摘要
為確定咪鮮胺對河南省禾谷鐮孢Fusarium graminearum的抑菌活性, 測定了其對禾谷鐮孢不同發(fā)育階段的毒力。結(jié)果表明: 咪鮮胺對孢子萌發(fā)、分生孢子產(chǎn)生、芽管伸長和菌絲生長的有效抑制中濃度(EC50)分別為3.868 9、0.315 6、0.063 1 μg/mL和0.022 3 μg/mL。對2019年、2021年和2022年河南省6個地市隨機選取的210株禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性進(jìn)行測定。結(jié)果顯示: 咪鮮胺對供試禾谷鐮孢菌絲生長的EC50范圍為0.001 8~0.057 2 μg/mL, 平均EC50為(0.023 3±0.008 6)μg/mL。敏感性頻率分布呈單峰曲線, 符合正態(tài)分布。測定了咪鮮胺原藥與葉菌唑、氰烯菌酯、氟啶胺、咯菌腈4種殺菌劑原藥之間分別按照質(zhì)量比1∶5、1∶3、1∶1、3∶1和5∶1配比的復(fù)配劑對禾谷鐮孢的聯(lián)合毒力。結(jié)果顯示: 增效系數(shù)(SR)范圍為0.54~3.94。不同組合、不同比例的復(fù)配劑均表現(xiàn)為相加作用或增效作用, 其中咪鮮胺∶氟啶胺按質(zhì)量比3∶1復(fù)配時, 增效系數(shù)最大。表明咪鮮胺可以與葉菌唑、氰烯菌酯、氟啶胺、咯菌腈等殺菌劑復(fù)配使用。防效試驗結(jié)果表明, 45%咪鮮胺水乳劑與50%氟啶胺懸浮劑按照3∶1比例復(fù)配以160 μg/mL濃度噴施保護(hù)效果達(dá)到100%。本試驗結(jié)果可以為小麥赤霉病的治理提供依據(jù)。
關(guān)鍵詞
禾谷鐮孢;" 咪鮮胺;" 復(fù)配劑;" 敏感性;" 殺菌活性
中圖分類號:
S 482.2
文獻(xiàn)標(biāo)識碼:" B
DOI:" 10.16688/j.zwbh.2024077
收稿日期:" 20240206""" 修訂日期:" 20240329
基金項目:
河南省科技研發(fā)計劃聯(lián)合基金(232301420122);河南省科技攻關(guān)項目(242102110157);洛陽市公益性行業(yè)科研專項(2302032A)
致" 謝:" 參加本試驗部分工作的還有江代禮、譚翰杰、張能和紀(jì)燁斌等同學(xué),特此一并致謝。
* 通信作者
E-mail:
liushengmingzb@163.com
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為并列第一作者
Inhibitory activity of prochloraz and its mixtures against Fusarium graminearum in Henan province and indoor control efficacy on wheat blast disease
CUI Yongyuan," GAO Xuheng," QIAN Le," JIANG Jia," LIU Shengming*
(College of Horticulture and Plant Protection, Henan University of Science and Technology,
Henan Engineering Technology Research Center of Green Plant Protection, Luoyang" 471023, China)
Abstract
To determine the inhibitory activity of prochloraz against Fusarium graminearum in Henan province, its toxicity to different developmental stages of F.graminearum were determined. The results showed that the EC50 of prochloraz for inhibiting spore germination, sporulation, germ tube elongation and mycelium growth were 3.868 9, 0.315 6, 0.063 1 and 0.022 3 μg/mL, respectively. Sensitivity testing was conducted on 210 F.graminearum isolates randomly selected from six cities in Henan province in 2019, 2021 and 2022. The results showed that the EC50 values for prochloraz against F.graminearum ranged from 0.001 8 to 0.057 2 μg/mL, with an average value of (0.023 3±0.008 6) μg/mL. The sensitivity distribution followed a single peak curve, consistent with a normal distribution. The combined toxicity of the mixture of prochloraz with metconazole, phenamacril, fluazinam, and fludioxonil was tested at the mass ratios of 1∶5, 1∶3, 1∶1, 3∶1 and 5∶1. The results showed that the synergistic ratio (SR) ranged from 0.54 to 3.94, with different mixtures exhibiting additive or synergistic effects. The highest synergistic ratio (SR) was observed on the mixtures of prochloraz and fluazinam with a mass ratio of 3∶1, indicating that prochloraz can be effectively used in combination with fungicides such as metconazole, phenamacril, fluazinam and fludioxonil. Protective effect of a mixture of 160 μg/mL of 45% prochloraz water emulsion with 50% fluazinam suspension at a ratio of 3∶1 achieved 100%. These results provide a basis for managing in wheat scab.
Key words
Fusarium graminearum;" prochloraz;" mixture;" susceptibility;" inhibitory activity
小麥赤霉病是一種世界范圍流行的真菌病害, 能夠?qū)r(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成極為嚴(yán)重的危害[1], 在小麥各生育期均可發(fā)生。半知菌亞門鐮孢屬的多個種可引起該病害, 其主要病原為禾谷鐮孢Fusarium graminearum[2]。小麥赤霉病不僅能夠使小麥的品質(zhì)和產(chǎn)量下降, 而且發(fā)病麥粒含有的次生代謝毒素可對人、畜造成威脅[34]。
近年來, 由于缺乏對小麥赤霉病高抗和免疫的品種[5], 生產(chǎn)中通常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行防治。咪鮮胺(prochloraz)被Birchmore等首次報道, 由Boots公司開發(fā)(現(xiàn)為Bayer CorpScience)[6],屬于甾醇生物合成抑制劑(SBIs), 其通過抑制病原真菌內(nèi)麥角甾醇的合成過程中C-14脫甲基反應(yīng)
,破壞病原真菌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性,阻止其功能的正常發(fā)揮, 抑制病原真菌的侵染和繁殖[79]。截至2024年2月, 在我國登記注冊并且仍在有效使用期限內(nèi)的防治小麥赤霉病農(nóng)藥共有511種, 其中單劑有252種, 混劑有259種(http:∥www.chinapesticide.org.cn/)。
化學(xué)藥劑長期單一使用易導(dǎo)致田間病原菌抗藥性群體的出現(xiàn)[1011]。咪鮮胺自2006年在我國登記用于小麥赤霉病的防治,至今已有近20年的歷史。為檢測河南省禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性是否下降, 本研究測定了咪鮮胺對河南省禾谷鐮孢不同發(fā)育階段的毒力;以及咪鮮胺、葉菌唑、氰烯菌酯、氟啶胺和咯菌腈等5種殺菌劑及其復(fù)配劑的聯(lián)合毒力;明確了咪鮮胺及其復(fù)配劑對小麥莖基腐病的離體防效。
1" 材料與方法
1.1" 試驗材料
2019年、2021年和2022年從河南省平頂山(112°14′E-113°45′E, 33°08′N-34°20′N)、濟源(112°01′E-112°45′E, 34°53′N-35°16′N)、焦作(113°04′E-113°26′E, 35°10′N-35°21′N)、南陽(110°58′E-113°49′E, 32°17′N-33°48′N)、駐馬店(113°10′E-115°12′E, 32°18′N-33°35′N)和商丘(114°49′E-116°39′E, 33°43′N-34°52′N)6個地市采集并單孢分離禾谷鐮孢, 通過形態(tài)學(xué)和特異性引物[12](FG16F-F,5′-CTCCGGATATGTTGCGTCAA-3′/FG16F-R,5′-GGTAGGTATCCGACATGGCAA-3′;擴增長度410 bp)鑒定, 共獲得210株禾谷鐮孢。菌株由河南科技大學(xué)殺菌劑生物學(xué)實驗室保存。
供試小麥品種為
‘津春6號’,天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)作物研究所提供。
毒力測定藥劑: 97.3%咪鮮胺原藥,南京紅太陽股份有限公司; 95%葉菌唑原藥,安道麥輝豐(江蘇)有限公司; 95%氰烯菌酯原藥,江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司; 97%氟啶胺原藥,江蘇優(yōu)嘉植物保護(hù)有限公司; 98%咯菌腈原藥,江蘇耘農(nóng)化工有限公司。葉菌唑預(yù)溶于甲醇, 其余藥劑均預(yù)溶于丙酮, 配制母液, 濃度為10 mg/mL(以有效成分計,下同)。
防效試驗制劑: 45%咪鮮胺水乳劑, 江西正邦作物保護(hù)股份有限公司;50%多菌靈懸浮劑, 安徽廣信農(nóng)化股份有限公司;50%氟啶胺懸浮劑, 山東鄒平農(nóng)藥有限公司。全部采用去離子水稀釋至濃度為1×104 μg/mL的母液。
供試培養(yǎng)基:馬鈴薯蔗糖瓊脂(PSA)培養(yǎng)基: 馬鈴薯200 g, 瓊脂粉15 g, 蔗糖20 g, 1 L去離子水;綠豆湯(LD)培養(yǎng)基: 綠豆30 g, 1 L去離子水;水瓊脂(WA)培養(yǎng)基: 瓊脂17.5 g, 1 L去離子水。
1.2" 試驗方法
1.2.1" 咪鮮胺對禾谷鐮孢不同發(fā)育階段的抑制活性測定
1.2.1.1" 咪鮮胺對禾谷鐮孢菌絲生長的抑制活性測定
從獲得的210株禾谷鐮孢中選取代表性菌株JZ2107,采用菌絲生長速率法[13]測定咪鮮胺對其菌絲生長的抑制活性。供試菌株在PSA平板25℃黑暗條件下培養(yǎng)3 d后, 轉(zhuǎn)接于含不同濃度(表1)咪鮮胺的含藥PSA平板上,25℃黑暗條件下培養(yǎng)3 d, 采用十字交叉法測量菌落直徑。每個濃度重復(fù)3次, 試驗重復(fù)3次。根據(jù)公式(1)求出各藥劑濃度對菌絲生長的抑制率。利用DPS軟件,求出抑制中濃度(EC50)。
I=DCK-Dt
DCK-0.5×100%(1)
式(1)中: I 為菌絲生長抑制率,DCK 為對照菌落直徑,Dt 為處理菌落直徑。
1.2.1.2" 咪鮮胺對禾谷鐮孢分生孢子產(chǎn)生的抑制活性測定
在培養(yǎng)3 d的禾谷鐮孢菌株JZ2107菌落邊緣打取菌餅, 置于100 mL LD培養(yǎng)基中, 每瓶培養(yǎng)基中10個菌餅, 然后在25℃, 光周期L∥D=12 h∥12 h下, 175 r/min振蕩培養(yǎng)5 d, 5 d后在綠豆湯中加入咪鮮胺使終濃度為0、0.5、1、2、4、8 μg/mL,以不加藥劑的處理為空白對照, 繼續(xù)振蕩培養(yǎng)48 h后,過濾去除菌絲,5 000 r/min離心10 min, 后用10 mL無菌水重懸,獲得孢子懸浮液。渦旋振蕩混勻后, 取20 μL分生孢子懸浮液置于血球計數(shù)板, 使用光學(xué)顯微鏡鏡檢不同藥劑濃度處理下的分生孢子數(shù)量, 每個濃度重復(fù)3次, 試驗重復(fù)3次。根據(jù)公式(2)計算各藥劑濃度下的分生孢子產(chǎn)生抑制率。
Ri=[(C-T)/C]×100%(2)
式(2)中: Ri為孢子產(chǎn)生數(shù)的抑制率,C為對照組孢子產(chǎn)生數(shù),T為藥劑處理組孢子產(chǎn)生數(shù)。
1.2.1.3" 咪鮮胺對禾谷鐮孢分生孢子萌發(fā)的抑制活性測定
采用孢子萌發(fā)法[14]測定咪鮮胺對禾谷鐮孢JZ2107孢子萌發(fā)的抑制活性。孢子懸浮液的制備方法同上,無菌水重懸后調(diào)整孢子濃度為1×105 個/mL備用。移液槍吸取100 μL孢子懸浮液, 涂布在含不同濃度(0、0.5、1、2、4、8 μg/mL)咪鮮胺的WA平板上, 每個處理3次重復(fù), 置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h后, 對照的孢子萌發(fā)率超過90%時, 每皿隨機觀察100個孢子, 萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)為芽管長度超過孢子最大直徑的一半。根據(jù)公式(3)計算各藥劑濃度下分生孢子萌發(fā)抑制率。
Ri=[(C-T)/C]×100%(3)
式(3)中: Ri為孢子萌發(fā)數(shù)的抑制率,C為對照組孢子萌發(fā)數(shù),T為藥劑處理組孢子萌發(fā)數(shù)。
1.2.1.4" 咪鮮胺對禾谷鐮孢芽管伸長的抑制活性測定
采用孢子萌發(fā)法測定咪鮮胺對禾谷鐮孢JZ2107芽管伸長的抑制活性[15]。孢子懸浮液的制備方法同1.5.2, 將分生孢子懸浮液均勻涂布在含有不同濃度(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μg/mL)咪鮮胺的WA平板上, 每個處理3次重復(fù), 25℃黑暗條件下培養(yǎng)10 h,在光學(xué)顯微鏡下觀察分生孢子芽管伸長的情況。根據(jù)公式(4)計算各藥劑濃度下分生孢子芽管伸長抑制率。
Ri=[(C-T)/C]×100%(4)
式(4)中: Ri為芽管長度的抑制率,C為對照組芽管長度,T為藥劑處理組芽管長度。
1.2.2" 禾谷鐮孢菌株對咪鮮胺的敏感性分布
將供試的210株禾谷鐮孢群體按照對咪鮮胺的敏感性由高到低分成不同的區(qū)間, 統(tǒng)計每個區(qū)間內(nèi)各菌株EC50值的分布頻率。以EC50的區(qū)間范圍為橫坐標(biāo), 對應(yīng)區(qū)間菌株的頻率為縱坐標(biāo), 繪制禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性頻率分布圖。
1.2.3" 咪鮮胺及其復(fù)配劑對禾谷鐮孢的聯(lián)合毒力
采用菌絲生長速率法測定咪鮮胺、葉菌唑、氰烯菌酯、氟啶胺和咯菌腈共5種殺菌劑單劑及咪鮮胺與其他藥劑按照質(zhì)量比5∶1, 3∶1, 1∶1, 1∶3, 1∶5的復(fù)配劑對禾谷鐮孢JZ2107的毒力。將母液稀釋制成咪鮮胺與葉菌唑、氰烯菌酯、氟啶胺以及咯菌腈及其各復(fù)配劑系列濃度的PSA平板。按照1.5.1方法測定藥劑的菌絲生長抑制率,求出各單劑及其復(fù)配藥劑的EC50。利用公式(5)求出各復(fù)配劑理論抑制中濃度[EC50 (Exp)], 利用公式(6)求出增效系數(shù)(SR),當(dāng)SR值大于1.5時為增效作用, 在0.5~1.5為相加作用, 小于0.5時為拮抗作用[16]。
EC50(Exp)=
a+b
aEC50(A)+b
EC50(B)(5)
SR=EC50(Exp)
EC50(Obs)(6)
式(5)(6)中: A, B為復(fù)配試驗選擇的2種不同單劑;a, b為A, B 2種藥劑在配方中所占的比例;EC50 (Exp)為理論抑制中濃度;EC50 (Obs)為實際測量抑制中濃度。
1.2.4" 不同藥劑對禾谷鐮孢的預(yù)防效果測定
采用胚芽鞘接種法[1718]測定咪鮮胺及其復(fù)配劑對禾谷鐮孢的預(yù)防活性。將小麥粒用75%乙醇快速清洗3次, 接著用蒸餾水清洗2次, 在超凈工作臺中將麥粒放入蒸餾水中浸泡2 h。用消毒后的鑷子夾取麥粒, 腹溝朝下放置在經(jīng)過無菌水濕潤后的無菌濾紙上, 麥粒之間距離1 cm。將處理好的麥粒在人工氣候箱中培養(yǎng)3 d。選取長勢一致、胚芽鞘長度在2~3 cm的麥粒轉(zhuǎn)移到其他托盤中。采用噴霧法均勻噴施不同濃度(有效成分用量: 0、20、40、60、80、160 μg/mL)的咪鮮胺藥液, 氟啶胺藥液、多菌靈藥液以及最佳配比的咪鮮胺與氟啶胺復(fù)配劑(3∶1)藥液。噴藥24 h后剪去芽尖, 進(jìn)行愈傷接種, 接種2 μL的1.0×107個/mL禾谷鐮孢分生孢子懸浮液,以無菌水作為對照。將其置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(溫度25℃、相對濕度95%、光周期L∥D=16 h∥8 h)7 d后, 測量小麥幼苗基部病斑長度。每處理5個重復(fù), 試驗重復(fù)3次。按公式(7)計算防效(E)。
E=[(DCK-Dt)/DCK]×100%(7)
式中:DCK為對照病斑長度,Dt為藥劑處理病斑長度。
1.3" 數(shù)據(jù)處理
利用Excel 2016和DPS v7.05進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析, 得出毒力測定結(jié)果的斜率加減標(biāo)準(zhǔn)誤、卡方值、自由度、P值和EC50, 并進(jìn)行差異顯著性分析(least-significant difference, LSD, α=0.05)。
2" 結(jié)果與分析
2.1" 禾谷鐮孢不同發(fā)育階段對咪鮮胺的敏感性
如表2所示, 咪鮮胺對禾谷鐮孢菌株JZ2107的菌絲生長和芽管伸長抑制效果顯著, EC50分別為0.022 3 μg/mL和0.063 1 μg/mL;對禾谷鐮孢的分生孢子產(chǎn)生抑制效果良好, EC50為0.315 6 μg/mL;對禾谷鐮孢的分生孢子萌發(fā)抑制效果較差, EC50為3.868 9 μg/mL。
2.2" 禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性
采用菌絲生長速率法測定2019年、2021年及2022年采自河南省6個地市的210株禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性, EC50平均值為(0.023 3±0.008 6) μg/mL,EC50分布范圍為0.001 8~0.057 2 μg/mL。不同地區(qū)測定結(jié)果見表3, 從中可以看出: 不同地區(qū)菌株之間對咪鮮胺的敏感性無顯著差異。河南省210株禾谷鐮孢對咪鮮胺敏感性頻率分布均呈連續(xù)單峰曲線(圖1), 說明田間不存在對該殺菌劑表現(xiàn)出敏感性下降亞群體。
2.3" 咪鮮胺與4種殺菌劑復(fù)配劑對禾谷鐮孢的聯(lián)合毒力
采用菌絲生長速率法測定咪鮮胺、葉菌唑、氰烯菌酯、咯菌腈及氟啶胺5種殺菌劑對禾谷鐮孢JZ2107的毒力。結(jié)果(表4)顯示: 5種殺菌劑對禾谷鐮孢JZ2107的EC50分別為0.022 3、0.014 8、0.099 1、0.023 8 μg/mL及0.051 2 μg/mL, 表明5種藥劑對禾谷鐮孢的菌絲生長均具有較好的抑制效果。
將咪鮮胺與葉菌唑、氰烯菌酯、咯菌腈及氟啶胺分別按照5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5質(zhì)量比進(jìn)行復(fù)配, 測定復(fù)配劑對禾谷鐮孢的聯(lián)合毒力。結(jié)果(表4)表明, 增效系數(shù)在0.54~3.94之間。不同組合、不同比例的復(fù)配劑均表現(xiàn)為相加作用或增效作用, 其中m(咪鮮胺)∶m(氟啶胺)=3∶1時, 增效系數(shù)值(SR)最大, 增效作用最強。
2.4" 咪鮮胺與4種殺菌劑復(fù)配劑的保護(hù)作用
本研究確定了45%咪鮮胺水乳劑、50%氟啶胺懸浮劑以及復(fù)配劑 [m(咪鮮胺)∶m(氟啶胺)=3∶1]對小麥赤霉病的抑制作用(圖2)。45%咪鮮胺水乳劑、50%氟啶胺懸浮劑以及復(fù)配劑對小麥胚芽鞘的保護(hù)作用隨著濃度的增加而增強。當(dāng)濃度達(dá)到160 μg/mL時, 除氟啶胺單劑保護(hù)效果為96.22%外, 其余藥劑保護(hù)效果均達(dá)到100%(圖3)。但在藥劑濃度較低時, 相同濃度下復(fù)配劑的保護(hù)效果與單劑相比更加優(yōu)異。尤其在藥劑濃度為20 μg/mL時, 咪鮮胺、氟啶胺以及對照藥劑多菌靈3種單劑的保護(hù)效果僅為37.70%、32.43%和31.43%, 而復(fù)配劑的保護(hù)效果已經(jīng)達(dá)到了53.73%(圖3)。
3" 結(jié)論與討論
不同發(fā)育階段禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性存在較大差異。敏感性由高到低依次為菌絲生長階段gt;芽管伸長階段gt;產(chǎn)孢階段gt;孢子萌發(fā)階段。咪鮮胺抑制禾谷鐮孢菌絲生長和芽管伸長的效果非常顯著, 對產(chǎn)孢階段的抑制效果一般, 對孢子萌發(fā)抑制效果較差。其原因可能與藥劑作用方式有關(guān)系, 甾醇生物合成抑制劑類(SBIs)殺菌劑主要通過抑制病原菌細(xì)胞膜上麥角甾醇的生物合成而起作用, 對禾谷鐮孢菌絲生長和芽管伸長階段的抑制效果較好;而孢子產(chǎn)生與萌發(fā)階段需要消耗大量能量, 咪鮮胺作用方式與能量的產(chǎn)生并無直接關(guān)系, 因此對于這兩個發(fā)育階段的抑制效果比較差。且邵莒南等[19]的結(jié)果證明,不同發(fā)育階段禾谷鐮孢對4種SBIs的敏感性存在較大差異, 其敏感性由高到低依次為菌絲生長和產(chǎn)孢階段gt;芽管伸長階段gt;孢子萌發(fā)階段, 本研究結(jié)果與其基本一致。
與咪鮮胺同類型的殺菌劑有戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、丙硫菌唑等。以往的報道中, 吳小美等[20]研究發(fā)現(xiàn)該類型的殺菌劑已在田間出現(xiàn)抗藥性菌株, Mcgrath等[21]研究發(fā)現(xiàn)瓜類白粉病菌Erysiphe cucurbi-tacearum
2001年已對該類殺菌劑產(chǎn)生抗性, Wyand等[22] 2005年發(fā)現(xiàn)了對該類殺菌劑產(chǎn)生抗性的小麥白粉病菌Blumeria graminis f.sp. tritici, Liu等[23]研究發(fā)現(xiàn),河南省田間出現(xiàn)對多菌靈具有抗性的禾谷鐮孢。隨著化學(xué)藥劑的長期使用, 柑橘綠霉病菌Penicillium digitatum、大麥網(wǎng)斑病菌Pyrenophora teres、大麥云紋病菌Rhynchosporium secalis、甜菜褐斑病菌Cercospora beticola、蘋果黑星病菌Venturia inaequalis、小麥紋枯病菌Rhizoctonia cerealis、小麥白粉病菌Erysiphe graminis f.sp. tritici、黃瓜白粉病菌和番茄葉霉病菌Fulvia fulva等許多常見的植物病原真菌已經(jīng)在實際生產(chǎn)中對SBIs殺菌劑產(chǎn)生不同程度抗性[24]。
長期、大量、使用單一種類的藥劑容易導(dǎo)致病菌產(chǎn)生抗藥性, 因此有必要監(jiān)測田間禾谷鐮孢群體對咪鮮胺的敏感性動態(tài), 及時掌握其抗藥性菌株出現(xiàn)時間和發(fā)展動態(tài)。本研究測定了2019年、2021年和2022年采集自河南省6個地市的210株禾谷鐮孢菌絲生長對咪鮮胺的敏感性, 平均EC50(0.023 3±0.008 6)μg/mL, 敏感性頻率分布呈現(xiàn)為單峰曲線, 符合正態(tài)分布。咪鮮胺對不同地區(qū)的禾谷鐮孢的毒力
無明顯差異, 表明田間不存在對咪鮮胺敏感性下降亞群體。在以往的研究中, 宋陽陽等[25]測定了2014年湖北省禾谷鐮孢對咪鮮胺的敏感性, EC50分布范圍為0.002 0~0.370 0 μg/mL, 平均值為0.040 0 μg/mL;尹軍良等[26]測定了2017年湖北省小麥赤霉菌株對咪鮮胺的敏感性, EC50在0.008 1~0.099 8 mg/L, 平均EC50為0.033 2 mg/L;陳豪琦等[27]測定了2020年采自浙江省各小麥種植區(qū)的赤霉病菌對常用殺菌劑的抗性, 結(jié)果顯示,田間小麥赤霉病菌對咪鮮胺的抗性頻率為8%;徐超等[28]2021年在江蘇田間采集到咪鮮胺抗性菌株, 抗性頻率為0.09%。本研究未檢測到河南省禾谷鐮孢對咪鮮胺的抗性菌株, 生產(chǎn)中咪鮮胺仍可作為防控小麥赤霉病的藥劑進(jìn)行使用。
咪鮮胺等脫甲基抑制劑被國際殺菌劑抗性委員會(Fungicide Resistance Action Committee, FRAC)列為中等抗性風(fēng)險,為了延緩禾谷鐮孢對咪鮮胺產(chǎn)生抗藥性[29],本研究測定了葉菌唑、氰烯菌酯、氟啶胺及咯菌腈4種單劑及其與咪鮮胺進(jìn)行復(fù)配對禾谷鐮孢的毒力。結(jié)果顯示:4種藥劑對禾谷鐮孢的有效抑制中濃度由高到低分別為:氰烯菌酯0.099 1 μg/mL、氟啶胺0.051 2 μg/mL、咯菌腈0.023 8 μg/mL、葉菌唑0.014 8 μg/mL,禾谷鐮孢的菌絲生長對這4種殺菌劑都有較高的敏感性;與咪鮮胺按5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5的質(zhì)量比進(jìn)行復(fù)配時,增效系數(shù)為0.54~3.94。不同組合、不同比例的復(fù)配劑均表現(xiàn)為相加作用或增效作用,其中m(咪鮮胺)∶m(氟啶胺)=3∶1時,增效系數(shù)最大,增效作用最強。這些不同類型的殺菌劑都具有防治小麥赤霉病的潛力,可作為咪鮮胺的輪換用藥,降低咪鮮胺抗性風(fēng)險。另外,本研究在室內(nèi)條件下測定了45%咪鮮胺水乳劑、50%多菌靈懸浮劑、50%氟啶胺懸浮劑以及咪鮮胺與氟啶胺的復(fù)配劑對小麥胚芽鞘的保護(hù)活性,其中復(fù)配劑效果顯著優(yōu)于單劑。在田間應(yīng)用中可以將咪鮮胺與氟啶胺復(fù)配使用,以降低咪鮮胺的使用風(fēng)險,保證小麥生產(chǎn)安全。
綜上所述, 試驗結(jié)果表明, 咪鮮胺、葉菌唑、咯菌腈、氟啶胺、氰烯菌酯這5種殺菌劑以及咪鮮胺與其他4種藥劑二元復(fù)配,
都對禾谷鐮孢具有較高的毒力并且復(fù)配均表現(xiàn)出增效或者相加作用。所以在田間實際生產(chǎn)中推薦使用這5種殺菌劑進(jìn)行交替或者復(fù)配使用, 以延緩禾谷鐮孢對殺菌劑抗藥性的發(fā)生和發(fā)展。本研究為小麥赤霉病的防治以及合理使用咪鮮胺提供理論依據(jù)。但由于殺菌劑對植物病害的防治效果會受到作物品種、天氣變化等其他因素的影響, 因此田間藥效還需進(jìn)一步研究。
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