牛巴氏桿菌病臨床特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)室診斷及防控措施的綜合闡述

牛巴氏桿菌病在牛養(yǎng)殖中較為常見(jiàn)，是由多殺性巴氏桿菌引發(fā)的一種傳染性、熱性、急性疫病，常呈現(xiàn)散發(fā)式流行特征，已被歸為國(guó)家二類(lèi)動(dòng)物疫病。牛染病后多表現(xiàn)出高熱、肺炎、內(nèi)臟出血、急性胃腸炎等典型癥狀，若不及時(shí)救治，則會(huì)嚴(yán)重危害牛群健康，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)較大經(jīng)濟(jì)損失。現(xiàn)就牛巴氏桿菌病的流行病學(xué)、臨床特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)室診斷及防控措施加以綜合闡述，以期為廣大牛養(yǎng)殖戶提供有益參考。

一、牛巴氏桿菌病流行病學(xué)

1、病原特點(diǎn)

多殺性巴氏桿菌是牛巴氏桿菌病病原，屬于革蘭氏陰性球桿菌，外觀呈小桿狀，其兩端鈍圓，中間部位稍微凸起，大小為0.5～2.5μm×0.3～0.5μm。按照該細(xì)菌的莢膜抗原不同，可將其分為A、B、C、D、E5個(gè)類(lèi)型，其中感染牛的多為B型和E型，臨床主要表現(xiàn)為敗血癥，感染A型多殺性巴氏桿菌后臨床主要表現(xiàn)為呼吸系統(tǒng)病變。該細(xì)菌在自然界中的抵抗力不強(qiáng)，60℃條件下20min即被滅活，70℃條件下6～10min便會(huì)滅活，遇高溫或強(qiáng)光照射會(huì)立即失去活性。但在干燥環(huán)境下能存活2～3d，動(dòng)物血液、糞便中可存活10d左右，在腐敗尸體中可存活1～3個(gè)月。常見(jiàn)的消毒劑如1%～2%氫氧化鈉、10%漂白粉、5%石炭酸等均能將其快速滅殺。

2、易感動(dòng)物

除牛外，巴氏桿菌病對(duì)豬、羊、兔、雞、鴨等畜禽也具有感染性，馬、驢、狗等動(dòng)物不易感，人不易感或感染后危害相對(duì)較輕。任何年齡、品種、性別的牛均易感發(fā)病，尤以3周歲以下的最易感，犢牛群體發(fā)病率最高，傳染性也最強(qiáng)，若不及時(shí)給予有效治療則易死亡。

3、傳播途徑

發(fā)病牛和帶菌牛是該病的主要傳染源，其糞便、尿液等排泄物和鼻涕、唾液等分泌物中均含有大量多殺性巴氏桿菌，會(huì)對(duì)周邊環(huán)境、飼料、飲水、生產(chǎn)用具等造成污染，健康牛直接或間接接觸后經(jīng)消化道染病。病牛打噴嚏、咳嗽、喘息時(shí)病毒會(huì)以飛沫的形式被排出，健康牛可經(jīng)呼吸道染病，也可經(jīng)皮膚被攜帶病原的蚊蟲(chóng)、跳蚤等昆蟲(chóng)叮咬后染病。

4、流行特點(diǎn)

牛巴氏桿菌病的發(fā)生無(wú)明顯季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病，但尤其高發(fā)于溫度變化較大的季節(jié)交替時(shí)期或多雨、潮濕的季節(jié)。該病常呈地方性流行或散發(fā)性流行，同種屬動(dòng)物之間極易相互傳播，但不易在不同屬動(dòng)物間產(chǎn)生交叉感染。飼養(yǎng)管理不善、牛舍養(yǎng)殖條件差、飼料營(yíng)養(yǎng)不均衡等因素，導(dǎo)致牛只體溫失調(diào)、抵抗力下降，易造成該病的暴發(fā)流行。

二、牛巴氏桿菌病臨床特點(diǎn)

牛感染多殺性巴氏桿菌后通常會(huì)有2～5d的潛伏期，根據(jù)其發(fā)病后的臨床癥狀，可將其分為肺炎型、敗血型和水腫型三種不同的類(lèi)型。

1、肺炎型

肺炎型在牛巴氏桿菌病中屬于常見(jiàn)病型，病牛體溫升至40℃左右，呼吸困難，心跳加快，眼結(jié)膜充血，咳嗽，咳嗽時(shí)有疼痛感。鼻腔分泌物增多，流出帶血、帶泡沫或膿性鼻液。病情嚴(yán)重的病牛呼吸困難，頸部前伸，張口呼吸，反芻停止，可視黏膜發(fā)紺，偶見(jiàn)血痢，四肢無(wú)力，常臥地不起。叩診胸部可聞大面積濁音區(qū)，胸膜有摩擦音，支氣管存在呼吸音、啰音。病程5～14d不等，部分可達(dá)30d以上，病重者常因機(jī)體慢性衰竭或呼吸困難而窒息死亡。

剖檢可見(jiàn)纖維性、出血性胸膜肺炎，胸腔內(nèi)存在大量含有纖維蛋白凝塊的黃色積液，肺部與心包粘連，存在纖維素性心包炎。肺臟表面可見(jiàn)大量小型黃色壞死灶，壞死灶周邊結(jié)締組織存在包囊，肺部組織切面呈大理石狀，伴有干酪樣壞死物根據(jù)病情發(fā)展的不同階段，肺臟表面呈紅色、黑紅色、灰白色或灰黃色，肺小葉間組織水腫，間質(zhì)增寬明顯。

2、敗血型

病牛體溫迅速升高至41～42℃，呼吸急促，脈搏跳動(dòng)加快，精神不振，食欲下降或廢絕，反芻減少，被毛干燥蓬亂，鼻鏡干燥。鼻黏膜充血、出血，尿中帶血或紅細(xì)胞，有明顯腹痛感，腹瀉，初期排稀粥狀糞便，后期變?yōu)樗畼酉”悖S便中摻雜有脫落的腸黏膜、血絲和黏液，散發(fā)惡臭味。該病型發(fā)病較急，病程12～24h，若發(fā)現(xiàn)和救治不及時(shí)，很容易導(dǎo)致病牛因出血過(guò)多而死亡。

剖檢病死牛，可見(jiàn)全身呈急性敗血性變化，全身淋巴結(jié)腫脹、充血，皮下、漿膜等部位存在點(diǎn)狀出血現(xiàn)象；大腸、小腸部位存在出血性炎癥，腸道內(nèi)積蓄有帶血液的稀薄內(nèi)容物；多器官可見(jiàn)出血點(diǎn)，腹腔內(nèi)積有大量血液。

3、水腫型

病牛咽喉、舌頭紅腫，呼吸、吞咽困難，食欲下降或廢絕，反芻次數(shù)減少或停止。眼睛紅腫，可視黏膜發(fā)紺，流淚、流口水，頭部、下頜和前胸部水腫嚴(yán)重，嚴(yán)重時(shí)下腹部、四肢和肛門(mén)也存在水腫，按壓有窩，且存在較大疼痛反應(yīng)。便血，全身虛脫，常臥地不起，病程通常為12～36h。

剖檢病死牛，可見(jiàn)舌頭腫大而伸出口腔，口腔、鼻腔內(nèi)存在大量積液，皮下、肌肉、咽喉中存現(xiàn)膠樣浸潤(rùn)，咽喉處、下頜間、胸前皮下存在凹陷性水腫癥狀，按壓留痕；胸腔、腹腔中存在大量纖維素性滲出液，空腸黏膜存在大量出血點(diǎn)，腸道內(nèi)積有大量含有粘膜組織或血液的內(nèi)容物；肺臟腫脹嚴(yán)重，多器官可見(jiàn)明顯出血點(diǎn)；切開(kāi)水腫部位，流出淡黃色渾濁液體，頜下淋巴結(jié)、縱隔淋巴結(jié)等處存在漿液性出血炎癥。

三、牛巴氏桿菌病實(shí)驗(yàn)室診斷

1、直接鏡檢

無(wú)菌條件下采集病牛血液、肺臟、肝臟、脾臟或淋巴結(jié)等作為觀察樣本，將血液制成涂片，其他病料制成涂片，分別采用37%甲醛固定后進(jìn)行革蘭氏染色、瑞士染色處理，倍鏡下觀察，可見(jiàn)革蘭染色為兩端鈍圓中間凸起的陰性短小桿菌，瑞士染色為兩個(gè)并列排布的兩端濃染卵圓形球菌，即為牛巴氏桿菌。

2、分離培養(yǎng)

將無(wú)菌采集的病牛肺臟、肝臟、脾臟或淋巴結(jié)等病料分別接種于血液瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基中，放置于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h，麥康凱瓊脂培養(yǎng)基中未見(jiàn)菌體生長(zhǎng)，血液瓊脂培養(yǎng)基上長(zhǎng)出灰白色、半透明、表明濕潤(rùn)光滑的米粒大小圓形菌落，未見(jiàn)溶血現(xiàn)象。用接種環(huán)挑取單個(gè)菌落涂片，經(jīng)革蘭氏染色和美蘭染色鏡檢，可見(jiàn)革蘭氏染色的短桿菌和美蘭染色的兩端濃染的橢圓形小桿菌。

3、動(dòng)物試驗(yàn)

取9只健康小鼠隨機(jī)分為3組，每組各3只。將采集的病料研磨后加入滅菌生理鹽水制成1∶5的混懸液，4℃條件下靜置12h，取上清液，給第1組小鼠皮下注射0.2mL/只；第2組小鼠皮下注射混合均勻的培養(yǎng)菌落和適量生理鹽水離心獲取的上清液0.2mL/只；第3組小鼠皮下注射生理鹽水0.2mL/只作為對(duì)照。結(jié)果顯示：第1、2組共6只小鼠在注射后20～36h內(nèi)陸續(xù)死亡，剖檢可見(jiàn)與病死牛相同的病理變化，第3組小鼠無(wú)任何異狀。無(wú)菌采集病死鼠肺臟組織和胸腔滲出液制成涂片，經(jīng)革蘭氏染色處理后鏡檢，可見(jiàn)革蘭氏染色的短桿菌。

4、血清學(xué)診斷

采用膠體金定性檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，將待檢液滴1～2滴至膠體金試紙條加樣孔內(nèi)進(jìn)行，室溫條件下靜置8～10min，當(dāng)檢測(cè)線（T）和對(duì)照線（C）均顯現(xiàn)出較深的紫紅色線時(shí)，結(jié)果可判定為陽(yáng)性；當(dāng)T顯現(xiàn)一條較淺紫紅色線，C顯現(xiàn)較深紫紅色線時(shí)，結(jié)果判定為弱陽(yáng)性；當(dāng)T未顯現(xiàn)出色線，C顯現(xiàn)較深的紫紅色線時(shí)，結(jié)果判定為陰性；當(dāng)C未顯現(xiàn)色線時(shí)，結(jié)果判定無(wú)效，需重新檢測(cè)。

四、牛巴氏桿菌病鑒別診斷

部分病牛在發(fā)病后很快死亡，其臨床癥狀與炭疽病、氣腫疽、惡性水腫病相似，應(yīng)注意鑒別區(qū)分?；加刑烤也〉牟∨６啾憩F(xiàn)出口鼻流血癥狀，血液呈暗紫色，剖檢可見(jiàn)脾臟腫脹為原來(lái)的2～3倍大，涂片鏡檢時(shí)可見(jiàn)存在莢膜的粗大炭疽桿菌；氣腫疽病牛高發(fā)于4歲以下的牛群，腫脹位置位于個(gè)別肌肉部位，觸壓時(shí)較柔軟，肌肉病部切面呈黑色海綿狀，存在氣泡，散發(fā)酸性奶酪氣味；惡性水腫病牛常見(jiàn)于存在外部損傷的牛群或母牛分娩后，腫脹部位觸之較柔軟，伴有捻發(fā)音，剖檢可見(jiàn)實(shí)質(zhì)器官病變，肝臟、腎臟腫脹，存在灰黃色壞死灶。

五、牛巴氏桿菌病防控措施

1、預(yù)防措施

①規(guī)范引種

建議牛養(yǎng)殖場(chǎng)堅(jiān)持自繁自養(yǎng)原則，以減少外源性病菌侵入養(yǎng)殖場(chǎng)的危害。確需從外地引種時(shí)，應(yīng)詳細(xì)了解種源地疫病流行情況和牛群實(shí)際健康狀況，做好疫病檢測(cè)馮作，避免引進(jìn)患病牛或帶菌牛。引入的牛只不能立即放入養(yǎng)殖場(chǎng)混養(yǎng)，需在距離養(yǎng)殖場(chǎng)500m以外的區(qū)域隔離飼養(yǎng)25～30日，期間做好健康檢測(cè)，無(wú)任何異常后才可放入養(yǎng)殖場(chǎng)混養(yǎng)?；祓B(yǎng)期間也應(yīng)經(jīng)常觀察牛的采食、排便情況及精神狀態(tài)。

②改善飼養(yǎng)環(huán)境

科學(xué)選址建場(chǎng)，并做好場(chǎng)內(nèi)分區(qū)管理，病畜管理區(qū)應(yīng)與其他功能區(qū)保持至少500m的距離，并設(shè)置單獨(dú)通道，便于后期消殺；根據(jù)牛的年齡、性別和體重等合理分群飼養(yǎng)，飼養(yǎng)密度宜為3.6m2/頭，以保障牛只生存質(zhì)量；做好養(yǎng)殖環(huán)境的清潔工作，定時(shí)清理羊群糞便、尿液及其他污物，并運(yùn)輸?shù)揭?guī)定地點(diǎn)進(jìn)行集中處理，避免在牛舍內(nèi)堆積發(fā)酵滋生病原菌；每日定時(shí)清理飼料槽內(nèi)隔天剩料，保證飼料和飲水的清潔衛(wèi)生；每日定時(shí)開(kāi)窗通風(fēng)，保證舍內(nèi)空氣新鮮，間隔3～5d更換1次墊料，保持圈舍環(huán)境的干燥舒適；適當(dāng)調(diào)節(jié)溫度與濕度，將溫度控制為15～24℃，濕度50%～75%，多雨季節(jié)做好防潮工作；保持養(yǎng)殖環(huán)境的安靜，避免出現(xiàn)不良應(yīng)激，導(dǎo)致牛群抵抗力下降；定期做好養(yǎng)殖場(chǎng)滅鼠、滅蚊蟲(chóng)工作，以減少病原菌的傳播媒介，降低牛巴氏桿菌病發(fā)生概率。

③加強(qiáng)飼料營(yíng)養(yǎng)

充足的營(yíng)養(yǎng)是保證牛群正常生長(zhǎng)發(fā)育的基礎(chǔ)，應(yīng)針對(duì)不同營(yíng)養(yǎng)需求的牛群科學(xué)配制飼料營(yíng)養(yǎng)成分，確保不同生長(zhǎng)發(fā)育階段的牛群養(yǎng)分?jǐn)z入充足、均衡。例如，2月齡后犢牛飼料配方推薦：34.2%豆餅，24.6%玉米，4.9%苜蓿粉，32.5%麩皮，2.8%骨粉，1.0%食鹽，日喂量隨犢牛月齡的增長(zhǎng)逐漸增加，并供應(yīng)有助牧草，讓犢牛自由采食，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育，提高抗病能力。

飼料采買(mǎi)時(shí)需選擇資質(zhì)齊全的正規(guī)廠家，確保飼料成分安全，營(yíng)養(yǎng)均衡，不含不良的化學(xué)添加劑。冬季青貯草料短缺時(shí)，可為牛群提供優(yōu)質(zhì)的青貯飼草，或在飼料中添加適量維生素、礦物質(zhì)等，提高牛群身體素質(zhì)，增強(qiáng)抗病能力。此外，飼喂應(yīng)定時(shí)定量定人飼喂，幫助牛群養(yǎng)成規(guī)律的進(jìn)食習(xí)慣，促進(jìn)腸胃消化吸收，提高飼料利用率。

④?chē)?yán)格消毒

養(yǎng)殖場(chǎng)至少每半個(gè)月進(jìn)行1次嚴(yán)格消毒，運(yùn)動(dòng)場(chǎng)、圈舍墻面、地面等可用2%～4%氫氧化鈉、84消毒液稀釋劑、1%漂白粉、3%石炭酸溶液等噴霧消毒，飼料槽、飲水器等使用0.1%高錳酸鉀溶液清洗消毒，外來(lái)車(chē)輛及人員需用0.2%過(guò)硫酸氫鉀溶液、2%～4%氫氧化鈉溶液等消毒劑噴霧消毒，盡量減少人員流通，降低疾病傳播概率。有條件的可在場(chǎng)內(nèi)配置氫氧化鈉消毒池，要注意每7d更換1次消毒液，確保消毒效果。

⑤免疫接種

接種疫苗可有效降低牛巴氏桿菌病的發(fā)病率，牛巴氏桿菌病發(fā)病較為頻繁的地區(qū)，需定期為牛群進(jìn)行免疫接種，以提升預(yù)防效果。目前，市場(chǎng)上用于預(yù)防牛巴氏桿菌病的疫苗包括弱毒疫苗、滅活疫苗、基因工程疫苗、亞單位疫苗和聯(lián)合疫苗。其中，滅活疫苗因其安全性較高、易于運(yùn)輸和保存等優(yōu)勢(shì)而應(yīng)用最為廣泛。

實(shí)施免疫接種的通常為犢牛群體，按照犢牛體重，100kg以下的可肌注或皮下注射牛巴氏桿菌滅活疫苗4mL/頭，體重在100kg以上的接種劑量增加至6mL/頭，一般在接種2～3周便可產(chǎn)生抗體。需要注意的是，疫苗接種后7d內(nèi)禁止使用安乃近、對(duì)乙酰氨基酚、地塞米松等免疫抑制類(lèi)藥物。

2、治療措施

①緊急隔離

養(yǎng)殖戶應(yīng)予以牛巴氏桿菌病足夠的重視，學(xué)習(xí)與了解該病的發(fā)病特點(diǎn)。養(yǎng)殖期間，應(yīng)密切關(guān)注牛群健康狀況，及早發(fā)現(xiàn)疑似病牛，并快速對(duì)其隔離診斷、治療，最大限度降低養(yǎng)殖損失。同時(shí)，將病牛糞便、病死牛尸體進(jìn)行無(wú)害化處理，禁止宰殺處理后流入市場(chǎng)，危害食品安全。將受污染的養(yǎng)殖環(huán)境、飼養(yǎng)用具等進(jìn)行全面清掃和消毒，以滅殺病原菌，控制疫情蔓延。將疾病發(fā)生情況上報(bào)給相關(guān)部門(mén)，對(duì)疫點(diǎn)及周邊地區(qū)的牛進(jìn)行緊急疫苗注射，減少該疫病的擴(kuò)散。此外，應(yīng)做好牛群凈化管理，對(duì)于有牛巴氏桿菌病史的牛群，需每間隔3個(gè)月左右進(jìn)行一次全群檢疫，及時(shí)將結(jié)果呈陽(yáng)性的牛隔離治療，直至連續(xù)2次檢疫結(jié)果均為陰性為止。

②西藥治療

病牛癥狀表現(xiàn)相對(duì)輕微，可肌注青霉素注射液400萬(wàn)IU、鏈霉素500萬(wàn)IU，2次/d，連用2d，同時(shí)，將20%磺胺注射液60～100mL、鹽酸黃連素注射液20mL加入5%葡萄糖溶液500mL中，給病牛靜脈推注，1次/d，連用2～3d?；?qū)⒀醴承?.8～4g、地塞米松30～50mg與25%葡萄糖溶液1000mL混合均勻后給病牛靜脈注射，1次/d，連用5d，同時(shí)肌注牛羊康泰55～60mL、安乃近40mL，2次/d，連用5d。

病牛癥狀較嚴(yán)重時(shí)，可將0.5%氫化可的松500mg、青霉素銨鹽800萬(wàn)IU、鹽酸黃連素注射液20mL、40%烏洛托品75～80mL加入5%葡萄糖溶液500mL中，混合后給病牛靜脈滴注，1次/d，連用2～3d，效果較好?；蜢o脈注射25%葡萄糖溶液1400mL、10%氯化鈉注射液300mL、5%碳酸氫鈉注射液300mL、鈣磷鎂注射液400mL、復(fù)方氯化鈉50mL、氧氟沙星3.6～4g、地塞米松50mg、維生素C50mL、三磷酸腺苷25mL混合液，1次/d，連用7d。若病牛腸炎癥狀較嚴(yán)重，可肌注氯霉素注射液300萬(wàn)IU，2次/d，連用2～3d。為抑制滲出，可肌注阿托品8～10mL、呋塞咪45～50mL，1次/d，連用3～4d。

③中藥治療

選用中藥治療時(shí)，可取大血藤300g、大黃150g、虎杖草100g、瓜蔞100g、小茜草80g，以上中藥材研磨成粉，倒沸水500mL沖劑混勻，候溫內(nèi)服，1次/d，連用2日?；蛉〈簏S、芒硝各30g，金銀花、射干、荊芥、連翹、玄參、黃連各18g，黃芩、梔子、甘草、防風(fēng)、桔梗各15g，加清水2L文火煎煮，除渣候溫，給病牛灌服，1次/d，連用3d?；蛉『＝鹕场⒔疸y花、山豆根、麥冬、連翹、桔梗各30g，甘草20g，加清水2L，文火煎煮至500mL，除渣候溫，給病牛灌服，1次/d，連用3d，效果較顯著。

總之，牛巴氏桿菌病是牛養(yǎng)殖過(guò)程中較為常見(jiàn)的傳染性疾病，常給牛養(yǎng)殖業(yè)造成較大危害。對(duì)此，應(yīng)充分認(rèn)識(shí)了解與掌握該病的流行特點(diǎn)、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室診斷和鑒別診斷技術(shù)等，及時(shí)發(fā)現(xiàn)患病牛，采取相應(yīng)的西藥治療或中藥治療等措施。日常養(yǎng)殖中，應(yīng)做到規(guī)范引種，改善飼養(yǎng)環(huán)境，加強(qiáng)飼料營(yíng)養(yǎng)，做好養(yǎng)殖場(chǎng)的全面消毒工作，為牛群創(chuàng)建舒適、安全的生存環(huán)境，并定期為犢牛免疫接種，降低牛巴氏桿菌病發(fā)生率，促進(jìn)區(qū)域內(nèi)牛養(yǎng)殖業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。

（作者單位：815099 青海省玉樹(shù)州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）