種間靠接對中粒種咖啡嫁接苗生長的影響

摘""要：為研究種間靠接方式對咖啡嫁接苗生長的影響，以中粒種咖啡熱研1號(hào)為接穗、大粒種查理5號(hào)為砧木，采用靠接法進(jìn)行嫁接。設(shè)置2組靠接方式（先剪砧木頂端再靠接、先靠接成活后再剪砧木頂端），分別移入3種土質(zhì)（黏土、壤土、沙土）和4種不同咖啡連作年限（0、5、10、20"a）土壤中，以中粒種自接苗作為CK，研究種間靠接對嫁接苗成活率、嫁接苗植株長勢指標(biāo)、葉綠素含量和嫁接苗在不同土質(zhì)中生長、退化以及不同連作年限土壤生長的影響。結(jié)果表明：在接穗相同階段嫁接，保留砧木地上部分的靠接處理嫁接苗成活率顯著高于未保留地上部分的靠接處理的成活率。采用相同的靠接方式，在接穗“蝴蝶葉期”嫁接，嫁接苗成活率比“士兵期”嫁接顯著降低。不同嫁接方法能夠顯著影響咖啡嫁接苗成活率，且接穗苗齡較小有利于提高嫁接苗成活率。不保留砧木頂端的靠接處理相對增大了根系，增大根冠比，促進(jìn)地上部分生物量增大，植株生長較快。保留砧木頂端的靠接處理前期地上部分生物量大，促進(jìn)地下部分的生長。芽接成活后剪掉大粒種頂端，相對降低了地上部分生物量，使根系生長受到抑制，降低根系生物量。不同土質(zhì)對嫁接苗根系的生長產(chǎn)生顯著影響，在黏土中，中粒種根系比大粒種根系發(fā)達(dá)，在沙土中，大粒種根系比中粒種根系發(fā)達(dá)。隨著靠接苗的生長，嫁接成活后不及時(shí)剪除中粒種根系，大粒種根系會(huì)隨著生長緩慢退化。在不同種植年限土壤中，種間嫁接苗成活率均為100%，可以有效緩解連作障礙，顯著提高成活率，恢復(fù)地上部分生長。靠接后2～3"d開始出現(xiàn)愈合的皮層薄壁細(xì)胞，4"d時(shí)可見砧木與接穗之間有愈傷組織形成，6～8"d時(shí)砧木與接穗間2/3的莖段已經(jīng)愈合，8～10"d中愈合明顯。因此，以大粒種為砧木、中粒種為接穗，在接穗“士兵期”采用先剪掉大粒種頂端再靠接的方法可獲得生長旺盛的種間嫁接苗，可有效緩解土壤連作障礙，提高咖啡長勢。

關(guān)鍵詞：咖啡種間嫁接；靠接法；不同土質(zhì)；連作障礙；解剖結(jié)構(gòu)中圖分類號(hào)：S432.1""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Effect"of"Interspecific"Inarching"on"the"Growth"of"Grafted"Seedlings"of"Robusta"Coffee

LIN"Xingjun1，"LI"Ailing2，"LIU"Chang3，"LONG"Yuzhou1，"ZHANG"Ang1*

1."Hainan"Key"Laboratory"of"Genetic"Improvement"and"Quality"Regulation"for"Tropical"Spice"and"Beverage"Crops"/"Spice"and"Beverage"Research"Institute，"Chinese"Academy"of"Tropical"Agricultural"Sciences，"Wanning，"Hainan"571533，"China;"2."Hainan"Xingke"Tropical"Engineering"Technology"Co.，"Ltd.，"Wanning，"Hainan"571533，"China;"3."Hainan"Changjia"Agricultural"Tourism"Technology"Co.，"Ltd.，"Lingshui，"Hainan"572400，"China

Abstract："Using"the"robusta"coffee"Reyan"1"as"the"scion"and"liberica"coffee"Chali"5"as"the"rootstock，"grafting"was"carried"out"using"the"inarching"method"to"investigate"the"effect"of"interspecies"grafting"on"the"growth"of"coffee"grafted"seedlings."Two"sets"of"inarching"methods"were"set"up"（cutting"off"the"top"of"the"rootstock"first"and"then"grafting，"and"grafting"first"and"then"cut"off"the"top"of"the"rootstock"after"surviving），"and"then"transplanted"into"three"types"of"soil"（clay，"loam，"and"sandy"soil）"and"four"different"coffee"continuous"cropping"years"（0，"5，"10，"20"a）"soil，"and"the"robusta"coffee"self"grafted"seedlings"were"used"as"CK"to"study"the"effect"of"interspecific"inarching"on"the"survival"rate，"growth"index，"chlorophyll"content，"and"growth"and"degradation"of"grafted"seedlings"in"the"different"soil"types"and"in"the"different"coffee"continuous"cropping"years"soil."Results"showed"that"grafting"at"the"same"stage"of"scion，"the"survival"rate"of"F2"treatment"（grafted"seedlings"with"preserved"aboveground"parts"of"the"rootstock）"was"significantly"higher"than"that"of"F1"treatment"（grafted"seedlings"without"preserved"aboveground"parts"of"the"rootstock）."Using"the"same"method，"grafting"at"the"“Butterfly”"stage"of"the"scion，"the"survival"rate"of"grafting"seeding"was"significantly"reduced"compared"to"grafting"at"the"“soldier”"stage."Different"grafting"methods"could"significantly"affect"the"survival"rate"of"coffee"grafted"seedlings，"and"the"younger"age"of"the"scion"seedlings"was"beneficial"for"improving"thenbsp;survival"rate"of"grafted"seedlings."The"treatment"of"F1"increased"the"root"system，"root"to"shoot"ratio，"and"promoted"the"increase"of"aboveground"biomass，"resulting"in"faster"plant"growth."In"the"early"stage"of"F2"treatment，"the"biomass"of"the"aboveground"part"was"high，"which"promoted"the"growth"of"the"underground"part."Cutting"off"the"top"of"the"rootstock"after"surviving"relatively"reduced"the"biomass"of"the"aboveground"part，"inhibited"the"growth"of"the"root"system，"which"reduced"the"biomass"of"the"root"system."Different"soil"types"had"a"significant"impact"on"the"growth"of"the"root"system"of"grafted"seedlings."In"clay，"the"root"system"of"robusta"coffee"seedlings"was"more"developed"than"that"of"liberica"coffee"seedlings，"while"in"sandy"soil，"the"root"system"of"liberica"coffee"seedlings"was"more"developed"than"that"of"robusta"coffee"seedlings."As"the"grafted"seedlings"grew，"if"the"root"system"of"robusta"coffee"seeds"was"not"cut"off"in"time"after"grafting"and"surviving，"the"root"system"of"liberica"coffee"seedings"would"slowly"deteriorate"with"growth."In"soils"with"different"coffee"continuous"cropping"years，"the"survival"rate"of"interspecific"inarching"seedlings"was"100%，"significantly"improving"the"survival"rate，"effectively"alleviating"continuous"cropping"obstacles，"improving"survival"rate，"and"restoring"aboveground"growth."On"the"2–3"days"after"grafting，"the"parenchyma"cell"in"the"cortex"began"to"coalescent."On"the"4th"day，"callus"tissue"could"be"seen"between"the"rootstock"and"scion."On"the"6–8"days，"2/3"of"the"stem"segments"between"the"rootstock"and"scion"had"already"healed，"and"healing"was"evident"on"the"8–10"days."Using"liberica"coffee"as"rootstocks"and"robusta"coffee"as"scions，"the"method"of"cutting"off"the"top"of"liberica"coffee"seeding"first"and"then"inarching"during"the"“soldier"stage”"of"the"scion"can"obtain"vigorous"interspecific"grafting"seedlings，"which"can"effectively"alleviate"soil"continuous"cropping"obstacles"and"improve"coffee"growth.

Keywords："coffee"interspecies"grafting;"inarching;"different"soil"types;"continuous"cropping"obstacle;"anatomic"structure

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2024.12.007

海南是我國咖啡規(guī)?；a(chǎn)的起源地。中粒種咖啡園多年連作后，發(fā)生連作障礙，樹勢衰退，對咖啡產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重影響。為提高咖啡抗逆性，保證產(chǎn)量和品質(zhì)，海南中粒種咖啡生產(chǎn)中常采用種間嫁接法進(jìn)行咖啡園更新。但有關(guān)嫁接咖啡的研究主要是集中在傳統(tǒng)的腹接嫁接方式上，對接穗粗度、砧木苗齡要求較高，種苗繁育效率較低，難以發(fā)揮種間嫁接苗的優(yōu)勢，研究合適的種間嫁接方式能夠有效提高嫁接效率和嫁接苗質(zhì)量。

中粒種咖啡為2倍體，由于屬于異花授粉，所以其后代性狀分離和變異嚴(yán)重，群體變異很大，難以保證咖啡品種的純度。為克服這些問題，生產(chǎn)上常采用嫁接的辦法。嫁接屬無性繁殖中的營養(yǎng)繁殖，是果樹種苗繁育常見方法[1]。通過嫁接可以促進(jìn)植株水分和養(yǎng)分利用，提高植株抗逆性，增強(qiáng)植株的抗病害能力，克服咖啡的連作障礙[2]，解決遺傳育種的問題[3]。早前，在國內(nèi)外已有種間嫁接相關(guān)研究的報(bào)道[4]。研究結(jié)果表明種間嫁接不僅能提高咖啡抗線蟲能力，還能提高產(chǎn)量和品質(zhì)[5]。嫁接栽培已成為克服連作障礙的有效途徑之一。近年來，不斷嘗試以大粒種為砧木，研發(fā)種間嫁接技術(shù)[6-7]，改善品質(zhì)[8]，利用種間嫁接優(yōu)勢改善連作障礙取得了一定的進(jìn)展[9]。1984年用電鏡詳細(xì)地觀察了嫁接結(jié)合部位細(xì)胞的變化過程后，Moore將其劃分為5個(gè)階段[10]。雙根嫁接可以提高黃瓜的生長速率，但使得黃瓜果實(shí)品質(zhì)降低，而雙斷根嫁接不僅可以提高黃瓜的生長速率，增強(qiáng)植株的生長勢，而且可以改善黃瓜果實(shí)的風(fēng)味及營養(yǎng)品質(zhì)[8，"11]。

靠接法在咖啡方面缺乏相關(guān)研究支撐，難以發(fā)揮嫁接苗的優(yōu)勢。為提高種間嫁接苗長勢，緩解土壤連作障礙，本試驗(yàn)以中粒種和大粒種種間嫁接苗為研究對象，使用不同靠接方法對種間嫁接苗的成活率、植株長勢、葉綠素含量、不同土質(zhì)根系性狀、不同土壤連作植株長勢及嫁接愈合過程的解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，探索適宜中粒種和大粒種咖啡種間靠接方式，以期提高嫁接苗質(zhì)量，提高老咖啡園咖啡長勢，恢復(fù)咖啡生產(chǎn)，為大粒種咖啡砧木選育和促進(jìn)種間嫁接栽培在咖啡上的推廣和應(yīng)用提供理論參考。

1""材料與方法

1.1""材料

試驗(yàn)于2021年2月至2024年1月在中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院香料飲料研究所日光溫室中進(jìn)行?？Х冉铀脒x用中粒種咖啡熱研1號(hào)，咖啡砧木選用大粒種咖啡查理5號(hào)。

1.2""方法

1.2.1""試驗(yàn)設(shè)計(jì)""選取飽滿、無病蟲害熱研1號(hào)的咖啡種子和查理5號(hào)播種。試驗(yàn)分別在“士兵期”（子葉未展開似士兵帶著頭盔）、“蝴蝶葉期”（子葉已展開似蝴蝶）進(jìn)行嫁接，接穗和砧木分別用t、T表示。嫁接時(shí)，將健壯的籽苗完整地從沙床中拔出，用清水沖洗根部的土雜物，籽苗臨時(shí)存放于盛有少量清水的淺容器中，使苗木斜靠容器一側(cè)，讓苗木根部浸于清水中。按照2種方法進(jìn)行嫁接。（1）F1：將查理5號(hào)咖啡籽苗頂部剪除，在籽苗莖干基部縱向用芽接刀開長約3～4"cm的切口；在熱研1號(hào)咖啡籽苗基部縱向用嫁接刀開與查理種相同長度的切口；然后將2個(gè)籽苗靠接在一起，使籽苗形成層對齊，并用嫁接綁帶綁縛好。（2）F2：分別將查理5號(hào)、熱研1號(hào)籽苗莖干基部縱向用芽接刀開長約3～4"cm的切口，然后將2個(gè)籽苗靠接在一起，使籽苗形成層對齊，并綁縛，嫁接成活后，將大粒種頂端剪除。對照為采用相同時(shí)期中粒種咖啡種子苗（CK0）、中粒種咖啡自接苗（CK1）。嫁接好的籽苗移入沙床培養(yǎng)。在沙床培育1個(gè)月后，選取長勢一致的嫁接苗F1，移栽至分別裝有黏土（S1）、壤土（S2）、沙土（S3）的營養(yǎng)袋中。在沙床培育3個(gè)月后，選取長勢一致的嫁接苗F1，剪除中粒種根系，CK1剪除一個(gè)根系后，分別移栽入裝有不同咖啡種植年限土壤（0、5、10、20"a）的營養(yǎng)袋中。營養(yǎng)袋規(guī)格18"cm×25"cm，營養(yǎng)袋中土體積配比為表土∶有機(jī)肥=90%∶10%。每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。

1.2.2""指標(biāo)測定""（1）嫁接苗成活率測定。分別在嫁接30"d后，移入不同年限土壤后30、60、90"d，每個(gè)重復(fù)取50株，統(tǒng)計(jì)各重復(fù)嫁接成活率。嫁接成活率=（成活株數(shù)/嫁接總株數(shù)）×100%。

（2）嫁接苗植株長勢指標(biāo)測定。分別在嫁接90"d后，移入不同土質(zhì)1、2、3"a后，每重復(fù)隨機(jī)取10株嫁接苗樣品，清洗植株，使用直尺和游標(biāo)卡尺測量嫁接苗的株高和莖粗，放入烘箱105"℃殺青30"min，80"℃烘干至恒重，稱取嫁接苗各部分干重，用根系掃描儀分析嫁接苗根系生長指標(biāo)總根長、總表面積、平均直徑、單位土壤體積的總根長、根系總體積、根尖數(shù)、分叉數(shù)。

（3）葉綠素含量測定。分別在移入不同年限土壤后30、60、90"d，用SPAD儀測定每株第一對完全展開葉片葉綠素值，每片葉片測量3次，取其平均值。

（4）愈傷部位結(jié)構(gòu)觀察。分別在嫁接1～12"d時(shí)取嫁接苗靠接部位修剪放到樣品托上，加入櫻花OCT包埋劑進(jìn)行包埋固定，設(shè)置切片厚度為60"μm，修片、冷凍切片（冷凍切片機(jī)型號(hào)為Thermo"Shandon），放置。在4×顯微鏡（型號(hào)為Olympus"CX23）下觀察組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)拍照，觀察靠接部位的差異。

1.3""數(shù)據(jù)處理

采用Excel"2019軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和作圖，使用SPSS"23.0軟件進(jìn)行方差分析，利用Duncan’s檢驗(yàn)法進(jìn)行差異顯著性分析。

2""結(jié)果與分析

2.1""不同靠接方法對咖啡嫁接籽苗成活率的影響

從圖1可以看出，在t1、T1階段，靠接方法F2成活率最高，為89.33%；在t1、T2階段，F(xiàn)2成活率最高，為93.33%，顯著高于F1（Plt;0.05）；在t2、T2階段，F(xiàn)2成活率最高，為80.67%，顯著高于靠接方法F1（Plt;0.05）。說明在接穗相同階段嫁接，F(xiàn)2顯著提高嫁接成活率。在F1下，t1T2處理成活率最高，為85.33%，顯著高于t2T2處理（Plt;0.05），與t1T1處理差異不顯著；在F2下，t1T2不同小寫字母表示處理間差異顯著（Plt;0.05）。

處理成活率最高，為93.33%，顯著高于t2T2處理（Plt;0.05），與t1T1處理差異不顯著。說明在相同的嫁接方式下，t1時(shí)期嫁接成活率顯著高于t2時(shí)期。由此可見，不同嫁接方法能夠顯著影響咖啡嫁接苗成活率，且接穗苗齡較小有利于提高靠接嫁接苗成活率。

2.2""不同靠接方法對嫁接籽苗生長的影響

從表1可知，F(xiàn)2處理的莖粗最高為6.21"mm，比CK0處理粗46%，比F1處理粗4.1%，顯著高于F1、CK0處理；F2處理的株高最高為26.63"cm，顯著高于CK0處理，與F1處理差異不顯著；F2處理的葉片數(shù)最高為15.84，顯著高于F1、CK0處理；F1處理的根干重最高為4.17"g，顯著高于F2、CK0處理；F2處理的莖干重最高為3.64"g，顯著高于F1、CK0處理；葉干重處理間差異不顯著；由此可見，靠接方式F2可以顯著提高地上部分生物量，不同靠接方法對嫁接籽苗生長產(chǎn)生顯著影響。

從表2可知，處理根系各個(gè)指標(biāo)（包括總根長、總表面積、平均直徑、單位土壤體積的總根長、體系總體積、根尖數(shù)、分叉數(shù)）F1gt;F2gt;CK0，差異顯著，變化趨勢與地上部分相反。由此可見，"F1顯著提高了根系生物量，這表明不同靠接處理對嫁接幼苗根系產(chǎn)生顯著影響。

2.3""不同土質(zhì)對嫁接苗根系生長的影響

從表3可以看出，嫁接2"a后，靠接苗在沙土中根系非常發(fā)達(dá)，根長、株高、根干重、葉干重、莖干重、莖粗、大粒種咖啡根粗均為：沙土gt;壤土gt;黏土，差異顯著（Plt;0.05）。中粒種咖啡根粗均為：黏土gt;沙土gt;壤土，差異不顯著。在黏土中，根粗表現(xiàn)為大粒種lt;中粒種；在壤土中，根粗表現(xiàn)為大粒種gt;中粒種；在沙土中，根粗表現(xiàn)為大粒種gt;中粒種，說明不同土壤對嫁接苗根系生長產(chǎn)生顯著影響，沙土促進(jìn)大粒種咖啡根系生長，黏

土抑制大粒種咖啡根系生長。

從圖2、圖3可以看出，靠接1"a，在壤土中，大粒種靠接苗根系比中粒種發(fā)達(dá)。隨著靠接苗的生長發(fā)現(xiàn)，如果嫁接成活后不及時(shí)剪除中粒種根系，大粒種根系會(huì)隨著生長慢慢退化。靠接3"a后，在壤土中，中粒種靠接苗主根粗度大于大粒種，相比靠接1"a的嫁接苗，大粒種根系在退化。

從表4可以看出，在不同種植年限土壤中，自接苗在0"a年限土壤中成活率最高，為100%，最低為10"a年限土壤，為53.3%，說明隨著種植年限增加，中粒種自接苗成活率降低。在5、10、20"a不同種植年限土壤中，成活率30"dgt;60"dgt;"90"d，說明隨著時(shí)間增加，自接苗成活率逐漸下降。相比中粒種自接苗，種間嫁接苗在不同年限土壤中成活率均為100%，顯著高于中粒種自接苗，說明種間嫁接提高了連作土壤中咖啡成活率。葉片數(shù)以中粒種自接苗在0"a年限土壤生長90"d中最高，為9.4片，最低為20"a年限土壤，為8.0片，說明隨著種植年限增加，中粒種自接苗葉片出生速率降低。相比中粒種自接苗，種間嫁接苗葉片數(shù)10"a年限土壤最高，為12.6片，0"a年限土壤為12.0片，說明連作土壤對種間嫁接無顯著抑制作用。莖粗自接苗在10"a年限土壤中最粗，為1.9"cm，其次為0"a年限土壤，為1.7"cm，最低為20"a年限土壤，為1.4"cm，說明隨著種植年限增加，中粒種自接苗莖粗先增加后降低。相比中粒種自接苗，種間嫁接苗莖粗10"a年限土壤最高，為2.4"cm，相比自接苗莖粗顯著提高，說明種間嫁接提高了連作土壤咖啡莖粗。由此可見，連作土壤降低了咖啡成活率，葉片和莖生長速度減緩，采用種間嫁接后，可以有效緩解連作障礙，提高成活率，恢復(fù)地上部分生長。

2.4""砧穗愈合過程中組織結(jié)構(gòu)學(xué)觀察

從圖4可以看出，靠接后2～3"d開始出現(xiàn)愈合的皮層薄壁細(xì)胞，4"d時(shí)可見砧木與接穗之間新愈傷組織形成，6～8"d時(shí)砧木與接穗間2/3的莖段

已經(jīng)愈合，8～10"d中愈合明顯。10"d以后完全愈合。從生長來看，砧木與接穗在外形上看似愈合，但實(shí)際結(jié)構(gòu)中未完全愈合和相互適應(yīng)，中間的營養(yǎng)物質(zhì)流通并不順暢。

3""討論

自20世紀(jì)50年代，科學(xué)家們就開始了對嫁接機(jī)理的研究。雖然因作物種類、年齡、嫁接方

法及時(shí)期等的不同，植物嫁接愈合也存在差異，但砧穗間的愈合過程卻基本相同。影響咖啡種間嫁接成活的因素包括接穗和砧木所處階段、木質(zhì)

化程度、光照和濕度環(huán)境條件等[12]。在接穗相同階段嫁接，保留砧木地上部分的靠接處理嫁接苗成活率顯著高于未保留地上部分的靠接處理的成活率，這可能是由于保留砧木地上部分可以保持砧木地上部分樹液流動(dòng)，保持根系吸水，減少砧木回枯，從而提高成活率。采用相同的嫁接方式，在接穗“蝴蝶葉期”嫁接，嫁接苗成活率比在“士兵期”嫁接顯著降低，由此可見，不同嫁接方法能夠顯著影響咖啡嫁接苗成活率，且接穗苗齡較小有利于提高嫁接苗成活率。經(jīng)田間觀察，發(fā)現(xiàn)“蝴蝶葉期”嫁接主要是由于此時(shí)期接穗易感染立枯病，導(dǎo)致存活的砧木帶立枯病菌，嫁接后感染嫁接口，造成嫁接成活率降低。

咖啡雙根嫁接研究表明，中粒種雙根苗和大粒種中粒種雙根苗生長優(yōu)勢明顯，以大粒種中粒種雙根苗壯根壯苗效果最佳[12]。由于采用先剪掉大粒種頂端再靠接的方法，相對增大了根系，增大根冠比，從而促進(jìn)地上部分生物量增大，植株生長較快。采用先靠接再剪掉頂端的方法，前期地上部分生物量大，從而促進(jìn)地下部分的生長，芽接成活后剪掉大粒種頂端，相對降低了地上部分生物量，使根系生長受到抑制，降低根系生物量。

海南省氣候濕熱，適宜種植中粒種咖啡和大粒種咖啡。其中，中粒種是海南的主栽品種，然而由于其根系淺，吸收根多分布在0～30"cm土層，主根下扎不深，不耐旱、不耐澇、不抗風(fēng)。大粒種咖啡主根深生，較耐旱抗風(fēng)，吸收根廣泛分布在表土層[12]。不同土質(zhì)對嫁接苗根系的生長產(chǎn)生顯著影響。土壤透氣有利于大粒種根系生長，在黏土中，中粒種根系比大粒種根系發(fā)達(dá)；在沙土中，大粒種根系比中粒種根系發(fā)達(dá)。嫁接苗根系非常發(fā)達(dá)，嫁接部位形成2個(gè)髓心，界限明顯。

本研究發(fā)現(xiàn)，雖然通過靠接方式獲得嫁接苗具有2個(gè)根系，但隨著靠接苗的生長，如果嫁接成活后不及時(shí)剪除中粒種根系，大粒種根系仍然會(huì)隨著生長慢慢退化?？拷?"a后，靠接苗在壤土中，中粒種主根粗度大于大粒種主根粗度，相比靠接1"a的嫁接苗根系，大粒種根系在退化。這可能是由于盆栽土層淺，大粒種主根發(fā)達(dá)，有限的空間限制了大粒種主根根系的發(fā)育。中粒種吸收根發(fā)達(dá)，隨著時(shí)間增加，中粒種發(fā)育超過大粒種。

前人研究表明，嫁接換根是改善植株根系生長狀況、恢復(fù)長勢的有效措施[13-15]。連作障礙是世界性難題[16-17]。由于咖啡多年生生長特性，連作栽培后主栽品種中粒種咖啡表現(xiàn)出根系少、爛根、減產(chǎn)等明顯的生長障礙，嚴(yán)重時(shí)甚至絕產(chǎn)、死亡[17]。大粒種砧木表現(xiàn)出抗連作障礙優(yōu)勢[18]。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在不同種植年限土壤中，中粒種自接苗在0"a年限土壤中成活率最高，葉片數(shù)為最多，相比中粒種自接苗，種間嫁接苗成活率均為100%，連作土壤降低了咖啡成活率，葉片和莖生長速度減緩，采用種間嫁接后，可以有效緩解連作障礙，顯著提高成活率，恢復(fù)地上部分生長。

鄒薛等[19]研究發(fā)現(xiàn)，嫁接后的砧木和接穗能形成完整的維管組織，植株體內(nèi)的內(nèi)源激素、遺傳物質(zhì)等發(fā)生變化，從而調(diào)節(jié)植物器官的發(fā)育，這些結(jié)果對嫁接研究有很大的參考價(jià)值。本研究在前人的研究基礎(chǔ)上，采用冷凍切片法對靠接部分組織進(jìn)行觀察，靠接后2～3"d開始出現(xiàn)愈合的皮層薄壁細(xì)胞，4"d時(shí)可見砧木與接穗之間有愈傷組織形成，6～8"d時(shí)砧木與接穗間2/3的莖段已經(jīng)愈合，8～10"d中愈合明顯。從生長來看，砧木與接穗在外形上看似愈合，但實(shí)際結(jié)構(gòu)中未完全愈合和相互適應(yīng)，中間的營養(yǎng)物質(zhì)流通并不順暢。另外，靠接時(shí)人工沒法控制每一株苗均在同一位置進(jìn)行同一深度的操作，導(dǎo)致砧木的韌皮部和木質(zhì)部與接穗的木質(zhì)部和韌皮部不能直接結(jié)合，影響愈合。由此可見，操作時(shí)直接劃到木質(zhì)部的深度更容易與對方愈合。因此以大粒種為砧木、中粒種為接穗，在接穗“士兵期”采用先剪掉大粒種頂端再靠接的方法可獲得生長旺盛的種間嫁接苗，可有效緩解土壤連作障礙，提高咖啡長勢，該研究結(jié)果為海南咖啡種間嫁接苗繁育，提升嫁接種苗質(zhì)量提供技術(shù)支持及理論依據(jù)。

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