不同種類的微藻肥對椰棗幼苗生長的影響

摘""要：椰棗作為外來引進(jìn)作物，國內(nèi)缺乏栽培管理經(jīng)驗(yàn)。選擇合適的營養(yǎng)劑，快速高效構(gòu)建椰棗生根體系，保障椰棗在田間定植期間根系對營養(yǎng)的充分吸收，縮短椰棗的生長周期，是我國椰棗產(chǎn)業(yè)發(fā)展的當(dāng)務(wù)之急。為研究不同種類的微藻肥對2個(gè)品種Mabroom、Sillege椰棗幼苗生長的影響，選用鮮微藻（M1）、發(fā)酵微藻液（M2）、微藻營養(yǎng)液（M3）、微藻循環(huán)液（M4）對幼苗進(jìn)行處理，對椰棗幼苗生長及生理指標(biāo)葉長、細(xì)胞膜的相對透性、丙二醛（MDA）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽還原酶（GR）進(jìn)行測定。結(jié)果表明：在M3和M4處理后，Mabroom幼苗葉長顯著高于CK，M4gt;M3，M3和M4能夠促進(jìn)Mabroom幼苗的生長；葉片細(xì)胞的滲透調(diào)節(jié)能力強(qiáng)；CAT、POD活性及MDA含量變化低于CK。而在M1、M2處理后，Sillege幼苗葉片伸長長度顯著高于CK，M1、M2更適合Sillege幼苗的生長，M1gt;M2；葉片細(xì)胞的滲透調(diào)節(jié)能力高于CK；CAT活性變化低于CK。該研究表明M3和M4在培養(yǎng)微藻的過程中，可合成相關(guān)活性物質(zhì)產(chǎn)生初級代謝產(chǎn)物，此種生物活性物質(zhì)被幼苗根系吸收，促進(jìn)了椰棗葉片的伸長生長，Mabroom幼苗更適合施用微藻的次生代謝產(chǎn)物作為肥料，Sillege椰棗幼苗更適合新鮮微藻和發(fā)酵后的微藻。

關(guān)鍵詞：椰棗；微藻；過氧化物；丙二醛中圖分類號：S59""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Effects"of"Different"Microalgae"Fertilizer"on"Growth"of"Date"Palm"Seedlings

ZHANG"Ning1，"WU"Fengman2，"ZHANG"Tingqian2，"XU"Zhongliang1，"XU"Fengyuan3，"ZHANG"Wei3，"CHENG"Shuanghong2*，"FU"Haiquan1*

1."Coconut"Research"Institute，"Chinese"Academy"of"Tropical"Agricultural"Sciences"/"National"Tropical"Palm"Germplasm"Reserve，"Wenchang，"Hainan"571300，"China;"2.nbsp;College"of"Tropical"Crops，"Yunnan"Agricultural"University，"Pu’er，nbsp;Yunnan"665000，"China;"3."Micro"Resources"（Shanghai）"Biotechnology"Co.，"Ltd，"Shanghai"201203，"China

Abstract："As"an"imported"crop，"date"palm"lacks"planting"management"experience"in"China."It"is"imperative"for"the"development"of"Chinese"date"palm"industry"to"select"suitable"nutrients，"construct"the"date"palm"rooting"system"quickly"and"efficiently，"ensure"the"full"absorption"of"nutrients"by"the"roots"during"the"field"planting"period，"and"shorten"the"growth"cycle"of"date"palm."In"order"to"study"the"effects"of"different"microalgae"fertilizer"on"the"growth"of"date"palm"seedlings"of"“Mabroom”"and"“Sillege”"varieties，"fresh"microalgae"（M1），"fermented"microalgae"solution"（M2），"microalgae"nutrient"solution"（M3）"and"microalgae"circulation"solution"（M4）"were"selected"to"treat"the"seedlings."The"growth"and"physiological"indexes"（leaf"length，"relative"permeability"of"cell"membrane，"malondialdehyde"MDA，"peroxidase"POD，"catalase"CAT，"glutathione"reductase"GR）"of"date"palm"seedlings"were"measured."The"results"showed"that"the"leaf"length"of"“Mabroom”"seedlings"was"significantly"higher"than"that"of"the"control"group"after"treatment"with"microalgae"nutrient"solution"（M3）"and"microalgae"circulation"solution"（M4），"and"the"microalgae"nutrient"solution"（M3）"and"microalgae"circulation"solution"（M4）"could"promote"the"growth"of"“Mabroom”"seedlings."The"osmotic"regulation"ability"of"leaf"cells"was"strong."The"contents"of"catalase，"peroxidase"and"malondialdehyde"were"lower"than"those"of"the"control."After"treatment"with"fresh"microalgae"（M1）"and"fermented"microalgae"solution"（M2），"the"leaf"elongation"length"of"“Sillege”"seedlings"was"significantly"higher"than"that"of"the"control，"and"fresh"microalgae"（M1）"and"fermented"microalgae"solution"（M2）"were"more"suitable"for"the"growth"of"“Sillege”"seedlings，"with"fresh"microalgae"（M1）gt;fermented"microalgae"solution"（M2）."The"osmotic"regulation"ability"of"leaf"cells"was"higher"than"that"of"the"control."The"change"of"catalase"content"was"lower"than"that"of"the"control."This"study"showed"that"during"the"cultivation"of"microalgae，"the"microalgae"nutrient"solution"（M3）"and"microalgae"circulation"solution"（M4）"could"synthesize"related"active"substances"to"produce"primary"metabolites."Such"bioactive"substances"were"absorbed"by"seedling"roots"and"promoted"the"elongation"and"growth"of"date"palm"leaves."The"“Mabroom”"seedlings"were"more"suitable"to"apply"the"secondary"metabolites"of"microalgae"as"fertilizer."“Sillege”"date"palm"seedlings"are"more"suitable"for"fresh"and"fermented"microalgae.

Keywords："date"palm;"microalgae;"peroxide;"malondialdehyde

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2024.12.008

椰棗樹（Phoenix"dactylifera）是阿拉伯國家的重要木本糧食作物，被譽(yù)為“阿拉伯民族之樹”。椰棗樹和椰棗在阿拉伯人民日常生活中扮演了極為重要的角色，營養(yǎng)價(jià)值極高，是阿拉伯一些國家重要的出口農(nóng)作物，在中東阿拉伯國家的生態(tài)和經(jīng)濟(jì)建設(shè)中發(fā)揮著重要作用[1]。椰棗的雜合性與雌雄異株有關(guān)[2]，種子繁殖產(chǎn)生的后代有一半是由開花前無法區(qū)分的雄樹組成的，它們不產(chǎn)生果實(shí)，而且在后續(xù)繁殖中也會發(fā)生很大的變異，而雌性植物產(chǎn)生的果實(shí)也多變，通常質(zhì)量較差[3]。無性繁殖成為椰棗種苗繁育的主要手段，無性繁殖技術(shù)包括2個(gè)方面：母株分蘗苗繁殖和組織培養(yǎng)技術(shù)[4]。其中分蘗苗繁殖是從母株上切割下分蘗苗，然后復(fù)壯生根后田間定植[5]。組織培養(yǎng)技術(shù)是取椰棗的器官組織通過體胚發(fā)生途徑獲得再生植株，而后壯苗生根，溫室煉苗后田間定植[6]。2種技術(shù)手段都需要重新構(gòu)建植株的根系，確保獲得健康根系為植株充分吸收營養(yǎng)提供保障，傳統(tǒng)的化肥不僅在幼嫩的苗期易對植物造成燒苗的危害，而且容易影響土壤結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、水分滲透力和養(yǎng)分組成。椰棗已成為熱帶農(nóng)業(yè)的重要組成部分，對促進(jìn)農(nóng)民增收和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有重要意義，然而，中國的椰棗研究起步較晚，種苗繁育技術(shù)還未完善，椰棗幼苗生長過程中存在生長緩慢、易受害蟲侵害等問題，限制了椰棗產(chǎn)業(yè)發(fā)展[7-8]。因此，如何篩選出快速、高效構(gòu)建椰棗生根體系的營養(yǎng)劑，且保障植物根系的營養(yǎng)吸收，縮短椰棗的生長周期成為目前我國的椰棗產(chǎn)業(yè)發(fā)展的當(dāng)務(wù)之急。

微藻是一類廣泛分布于海洋、淡水和陸地環(huán)境中的微小植物，具有光合利用度高、營養(yǎng)豐富的特點(diǎn)，微藻作為一種新型生物資源，在食品、飼料、化妝品、醫(yī)藥和能源等領(lǐng)域得到了廣泛關(guān)注[9-11]。微藻肥作為一種綠色、高效的生物肥料，已經(jīng)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中取得了良好的應(yīng)用效果。在農(nóng)業(yè)工程中藻類資源也具有廣闊的應(yīng)用前景。微藻具有品質(zhì)可塑、固碳能力強(qiáng)、生長速率快、培養(yǎng)方式多樣化（光合自養(yǎng)、混養(yǎng)及異養(yǎng)）、生長周期短，可工業(yè)化養(yǎng)殖等特點(diǎn)[12-15]。藻類作為生物圈的重要組成部分，廣泛生長于水體和陸地環(huán)境中，具有形態(tài)多樣性和功能多樣性，藻類是土壤改良和作物增產(chǎn)的潛在綠色生物資源，具有巨大的開發(fā)價(jià)值。微藻細(xì)胞含有大量營養(yǎng)元素，如氮、磷和鉀等，可以作為椰棗育苗階段有機(jī)緩釋肥料，改善土壤營養(yǎng)元素的化學(xué)劑量比，為后期提高椰棗的產(chǎn)量和品質(zhì)打下技術(shù)基礎(chǔ)[16]。

根據(jù)藻類資源對土壤和植物的不同作用機(jī)制，其衍生出不同類型的產(chǎn)品。其中微藻作為生物肥料（microalgae"biofertil-izer，MBF）可提高土壤肥力，即藻細(xì)胞通過光合作用和固氮作用，提高土壤的氧氣和有機(jī)質(zhì)含量，進(jìn)而提高土壤微生物活力和改善微生物間的相互作用，促進(jìn)植物生長[17]，可通過施加藻源顆?；蛟宸?，利用藻細(xì)胞自身營養(yǎng)物質(zhì)改良土壤；從藻類細(xì)胞中提取的生物刺激劑（microalgae"biostimulant，MBS）可以促進(jìn)種子萌發(fā)、植物生長，提高植物的養(yǎng)分利用效率，增強(qiáng)植物對環(huán)境脅迫的耐受性；從藻類細(xì)胞中提取的海藻多糖可在農(nóng)產(chǎn)品表面形成生物膜（biofilm），抑制微生物感染和生物氧化，是潛在的農(nóng)產(chǎn)品保鮮劑；在土壤修復(fù)和污染治理方面，也可以利用微藻的胞外聚合物（extracellular"polymeric"substance，EPS）增強(qiáng)土壤團(tuán)聚體的穩(wěn)定性，實(shí)現(xiàn)荒漠化土壤的治理[18]。土壤微藻具有固氮和固碳作用、釋放生物活性物質(zhì)（如類胡蘿卜素、蛋白質(zhì)、脂肪酸、植物激素等）及含有微量元素（Cu、Fe、Se、Mn、Zn）等生物特性，在養(yǎng)分投入量過多的條件下，施用微藻并不會提高番茄／黃瓜的產(chǎn)量，但可明顯降低果實(shí)中硝酸鹽含量，改善果實(shí)品質(zhì)[19]。藍(lán)藻在對水稻作物的養(yǎng)分需求及環(huán)境脅迫方面發(fā)揮著有效作用，其中藍(lán)藻作為生物肥料在改善水稻氮素需求和粉煤灰脅迫中發(fā)揮著重要的作用[20]。在洋蔥栽培的田間試驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)微藻生物肥料對洋蔥的產(chǎn)量有明顯提高，可作為生物替代肥料產(chǎn)生可持續(xù)性和提高生產(chǎn)力[21]。在番茄栽培管理上，微藻作為緩釋肥料，改善土壤結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)植物抗逆性、促進(jìn)根系生長和增殖、增強(qiáng)植物光合作用等優(yōu)點(diǎn)[22]。近年來，在我國有關(guān)微藻肥對植物生長的促進(jìn)作用的研究越來越多，但關(guān)于微藻肥對椰棗幼苗生長影響的研究鮮見報(bào)道。為此，本研究選取鮮微藻（M1）、發(fā)酵微藻液（M2）、微藻營養(yǎng)液（M3）、微藻循環(huán)液（M4）4種微藻肥，2個(gè)品種Mabroom、Sillege椰棗幼苗為研究對象，探討4種微藻肥對2個(gè)不同品種類型的椰棗幼苗生長指標(biāo)和生理指標(biāo)的影響，旨在為椰棗種苗繁育提供一種高效、環(huán)保的育苗方法，促進(jìn)我國椰棗產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1""材料與方法

1.1""材料

試驗(yàn)在中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所光照培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。椰棗種子品種Mabroom、Sillege均來自阿聯(lián)酋。在培養(yǎng)皿中催芽至露白后，播種于含有泥炭、珍珠巖、蛭石和椰糠（體積比4∶3∶2∶1）的營養(yǎng)缽中，在光照培養(yǎng)室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度28"℃，6個(gè)月后，選擇生長健壯、長勢一致的椰棗幼苗作為供試材料。微藻肥料M1（微藻養(yǎng)殖池里采獲新鮮的藻）、M2（新鮮微藻經(jīng)過30"d密封發(fā)酵的培養(yǎng)液）、M3（采收新鮮微藻后的培養(yǎng)液）、M4（采收微藻后經(jīng)過雜質(zhì)過濾后進(jìn)入第二輪循環(huán)使用的液體）均由上海微資源有限公司提供（表1）。

1.2""方法

1.2.1""試驗(yàn)設(shè)計(jì)""對供試材料作以下處理，分別以清水（CK）、M1、M2、M3、M4作為肥料，隔天處理1次，每次200"mL，每周3次，7"d為一個(gè)處理周期，共6個(gè)周期。每個(gè)處理5株，重復(fù)3次。

1.2.2""指標(biāo)測定""每7"d統(tǒng)計(jì)苗期形態(tài)指標(biāo)：葉長；測定葉片的電導(dǎo)率，計(jì)算細(xì)胞膜的相對透性；取樣椰棗葉片，測定生理指標(biāo)：丙二醛（MDA）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽還原酶（GR）。MDA、POD、CAT、GR指標(biāo)檢測所使用的試劑盒為96樣微板法，均采購自蘇州格銳思生物科技有限公司，所用設(shè)備為賽默飛的酶聯(lián)免疫檢測儀。

42"d后，從營養(yǎng)缽中取出完整的葉片，用石蠟切片技術(shù)對組織樣本進(jìn)行切片，番紅固綠染色，觀察細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；實(shí)驗(yàn)流程：脫蠟至水-固綠染色-番紅染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢；細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征：韌皮部性形成層芽尖根尖分生區(qū)等新生組織結(jié)構(gòu)呈綠色，木質(zhì)化木栓化結(jié)構(gòu)呈紅色。

1.3""數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel軟件整理，用SPSS"22軟件進(jìn)行單因素、多因素方差分析、多重比較及顯著性分析，用R語言（3.6.2）進(jìn)行相關(guān)性分析。

2""結(jié)果與分析

2.1""不同藻類肥料處理對椰棗幼苗生長指標(biāo)的影響

由表2可以看出，不同種類的微藻肥料處理椰棗幼苗后，對2個(gè)品種的椰棗幼苗葉長均產(chǎn)生了不同程度的影響。隨著處理時(shí)間的增加，2個(gè)品種的椰棗葉長隨之增加，MM1、MM2、MM3、MM4處理的葉長在42"d時(shí)均顯著高于MCK（Plt;"0.05），其中MM4處理葉長在42"d時(shí)達(dá)到最長，為62.5"cm；其次是MM3處理的葉長，在42"d時(shí)達(dá)到60.4"cm，與MCK差異顯著（Plt;0.05）。SM1、SM2、SM3、SM4處理的葉長在42"d時(shí)均顯著高于SCK（Plt;0.05），其中，SM1和SM2長度分別達(dá)到47.2、46.0"cm，二者之間差異不顯著；SM3和SM4長度分別達(dá)到44.5、43.0"cm，二者之間差異不顯著。由此可見，M3和M4有利于促進(jìn)Mabroom品種幼苗葉片的伸長，M1和M2有利于促進(jìn)Sillege品種幼苗葉片的伸長。

由表3可以看出，MCK、MM1、MM2處理下細(xì)胞膜相對透性隨著處理時(shí)間的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，每個(gè)相同時(shí)間段的數(shù)值與MCK差異顯著（Plt;0.05），MM3處理下細(xì)胞膜相對透性在7～14"d出現(xiàn)升高趨勢，14～21"d出現(xiàn)降低趨勢，21～28"d出現(xiàn)升高趨勢，28～42"d出現(xiàn)降低趨勢；MM4處理下細(xì)胞膜相對透性在

7～14"d出現(xiàn)升高趨勢，14～28"d出現(xiàn)降低趨勢并趨于穩(wěn)定，35～42"d出現(xiàn)降低趨勢，每個(gè)相同時(shí)間段的數(shù)值與MCK差異顯著（Plt;0.05），MM1在42"d的細(xì)胞膜相對透性相比對照組增量最少；SM1、SM2的細(xì)胞膜相對透性出現(xiàn)先升高后降低并保持穩(wěn)定趨勢，SM3、SM4在7～28"d出現(xiàn)先升高后降低趨勢，在35"d出現(xiàn)明顯升高，SM2在42"d的細(xì)胞膜相對透性與SCK差異不顯著。由此可見，M1和M4對Mabroom品種幼苗葉片細(xì)胞損傷最小，M1和M2對Sillege品種幼苗葉片細(xì)胞損傷最小。

2.2""不同藻類肥料處理對椰棗幼苗谷胱甘肽還原酶（GR）活性的影響

理的第7天，MM2處理的GR活性達(dá)到最高值，較其他處理差異顯著（Plt;0.05），在處理的14～"28"d，MM1處理后GR活性維持在較高水平，在處理的35～42"d，MM4處理的GR值活性升高；Sillege品種幼苗經(jīng)過藻肥處理的14"d，SM2處理的GR值活性升高較其他處理差異顯著（Plt;0.05），處理14～28"d，GR活性出現(xiàn)降低趨勢，在處理的35"d，SM3處理的GR活性升至最高值，在處理的42"d，Sillege品種幼苗的GR活性整體降低，SM1處理的GR活性較其他處理高且差異顯著（Plt;"0.05）。由此可見，MM1、MM2處理可以在不同時(shí)間段內(nèi)提高M(jìn)abroom品種椰棗幼苗GR活性，SM2、SM3處理在14～35"d可以提高Sillege品種幼苗的GR活性，而SM1處理只能在42"d時(shí)提高Sillege品種幼苗的GR活性。

2.3""不同藻類肥料處理對椰棗幼苗過氧化氫酶（CAT）活性的影響

由圖2可知，在7～35"d處理中，CAT活性呈先升高后降低再升高的趨勢，在42"d處理時(shí)呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢。Mabroom品種幼苗在MM3處理7、21"d時(shí)，CAT活性達(dá)到最高，與其他處理差異顯著（Plt;0.05），MM2處理14"d時(shí)，CAT活性達(dá)到最高，MM1處理Mabroom品種幼苗35"d時(shí)，CAT活性達(dá)到最高，42"d時(shí)CAT活性降低至MCK以下，與MCK差異顯著（Plt;0.05）；Sillege品種幼苗在處理7"d時(shí)，SM4處理的CAT活性達(dá)到最高，14～21"d時(shí)，CAT活性呈現(xiàn)下降趨勢，28～35"d時(shí)CAT活性呈上升趨勢，42"d時(shí)CAT活性下降，顯著低于SCK（Plt;0.05）。Sillege品種幼苗在SM1處理下7～"21"d與SCK的變化趨勢基本保持一致，呈現(xiàn)平穩(wěn)趨勢，28"d時(shí)，CAT活性增加，與其他處理差異顯著（Plt;0.05），35"d時(shí)CAT活性低于SCK，42"d時(shí)CAT活性升高，顯著高于SCK（Plt;0.05）。SM2處理在42"d時(shí)CAT活性升高，顯著高于SCK（Plt;0.05）。由此可見，Mabroom品種的椰棗幼苗在MM2和MM3處理的7～14"d即可產(chǎn)生敏感反應(yīng)分泌過氧化氫，Sillege品種的椰棗幼苗在SM4處理7"d時(shí)即可產(chǎn)生敏感反應(yīng)分泌過氧化氫，Sillege品種的椰棗幼苗對SM1和SM2的處理敏感反應(yīng)延遲至35～42"d。

2.4""不同藻類肥料處理對椰棗幼苗過氧化物酶（POD）活性的影響

由圖3可知，Mabroom品種幼苗在MCK、MM1和MM4處理下，POD活性呈現(xiàn)先降低后升高再降低的趨勢，其中MM1處理POD活性在7～"14"d降低，14～21"d升高，21～28"d再降低，28～35"d再升高，35～42"d又降低，與MCK的變化趨勢一致，而MM4處理在35～42"d后POD活性趨于穩(wěn)定。藻肥MM2和MM3處理Mabroom品種椰棗幼苗POD活性呈現(xiàn)先升高后降低再升高的趨勢，其中POD活性在7～21"d升高，21～28"d降低，28～35"d再升高，35～42"d再降低，與MCK變化趨勢相反；Sillege品種幼苗POD活性在SMK、SM2、SM3的變化趨勢相似，呈先升高后降低趨勢，其中在SM2處理下，7～35"d的POD活性呈現(xiàn)升高趨勢，42"d時(shí)出現(xiàn)降低，而在SM3處理下7～21"d的POD活性升高，21～28"d的POD活性降低，35"d時(shí)短暫升高又降低至回歸平穩(wěn)。SM1、SM4的變化趨勢與其相反，POD活性呈先降低后升高趨勢，其中在SM1處理下，POD活性在7～14"d急速下降，而后21～35"d平穩(wěn)上升，在42"d時(shí)POD活性有所降低，在SM4處理下，POD活性在7～14"d略微下降，14～42"d處于快速升高期，顯著高于SCK（Plt;0.05）。由此可見，Mabroom品種幼苗對MM2和MM3處理更為敏感，植株在此處理下可以快速產(chǎn)生大量過氧化物，Mabroom品種幼苗對MM1和MM4處理出現(xiàn)短暫的敏感期，即降低歸于平穩(wěn)；Sillege品種幼苗對SM2和SM3的前期處理更為敏感，對SM4處理的敏感度則主要表現(xiàn)在后期產(chǎn)生大量過氧化物。

2.5""不同藻類肥料處理對椰棗幼苗丙二醛（MDA）含量的影響

由圖4可知，Mabroom品種幼苗在MM2、MM3和MM4處理下，MDA含量的變化趨勢相似，呈先降低后升高趨勢，7～21"d降低，21～28"d平穩(wěn)上升，28～42"d呈升高趨勢，在MCK處理下，MDA含量在7～21"d平穩(wěn)下降，21～42"d呈現(xiàn)升高趨勢，在MM1處理下，MDA含量在7～14"d先升高后在21"d時(shí)降低，21～35"d進(jìn)入快速升高期，42"d時(shí)降至初期含量。Sillege品種幼苗MDA含量在SMK的變化趨勢7～21"d快速升高、28"d時(shí)降低，35"d時(shí)升高，而后降低至與21"d時(shí)持平，在藻肥SM1的處理下MDA含量呈先降低后平穩(wěn)上升的趨勢，在SM2處理下MDA含量變化呈現(xiàn)先快速升高后平穩(wěn)上升，在SM3處理下MDA含量變化呈現(xiàn)先降低后28"d時(shí)開始升高，而后降低趨于平穩(wěn)，SM4處理下MDA含量變化呈現(xiàn)先降低后14"d開始升高，而后降低趨于平穩(wěn)。由此可見，Mabroom品種幼苗對MM2和MM3的處理表現(xiàn)敏感，7"d的MDA含量就達(dá)到最高值，膜脂過氧化程度最高，Sillege品種幼苗對SM2處理后期更為敏感，35～42"d的MDA含量升高，膜脂過氧化程度達(dá)到最高。SM1、SM3和SM4的膜脂化程度變化并不明顯。

2.6""不同藻類肥料處理下椰棗幼苗6個(gè)性狀指標(biāo)的相關(guān)性和變異性分析

對不同藻類肥料處理下椰棗幼苗6個(gè)指標(biāo)的相關(guān)分析（表4）及變異性分析（表5）發(fā)現(xiàn)，所有性狀均存在不同程度的相關(guān)性，其中MDA含量與GR、CAT、POD活性呈顯著正相關(guān)，與細(xì)胞膜相對透性呈顯著負(fù)相關(guān)，MDA與CAT的相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.326；GR活性與CAT、細(xì)胞膜的相對透性和葉長呈顯著正相關(guān)，與細(xì)胞膜相對透性的相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.299；CAT活性與POD活性呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.226；POD活性與細(xì)胞膜相對透性呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.120。

對不同藻類肥料處理下椰棗幼苗6個(gè)指標(biāo)的變異性分析（表5）發(fā)現(xiàn)，所有性狀均存在變異情況，GR的變異系數(shù)最大，達(dá)到57.32，細(xì)胞膜相對透性的變異系數(shù)最小，僅為11.44%，CAT的

變異系數(shù)達(dá)到49.14%，僅次于GR的變異系數(shù)。

2.7""不同藻類肥料處理對椰棗幼苗葉片的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由圖5可以看出，椰棗幼苗經(jīng)過番紅固綠染色后，細(xì)胞呈現(xiàn)綠色部分居多，證明多數(shù)細(xì)胞具備分生能力，MM4中細(xì)胞的綠色程度更深，說明Mabroom幼苗在M4的施用過程中，細(xì)胞分生能力更強(qiáng)，更有活力，其次是MM3，呈紅色部分的木質(zhì)化木栓化結(jié)構(gòu)的細(xì)胞較少。由SM1、SM2可以看出，Sillege幼苗在M1和M2的施用過程中，減少了葉片組織細(xì)胞中的老化部分，增強(qiáng)了細(xì)胞活力。細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與生理指標(biāo)分析結(jié)果基本保持一致。

3""討論

我國是世界農(nóng)業(yè)大國，也是化肥消費(fèi)大國，對肥料有較大的需求，微藻作為一種生物肥料，具有巨大優(yōu)勢，發(fā)展空間廣闊。劉淑芳等[23]使用了混合蛋白核小球藻、卷曲魚腥藻和四尾柵藻的生物肥料不僅可以促進(jìn)黃瓜的生長，還能顯著改善土壤品質(zhì)，減少化肥的使用[24]。王榮敏[25]在研究藍(lán)藻和綠藻組成的肥液對于桃子生長發(fā)育的影響中發(fā)現(xiàn)微藻肥可以有效增加果實(shí)質(zhì)量和固形物含量的作用。FAHEED等[26]研究了小球藻對生菜的影響，經(jīng)過藻液處理可以顯著提高種子的發(fā)芽速率，在土壤中添加藻液也增加了幼苗的鮮質(zhì)量、干質(zhì)量和色素含量。GRZESIK等[27]通過使用藍(lán)藻和綠藻改善玉米種子萌發(fā)、幼苗生長和代謝活性，結(jié)果表明，單株培養(yǎng)的微藻均能顯著提高玉米幼苗的生長，并強(qiáng)化了酶的代謝活性，而關(guān)于椰棗的生物肥料研究使用鮮有報(bào)道。

本研究以2個(gè)品種Mabroom、Sillege椰棗幼苗為研究對象，采用4種微藻肥M1、M2、M3、M4處理，探討不同微藻肥對椰棗品種幼苗生長生理指標(biāo)的影響。MDA是膜脂過氧化最重要的產(chǎn)物之一，能反映植物膜脂過氧化的程度，MDA可以與蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，從而保護(hù)這些分子免受氧化損傷，此外，MDA還可以促進(jìn)谷胱甘肽的合成，進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力，可通過MDA了解膜脂過氧化的程度，以間接測定膜系統(tǒng)受損程度以及植物的抗逆性[28]。在對Mabroom幼苗的結(jié)果分析中可知，M2在對Mabroom幼苗的施用中，MDA含量迅速積累升高，直到21"d才降低，顯然在早期的脅迫過程中發(fā)酵微藻對Mabroom幼苗造成了一定的傷害，葉片的生長也受到影響，發(fā)酵微藻肥在施肥至椰棗種植器皿中，在高溫高濕環(huán)境下仍舊繼續(xù)發(fā)酵繁殖，分泌堿性胞外物質(zhì)來堿化周圍環(huán)境，造成土壤的pH升高[29]，而Mabroom品種幼苗的耐受堿性脅迫的能力不強(qiáng)，所以在M2中容易受到損傷；M3和M4在培養(yǎng)微藻的過程中，微藻可合成相關(guān)活性物質(zhì)產(chǎn)生初級代謝產(chǎn)物，此種生物活性物質(zhì)被幼苗根系吸收，促進(jìn)了椰棗葉片的伸長生長，降低了CAT和POD活性。由此可見Mabroom幼苗更適合施用微藻的次生代謝產(chǎn)物作為肥料。

在對Sillege幼苗的結(jié)果分析中可知，M1藻類可富集水體中的氮磷等營養(yǎng)物質(zhì)，增加自身生物質(zhì)產(chǎn)量，繼而作為生物肥料，M1在對Sillege椰棗幼苗施用時(shí)，豐富的氮磷含量，促進(jìn)了椰棗幼苗的葉片的伸長生長育，提高了幼苗內(nèi)的GR活性，CAT和POD活性降低，CAT作為酶類清除劑，是以鐵卟啉為輔基的結(jié)合酶，它可促使H2O2分解為分子氧和水，清除體內(nèi)的過氧化氫，從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一。POD是一種氧化還原性酶，將光合作用的副產(chǎn)物乙醇酸氧化為乙醛酸和過氧化氫。細(xì)胞出現(xiàn)高濃度氧狀態(tài)時(shí)，也會通過過氧化物酶體的強(qiáng)氧化作用而得以有效調(diào)節(jié)，以避免細(xì)胞遭受高濃度氧的損害。谷胱甘肽還原酶在氧化脅迫反應(yīng)中對活性氧清除起關(guān)鍵作用，可以維持細(xì)胞內(nèi)充足的GSH水平。M2是微藻經(jīng)過高溫密封發(fā)酵，微藻中的多糖在高溫密封發(fā)酵過程中可能會被微生物分解，轉(zhuǎn)化為單糖或其他低分子量的糖類，微藻的蛋白質(zhì)會發(fā)生水解，生成氨基酸、多肽等更小分子量的物質(zhì)，此類物質(zhì)有利于植物根系對營養(yǎng)的吸收[30]，促進(jìn)幼苗的生長，增強(qiáng)了細(xì)胞膜的相對透性，減輕了土壤基質(zhì)中不利因素對幼苗的脅迫，Sillege品種椰棗幼苗耐受鹽堿脅迫能力更強(qiáng)，更容易在高pH環(huán)境下生長。由此可見，Sillege椰棗幼苗更適合新鮮微藻和發(fā)酵后的微藻。

綜上所述，不同微藻類型適應(yīng)的椰棗品種幼苗種類有所不同，Mabroom幼苗耐受堿性土壤能力有限，更適合富含生物活性物質(zhì)的微藻代謝產(chǎn)物作為肥料，而Sillege椰棗幼苗耐受鹽堿土壤能力強(qiáng)，更適合富含小分子單糖或者小分子氨基酸的微藻原液或者發(fā)酵液作為肥料。此研究目前只做了椰棗幼苗生長階段所需肥料的微藻種類，關(guān)于椰棗生殖生長階段所需的種類還需進(jìn)一步深入研究。

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