原料藥中的未知雜質(zhì)分離技術(shù)分析

摘要：原料藥中的未知雜質(zhì)對藥品質(zhì)量和安全性具有重要影響。因此，對這些雜質(zhì)的分離和鑒定技術(shù)的研究至關(guān)重要。概述了原料藥中未知雜質(zhì)分離技術(shù)的常用方法，包括色譜技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)以及核磁共振波譜技術(shù)。這些技術(shù)在未知雜質(zhì)的檢測、結(jié)構(gòu)解析和含量測定中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。通過這些技術(shù)的應用，確保原料藥的質(zhì)量和安全性，為藥品監(jiān)管和質(zhì)量控制提供科學依據(jù)。

關(guān)鍵詞：原料藥;未知雜質(zhì);分離技術(shù)原料藥作為藥品生產(chǎn)的基礎(chǔ)，其質(zhì)量直接影響到最終產(chǎn)品的安全性和有效性。在原料藥的生產(chǎn)過程中，不可避免地會引入一些未知雜質(zhì)，這些雜質(zhì)的存在可能會對藥品的療效和安全性產(chǎn)生不利影響。因此，對原料藥中未知雜質(zhì)的分離和鑒定技術(shù)的研究顯得尤為重要。

1原料藥中未知雜質(zhì)的重要性

原料藥中未知雜質(zhì)是不可忽視的，它的存在會顯著地影響藥物的療效、安全性和穩(wěn)定性。未知雜質(zhì)可源于原料藥合成工藝，如反應不完全、副反應、原料不純或者在生產(chǎn)中受到污染等。這些雜質(zhì)可能使藥品療效下降甚至出現(xiàn)不良反應。如一些雜質(zhì)可能有毒性，含雜質(zhì)藥品的長時間或大劑量攝入可嚴重威脅人體健康。未知雜質(zhì)可能會對藥品穩(wěn)定性造成影響。某些雜質(zhì)在貯存、運輸中可能促使藥品降解、失效或生成新的有害物質(zhì)。另外，雜質(zhì)存在也會對藥品外觀、氣味、溶解度等物理性質(zhì)產(chǎn)生影響，進而影響患者用藥依從性及藥品市場接受度。再者，未知雜質(zhì)的出現(xiàn)也給藥品監(jiān)管及質(zhì)量控制帶來更多考驗。藥品監(jiān)管機構(gòu)一般都制定了嚴格的雜質(zhì)管控標準，規(guī)定藥品生產(chǎn)企業(yè)必須對原料藥進行細致的雜質(zhì)檢測與識別，以保證藥品安全有效。所以，研究未知雜質(zhì)分離鑒定技術(shù)，以滿足監(jiān)管要求，提高藥品質(zhì)量顯得尤為重要，如圖1所示。

2原料藥中未知雜質(zhì)分離技術(shù)的常用方法

2.1色譜技術(shù)

2.1.1高效液相色譜（HPLC）

高效液相色譜（HPLC）是一種常用的分離和檢測未知雜質(zhì)的技術(shù)。其基本原理是將樣品通過高壓推動，經(jīng)過填充固定相的柱子，利用固定相與流動相（溶劑）之間的相互作用來分離混合物中的成分。在HPLC中，通過調(diào)節(jié)流動相的組成、柱溫和壓力等參數(shù)，實現(xiàn)對不同化合物的分離。高效液相色譜具有分離效率高、分析速度快、靈敏度高和操作簡便等優(yōu)點，因此在藥物分析中得到廣泛應用［1］。

2.1.2氣相色譜（GC）

氣相色譜（GC）被廣泛認為是一種有效的分離方法，特別是在分析易揮發(fā)物質(zhì)時。樣本首先會蒸發(fā)為氣態(tài)，接著通過柱內(nèi)的載氣（通常是惰性氣體）推進，利用樣本與固定相之間的互動來實現(xiàn)分離。通過調(diào)整柱溫、載氣流速及固定相類型，實現(xiàn)不同化合物分離。氣相色譜因其高分辨率、高靈敏度和快速圖1原料藥中的未知雜質(zhì)分離技術(shù)分析

的分析能力，在藥物分析領(lǐng)域也獲得了廣泛的應用。對未知雜質(zhì)分析時，可將未知雜質(zhì)與標準物質(zhì)保留時間進行比對，做定性定量分析，這對確保藥品的安全、有效至關(guān)重要。目前常用方法主要包括：化學分析法、質(zhì)譜分析法和電化學法。但這幾種手段均需花費一定的時間來完成試樣的前處理，且無法完全取得預期的效果。

2.1.3毛細管電泳（CE）

毛細管電泳（CE）是一種電動力驅(qū)動的分離方法，在藥物分析中有著廣泛的應用，尤其是在分離和檢測帶電性化合物方面表現(xiàn)尤為出色。其原理是基于電場的作用，帶電的粒子（通常是離子或分子）在毛細管中的移動速度是由其電荷量、大小和電場的強度決定的。不同化合物因其電荷性質(zhì)及尺寸不一樣，在電場作用下遷移速率亦不相同，從而達到分離混合物之目的。毛細管電泳技術(shù)擁有眾多的優(yōu)點，如高效的分離能力、快速的分析速度以及對樣本的低消耗。毛細管內(nèi)徑較小，減小對流動性及擴散的影響，從而提高了分離效率，便于復雜樣品分析。另外，因毛細管中流動阻力很小，所以分析速度很快，一般僅需數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘就能完成一個分析。

2.2質(zhì)譜技術(shù)

2.2.1液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LCMS）融合了液相色譜與質(zhì)譜兩大技術(shù)的優(yōu)勢，是一種高效的分析手段。LCMS中，樣品先被液相色譜分離后再進入質(zhì)譜檢測定性分析。液相色譜是用于從復雜混合物中分離化合物并按它們在柱體上的滯留時間進行分離，質(zhì)譜是用來測定化合物分子結(jié)構(gòu)及其相對豐度。兩種技術(shù)相結(jié)合，使LCMS兼具高分辨率、高靈敏度及高選擇性。當未知雜質(zhì)被解析后，可將待測化合物質(zhì)譜圖譜與數(shù)據(jù)庫標準質(zhì)譜比對，以判斷化合物結(jié)構(gòu)及性能。除此之外，LCMS技術(shù)還能夠利用多級質(zhì)譜技術(shù)（MS/MS）進行精確的定量分析和雜質(zhì)結(jié)構(gòu)的推測，這為藥物的研發(fā)和生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制提供了一種可靠的方法［2］。

2.2.2氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用

質(zhì)譜聯(lián)用（GCMS）是一種常用的分析技術(shù)，結(jié)合了氣相色譜和質(zhì)譜兩種技術(shù)的優(yōu)勢。在GCMS中，樣品首先通過氣相色譜進行分離，然后進入質(zhì)譜進行檢測和定性分析。氣相色譜用于分離易揮發(fā)性化合物，根據(jù)其在柱上的保留時間進行分離，而質(zhì)譜則用于確定化合物的分子結(jié)構(gòu)和相對豐度。GCMS具有分辨率高、靈敏度高和選擇性強的特點，可用于分析復雜混合物中的微量雜質(zhì)。在分析未知雜質(zhì)時，可以通過比較待測化合物的質(zhì)譜圖譜與數(shù)據(jù)庫中的標準質(zhì)譜進行匹配，從而確定其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。

2.3核磁共振波譜技術(shù)

2.3.11HNMR

質(zhì)子核磁共振波譜（1HNMR）是一項在化合物結(jié)構(gòu)和性質(zhì)分析方面具有廣泛應用的高效技術(shù)。這一原理是基于核磁共振的觀察，當樣本被置于高強度的磁場中，其中的質(zhì)子核會因磁場的影響而產(chǎn)生共振現(xiàn)象。1HNMR譜圖上不同化學環(huán)境下質(zhì)子會表現(xiàn)出不同共振頻率，從而在譜圖上出現(xiàn)特定的信號峰。對1HNMR譜圖進行分析，可得到大量信息用于化合物結(jié)構(gòu)與性能的鑒定。首先，化學位移提供了關(guān)于質(zhì)子環(huán)境的信息，即特定質(zhì)子相對于標準化合物（通常是四甲基硅烷）的位移程度。其次，信號峰上的積分值能夠給出每一個質(zhì)子所關(guān)聯(lián)的相對個數(shù)，進而推斷出分子內(nèi)各個部分所占的相對比例。最后，通過對信號峰形狀及相對位置的觀察還可判斷質(zhì)子間的耦合模式——鄰近質(zhì)子間的相互作用，對推測分子構(gòu)象及立體結(jié)構(gòu)有重要意義。1HNMR技術(shù)有很多的優(yōu)勢，包括非破壞性、不需要對樣品進行前處理、靈敏度高、分辨率好等。這就決定了樣品在被分析的同時結(jié)構(gòu)不會受到損傷，而且樣品制備過程無需繁瑣的步驟。

3原料藥中未知雜質(zhì)分離技術(shù)的應用

3.1未知雜質(zhì)的檢測與鑒定

對于原料藥而言，由于其可能對藥品的安全性、有效性以及穩(wěn)定性造成不利影響，對于未知雜質(zhì)進行檢測和識別就顯得尤為重要。針對未知雜質(zhì)的檢測與鑒定，常用的技術(shù)包括色譜技術(shù)（如高效液相色譜、氣相色譜等）、質(zhì)譜技術(shù)（如質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)）以及核磁共振波譜技術(shù)（如質(zhì)子核磁共振波譜、13CNMR等）。這些技術(shù)能有效而敏感地分離檢測樣品，以精確地識別未知雜質(zhì)類型及含量。其中，色譜技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)未知雜質(zhì)分離與定性分析，質(zhì)譜技術(shù)能夠為未知雜質(zhì)分子結(jié)構(gòu)提供數(shù)據(jù)支持，核磁共振波譜技術(shù)能夠進一步證實其結(jié)構(gòu)［3］。

3.2未知雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)解析

解析未知雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)可以幫助理解其來源、合成路徑以及對藥物質(zhì)量的影響，從而采取相應的控制措施。通常，結(jié)構(gòu)解析的過程包括樣品的分離、提純和結(jié)構(gòu)鑒定。色譜技術(shù)（如高效液相色譜、氣相色譜）可以實現(xiàn)對未知雜質(zhì)的分離和純化，質(zhì)譜技術(shù)（如質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)）則可以提供未知雜質(zhì)的分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)信息。此外，核磁共振波譜技術(shù)（如質(zhì)子核磁共振波譜、13CNMR）可以提供未知雜質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和構(gòu)象信息。綜合運用這些技術(shù)，可以對未知雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行全面、準確的解析。

4結(jié)語

原料藥中未知雜質(zhì)的分離和鑒定技術(shù)是確保藥品質(zhì)量和安全性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。色譜技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)以及核磁共振波譜技術(shù)等現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展，為原料藥中未知雜質(zhì)的檢測和結(jié)構(gòu)解析提供了強有力的工具。通過這些技術(shù)的應用，有效地監(jiān)控原料藥的質(zhì)量，為藥品監(jiān)管和質(zhì)量控制提供科學依據(jù)，保障公眾用藥安全。

參考文獻：

［1］彭秀玲，李文強，王茴茴，等.撲熱息痛原料藥中的未知雜質(zhì)分離及結(jié)構(gòu)鑒定［J］.化學研究與應用，2023，35（7）：17901795.

［2］計小凡，歐陽輝，馮育林，等.多中心切割2DHPLCQTOF法對表柔比星脂質(zhì)體制劑中未知雜質(zhì)的分離與結(jié)構(gòu)推斷［J］.中國抗生素雜志，2023，48（1）：7986.

［3］孟祥燕，馮傳威，樊偉明，等.羅紅霉素未知雜質(zhì)的分離鑒定與抗菌活性研究［J］.中國抗生素雜志，2022，47（4）：361365.

作者簡介：滕麗華，女，河北保定人，工程師，本科，研究方向：藥品分析與國際注冊。