一例雛鵝痛風(fēng)的診斷與防控

摘 要： 雛鵝痛風(fēng)是由鵝星狀病毒感染引起的一種傳播范圍極廣的傳染病。自2017年國內(nèi)發(fā)現(xiàn)雛鵝痛風(fēng)病例后，該病在我國多省份養(yǎng)鵝地區(qū)發(fā)生，且暫無特效藥使用，嚴(yán)重制約我國養(yǎng)鵝業(yè)健康快速發(fā)展。本文介紹了一例雛鵝痛風(fēng)病例的鑒別診斷，并提出了防控措施，旨在為雛鵝痛風(fēng)的綜合防控提供參考。

關(guān)鍵詞：雛鵝痛風(fēng)；鵝星狀病毒；診斷；防控

中圖分類號(hào)：S858.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C 文章編號(hào)：1673-1085（2024）07-0097-03

引起鵝痛風(fēng)的原因有多種，包括腎臟功能障礙、飼料蛋白質(zhì)過高、嚴(yán)重飲水不足、中毒或疾病等因素。近年來，一種引起雛鵝痛風(fēng)的傳染性疾病在我國江蘇、山東、河南、遼寧、黑龍江等養(yǎng)鵝地區(qū)發(fā)生，該病主要感染2周齡以內(nèi)的雛鵝，患病雛鵝主要以心臟、肝臟表面和關(guān)節(jié)處有大量尿酸鹽沉積為主要癥狀，隨后被研究證實(shí)致病原為鵝星狀病毒。

1 "病例情況

2020年5月，黑龍江省齊齊哈爾地區(qū)某養(yǎng)殖戶低溫送檢病死雛鵝6只。經(jīng)詢問。該鵝場(chǎng)養(yǎng)殖了1 000只雛鵝，發(fā)病群體為三花鵝，鵝群5～6日齡開始發(fā)病，12日齡時(shí)死亡雛鵝達(dá)到210只，給養(yǎng)殖戶造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，隨后來我處就診。

2 "臨床癥狀

患病雛鵝精神沉郁，采食量下降，消瘦體弱、羽毛蓬亂，四肢無力、關(guān)節(jié)腫脹、單腿跛行，排白色水樣稀便等。

3 "剖檢病變

對(duì)病死雛鵝剖檢，打開腹腔可見皮下及腹膜上有點(diǎn)狀尿酸鹽沉積，心臟表面及肝臟表面有大量白色尿酸鹽沉積。膽囊腫大，內(nèi)有灰白色尿酸鹽顆粒沉積。腎臟明顯腫大、斑駁，輸尿管內(nèi)可見大量白色尿酸鹽沉積（圖1）。剖開腕關(guān)節(jié)和趾關(guān)節(jié)，可見大量白色尿酸鹽沉積。

4 "流行情況

鵝養(yǎng)殖業(yè)是我國傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)，隨著該行業(yè)的不斷發(fā)展，鵝疫病漸漸有舊病新發(fā)的趨向。2017年以來，我國多省份地區(qū)雛鵝群發(fā)生一種以內(nèi)臟表面和關(guān)節(jié)尿酸鹽沉積為典型病癥的傳染病，病原確診為鵝星狀病毒[1]。該病一年四季均可發(fā)生，高發(fā)季節(jié)在每年冬季到次年夏季前這一期間。該病主要感染4周齡以內(nèi)的雛鵝，其中2周齡以內(nèi)的雛鵝最易感，且死亡率可高達(dá)50%[2]。患病鵝和帶毒鵝是本病的主要傳染源，星狀病毒主要通過水、飼料和糞便等被病毒污染的物質(zhì)水平傳播，在鵝胚中檢測(cè)到鵝星狀病毒，證明該病也可以垂直傳播[3]。

5 "實(shí)驗(yàn)室診斷

根據(jù)臨床癥狀和剖檢病變可以做出初步診斷，確診需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。目前在流行病學(xué)調(diào)查和臨床病例確診中，分子生物學(xué)檢測(cè)方法作為檢測(cè)病毒的常規(guī)方法被廣泛應(yīng)用。實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法被應(yīng)用于鵝星狀病毒的檢測(cè)，該方法重復(fù)性高、靈敏度強(qiáng)、特異性強(qiáng)，為鵝星狀病毒的早期快速診斷以及定量提供了新的技術(shù)手段[4]。有研究顯示，環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)被應(yīng)用于鵝星狀病毒檢測(cè)，能夠快速準(zhǔn)確地檢測(cè)出病原，為檢疫部門和養(yǎng)殖基地等提供了一種快速、便捷、有效的檢測(cè)手段[5]。隨著鵝產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，鵝疫病出現(xiàn)了混合感染的現(xiàn)象，越來越多的多重檢測(cè)方法被建立，用來檢測(cè)鵝星狀病毒和可能混合感染的其他病毒[6]。多重檢測(cè)方法使流行病學(xué)的調(diào)查更簡(jiǎn)便、快捷、省時(shí)。

本實(shí)驗(yàn)室采用的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）方法是目前實(shí)驗(yàn)室診斷鵝星狀病毒常用的技術(shù)手段之一。無菌采集病死雛鵝肝臟、脾臟和腎臟病料，分別接種于綿羊血瓊脂培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，37 ℃培養(yǎng)24～48 h，結(jié)果顯示本次檢測(cè)無細(xì)菌感染。同時(shí)進(jìn)行鵝胚病毒接種：將上述病料放入已滅菌研缽中，一邊加入生理鹽水一邊研磨，將研磨后病料懸液反復(fù)凍融、離心和過濾除菌；將獲得的病毒懸液經(jīng)尿囊膜接種于鵝胚，0.2 mL/枚，置溫箱37 ℃培養(yǎng)孵育，觀察鵝胚生長(zhǎng)發(fā)育情況，棄去24 h內(nèi)死亡鵝胚，收集168 h內(nèi)死亡鵝胚尿囊液。根據(jù)病毒DNA/RNA提取試劑盒說明書對(duì)尿囊液進(jìn)行病毒基因組提取，根據(jù)反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書將提取的基因組反轉(zhuǎn)錄為cDNA，以其作為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。應(yīng)用本實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物序列：上游引物（F）5'-TTTCACGGGATGCCGATTAC-3'；下游引物（R）5'-ACTCATGTCCGCCCTTCTCA-3'[6]。PCR反應(yīng)體系（總體積50 μL）：2×預(yù)混酶25 μL，上游引物1 μL，下游引物1 μL，模板1 μL，ddH2O 22 μL。PCR反應(yīng)程序：94 ℃預(yù)變性5 min；94 ℃變性30 s，57 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，共32個(gè)循環(huán)。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析，結(jié)果顯示能夠擴(kuò)增出885 bp的目的條帶，對(duì)目的條帶進(jìn)行膠回收純化，送往試劑公司進(jìn)行測(cè)序，經(jīng)過序列比對(duì)最終確診為鵝星狀病毒感染。目的基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果見圖2。

6 "防控措施

雛鵝感染星狀病毒后致死率高，即使雛鵝未死亡，生長(zhǎng)也會(huì)受到抑制，嚴(yán)重影響鵝產(chǎn)業(yè)的健康快速發(fā)展。不同省份之間的流行毒株存在差異，疫苗適用性不強(qiáng)，應(yīng)建立快速有效的檢測(cè)方法，早發(fā)現(xiàn)、早防疫。目前，針對(duì)鵝星狀病毒的研究重點(diǎn)應(yīng)放在研制高效疫苗及特效治療藥物，這對(duì)鵝星狀病毒的防控極其重要。

6.1 "加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

鵝星狀病毒主要是通過口糞途徑進(jìn)行傳播擴(kuò)散，所以一定要保證飼養(yǎng)環(huán)境的衛(wèi)生。鵝舍、舍外運(yùn)動(dòng)場(chǎng)等做到定期清掃和消毒，鵝群生活密度不易過高，保障空氣流通；及時(shí)清理排泄物，病死雛鵝和被污染的物品及時(shí)消毒、深埋或焚燒，以防止疾病的進(jìn)一步擴(kuò)散傳播；對(duì)飲食、飲水等器具定期進(jìn)行消毒；在飼料營(yíng)養(yǎng)及添加劑方面，根據(jù)鵝群不同生長(zhǎng)階段對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求進(jìn)行適宜的添加和適度飼喂，注意各種維生素的適宜供給量，確保鵝群對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)正常代謝，避免尿酸在雛鵝體內(nèi)過分蓄積。應(yīng)盡量避免可能引起鵝應(yīng)激的各種因素，如換舍、轉(zhuǎn)群、低溫、高溫、捕捉、光照變化等，這些因素都會(huì)影響鵝的生長(zhǎng)發(fā)育，進(jìn)而降低鵝免疫力。當(dāng)有誘使鵝產(chǎn)生應(yīng)激的因素發(fā)生時(shí)，可在飼料中添加維生素C、維生素E和黃芪多糖粉劑等具有增強(qiáng)免疫力和提高抗應(yīng)激能力的物質(zhì)，增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，盡量減少疾病的發(fā)生。

6.2 "治療方法

目前治療鵝星狀病毒尚無特效藥物，急需研制出一種快速、有效的獸用生物制品防治該病。有研究[7]顯示，建立鵝星狀病毒卵黃抗體生產(chǎn)工藝，研制出一種安全、有效的鵝星狀病毒卵黃抗體，對(duì)雛鵝攻毒保護(hù)效果可達(dá)80 %，具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。此外，臨床上也可以嘗試對(duì)患病雛鵝進(jìn)行中藥治療，治療原則為抗病毒、清熱、通淋等。由茯苓、板藍(lán)根、白術(shù)、黃連、黃芩、黨參、梔子、車前草、川木通、滑石等組成的中藥方劑，在連續(xù)用藥幾天后，可以降低雛鵝的死亡率[8]。目前有關(guān)中草藥治療鵝星狀病毒病的研究非常少，需要加強(qiáng)這一方向的研究，為該病的治療提供一定的應(yīng)用參考。

參考文獻(xiàn)：

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[8] "陳琳.一例新型鵝星狀病毒引起雛鵝痛風(fēng)的中藥治療[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2020（06）：169-170.