血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于鑒別甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的診斷價(jià)值

段艷峰，鄭守華

（1.安陽(yáng)市人民醫(yī)院，河南 安陽(yáng) 455000；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450003）

甲狀腺癌約占全身惡性腫瘤的1%左右，屬于臨床多見(jiàn)內(nèi)分泌惡性腫瘤。 甲狀腺癌早期臨床表現(xiàn)多無(wú)特異性，診斷準(zhǔn)確性較低，困難度較高[1]。 現(xiàn)臨床主要通過(guò)病理學(xué)檢測(cè)對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行診斷確診。

惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展多與慢性炎癥反應(yīng)關(guān)系密切，可從多方面介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡、增殖和遷移，可溶性白細(xì)胞介素Ⅱ受體（soluble interleukin-2 receptor，SIL-2R）屬于機(jī)體重要的免疫相關(guān)指標(biāo)，已證實(shí)[12]SIL-2R 與肺癌、消化道腫瘤及乳腺癌具有密切關(guān)系，但關(guān)于甲狀腺癌的研究資料缺乏。 高遷移率族蛋白B1(High mobility group box 1，HMGB 1）是一類(lèi)廣泛分布于所有細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的高度保守蛋白， 與膿毒癥等炎癥反應(yīng)關(guān)系密切[2，3]。半乳糖凝集素-3（galectin-3，gal-3）是可識(shí)別糖脂和糖蛋白的半乳糖結(jié)合蛋白，研究[4]發(fā)現(xiàn)gal-3 水平與胃腸道腫瘤、 肺癌及非霍奇金淋巴瘤的發(fā)展和大小具有密切聯(lián)系。 故而，本研究以上3 種因子為著手點(diǎn)，探討了上述指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的價(jià)值，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院 2017 年1 月至 2017 年12 月確診的90 例甲狀腺癌患者為惡性組、90 例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者為良性組、90 例健康對(duì)象為健康組。

惡性組，年齡 42～68 歲，平均為 55.6±9.6 歲，男 34 例、女 56 例，體質(zhì)量指數(shù)（BMI）22.8±2.3kg/m2，其中甲狀腺乳頭狀癌78 例、甲狀腺髓樣癌12例。良性組，年齡 40～69 歲，平均為 54.8±10.3 歲，男30 例、女 60 例，BMI 22.4±2.9kg/m2。 健康組，年齡40～69 歲，平均為 55.3±11.0 歲，男 37 例、女 53 例，BMI 22.8±2.5kg/m2。 三組研究對(duì)象的年齡、 性別、BMI 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)[5]：⑴甲狀腺癌患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考人民衛(wèi)生出版社《外科學(xué)》第八版中的標(biāo)準(zhǔn)；⑵年齡≤69 歲；⑶甲狀腺癌、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者均為首次診斷患者； ⑷本研究獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)、研究對(duì)象的知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴轉(zhuǎn)移性甲狀腺癌；⑵近2 個(gè)月具有免疫治療病史；⑶伴有全身感染性疾?。虎阮?lèi)風(fēng)濕、結(jié)締組織疾病；⑸具有放化療病史。

1.2 血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 檢測(cè)方法 取三組患者空腹靜脈血，離心后分離血清，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)所有患者血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平，相關(guān)試劑盒均購(gòu)于南京建成生物研究所，試驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 三組研究對(duì)象血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較 惡性組患者的血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平顯著高于良性組和健康組（P＜0.05）；良性組和健康組的血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表1。

2.2 不同TNM 分期、 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理學(xué)類(lèi)型的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較 不同TNM 分期、 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同病理學(xué)類(lèi)型的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見(jiàn)表2。

表1 三組研究對(duì)象血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較（±s）

表1 三組研究對(duì)象血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較（±s）

組別 n惡性組良性組健康組F 值P 值90 90 90 SIL-2R（pmol/L） HMGB1（ng/ml）103.6±29.5 46.8±11.2 44.3±9.8 28.639 0.000 11.03±3.86 4.25±1.63 4.10±1.50 25.330 0.000 gal-3（ng/ml）25.08±7.93 14.36±3.11 13.90±3.28 17.754 0.000

2.3 血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 檢測(cè)對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的價(jià)值 通過(guò)繪制ROC 曲線，血清SIL-2R 臨界值取79.85pmol/L 時(shí)，對(duì)應(yīng)的靈敏度為79.41%、 特異度為 68.44%、AUC 值為0.752；血清HMGB1 臨界值取7.02ng/ml 時(shí)， 對(duì)應(yīng)的靈敏度為 84.21%、 特異度為75.85%、AUC 值為0.803；血清gal-3 臨界值取18.44ng/ml 時(shí)，對(duì)應(yīng)的靈敏度為 81.04%、 特異度為 71.43%、AUC 值為 0.762；血清SIL-2R+HMGB1+gal-3 聯(lián)合應(yīng)用時(shí)， 靈敏度為93.36%、特異度為81.24%、特異度為6.64%、漏診率為 18.76%、AUC 值為 0.875。 見(jiàn)表3、圖1。

3 討論

甲狀腺癌屬于臨床最常見(jiàn)甲狀腺惡性腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展與電離輻射、遺傳、自身免疫性疾病等因素關(guān)系密切。 甲狀腺癌的病理分型有濾泡狀癌、乳頭狀癌、髓樣癌及未分化癌等，主要癥狀為無(wú)痛性甲狀腺結(jié)節(jié)，早期多無(wú)明顯癥狀和體征，通常在體檢時(shí)通過(guò)甲狀腺觸診和頸部超聲檢查而發(fā)現(xiàn)甲狀腺小腫塊，確診時(shí)多為晚期，嚴(yán)重影響了治療效果[6，7]。

表2 不同TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理學(xué)類(lèi)型的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較（±s）

表2 不同TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理學(xué)類(lèi)型的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平比較（±s）

因素 n SIL-2R（pmol/L） t 值 P 值 HMGB1（ng/ml）TNM分期Ⅰ期+Ⅱ期Ⅲ期+Ⅳ期發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移-4.6280.000 63 26 95.2±27.0 122.7±21.3 10.41±3.70 12.52±2.95 5.2820.000 t 值-2.586 3.425 P 值 gal-3（ng/ml） t 值 P 值0.011-4.0570.000 22.74±7.66 29.66±6.39 0.0013.1550.002是否31 59 125.0±27.8 93.5±26.4 12.91±3.21 10.22±3.70 28.40±7.54 23.04±7.72病理學(xué)類(lèi)型乳頭狀癌髓樣癌78 12 105.1±28.4 103.2±24.0 0.2200.827 10.98±3.56 11.32±3.74-0.3060.760 25.34±6.88 24.50±7.50 0.3890.698

表3 血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 檢測(cè)對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的價(jià)值（±s）

表3 血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 檢測(cè)對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的價(jià)值（±s）

指標(biāo) 臨界值 靈敏度 特異度 漏診率 誤診率 AUC 值SIL-2R（pmol/L）HMGB1（ng/ml）gal-3（ng/ml）SIL-2R+HMGB1+gal-3 79.85 7.02 18.44-79.41 84.21 81.04 93.36 68.44 75.85 71.43 81.24 20.59 15.79 18.96 6.64 31.56 24.15 28.57 18.76 0.752 0.803 0.762 0.875

圖1 血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 檢測(cè)對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的ROC 曲線圖

現(xiàn)階段甲狀腺癌的診斷方法較多， 主要包括CT、B 超、血清學(xué)檢測(cè)及各項(xiàng)穿刺活檢等，單純某項(xiàng)檢測(cè)常無(wú)法取得滿意效果[8]。 血清學(xué)檢查無(wú)創(chuàng)、快速，臨床檢測(cè)備受青睞，研究發(fā)現(xiàn)診斷惡性腫瘤，血清學(xué)指標(biāo)較臨床癥狀4～6 個(gè)月出現(xiàn)，現(xiàn)階段血清學(xué)多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)已成為惡性腫瘤診斷的重要趨勢(shì)[9，10]。

HMGB1 屬于一類(lèi)高度保守DNA，哺乳動(dòng)物中普遍存在，可參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、重組、分化及細(xì)胞復(fù)制過(guò)程，并介導(dǎo)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。研究[11]發(fā)現(xiàn)HMGB1 在多種惡性腫瘤中均存在高表達(dá)，單獨(dú)診斷甲狀腺癌時(shí)具有較高的假陰性率，故而多作為診斷的輔助指標(biāo)。 腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程與炎癥反應(yīng)關(guān)系密切，SIL-2R 多由淋巴細(xì)胞合成， 可與IL-2 特異性結(jié)合，使IL-2 失去正常的生物學(xué)功能，抑制機(jī)體免疫功能[12]。 gal-3 在一系列生理及病理過(guò)程中扮演重要角色，生物學(xué)功能多樣，主要通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面及細(xì)胞外基質(zhì)多種配體，調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、遷移、粘附、增殖、免疫應(yīng)答、炎癥應(yīng)答和纖維化等過(guò)程。

SIL-2R 是一種重要的免疫抑制劑， 可中和活化T 細(xì)胞周?chē)陌准?xì)胞介素-2、 減弱機(jī)體的內(nèi)分泌效應(yīng)，抑制已活化的T 細(xì)胞的克隆化擴(kuò)增，進(jìn)而降低機(jī)體免疫能力，從而促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞的分化及增值[13]。 腫瘤的生長(zhǎng)與侵襲需要細(xì)胞趨化信號(hào)，蛋白水解酶對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，而HMGB1 與纖維蛋白酶原激活系統(tǒng)關(guān)系密切，該系統(tǒng)在調(diào)節(jié)胞外蛋白酶活性、細(xì)胞遷移、損傷修復(fù)、炎癥、血管發(fā)生、腫瘤侵襲等方面均具有重要作用。 HMGB1 可激活纖維蛋白酶，還能誘導(dǎo)金屬蛋白酶的活化，從而直接地誘導(dǎo)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和間接地促進(jìn)ECM 降解，從而有利于細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲、腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[14，15]。 抑制細(xì)胞凋亡并導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)凋亡機(jī)制紊亂可能是甲狀腺癌中g(shù)al-3 高表達(dá)的主要機(jī)制，進(jìn)而使細(xì)胞出現(xiàn)異性增生和惡性轉(zhuǎn)化。

本研究結(jié)果顯示惡性組患者的血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平顯著的高于良性組和健康組；良性組和健康組的血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 上述結(jié)果提示惡性甲狀腺癌患者血清 SIL-2R、HMGB1、gal-3 存在高表達(dá)，上述指標(biāo)具有成為早期診斷甲狀腺癌重要指標(biāo)的潛力。

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)不同TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但不同病理學(xué)類(lèi)型的甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMGB1、gal-3 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 上述結(jié)果說(shuō)明SIL-2R、HM GB1、gal-3 與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及分期具有密切相關(guān)性。

本研究通過(guò)繪制ROC 曲線， 血清SIL-2R 臨界值取79.85pmol/L 時(shí)， 對(duì)應(yīng)的靈敏度為79.41%、特異度為68.44%、AUC 值為0.752； 血清 HMGB1臨界值取7.02ng/ml 時(shí)， 對(duì)應(yīng)的靈敏度為84.21%、特異度為 75.85%、AUC 值為 0.803； 血清 gal-3 臨界值取18.44ng/ml 時(shí)，對(duì)應(yīng)的靈敏度為81.04%、特異度為 71.43%、AUC 值為 0.762； 血清 SIL-2R+HMGB1+gal-3 聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，靈敏度為93.36%、特異度為81.24%、特異度為6.64%、漏診率為18.76%、AUC 值為0.875。 上述結(jié)果提示三者聯(lián)合檢測(cè)有對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性疾病較單指標(biāo)檢測(cè)具有更高的靈敏度和特異度。

綜上所述， 甲狀腺癌患者血清SIL-2R、HMG B1、gal-3 水平較甲狀腺良性疾病患者和健康人群均顯著升高，三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于鑒別診斷甲狀腺良惡性疾病具有一定的臨床價(jià)值。