• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于脂質(zhì)組學和風味組學分析日齡、品種對鴨胸肌風味的影響

    2024-11-08 00:00:00王雅婷曾雅婷張幸哲吳瓊吳旭
    畜牧獸醫(yī)學報 2024年10期

    摘 要: 旨在研究日齡、品種對鴨胸肌的脂質(zhì)組成和風味物質(zhì)的影響。本研究選取120日齡連城白鴨(LC120),500日齡連城白鴨(LC500),500日齡龍巖山麻鴨(SM500)為研究對象,采集胸肌組織,利用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術測定鴨肉脂質(zhì)組成,頂空固相微萃取結合全二維氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術檢測鴨肉中揮發(fā)性風味物質(zhì)組成,用單變量統(tǒng)計檢驗和偏最小二乘判別分析(PLS-DA)篩選差異脂質(zhì)和差異揮發(fā)性風味物質(zhì),計算相對氣味活度值(ROAV),確定影響鴨風味的主要物質(zhì)。結果顯示,在LC120、LC500、SM500中共鑒定出1 615種脂質(zhì),LC120與LC500和SM500與LC500的比較中分別篩選到26和38個差異脂質(zhì),其中LC120與LC500的脂質(zhì)差異主要為甘油三酯類(triglyceride,TG),SM500與LC500的脂質(zhì)差異主要體現(xiàn)在磷脂酰膽堿類(phosphatidylcholine,PC)上。進一步分析發(fā)現(xiàn),TG、PC的結構位點上是不飽和脂肪酸時會影響肉類中揮發(fā)性化合物的形成,在LC120、LC500中TG側(cè)鏈sn-2位點存在少量多不飽和脂肪酸,但在SM500中并未發(fā)現(xiàn)。風味物質(zhì)檢測結果顯示,在LC120與LC500的比較中篩選出1種差異揮發(fā)性化合物,為3-乙?;?2,4-二甲基呋喃;在SM500與LC500的比較中篩選出29種差異揮發(fā)性化合物,差異揮發(fā)性化合物主要體現(xiàn)在烴類、醛酮類和其他類等。此外,計算ROAV值得到3組鴨肉的關鍵香氣化合物16種,其中2-甲基丁醛和2,3-丁二酮為主要風味物質(zhì)。綜上,本研究篩選到了64種區(qū)分3組鴨胸肌肌肉的差異脂質(zhì),確定16種揮發(fā)性有機化合物是3組鴨胸肌肌肉的關鍵香氣物質(zhì),表明連城白鴨風味優(yōu)于龍巖山麻鴨,品種對肉質(zhì)風味的影響大于日齡對肉質(zhì)風味的影響;TG、PC在鴨肉揮發(fā)性化合物的形成中起著關鍵作用,這些為鴨種質(zhì)資源開發(fā)以及我國地方品種鴨風味品質(zhì)評價提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐。

    關鍵詞: 連城白鴨;龍巖山麻鴨;胸?。恢|(zhì)組學;風味組學

    中圖分類號: S834.2

    文獻標志碼: A

    文章編號:0366-6964(2024)10-4403-14

    收稿日期:2024-03-25

    基金項目:福建省科技廳引導性項目(2020N0034)

    作者簡介:王雅婷(1999-),女,新疆庫爾勒人,碩士生,主要從事動物遺傳育種與繁殖研究,E-mail:2422694011@qq.com

    *通信作者:吳 瓊,主要從事地方畜禽遺傳資源評價與育種研究,E-mail:106565789@qq.com;吳 旭,主要從事動物遺傳資源保護與利用研究,E-mail: wuxufafu@163.com

    Analysis of the Effects of Age and Variety on the Flavor of Duck Breast Muscle Based

    on Lipidomics and Flavoromics

    WANG" Yating1,2, ZENG" Yating2, ZHANG" Xingzhe2, WU" Qiong2*, WU" Xu1*

    (1.College of Animal Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002," China;

    2.College of Life Sciences, Longyan University, Longyan 364012," China)

    Abstract:" This study aimed to investigate the effects of age and breed on the lipid composition and flavor compounds of duck breast muscles. Using liquid chromatography-mass spectrometry technology and headspace solid phase microextraction combined with comprehensive two-dimensional gas chromatography/time-of-flight mass spectrometry to determine lipid composition and detect volatile flavor compounds in the breast muscle of 120 days old Liancheng White duck (LC120), 500 days old Liancheng White duck (LC500), and 500 days old Longyan Shanma duck (SM500).Univariate statistical analysis and partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) were used to screen for differential lipids and volatile flavor compounds, then relative odor activity values (ROAV) were calculated to determine the main substances affecting duck flavor. The results showed that a total of 1 615 lipids were identified in LC120, LC500, and SM500. In the comparison between LC120 and LC500 were identified 26 differential lipids, with the main types of different lipids were triglycerides (TG). The 38 differential lipids were screened in the comparison between SM500 and LC500, mainly reflected in phosphatidylcholine (PC). Further analysis revealed that unsaturated fatty acids on the structural sites of TG and PC could affect the formation of volatile compounds in meat. In LC120 and LC500, the sn-2 positions of the TG side chain contained a few polyunsaturated fatty acids, but it was not found in SM500. The results of flavor substance detection showed that one differential volatile compound, 3-acetyl-2,4-dimethylfuran, was selected in the comparison between LC120 and LC500. The 29 differential volatile compounds were selected in the comparison between SM500 and LC500, mainly reflected in hydrocarbons, aldehydes, ketones and others. In addition, there were 16 key aroma compounds in 3 groups of duck meat by calculating ROAV, among which 2-methylbutanal and 2,3-butanedione were the main characteristic flavor compounds. In summary, this study identified 64 differential lipids that distinguish the breast muscles of 3 groups of ducks, and identified 16 volatile organic compounds as key aroma compounds in the breast muscles of the 3 groups. Indicated that the flavor of Liancheng White duck is superior than Longyan Shanma duck, and the influence of variety on meat flavor is greater than that of age. TG and PC play a crucial role in the formation of volatile compounds in duck meat. The results provide theoretical basis and data support for the development of duck germplasm resources and the evaluation of flavor and quality of local duck varieties in China.

    Key words: Liancheng White duck; Longyan Shanma duck; breast muscles; lipidomics; flavoromics

    *Corresponding authors: WU Qiong, E-mail: 106565789@qq.com; WU Xu, E-mail: wuxufafu@163.com

    肉制品不僅是人類日常三餐中不可缺少的食物,也是人體蛋白質(zhì)的重要來源。隨著生活水平的提高,人們更傾向于選擇肉質(zhì)風味和營養(yǎng)價值優(yōu)質(zhì)的肉制品。風味是肉品質(zhì)的一個重要組成部分[1],由非揮發(fā)性的滋味物質(zhì)和揮發(fā)性的香味物質(zhì)組成[2],其中揮發(fā)性化合物是影響肉質(zhì)風味的重要因素之一[3],使不同肉品質(zhì)呈現(xiàn)出不同的風味,產(chǎn)生揮發(fā)性化合物的主要途徑是脂質(zhì)氧化和美拉德反應[4]。因此,脂質(zhì)與揮發(fā)性化合物的形成有著密不可分的聯(lián)系[5],也是肉類物質(zhì)產(chǎn)生特定風味的最重要來源[6]。

    隨著檢測技術的發(fā)展,脂質(zhì)組學和風味組學逐漸成熟,脂質(zhì)組學[7]的概念是2003年由Han和Gross[8]首次提出,能夠系統(tǒng)性解析生物脂質(zhì)組成與表達變化的研究模式[9]。風味組學的概念于2008年首次提出,針對性的對影響肉風味的組分進行全面表征,結合化學計量學等技術挖掘、篩選和鑒定影響風味的關鍵化合物[10]。近年來,李孟孟等[11]基于液相色譜-質(zhì)譜法脂質(zhì)組學研究出德州驢肌肉脂質(zhì)和脂肪酸組成、差異脂質(zhì)、潛在生物標記物和代謝途徑。Man等[12]使用高效液相與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用技術和固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用技術比較了驢肉、牛肉和羊肉,發(fā)現(xiàn)3個物種之間有97種不同的脂質(zhì),3種磷脂可以作為區(qū)分不同肉類的潛在標記物,并且13種特征揮發(fā)性化合物與21種磷脂標志物呈負相關。這些都說明脂質(zhì)組學和風味組學廣泛應用于各種食品研究。

    目前,風味物質(zhì)在雞[13-14]與羊[15-16]等主要畜禽中的研究報道較多,鴨肉制品[17]的風味物質(zhì)也已見報道,但針對不同日齡的鴨脂質(zhì)組學和風味組學相關研究較少。連城白鴨和龍巖山麻鴨是我國優(yōu)良的地方品種,其中連城白鴨被稱為“鴨中國粹”,為全國唯一藥用鴨,常被用來燉煮。連城白鴨一般有120日齡和400日齡以上的兩個食用階段,通常認為飼養(yǎng)時間越長,其營養(yǎng)成分積累的充足,風味濃。龍巖山麻鴨為福建省的優(yōu)良地方品種之一,是肉蛋兼用型鴨,淘汰后的母鴨適合燉煮,配合各種中草藥清燉,具有清熱解毒、性涼降火的功效。因此,本試驗選取了120日齡連城白鴨(LC120)和500日齡連城白鴨(LC500),同時選取500日齡龍巖山麻鴨(SM500)作比較,采用液相色譜-質(zhì)譜法和頂空固相微萃取結合全二維氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術分析不同日齡對連城白鴨脂質(zhì)和風味物質(zhì)組成的影響,以及不同地方鴨品種間的脂質(zhì)組成和風味物質(zhì)差異,為連城白鴨和龍巖山麻鴨鴨肉品質(zhì)改良提供新的思路。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    本研究選用的試驗鴨均來自龍巖山麻鴨原種場。選取體況相近、健康狀況相似的連城白鴨和龍巖山麻鴨各28只,在相同飼養(yǎng)管理條件和營養(yǎng)水平下分別喂養(yǎng)至120日齡和500日齡后,隨機選取體重相近的雌性LC120、LC500及SM500各3只,進行屠宰,屠宰前10 h禁食。屠宰后,將左側(cè)胸肌完整地剝離并稱重,于液氮中速凍后保存于-80 ℃超低溫冰箱,用于后續(xù)脂質(zhì)組學和風味組學測定。

    異丙醇、甲醇、乙腈(均為LC-MS級,F(xiàn)isher Scientific amp; Dikma Technologies公司);甲酸(TCI公司);甲酸銨(Sigma-Aldrich公司);三氯甲烷(科龍化工有限公司)。超純水(沃森公司);乙醇(阿拉丁公司);氘代正己醇-d13(C/D/N Isotopes公司);正己烷(永華公司);正構烷烴(SIGMA公司)。

    1.2 儀器與設備

    冷凍離心機(H2050R,湘儀公司);混勻儀(MV54,SCRC公司);真空濃縮儀(CV200,艾吉姆公司);高通量組織研磨器(MB-96S,美壁公司);濾膜(0.22 μm PTFE,Jin Teng公司);液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(配有Q Exact及ACQUITY UPLC系統(tǒng),F(xiàn)isher Scientific公司);DVB/CAR/PDMS固相微萃取頭(57329-U,Supelco公司);氣相色譜儀(8890A,Agilent公司);質(zhì)譜儀(Pegasus BT 4D,LECO公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 脂質(zhì)組學分析

    脂質(zhì)提取參照Werner等[18]的方法,取50 mg樣本加入750 μL氯仿甲醇溶液于2 mL離心管中,渦旋混合30 s;加入190 μL H2O,渦旋混合30 s,室溫離心5 min,取300 μL有機層加入500 μL氯仿甲醇混合溶液,渦旋混合30 s;室溫離心5 min,用200 μL異丙醇溶解400 μL有機層,過濾取上清液檢測[19-20]。

    1.3.1.1 色譜條件:

    ACQUITY UPLC? BEH C18 1.7 μm(2.1×100 mm)色譜柱,流速:0.25 mL·min-1,柱溫:50 ℃,進樣量:2 μL,流動相A水(含1%甲酸),流動相B乙腈(含1%甲酸)。梯度洗脫程序:0~5 min,70%~57%;5~5.1 min,57%~50%;5.1~14 min,50%~30%;14~14.1 min,30%;14.1~21 min,30%~1%;21~24 min,1%;24~24.1 min,1%~70%;24.1~28 min,70%。

    1.3.1.2 質(zhì)譜條件:儀器使用電噴霧離子源(ESI),正負離子電離模式進行檢測,樣品經(jīng)液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)分離后采用質(zhì)譜儀進行質(zhì)譜分析。

    1.3.2 頂空固相微萃取結合全二維氣相色譜-飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術

    1.3.2.1 頂空條件:

    參照Li等[21]的方法,取1 g已絞碎的樣本和10 μL溶劑為氘代正己醇的內(nèi)標溶液于20 mL頂空進樣瓶中。在轉(zhuǎn)速為400 r·min-1,溫度80 ℃條件下平衡10 min,萃取50 min。萃取完成以GC進樣口250 ℃解吸附5 min,進行GC×GC-TOFMS分析。

    1.3.2.2 GC×GC-TOFMS分析:

    色譜柱系統(tǒng):一維色譜柱DB-Heavy Wax(30 m×250 μm×0.5 μm),二維色譜柱Rxi-5Sil MS (2 m×150 μm×0.15 μm)。

    色譜條件:GC進樣口溫度250 ℃,載氣為高純氦氣,流速為1 mL·min-1,不分流進樣。一維色譜柱溫度起始為50 ℃,2 min后以4 ℃·min-1升溫至220 ℃,保持13 min。二維色譜柱溫度高于一維色譜柱5 ℃,調(diào)制補償溫度15 ℃,調(diào)制周期為5 s。

    1.3.2.3 質(zhì)譜條件:

    傳輸線溫度為250 ℃,離子源溫度為250 ℃,采集頻率為200 spectrum·s-1,電子轟擊源為70 eV,質(zhì)譜掃描范圍為35~550 m·z-1。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用SPSS 26.0軟件進行數(shù)理統(tǒng)計分析,采用T檢驗對試驗結果進行差異分析,Plt;0.05說明統(tǒng)計學上存在顯著差異。使用Origin 2022對揮發(fā)性化合物和脂質(zhì)的種類、相對含量及百分比進行繪圖。使用BioDeep在線軟件進行偏最小二乘判別分析、VIP篩選、熱圖分析。

    2 結 果

    2.1 脂質(zhì)亞類及分子鑒定數(shù)量

    本研究利用非靶向脂質(zhì)組學在LC120、LC500和SM500三組鴨胸肌中共鑒定出1 615種脂質(zhì)分子,涉及46個亞類,包括879種甘油磷脂(glycerophospholipids,GP)、374種甘油酯(glycerophospholipids,GL)、61種脂肪酰(fatty acyl,F(xiàn)A)、283種鞘脂(sphingolipids,SP)、18種固醇脂類(sterol lipids,ST)脂質(zhì)分子(圖1a),這說明鴨胸肌中脂質(zhì)種類最多的是GP,其次為GL、SP和FA,而ST種類最少。從整體含量看,含量前10的脂質(zhì)亞類依次為磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine,PC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)、甲基化磷脂酰膽堿(methylated phosphatidylcholine,MePC)、溶血鞘磷脂(sphingomyelin,SM)、單己糖神經(jīng)酰胺(monohexosyl ceramides,Hex1Cer)、神經(jīng)酰胺(ceramide,Cer)、甘油二酯(diglyceride,DG)、心磷脂(Cardiolipin,CL)和磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine,PS)(圖1b)。

    2.2 脂質(zhì)組多元分析

    為了更詳細地探討日齡、品種對鴨胸肌中的脂質(zhì)組學特征的影響,本研究采用多元統(tǒng)計分析方法,對鑒定到的所有脂質(zhì)進行了主成分分析和PLS-DA分析,結果表明,連城白鴨樣品隨著日齡分開,均遠離龍巖山麻鴨樣品,說明日齡和品種均會影響鴨胸肌脂質(zhì)組(圖2a)。

    為了更直觀、全面地了解連城白鴨和龍巖山麻鴨胸肌脂質(zhì)組的差異及脂質(zhì)組在日齡、品種間的變化特點,本研究對LC120、LC500和SM500的胸肌脂質(zhì)組數(shù)據(jù)進行了層次聚類熱圖分析。結果如圖2b所示,不同日齡組連城白鴨的脂質(zhì)組存在差異,表明日齡是影響脂質(zhì)組成的原因。鴨胸肌脂質(zhì)樣本按品種被聚集為兩類,說明品種對脂質(zhì)組成的影響比日齡對脂質(zhì)組成的影響大。脂質(zhì)聚類結果顯示,結構相似的同類別脂質(zhì)大部分聚集在一起,但同類脂質(zhì)在不同日齡、不同品種的鴨胸肌中所占的相對含量不同。其中TG在LC500中高表達,在LC120和SM500中低表達;PC在SM500中相對含量最高,其次是LC500,在LC120中的相對含量最低。

    2.3 差異脂質(zhì)篩選

    以Plt;0.05,VIP≥1的限制標準篩選LC120與LC500、SM500與LC500差異顯著的脂質(zhì),分別篩選到26種和38種差異顯著脂質(zhì),得到LC120與LC500(圖3a)、SM500與LC500(圖3b)的差異脂質(zhì)火山圖。其中每個點代表一個脂類分子,滿足FCgt;0、Plt;0.05的脂質(zhì)被標記為紅色,代表表達上調(diào)的脂類分子;滿足FClt;0、Plt;0.05的脂質(zhì)被標記為藍色,代表表達下調(diào)的脂類分子;灰色點代表差異不顯著的脂類分子。結果顯示,LC120與LC500中鑒定出26個差異顯著脂質(zhì),與LC500相比,LC120有4個表達上調(diào)的差異脂質(zhì),脂質(zhì)種類為BisMePA、PE和Cer,其余22個差異脂質(zhì)表達下調(diào);SM500與LC500中鑒定出38個差異顯著脂質(zhì),SM500有22個上調(diào)表達脂質(zhì),其中DG、SM、PS、溶血磷脂酰膽堿(lysophosphatidyl choline,LPC)類的相對含量在SM500中高表達。LC500組中TG、PC和MePC類脂質(zhì)相對含量高。此外,由表1可以看出LC120與LC500的脂質(zhì)差異主要體現(xiàn)在TG上,SM500與LC500的脂質(zhì)差異主要體現(xiàn)在PC上。其中差異脂質(zhì)結構顯示,3組樣本中PC類含C18∶2和C20∶4的亞類較少;TG類的sn-2和sn-3位點上積累了不飽和脂肪酸(表1)。

    2.4 揮發(fā)性風味物質(zhì)的種類組成分析

    本研究采用GC×GC-TOFMS技術方法在LC120、LC500和SM500中分別鑒定出并定量了437、469、667種揮發(fā)性化合物(圖4a)。其中,在LC120、LC500和SM500中特有揮發(fā)性化合物分別有162、182、498種(圖4b),說明日齡和品種均會影響揮發(fā)性化合物。

    為比較3組鴨之間成分種類及相對含量上的異同點,采用直觀的柱狀圖分析,種類上如圖4c所示,LC120中含酯類25種,醇類53種,醛類11種,酮類28種,烯類106種,雜環(huán)類25種,胺類15種,其他類174種;LC500中含酯類27種,醇類50種,醛類15種,酮類28種,烯類129種,雜環(huán)類17種,胺類13種,其他類190種;SM500中含酯類29種,醇類36種,醛類10種,酮類37種,烯類173種,雜環(huán)類23種,胺類17種,其他類342種。由此看出,不同日齡組連城白鴨中揮發(fā)性化合物的種類數(shù)目基本一致,LC120、LC500中醇類數(shù)目多于SM500,SM500中烴類和其他類化合物的數(shù)目多于LC120、LC500。從相對含量(圖4d)上看,LC120和LC500含量最多的前三類化合物均是醇類、酮類、其他類,SM中含量最多的前三類化合物為烴類、其他類、醇類??梢钥闯鲞B城白鴨中烴類、醛類和酯類的相對含量是隨日齡的增大而增加。LC120、LC500中醇類、醛類、酮類、酯類和雜環(huán)類的相對含量均高于SM500,SM500中烴類和其他類化合物的相對含量高于LC120、LC500。

    2.5 主要風味物質(zhì)的鑒定

    食品風味主要受風味物質(zhì)的感覺閾值影響[22]。計算風味物質(zhì)的ROAV可以判斷其對樣品風味的貢獻程度,篩選ROAVgt;0的揮發(fā)性化合物為重要香氣貢獻者,如表2所示,共篩選出16種ROAVgt;0的物質(zhì)。通常認為ROAV≥1的揮發(fā)性化合物為關鍵的風味物質(zhì)[23],因此,可知2-甲基丁醛和2,3-丁二酮是3組鴨胸肌中篩選到的ROAV≥1的關鍵風味物質(zhì)。在3組中起重要修飾的揮發(fā)性化合物均有14種,其中丁醛、2-甲基丁醛、乙酸乙酯和丙酮對SM500的風味發(fā)揮著重要作用;異丁醛和丙烯醛對LC120、LC500的風味發(fā)揮重要作用。

    由于相同種類香氣化合物大多呈現(xiàn)相似的香氣特征,因此根據(jù)表2得到3組鴨胸肌的整體揮發(fā)性風味輪廓。結果顯示,LC120、LC500的整體風味輪廓相似,與LC500相比,LC120具有更顯著的甜香和果香味(圖5a)。相比之下,連城白鴨的風味強度明顯強于龍巖山麻鴨,SM500在辛辣味、油脂味、草香、果香和甜香方面低于LC120、LC500,具有顯著高的蠟味特征。PCA分析結果顯示(圖5b),不同日齡組的連城白鴨樣品基本聚為一類,SM500和LC120、LC500分離較明顯,整體揮發(fā)性風味輪廓同樣也呈現(xiàn)了這一結果,說明品種對風味物質(zhì)的影響高于日齡的影響。綜上結果表明,連城白鴨風味優(yōu)于龍巖山麻鴨,不同日齡連城白鴨之間的風味差異不顯著。

    2.6 差異揮發(fā)性風味物質(zhì)

    利用t檢驗進一步篩選具體差異揮發(fā)性化合物,以Plt;0.05,VIP≥1的限制標準來篩選差異風味物質(zhì)。結果顯示,LC120與LC500中差異揮發(fā)性物質(zhì)為3-乙?;?2,4-二甲基呋喃,主要呈甜味;LC500和SM500中差異物質(zhì)為乙醇、4-乙基環(huán)己醇、異丁醛、噻唑-4-甲醛、2-甲基丁醛等揮發(fā)性化合物共29種,包含了酯類1種,醇類2種,醛酮類4種,苯環(huán)型類2種,雜環(huán)類1種,有機含氧類1種,烴類12種,其他類6種(表3)。以上結果表明,日齡對鴨肉風味的影響低于品種對其的影響,連城白鴨風味不同于龍巖山麻鴨的原因主要是二者在烴類、其他類和醛酮類等揮發(fā)性化合物存在顯著差異。

    3 討 論

    本研究共鑒定出1 615種脂類,其中種類較多的是PC、TG等,主要歸屬于GP、GL類,與Nazari和Muddiman[24]和Mi等[25]的研究結果一致。本研究中,PC在GP中所占比例最高,與多數(shù)研究表明在大多數(shù)動物骨骼肌細胞中PC是最豐富的甘油磷脂[26]這一結果相一致。Man等[12]的研究發(fā)現(xiàn),PC在肉類中揮發(fā)性化合物的形成中起著關鍵作用。Zhang等[27]研究表明,磷脂可能是影響肌肉發(fā)育和雞肉品質(zhì)的重要因素。磷脂水解首先產(chǎn)生脂肪酸,然后進一步氧化產(chǎn)生醛和酮,其中,C18∶2和C20∶4可分別降解形成己醛和壬醛。因此進一步對本研究中的PC分析,發(fā)現(xiàn)PC(C18∶2)和PC(C20∶4)脂質(zhì)亞類較少,這也解釋了在分析風味物質(zhì)時揮發(fā)性化合物中沒有產(chǎn)生己醛和壬醛的原因。

    在鑒定到的甘油酯類中,最豐富的亞類是TG[28]。TG側(cè)鏈位點上的脂肪酸種類對氧化揮發(fā)性化合物產(chǎn)生很大影響,進而影響肉的風味[29]。本研究發(fā)現(xiàn)不飽和脂肪酸主要分布在TG的sn-2和sn-3位點,其中sn-2位點積累了大量的單不飽和脂肪酸(C18∶1),這一發(fā)現(xiàn)與Li等[30]對德州驢在TG側(cè)鏈sn-2位點上單不飽和脂肪酸百分比含量高于其他位點的結果相一致。TG側(cè)鏈sn-2位點是單不飽和脂肪酸時會被氧化形成飽和甲基酮(例如2-十一烷酮),而TG側(cè)鏈sn-2位點是多不飽和脂肪酸(C18∶2)的情況則會被氧化生成不飽和酮(例如2,3-丁二酮)[31],且在Li等[16]對湖羊肌肉脂肪的研究中發(fā)現(xiàn)TG是通過氧化多不飽和脂肪酸來影響肉的香氣。此外Benet等[32]的研究表明高水平的多不飽和脂肪酸反而會降低美拉德反應產(chǎn)生揮發(fā)性化合物的水平和香氣屬性。因此,在對本研究中3組鴨肉的差異脂質(zhì)TG分析,發(fā)現(xiàn)LC120、LC500中TG側(cè)鏈sn-2位點含有少量多不飽和脂肪酸,但在龍巖山麻鴨組中并未發(fā)現(xiàn),推測可能是連城白鴨風味優(yōu)于龍巖山麻鴨的原因。

    肉品的風味是前體物經(jīng)過一系列變化(如脂氧化反應、美拉德反應等),產(chǎn)生多種化合物共同作用形成的[33]。目前肉制品中檢測到的揮發(fā)性風味物質(zhì)成分多達千余種,這些風味物質(zhì)的組成及含量在一定程度上影響著肉的香味和口感。根據(jù)ROAV篩選主要香氣貢獻者發(fā)現(xiàn)醛類、酮類含量的不同可能是造成鴨肉風味差異的原因,這與劉春利[34]的研究結果一致。其中醛類物質(zhì)多由脂肪氧化產(chǎn)生,閾值較低,對肉質(zhì)風味貢獻較大[35],是肉質(zhì)風味成分中最重要的一類化合物。研究表明,2-甲基丁醛和3-甲基丁醛通過Strecker降解亮氨酸、異亮氨酸產(chǎn)生,是美拉德反應重要的降解產(chǎn)物[36]。本研究中,檢測出2-甲基丁醛具有較高的氣味活性,表明2-甲基丁醛對構成鴨肉香氣具有重要貢獻。在鴨肉中較為重要的醛類物質(zhì)為己醛[37],但是該物質(zhì)在3組鴨肉中沒有通過質(zhì)譜檢測到,根據(jù)本研究中脂質(zhì)組檢測出的PC,發(fā)現(xiàn)PC(C18∶2)脂質(zhì)亞類較少,推斷可能是磷脂水解得到己醛的含量低于質(zhì)譜檢出值造成的。酮類物質(zhì)是脂肪氧化以及美拉德反應產(chǎn)物的一類代表物質(zhì),使肉的風味更有層次感,對肉香味的構成起到重要作用[38]。因其還具有水果香和奶油香,對風味有著較為積極的影響。崔巖[39]和Legako等[40]的研究均發(fā)現(xiàn),生牛肉中可能存在2,3-丁二酮和3-羥基-2-丁酮,通常被認為是美拉德反應成分,這與本試驗的結果一致,且本試驗中2,3-丁二酮ROAV值在3組鴨中均大于1,說明對LC120、LC500和SM500揮發(fā)性風味具有重要貢獻。

    通過鴨胸肌揮發(fā)性物質(zhì)相對含量圖(圖4d)和ROAV表(表2)可以看出,四氫呋喃和2-乙基呋喃的含量在LC120和LC500組中高于SM500,通常呋喃類化合物被認為是蒸煮雞肉的主要香氣成分[41],主要來自碳水化合物的烯醇化和脫水反應[42],一般賦予肉焦糖香,其閾值較低,因此呋喃類對LC120和LC500的肉質(zhì)香氣有很大貢獻。對本研究中檢測到的烴類化合物分析,發(fā)現(xiàn)SM500中檢測到的烴類種類和相對含量遠大于LC120和LC500中檢測到的,且占據(jù)了SM500總風味物質(zhì)相對含量的48.35%左右,但因其閾值普遍較高,對肉質(zhì)風味貢獻較?。?3]。根據(jù)整體揮發(fā)性風味輪廓圖看出連城白鴨的風味強度明顯強于龍巖山麻鴨,也證明了烴類對肉質(zhì)風味的貢獻小。Duan等[44]的研究中以麻鴨為試驗對象,結果表明老鴨香氣更重。但對本試驗數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)選取的LC120、LC500風味差異不大,差異揮發(fā)性化合物種類較少,這可能是跟選取的鴨品種不同有關。有研究表明,揮發(fā)性有機物之間存在許多復雜的關系,揮發(fā)性有機物類別的差異會導致品種間風味的差異,因此說明品種對風味的影響大于日齡對風味的影響[45]?;谝陨系难芯拷Y果也進一步證明了品種對肉質(zhì)風味的影響大。

    4 結 論

    本研究利用脂質(zhì)組學和風味組學在3組鴨胸肌肌肉中分別鑒定到1 615種脂質(zhì)和109種共有揮發(fā)性有機物,篩選到64種可以區(qū)分3組鴨胸肌肌肉的差異脂質(zhì),確定16種揮發(fā)性有機化合物是3組鴨胸肌肌肉的關鍵香氣物質(zhì),對鴨肉風味具有貢獻。通過多元分析比較發(fā)現(xiàn),品種對肉質(zhì)風味的影響大于日齡對肉質(zhì)風味的影響,連城白鴨肉質(zhì)風味優(yōu)于龍巖山麻鴨。TG、PC對鴨肉中揮發(fā)性化合物的形成中起著關鍵作用,肉類中的脂質(zhì)和揮發(fā)性有機物是物種依賴性的,其特征揮發(fā)性有機物成分與脂質(zhì)中脂肪酸的分布有關。

    參考文獻(References):

    [1] 王中波,劉 爽,賀麗霞,等.固原黃牛不同部位肌肉組織代謝組學分析[J].畜牧獸醫(yī)學報,2024,55(4):1565-1578.

    WANG Z B,LIU S,HE L X,et al.Metabolomics analysis on different muscle tissues of Guyuan cattle[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2024,55(4):1565-1578.(in Chinese)

    [2] 李武峰,邱麗霞,關家偉,等.基于HS-SPME-GC-MS和OPLS-DA模型探究不同嫩度驢肉的關鍵揮發(fā)性物質(zhì)成分差異[J].畜牧獸醫(yī)學報,2022,53(12):4258-4270.

    LI W F,QIU L X,GUAN J W,et al.Exploring the differences of key volatile compounds in donkey meat with different tenderness based on HS-SPME-GC-MS and OPLS-DA models[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2022,53(12):4258-4270.(in Chinese)

    [3] 張麗燕,劉萬軍,朱紹輝,等.HS-SPME-GC-MS條件優(yōu)化及北京鴨揮發(fā)性風味物質(zhì)分析[J].家禽科學,2023,45(10):19-25.

    ZHANG L Y,LIU W J,ZHU S H,et al.Condition optimization and analysis of volatile components in Beijing duck by HS-SPME-GC-MS[J].Poultry Science,2023,45(10):19-25.(in Chinese)

    [4] LIU H,WANG Z Y,ZHANG D Q,et al.Characterization of key aroma compounds in Beijing roasted duck by gas chromatography-olfactometry-mass spectrometry,odor-activity values,and aroma-recombination experiments[J].J Agric Food Chem, 2019,67(20):5847-5856.

    [5] 張 潤,楊 曼,王立賢,等.畜禽肉中代謝物質(zhì)對肉品質(zhì)的影響及相關基因研究進展[J].畜牧獸醫(yī)學報,2022,53(8):2444-2452.

    ZHANG R,YANG M,WANG L X,et al.Research progress of effects of metabolic substances in meat of livestock and poultry on meat quality and the related genes[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2022,53(8):2444-2452.(in Chinese)

    [6] SHAHIDI F,HOSSAIN A.Role of lipids in food flavor generation[J].Molecules,2022,27(15):5014.

    [7] SONG Y H,CAI C Y,SONG Y Z,et al.A comprehensive review of lipidomics and its application to assess food obtained from farm animals[J].Food Sci Anim Resour,2022,42(1):1-17.

    [8] HAN X L,GROSS R W.Global analyses of cellular lipidomes directly from crude extracts of biological samples by ESI mass spectrometry:a bridge to lipidomics[J].J Lipid Res,2003,44(6):1071-1079.

    [9] WENK M R.Lipidomics:new tools and applications[J].Cell,2010,143(6):888-895.

    [10] CHARVE J,CHEN C,HEGEMAN A D,et al.Evaluation of instrumental methods for the untargeted analysis of chemical stimuli of orange juice flavour[J].Flavour Fragr J,2011,26(6):429-440.

    [11] 李孟孟,宋英華,劉寶秀,等.基于液相色譜-質(zhì)譜法脂質(zhì)組學研究德州驢肌肉的脂質(zhì)組成[J].食品科學,2022,43(14):249-255.

    LI M M,SONG Y H,LIU B X,et al.Lipid profiles of meat from donkeys in Dezhou analyzed by liquid chromatography-mass spectrometry-based lipidomics[J].Food Science,2022,43(14):249-255.(in Chinese)

    [12] MAN L M,REN W,QIN H X,et al.Characterization of the relationship between lipids and volatile compounds in donkey,bovine,and sheep meat by UHPLC-ESI-MS and SPME-GC-MS[J].LWT,2023,175:114426.

    [13] JIN Y X,CUI H X,YUAN X Y,et al.Identification of the main aroma compounds in Chinese local chicken high-quality meat[J].Food Chem,2021,359:129930.

    [14] WANG Y K,LIU L,LIU X J,et al.Identification of characteristic aroma compounds in chicken meat and their metabolic mechanisms using gas chromatography-olfactometry,odor activity values,and metabolomics[J].Food Res Int,2024,175:113782.

    [15] WANG W T,SUN B,HU P,et al.Comparison of differential flavor metabolites in meat of Lubei white goat,Jining gray goat and Boer goat[J].Metabolites,2019,9(9):176.

    [16] LI J,YANG Y Y,TANG C H,et al.Changes in lipids and aroma compounds in intramuscular fat from Hu sheep[J].Food Chem,2022,383:132611.

    [17] 滕 飛,劉小琳,鐘 強,等.基于風味組學和脂質(zhì)組學分析不同品種原料鴨對鹵鴨揮發(fā)性風味的影響[J].食品科學,2024, 45(12):176-186.

    TENG F,LlU X L,ZHONG Q,et al.Flavoromic and lipidomic analysis of the effect of different breeds on volatile flavor components of pot-stewed duck[J].Food Science,2024,45(12):176-186.(in Chinese)

    [18] WERNER E R,KELLER M A,SAILER S,et al.A novel assay for the introduction of the vinyl ether double bond into plasmalogens using pyrene-labeled substrates[J].J Lipid Res,2018,59(5):901-909.

    [19] DALLI J,COLAS R,WALKER M,et al.Lipid mediator metabolomics via LC-MS/MS profiling and analysis[M]∥GIERA M.Clinical Metabolomics:Methods and Protocols.New York:Humana,2018:59-72.

    [20] DASILVA G,MUOZ S,LOIS S,et al.Non-targeted LC-MS/MS assay for screening over 100 lipid mediators from ARA,EPA,and DHA in biological samples based on mass spectral fragmentations[J].Molecules,2019,24(12):2276.

    [21] LI H H,GENG W H,HARUNA S A,et al.Identification of characteristic volatiles and metabolomic pathway during pork storage using HS-SPME-GC/MS coupled with multivariate analysis[J].Food Chem,2022,373:131431.

    [22] 劉純友,江素珍,馮 笑,等.HS-SPME-GC-MS測定三種類型百香果果實揮發(fā)性風味成分[J].食品工業(yè)科技,2021, 42(11):255-262.

    LIU C Y,JIANG S Z,F(xiàn)ENG X,et al.Study on volatile flavor compounds from three types of passion fruit using headspace solid phase micro-extraction gas chromatography mass spectrometry[J].Science and Technology of Food Industry,2021,42(11):255-262.(in Chinese)

    [23] 張李智桐,張佳敏,王 衛(wèi),等.釀酒酵母發(fā)酵四川臘肉貯藏期揮發(fā)性風味物質(zhì)變化[J].食品科技,2023,48(3):123-131.

    ZHANG L Z T,ZHANG J M,WANG W,et al.Changes in volatile flavor substances of Sichuan bacon fermented by saccharomyces cerevisiae during storage[J].Food Science and Technology,2023,48(3):123-131.(in Chinese)

    [24] NAZARI M,MUDDIMAN D C.Enhanced lipidome coverage in shotgun analyses by using gas-phase fractionation[J].J Am Soc Mass Spectrom,2016,27(11):1735-1744.

    [25] MI S,SHANG K,JIA W,et al.Characterization and discrimination of Taihe black-boned silky fowl (Gallus gallus domesticus Brisson) muscles using LC/MS-based lipidomics[J].Food Res Int,2018,109:187-195.

    [26] LI C,LI X F,HUANG Q L,et al.Changes in the phospholipid molecular species in water-boiled salted duck during processing based on shotgun lipidomics[J].Food Res Int,2020,132:109064.

    [27] ZHANG J,CAO J,GENG A L,et al.UHPLC-QTOF/MS-based comparative metabolomics in pectoralis major of fast- and slow-growing chickens at market ages[J].Food Sci Nutr,2022,10(2):487-498.

    [28] HILGENDORF K I,JOHNSON C T,MEZGER A,et al.Omega-3 fatty acids activate ciliary FFAR4 to control adipogenesis[J]. Cell,2019,179(6):1289-1305.e21.

    [29] LI J,ZHANG J Q,YANG Y Y,et al.Comparative characterization of lipids and volatile compounds of Beijing Heiliu and Laiwu Chinese black pork as markers[J].Food Res Int,2021,146:110433.

    [30] LI M M,ZHU M X,CHAI W Q,et al.Determination of the heterogeneity of intramuscular fat and visceral adipose tissue from Dezhou donkey by lipidomics and transcriptomics profiling[J].Front Nutr,2021,8:746684.

    [31] ZHOU L,ZHAO M J,BINDLER F,et al.Identification of oxidation compounds of 1-stearoyl-2-linoleoyl-sn-glycero- 3-phosphoethanolamine during thermal oxidation[J].J Agric Food Chem,2015,63(43):9615-9620.

    [32] BENET I,GUàRDIA M D,IBAEZ C,et al.Low intramuscular fat (but high in PUFA) content in cooked cured pork ham decreased Maillard reaction volatiles and pleasing aroma attributes[J].Food Chem,2016,196:76-82.

    [33] 洛桑催成,次仁曲珍,平措班旦,等.彭波半細毛羊羊肉風味物質(zhì)的鑒定與分析[J].中國草食動物科學,2023,43(6):29-34.

    LUO S C C,CI R Q Z,PING C B D,et al.Identification and analysis of flavour compounds in mutton of Pengbo semi-fine wool sheep[J].China Herbivore Science,2023,43(6):29-34.(in Chinese)

    [34] 劉春利.不同日齡鴨肉主體風味物質(zhì)的研究[D].寧波:寧波大學,2013.

    LIU C L.Study of age-related duck main flavor[D].Ningbo:Ningbo University,2013.(in Chinese)

    [35] LIU D Y,YANG C,BAI L,et al.Analysis of volatile compounds in Jinhua ham using three extraction methods combined with gas chromatography-time-of-flight mass spectrometry[J].Foods,2022,11(23):3897.

    [36] 劉 同,楊悠悠,劉大鵬,等.肉鴨胸肌特異揮發(fā)性風味物質(zhì)的鑒定[J].畜牧獸醫(yī)學報,2022,53(2):402-413.

    LIU T,YANG Y Y,LIU D P,et al.Identification of specific volatile flavor compounds in breast muscle of meat duck[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2022,53(2):402-413.(in Chinese)

    [37] RANNOU C,TEXIER F,MOREAU M,et al.Odour quality of spray-dried hens′egg powders:the influence of composition,processing and storage conditions[J].Food Chem,2013,138(2/3):905-914.

    [38] JIANG H,ZHANG M T,YE J J,et al.HS-SPME-GC-MS and OAV analyses of characteristic volatile flavour compounds in salt-baked drumstick[J].LWT,2022,170:114041.

    [39] 崔 巖.延邊黃牛不同肌肉組織風味物質(zhì)差異比較和代謝組學分析[D].延吉:延邊大學,2021.

    CUI Y.Comparison of flavor compounds and metabolomics analysis in different muscle tissues of Yanbian yellow cattle[D]. Yanji:Yanbian University,2021.(in Chinese)

    [40] LEGAKO J F,CRAMER T,YARDLEY K,et al.Retail stability of three beef muscles from grass-,legume-,and feedlot-finished cattle[J].J Anim Sci,2018,96(6):2238-2248.

    [41] 姜家?guī)洠瑢O進華,蔣守群,等.雞肉揮發(fā)性風味物質(zhì)成分、形成機制及脂質(zhì)調(diào)控研究進展[J].動物營養(yǎng)學報,2023, 35(9):5465-5474.

    JIANG J S,SUN J H,JIANG S Q,et al.Research progress on components,formation mechanism and lipid regulation of volatile flavor substances in chicken[J].Chinese Journal of Animal Nutrition,2023,35(9):5465-5474.(in Chinese)

    [42] SUNG W C.Volatile constituents detected in smoke condensates from the combination of the smoking ingredients sucrose,black tea leaves,and bread flour[J].J Food Drug Anal,2013,21(3):292-300.

    [43] ZHANG L,HU Y Y,WANG Y,et al.Evaluation of the flavour properties of cooked chicken drumsticks as affected by sugar smoking times using an electronic nose,electronic tongue,and HS-SPME/GC-MS[J].LWT,2021,140:110764.

    [44] DUAN M C,XU L G,GU T T,et al.Investigation into the characteristic volatile flavor of old duck[J].Food Chem X,2023,20:100899.

    [45] CHEN C,ZHOU W Y,YU H Y,et al.Evaluation of the perceptual interactions among aldehydes in a cheddar cheese matrix according to odor threshold and aroma intensity[J].Molecules,2020,25(18):4308.

    (編輯 郭云雁)

    日韩 亚洲 欧美在线| 久久人妻av系列| av专区在线播放| 亚洲专区国产一区二区| 99久久精品热视频| 日日干狠狠操夜夜爽| bbb黄色大片| 乱码一卡2卡4卡精品| 精品福利观看| 久久久成人免费电影| 嫩草影院新地址| 国产人妻一区二区三区在| 国产av一区在线观看免费| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲精品国产成人久久av| 1024手机看黄色片| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 露出奶头的视频| 精品国产三级普通话版| 中文字幕av成人在线电影| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国产精品女同一区二区软件 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 日本黄色片子视频| 校园春色视频在线观看| 久久久久久久久久久丰满 | 黄色日韩在线| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲经典国产精华液单| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 中文资源天堂在线| 久久香蕉精品热| 亚洲成人久久性| 婷婷精品国产亚洲av| 日本成人三级电影网站| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产高清不卡午夜福利| 九九在线视频观看精品| 身体一侧抽搐| av中文乱码字幕在线| 黄片wwwwww| 精品乱码久久久久久99久播| 天堂√8在线中文| 日韩欧美国产一区二区入口| 韩国av一区二区三区四区| 国产69精品久久久久777片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲专区中文字幕在线| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品日产1卡2卡| 99riav亚洲国产免费| 精品一区二区免费观看| 九九在线视频观看精品| 国内精品久久久久精免费| 在线免费十八禁| 九九热线精品视视频播放| av中文乱码字幕在线| 欧美激情久久久久久爽电影| 欧美高清性xxxxhd video| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 99在线人妻在线中文字幕| 美女大奶头视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产不卡一卡二| 欧美性猛交黑人性爽| 国国产精品蜜臀av免费| а√天堂www在线а√下载| 欧美激情在线99| 我要搜黄色片| 69人妻影院| 免费看美女性在线毛片视频| 最近视频中文字幕2019在线8| 变态另类丝袜制服| 欧美zozozo另类| 久久久久性生活片| 亚洲三级黄色毛片| h日本视频在线播放| 永久网站在线| 精华霜和精华液先用哪个| 国产成人福利小说| av视频在线观看入口| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲avbb在线观看| 在线播放无遮挡| av.在线天堂| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲av美国av| 深爱激情五月婷婷| 乱系列少妇在线播放| 日本在线视频免费播放| netflix在线观看网站| 欧美日韩综合久久久久久 | 久久精品国产清高在天天线| 熟女人妻精品中文字幕| 精品欧美国产一区二区三| 人妻久久中文字幕网| 免费一级毛片在线播放高清视频| 窝窝影院91人妻| 精品欧美国产一区二区三| 婷婷丁香在线五月| 欧美最黄视频在线播放免费| 黄色配什么色好看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲自偷自拍三级| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 99热这里只有是精品50| 村上凉子中文字幕在线| 午夜老司机福利剧场| 国产在线精品亚洲第一网站| 精品人妻1区二区| 我的女老师完整版在线观看| 久久午夜福利片| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日日夜夜操网爽| 亚洲 国产 在线| 听说在线观看完整版免费高清| 两人在一起打扑克的视频| 内射极品少妇av片p| 日韩精品有码人妻一区| 久99久视频精品免费| av在线亚洲专区| 色噜噜av男人的天堂激情| 久久久久国内视频| 午夜日韩欧美国产| 国产高清激情床上av| 桃红色精品国产亚洲av| 日韩欧美在线乱码| 一进一出好大好爽视频| 能在线免费观看的黄片| 色综合色国产| 哪里可以看免费的av片| 99久国产av精品| 婷婷精品国产亚洲av| 五月玫瑰六月丁香| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲av免费高清在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 国产真实伦视频高清在线观看 | 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产亚洲欧美98| 日韩欧美在线二视频| 男人的好看免费观看在线视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 夜夜爽天天搞| 亚洲av免费高清在线观看| 日本欧美国产在线视频| 性欧美人与动物交配| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 在线a可以看的网站| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲熟妇熟女久久| 国产成人aa在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 国产精品一区二区性色av| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产亚洲精品av在线| 在线观看免费视频日本深夜| 免费在线观看日本一区| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲综合色惰| 两个人视频免费观看高清| 中文字幕av在线有码专区| aaaaa片日本免费| 免费在线观看成人毛片| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品永久免费网站| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产高清激情床上av| 日韩av在线大香蕉| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲av五月六月丁香网| 午夜福利18| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 天美传媒精品一区二区| 午夜福利视频1000在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 变态另类丝袜制服| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲 国产 在线| 久久久久久久精品吃奶| 欧美最黄视频在线播放免费| 色综合亚洲欧美另类图片| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 丰满乱子伦码专区| 九色国产91popny在线| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 最近最新免费中文字幕在线| 国产精品99久久久久久久久| 国产91精品成人一区二区三区| 久久午夜亚洲精品久久| 国内精品一区二区在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 成人二区视频| 亚洲专区中文字幕在线| 国模一区二区三区四区视频| 韩国av一区二区三区四区| 日日撸夜夜添| 精品日产1卡2卡| 悠悠久久av| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美日本视频| 国产精品一及| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产三级中文精品| 日韩亚洲欧美综合| 女同久久另类99精品国产91| 国产黄色小视频在线观看| 国产成人a区在线观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| av天堂中文字幕网| 国产黄色小视频在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 看片在线看免费视频| 午夜激情欧美在线| 欧美最黄视频在线播放免费| 一区二区三区高清视频在线| 国产男人的电影天堂91| 99在线视频只有这里精品首页| 99久久成人亚洲精品观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| av在线观看视频网站免费| 长腿黑丝高跟| 好男人在线观看高清免费视频| 日韩欧美国产在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影| 男女视频在线观看网站免费| 内射极品少妇av片p| 国产高清视频在线观看网站| 人妻久久中文字幕网| 日本黄色视频三级网站网址| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产探花在线观看一区二区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 一级黄片播放器| 在线观看免费视频日本深夜| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲自偷自拍三级| 国产久久久一区二区三区| 99国产极品粉嫩在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | av在线老鸭窝| 黄色女人牲交| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 欧美性猛交黑人性爽| 午夜久久久久精精品| 亚洲美女黄片视频| 精品人妻熟女av久视频| 免费观看在线日韩| 午夜福利在线观看吧| 国产午夜精品论理片| 国产欧美日韩精品亚洲av| 校园春色视频在线观看| 精品久久久久久,| 人妻少妇偷人精品九色| 身体一侧抽搐| 国产亚洲av嫩草精品影院| 99久久九九国产精品国产免费| 国产男人的电影天堂91| 国产大屁股一区二区在线视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 全区人妻精品视频| 亚洲精华国产精华精| 国产午夜精品论理片| 国产成人福利小说| 久久久精品大字幕| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产av一区在线观看免费| 深夜a级毛片| 国产麻豆成人av免费视频| 永久网站在线| 日本一二三区视频观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 一区二区三区四区激情视频 | 国产v大片淫在线免费观看| 在线天堂最新版资源| 日韩欧美免费精品| 日韩欧美在线乱码| 综合色av麻豆| 人人妻人人看人人澡| 99热只有精品国产| 十八禁国产超污无遮挡网站| 91麻豆精品激情在线观看国产| 干丝袜人妻中文字幕| 又粗又爽又猛毛片免费看| 免费观看的影片在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美中文日本在线观看视频| 无遮挡黄片免费观看| 一进一出抽搐动态| 久久精品91蜜桃| 久久亚洲真实| 99久久九九国产精品国产免费| 嫩草影院精品99| 国产精品电影一区二区三区| 变态另类丝袜制服| 美女被艹到高潮喷水动态| 色吧在线观看| 男女那种视频在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 精品日产1卡2卡| 精品久久久久久,| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 999久久久精品免费观看国产| 久久6这里有精品| 国产午夜精品论理片| a级毛片免费高清观看在线播放| 老女人水多毛片| 久久久成人免费电影| 国产精品久久电影中文字幕| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 国产在视频线在精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产精品久久电影中文字幕| 99久久精品热视频| 午夜久久久久精精品| 国产主播在线观看一区二区| 精品日产1卡2卡| 一级a爱片免费观看的视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 嫩草影视91久久| 国产精品一区www在线观看 | 一级av片app| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产美女午夜福利| 欧美又色又爽又黄视频| 日本黄色片子视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 中出人妻视频一区二区| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲美女搞黄在线观看 | 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产精品人妻久久久久久| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲av成人精品一区久久| 97超视频在线观看视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 精品国产三级普通话版| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 一区福利在线观看| av黄色大香蕉| 国产精品人妻久久久影院| 国产高清三级在线| 99在线人妻在线中文字幕| 免费在线观看日本一区| 久久精品综合一区二区三区| 欧美日本视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美激情国产日韩精品一区| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 免费人成视频x8x8入口观看| 又紧又爽又黄一区二区| 毛片女人毛片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 成人av在线播放网站| 久久久久久九九精品二区国产| 日本欧美国产在线视频| 久久热精品热| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日日啪夜夜撸| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久久国产成人精品二区| 亚洲国产精品sss在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产av在哪里看| 最新在线观看一区二区三区| 久久国产乱子免费精品| 亚洲国产精品久久男人天堂| 香蕉av资源在线| 亚洲中文字幕日韩| 久久国内精品自在自线图片| 两个人的视频大全免费| 国产成人av教育| 久久精品人妻少妇| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产不卡一卡二| 日本在线视频免费播放| 日本精品一区二区三区蜜桃| 波多野结衣巨乳人妻| 我要看日韩黄色一级片| 黄色配什么色好看| 午夜福利在线观看吧| 国产精品久久久久久久电影| 99精品久久久久人妻精品| 又粗又爽又猛毛片免费看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 最好的美女福利视频网| 老司机福利观看| 午夜福利欧美成人| 国产综合懂色| 色哟哟·www| 欧美高清成人免费视频www| 日韩欧美免费精品| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 国内揄拍国产精品人妻在线| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲精品一区av在线观看| 国产视频内射| 最新中文字幕久久久久| 级片在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 十八禁网站免费在线| 国产欧美日韩精品一区二区| 欧美性感艳星| 色综合色国产| 国内精品宾馆在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国产主播在线观看一区二区| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲无线在线观看| 日本熟妇午夜| 一本久久中文字幕| 男女啪啪激烈高潮av片| 免费看日本二区| 男人舔女人下体高潮全视频| av在线老鸭窝| 91久久精品国产一区二区三区| 波多野结衣巨乳人妻| 欧美日韩乱码在线| 免费无遮挡裸体视频| 国产成人影院久久av| 不卡一级毛片| 两人在一起打扑克的视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲人成网站高清观看| 综合色av麻豆| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久人人精品亚洲av| 日韩欧美国产一区二区入口| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产精品不卡视频一区二区| 久久中文看片网| 最新在线观看一区二区三区| 成人毛片a级毛片在线播放| 午夜免费激情av| 一个人看的www免费观看视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产久久久一区二区三区| 国产不卡一卡二| 成年免费大片在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 午夜精品在线福利| 亚洲国产高清在线一区二区三| 欧美黑人巨大hd| 成人国产综合亚洲| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 国产乱人视频| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 日日撸夜夜添| 99热这里只有是精品50| 亚洲性夜色夜夜综合| 伦理电影大哥的女人| 久久午夜亚洲精品久久| 日韩欧美精品v在线| 日本在线视频免费播放| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 中文资源天堂在线| 成人无遮挡网站| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲av不卡在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 在线国产一区二区在线| 日韩av在线大香蕉| 12—13女人毛片做爰片一| 成人二区视频| 欧美黑人欧美精品刺激| 色5月婷婷丁香| 97热精品久久久久久| 又粗又爽又猛毛片免费看| 成熟少妇高潮喷水视频| 哪里可以看免费的av片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 一区二区三区免费毛片| 此物有八面人人有两片| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 欧美黑人巨大hd| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲人成网站在线播| 精品午夜福利在线看| 欧美+日韩+精品| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美日本亚洲视频在线播放| 观看免费一级毛片| 日韩欧美免费精品| 日本-黄色视频高清免费观看| 午夜激情福利司机影院| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲三级黄色毛片| av视频在线观看入口| 1000部很黄的大片| 成熟少妇高潮喷水视频| 变态另类丝袜制服| 色综合色国产| 熟女人妻精品中文字幕| 草草在线视频免费看| 国产伦精品一区二区三区四那| 观看美女的网站| 亚洲电影在线观看av| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲av美国av| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 欧美zozozo另类| 悠悠久久av| 午夜福利成人在线免费观看| 有码 亚洲区| 伦理电影大哥的女人| 精品人妻熟女av久视频| 99久久精品热视频| 91在线观看av| videossex国产| 日韩欧美国产一区二区入口| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲精品粉嫩美女一区| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产精品一区www在线观看 | 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 美女高潮的动态| 亚洲自偷自拍三级| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产亚洲精品久久久com| 国产 一区精品| 中文字幕久久专区| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲 国产 在线| 在线播放国产精品三级| 99九九线精品视频在线观看视频| 欧美不卡视频在线免费观看| 亚洲成人久久爱视频| 久久99热这里只有精品18| 国产亚洲精品av在线| 国产精华一区二区三区| 一级a爱片免费观看的视频| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲五月天丁香| 久久欧美精品欧美久久欧美| 最近最新中文字幕大全电影3| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久99热6这里只有精品| 88av欧美| 黄色一级大片看看| 51国产日韩欧美| 亚洲av.av天堂| 久久久久久久久久成人| 久久久国产成人免费| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲美女黄片视频| 国产探花在线观看一区二区| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲五月天丁香| 村上凉子中文字幕在线| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲黑人精品在线| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲在线观看片| 久久亚洲真实| 久久人人精品亚洲av| 亚洲av第一区精品v没综合| 91久久精品电影网| 级片在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6 | 午夜老司机福利剧场| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 日本一本二区三区精品| 色播亚洲综合网| 午夜免费成人在线视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 两个人视频免费观看高清| 日韩欧美国产一区二区入口| av在线老鸭窝| 免费搜索国产男女视频| 日日啪夜夜撸| 日韩大尺度精品在线看网址| 日本 欧美在线| 国产 一区精品| 久久久久久久久中文|