(yǎng)基中的芽孢數(shù)量最多,分別為LB、YD培養(yǎng)基中芽孢數(shù)量的9.29倍和5.85倍,表明YDC培養(yǎng)基較LB和YD培養(yǎng)基更有利于多粘類芽孢桿菌芽孢的產(chǎn)生。其中,YDC培養(yǎng)基與YD培養(yǎng)基在主要成分相同的基礎(chǔ)上僅在YDC培養(yǎng)基中添加1%的茶餅粉,可見茶餅粉在一定程度上能夠有效促進(jìn)多粘類芽孢桿菌芽孢的產(chǎn)生,具體促進(jìn)機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。
2.2 不同發(fā)酵液對(duì)多粘類芽孢桿菌產(chǎn)IAA能力的影響
采用HPLC法對(duì)各發(fā)酵培養(yǎng)基中的IAA含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見圖2。IAA的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=19 244x-36 120,R2=0.999 6;LB、YD和YDC 3種發(fā)酵培養(yǎng)基中的IAA含量存在顯著差異。其中在YDC發(fā)酵培養(yǎng)基中的IAA含量最高為3.08 μg/mL,其次為YD發(fā)酵培養(yǎng)基IAA含量2.51 μg/mL,而LB發(fā)酵培養(yǎng)基中的IAA含量最低僅為2.02 μg/mL,YDC發(fā)酵培養(yǎng)基中IAA含量分別較LB和YD發(fā)酵培養(yǎng)基增加了52.48%和22.71%,且與LB和YD發(fā)酵培養(yǎng)基存在顯著差異(P<0.05)。
2.3 不同發(fā)酵液對(duì)花生生長的影響
通過室內(nèi)盆栽試驗(yàn)進(jìn)一步研究了3種培養(yǎng)基發(fā)酵液對(duì)花生的促生效果,結(jié)果見表1、2 。播種后3 d,各處理花生的發(fā)芽率存在一定差異,3種多粘類芽孢桿菌發(fā)酵液處理的發(fā)芽率在42.67%~52.33%,其中YD和YDC發(fā)酵液發(fā)芽率顯著高于清水浸種對(duì)照(CK,41.00%)和25 g/L咯菌腈懸浮種衣劑懸浮劑(CA,39.67%)。
播種后10 d,各發(fā)酵液處理的發(fā)芽率均達(dá)90.33%以上,均優(yōu)于CA和CK處理,其中YDC發(fā)酵液的發(fā)芽率最高為93.33%,顯著高于除YD處理外其他各處理發(fā)芽率,分別較CA和CK處理增加了8.11%和4.08%;花生的根長和鮮重各處理間存在一定差異,各處理根長在8.57~10.17 cm,鮮重在4.30~5.17 g,除CA處理外其他各處理與CK相比,對(duì)根長和鮮重均有一定的促生效果。其中,LB、YD和YDC發(fā)酵液中根長分別增加了0.79%、2.81%和14.14%,鮮重分別增加了2.55%、2.97%和9.77%,均以YDC處理促生效果最好。播種后30 d,LB、YD和YDC 3種發(fā)酵液的株高分別為15.90、16.04 和17.45 cm,與CK均無顯著差異,而CA處理株高最低,僅為14.49 cm,顯著低于YDC處理;各處理分枝數(shù)在4.25~4.99,各處理與CK相比均無顯著差異。綜上所述,多粘類芽孢桿菌各發(fā)酵液對(duì)花生的發(fā)芽率、根長和鮮重均有一定的促生效果,而對(duì)株高和分枝數(shù)無明顯促生效果。
2.4 花生各生長指標(biāo)與芽孢數(shù)和IAA含量的相關(guān)性分析
通過分析多粘類芽孢桿菌發(fā)酵液中產(chǎn)芽孢數(shù)、IAA含量與花生種子發(fā)芽率、根長、鮮重和株高等生長指標(biāo)的相關(guān)性,探究多粘類芽孢桿菌產(chǎn)芽孢數(shù)和IAA含量對(duì)花生各項(xiàng)生理指標(biāo)是否具有顯著影響,結(jié)果見表3。IAA含量和芽孢數(shù)均與花生的發(fā)芽率、根長呈顯著或極顯著正相關(guān)關(guān)系,表明芽孢數(shù)和IAA含量的增加能夠顯著提高花生種子的發(fā)芽率并促進(jìn)花生根系的生長,此外芽孢數(shù)與花生植株的鮮重也呈顯著正相關(guān),表明芽孢能夠顯著促進(jìn)花生植株的生長。而IAA含量和芽孢數(shù)與花生株高和分枝數(shù)均無顯著相關(guān)性。
3 討論與結(jié)論
芽孢是芽孢桿菌產(chǎn)生的休眠體,具有較強(qiáng)的抗逆性,是微生物源農(nóng)藥的重要組成成分,是影響生防制劑應(yīng)用效果的關(guān)鍵因素,也是評(píng)價(jià)發(fā)酵效果的重要評(píng)判指標(biāo)[19]。該研究中多粘類芽孢桿菌前期已在防治水稻紋枯病上得以驗(yàn)證,盆栽試驗(yàn)和田間防效均具有較好防效,當(dāng)芽孢濃度為80×108孢子/L以上時(shí)防效達(dá)70%以上[20]。芽孢量除受到菌株特性影響外,發(fā)酵培養(yǎng)基碳氮源、pH、溫度以及含氧量等都是影響芽孢產(chǎn)量的重要因素。碳氮源是培養(yǎng)基中重要的組成成分,目前以促進(jìn)芽孢產(chǎn)量為目的的大多數(shù)發(fā)酵培養(yǎng)基以玉米粉、淀粉和麩皮等農(nóng)副產(chǎn)品以及蔗糖和葡萄糖等糖類物質(zhì)作為主要碳源,而氮源以黃豆粉、花生浸粉和蛋白胨等為主[21]。該研究以玉米粉和黃豆粉作為培養(yǎng)基的主要碳氮源,進(jìn)一步研究了其對(duì)多粘類芽孢桿菌芽孢產(chǎn)量的影響。結(jié)果顯示,YD發(fā)酵培養(yǎng)基中芽孢量顯著高于LB液體發(fā)酵培養(yǎng)基,這與曲遠(yuǎn)航等[22]和郭建軍等[23]的研究結(jié)果類似,表明以玉米粉和黃豆粉作為發(fā)酵培養(yǎng)基碳氮源能夠有利于芽孢的產(chǎn)生。玉米粉中含有大量的可溶性淀粉,在發(fā)酵過程中降解為葡萄糖供細(xì)胞吸收和轉(zhuǎn)化,而黃豆粉中蛋白質(zhì)、氨基酸和多肽等物質(zhì)的高含量可能是促進(jìn)多粘類芽孢桿菌生長和芽孢產(chǎn)生的原因。此外,該研究發(fā)現(xiàn)在YD發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加1%的茶餅粉(YDC)后其芽孢量達(dá)57.62×108 CFU/mL,為YD發(fā)酵培養(yǎng)基中芽孢量的5.85倍,表明茶餅粉的加入對(duì)多粘類芽孢桿菌芽孢的產(chǎn)生具有促進(jìn)作用,可能是由于茶餅粉在發(fā)酵過程中多糖、粗蛋白和必需氨基酸等營養(yǎng)成分的增加,在一定程度上促進(jìn)了芽孢的生長。
IAA作為一種重要的植物生長激素,能夠有效促進(jìn)植物側(cè)根和不定根的形成,增加植物根系與土壤的接觸面積,提高植物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。該研究采用HPLC法對(duì)3種不同發(fā)酵培養(yǎng)基的IAA含量進(jìn)行了測(cè)定,各發(fā)酵培養(yǎng)基中IAA含量在2.02~3.08 μg/mL,這與金莉萍[24]測(cè)定多粘類芽孢桿菌CF05菌株產(chǎn)IAA含量最高能達(dá)5.35 μg/mL的結(jié)論一致。此外,該研究中YDC發(fā)酵培養(yǎng)基IAA含量分別較LB和YD發(fā)酵培養(yǎng)基分別增加了52.48%和22.71%,可能是由于YDC發(fā)酵培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分更有利于IAA產(chǎn)生。后續(xù)可對(duì)其促進(jìn)機(jī)制進(jìn)行更深入的研究。
盆栽試驗(yàn)結(jié)果顯示,相較于清水對(duì)照和25 g/L咯菌腈懸浮種衣劑處理,使用上述多粘類芽孢桿菌3種發(fā)酵液進(jìn)行浸種處理均能在不同程度上促進(jìn)花生種子發(fā)芽、根系和植株生長,這與金美芳等[25]研究發(fā)現(xiàn)多粘類芽孢桿菌能夠有效促進(jìn)番茄植株生長的結(jié)論一致,進(jìn)一步說明多粘類芽孢桿菌在促進(jìn)花生生長方面具有一定的開發(fā)潛能。同時(shí)該研究發(fā)現(xiàn),YDC發(fā)酵液在促進(jìn)花生生長方面表現(xiàn)更為突出,可能是由于YDC 發(fā)酵液中芽孢數(shù)和IAA含量較高引起的促生效應(yīng)更為明顯,相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)芽孢數(shù)、IAA含量與花生發(fā)芽率、根長等呈顯著正相關(guān),也進(jìn)一步驗(yàn)證了上述觀點(diǎn)。
該研究通過比較多粘類芽孢桿菌在不同發(fā)酵培養(yǎng)基中的芽孢量和IAA含量,初步篩選出YDC發(fā)酵培養(yǎng)基更有利于多粘類芽孢桿菌芽孢的形成和IAA的產(chǎn)生;同時(shí),通過盆栽試驗(yàn)表明多粘類芽孢桿菌能夠有效促進(jìn)花生種子的萌發(fā)和幼苗生長。但該研究對(duì)于溫度、pH和接種量等其他發(fā)酵因素的影響未進(jìn)行系統(tǒng)研究,因此在后續(xù)的研究中可在YDC發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上探索其他發(fā)酵因素的影響以及多粘類芽孢桿菌發(fā)酵液中關(guān)鍵促生物質(zhì)的分析,并通過開展田間試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證該菌株對(duì)花生的促生效果。
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