宮頸癌患者血清miRNA-18a、CXCL10的表達(dá)及預(yù)后價值

［摘"要］目的"探討宮頸癌患者血清微小RNA-18a（miR-18a）、CXC趨化因子配體10（CXCL10）的表達(dá)及對預(yù)后的評估價值。方法"回顧性選取2017年1月至2020年12月中國人民解放軍中部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院收治的112例宮頸癌患者為病例組，并根據(jù)患者3年生存情況分為生存組和死亡組。另收集83例宮頸良性腫瘤患者為良性組。檢測各組血清miR-18a、CXCL10水平，分析血miR-18a、CXCL10水平與宮頸癌臨床特征及患者生存預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果"癌癥組患者血清miR-18a、CXCL10水平明顯高于良性組（t=13.819、17.524，P＜0.05）。病例組中肌層浸潤深度＞1/2、TNM分級Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的血清miR-18a及CXCL10水平更高（t=2.260、4.118、3.851、2.141、3.104、2.699，P＜0.05）。死亡組患者TNM分級Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率明顯高于生存組（χ2=17.903、36.107，P＜0.05），死亡組中血清miR-18a、CXCL10水平明顯高于生存組（t=6.359、5.373，P＜0.05）。COX多因素回歸分析顯示TNM分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血miR-18a和CXCL10水平升高為宮頸癌患者預(yù)后不良的危險因素（OR=5.778、5.150、1.220、1.020，P＜0.05）。血清miR-18a聯(lián)合CXCL10檢測宮頸癌患者生存預(yù)后的曲線下面積為0.887（95%CI：0.827～0.948）。結(jié)論"宮頸癌患者血清miR-18a、CXCL10水平明顯升高，血清miR-18a、CXCL10及腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和生存預(yù)后密切相關(guān)。

［關(guān)鍵詞］宮頸癌；微小RNA-18a；CXC趨化因子配體；臨床特征；生存預(yù)后

Doi：10.3969/j.issn.1673-5293.2024.10.13

［中圖分類號］R173""""［文獻(xiàn)標(biāo)識碼］A

［文章編號］1673-5293（2024）10-0073-06

Expression and prognostic value of serum miR-18a and CXCL10 in patients with cervical cancer

CHEN Xiaoyan，SONG Chengwen，ZHANG Peng

（Department of Obstetrics and Gynecology，Central War Zone General Hospital of

the People，s Liberation Army of China，Hubei Wuhan 430061，China）

［Abstract］ Objective To investigate the expression of serum microRNA-18a （miR-18a） and CXC chemokine ligand 10 （CXCL10） in patients with cervical cancer and their value in evaluating prognosis. Methods 112 patients with cervical cancer who were admitted to the Central War Zone General Hospital of the People，s Liberation Army of China from January 2017 to December 2020 were retrospectively selected as the case group，and were divided into the survival group and the death group based on their 3-year survival status.In addition，83 patients with benign cervical tumors were included in the benign group.Serum levels of miR-18a and CXCL10 were measured in each group，and their correlation with cervical cancer clinical characteristics and patient survival prognosis was analyzed. Results The serum levels of miR-18a and CXCL10 in the cancer group were significantly higher than those in the benign group （t=13.819 and 17.524，respectively，P＜0.05）.In the case group，the serum levels of miR-18a and CXCL10 were higher in patients with a depth of myometrial invasion ＞1/2，TNM stage Ⅲ to Ⅳ，lymph node metastasis （t=2.260，4.118，3.851，2.141，3.104 and 2.699，respectively，P＜0.05）.The incidence of TNM stage Ⅲ to Ⅳ and lymph node metastasis was significantly higher in the death group compared to the survival group （χ2= 17.903 and 36.107，respectively，P＜0.05），and the levels of serum miR-18a and CXCL10 in the death group were significantly higher than those in the survival group （t=6.359 and 5.373，respectively，P＜0.05）.COX multivariate regression analysis showed that TNM grade，lymph node metastasis，and increased levels of miR-18a and CXCL10 were risk factors for poor prognosis in patients with cervical cancer （OR=5.778，5.150，1.220 and 1.020，respectively，P＜0.05）.The area under the curve （AUC） for the combined detection of serum miR-18a and CXCL10 in predicting the survival prognosis of cervical cancer patients was 0.887 （95%CI：0.827 to 0.948）. Conclusion The levels of serum miR-18a and CXCL10 are significantly increased in patients with cervical cancer，and the serum levels of miR-18a and CXCL10 are closely related to tumor stage，lymph node metastasis and survival prognosis.

［Key words］ cervical cancer;microRNA-18a;CXC chemokine ligand;clinical characteristic;survival prognosis

宮頸癌是一種常見的婦科惡性腫瘤，具有較高發(fā)病率和死亡率，嚴(yán)重威脅女性生命安全。據(jù)統(tǒng)計(jì)［1-2］，全球每年宮頸癌新發(fā)病例約60萬，在女性生殖系統(tǒng)癌癥發(fā)病率中位居首位，發(fā)病年齡也趨于年輕化。目前，臨床針對宮頸癌的治療方法有手術(shù)、放療和化療，雖能在一定程度上延緩病情進(jìn)展，但復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移風(fēng)險依舊較高，嚴(yán)重影響患者預(yù)后情況［3］。因此，尋找預(yù)測宮頸癌發(fā)展趨勢的生物指標(biāo)對臨床擬定個性化治療方案、改善患者預(yù)后具有重要意義。微小RNA（miRNA）是一類非編碼RNA，具有調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的作用。miR-18a定位于染色體13q31.3，通過調(diào)控下游靶蛋白的表達(dá)，參與胃癌、肝癌、結(jié)腸癌等惡性腫瘤的病理過程［4］。CXC趨化因子配體（CXC chemokine ligand，CXCL）10屬于炎性趨化因子，通過與特異性受體結(jié)合，激活某些細(xì)胞信號傳導(dǎo)途徑，促進(jìn)腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移［5］。本研究通過測定宮頸癌患者血清miR-18a、CXCL10水平，分析其與患者預(yù)后的關(guān)系，為宮頸癌病情和預(yù)后評估提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料

回顧性選取2017年1月至2020年12月期間中國人民解放軍中部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院收治的112例宮頸癌患者為病例組，年齡為35～66（50.85±6.28）歲，體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）為19～30（24.89±2.06）kg/m2。另選取同期83例宮頸良性病變患者為良性組，包括宮頸良性腫瘤21例，宮頸炎62例，患者年齡為38～64（50.62±6.32）歲，BMI為20～30（24.65±1.98）kg/m2。兩組年齡、BMI等資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批，患者及家屬知情并同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①癌癥組患者符合宮頸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；②經(jīng)病理檢查確診；③年齡為18～70歲；④預(yù)計(jì)生存時間超過半年；⑤接受規(guī)范化抗癌治療；⑥臨床資料完整。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他腫瘤疾病或復(fù)發(fā)性宮頸癌；②已接受放化療；③合并其他生殖系統(tǒng)疾病或生殖系統(tǒng)手術(shù)史；④伴有心肝腎等臟器功能障礙；⑤患有甲狀腺疾病、免疫疾病、血液疾病、傳染性疾病等；⑥患有精神疾病或認(rèn)知障礙；⑦妊娠期或哺乳期女性；⑧臨床資料及隨訪資料缺失。

1.2隨訪

所有患者以電話或門診復(fù)查形式隨訪，隨訪期為3年，記錄癌癥組患者3年內(nèi)生存狀況及生存時間。根據(jù)3年生存預(yù)后情況，將79例存活患者歸入生存組，33例死亡患者為死亡組。

1.3檢測方法

所有受試者采集空腹靜脈血5mL，室溫靜置30min，以3 000r/min速度離心10min，取血清后編號保存。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法測定血清中miR-18a水平，引物由上海生工生物工程公司設(shè)計(jì)合成，試劑盒購于日本Takara公司，以U6為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計(jì)算miR-18a相對表達(dá)量，每份標(biāo)本測量3次，取平均值為最終檢測結(jié)果。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清CXCL10水平，試劑盒購于武漢貝茵萊生物科技有限公司。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以x-±s表示，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2分析。采用COX回歸分析影響宮頸癌患者生存預(yù)后因素，采用Spearman分析宮頸癌患者血清miR-18a、CXCL10水平與生存時間的相關(guān)性，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1血清miR-18a、CXCL10水平比較

病例組患者血清miR-18a、CXCL10水平高于良性組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2不同臨床特征患者血清miR-18a、CXCL10水平比較

病例組中肌層浸潤深度＞1/2、TNM分級Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清miR-18a及CXCL10水平高于肌層浸潤深度≤1/2、TNM分級Ⅰ～Ⅱ期和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者（P＜0.05），見表2。

2.3不同預(yù)后患者比較

死亡組患者TNM分級Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率高于生存組（P＜0.05），死亡組患者血清miR-18a、CXCL10水平顯著高于生存組（P＜0.05），見表3。

2.4影響宮頸癌患者預(yù)后的多因素分析

以單因素分析存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的指標(biāo)為自變量，以預(yù)后狀況（生存=0，死亡=1）為因變量，COX多因素回歸分析顯示，TNM分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血miR-18a和CXCL10水平升高是宮頸癌患者預(yù)后不良的危險因素（P＜0.05），見表4。

2.5血清miR-18a、CXCL10水平與生存時間的相關(guān)性

Spearman相關(guān)性分析顯示，宮頸癌患者血清miR-18a、CXCL10水平與生存時間呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.531、-0.493，P＜0.05）。

2.6血清miR-18a、CXCL10對預(yù)后的評估價值

血清miR-18a、CXCL10評估宮頸癌患者預(yù)后的曲線下面積（area under the curve，AUC）分別為0.805（95%CI：0.716～0.893）、0.763（95%CI：0.665～0.860），最佳臨界值分別為miR-18a＜2.08μg/L、CXCL10＜132.67pg/mL。將miR-18a與CXCL10并聯(lián)檢測作為評估宮頸癌預(yù)后的指標(biāo)，聯(lián)合評估的敏感度為81.8%，顯著高于單一指標(biāo)檢驗(yàn)（χ2=5.922、13.714，P＜0.05），聯(lián)合評估特異度為79.7%，與單一指標(biāo)檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.032、0.336，P＜0.05），見表5。

3討論

宮頸癌是威脅女性健康的常見腫瘤之一，全球每年宮頸癌新發(fā)病例約60萬，死亡病例超過30萬［7-8］。近些年，國內(nèi)宮頸癌篩查得到推廣和普及，加上HPV疫苗的應(yīng)用，對宮頸癌起到一定預(yù)防作用，但宮頸癌負(fù)擔(dān)依舊較高，防治現(xiàn)狀仍不容樂觀［9］。病理活檢是宮頸癌診斷的常用手段，但屬于有創(chuàng)操作，易造成組織損害，部分患者耐受度不高，且對細(xì)小病灶檢出率較低，容易造成漏診［10-11］。血清腫瘤標(biāo)志物檢測簡便、快捷、靈敏度高，廣泛應(yīng)用于多種惡性腫瘤的診斷和評估。

3.1 miR-18a的作用機(jī)制

miRNA是一種內(nèi)源性小分子RNA，參與細(xì)胞增殖、分化及新陳代謝等多種生理活動，在機(jī)體發(fā)育、修復(fù)和疾病進(jìn)展等過程中發(fā)揮重要作用［12］。miR-18a作為miR-17-92家族成員，能夠調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、分化，在乳腺癌、結(jié)直腸癌等腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)［13-14］。有研究［15］顯示，miR-18a能夠激活Wnt信號通路，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，促進(jìn)乳腺癌的侵襲和預(yù)后不良。李丹萍等［16］報(bào)道稱，HPV感染后，宮頸微生態(tài)環(huán)境紊亂，促進(jìn)miR-18a高表達(dá)，可能增加宮頸癌發(fā)生風(fēng)險。本研究顯示，癌癥組血清miR-18a水平高于良性組，證實(shí)miR-18a對宮頸癌診斷具有參考價值。另外，不同肌層浸潤深度、TNM分期和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清miR-18a水平存在顯著差異，提示miR-18a與宮頸癌病情進(jìn)展密切相關(guān)。血清miR-18a升高預(yù)示癌細(xì)胞增殖速度快，腫瘤惡性程度較高，容易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。

3.2 CXCL10的作用機(jī)制

CXCL10是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)趨化因子，參與機(jī)體內(nèi)多項(xiàng)生理、病理調(diào)節(jié)過程，在傳染性疾病、免疫障礙及腫瘤等疾病中發(fā)揮關(guān)鍵作用［17］。有研究［18］顯示，CXCL10通過與趨化因子受體3結(jié)合，激活一系列信號傳導(dǎo)通路，促進(jìn)堿性磷酸酶與基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，介導(dǎo)腫瘤的惡性進(jìn)展。另有報(bào)道［19］稱，CXCL10活性與T細(xì)胞毒性作用相關(guān)，調(diào)節(jié)T細(xì)胞及NK細(xì)胞遷移，誘發(fā)胸腺依賴性促腫瘤效應(yīng)。本研究中，癌癥組患者血清CXCL10水平升高，且與腫瘤肌層浸潤深度、TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示CXCL10參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程，可作為評估病情進(jìn)展程度的重要指標(biāo)。CXCL10升高會促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，造成胞外基質(zhì)降解，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移。腫瘤微環(huán)境也會促進(jìn)CXCL10等趨化因子釋放，通過與細(xì)胞表面受體結(jié)合，促進(jìn)新血管的生成，加快腫瘤疾病的進(jìn)展。

3.3血清miR-18a、CXCL10的預(yù)后評估效能

COX多因素分析顯示，TNM分級高、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血清miR-18a和CXCL10高表達(dá)是影響宮頸癌患者生存預(yù)后的獨(dú)立危險因素，且血清miR-18a、CXCL10水平與宮頸癌患者生存時間呈顯著負(fù)相關(guān)。血清miR-18a、CXCL10的表達(dá)能反映腫瘤惡性程度，其水平升高提示腫瘤細(xì)胞增殖活性越高、轉(zhuǎn)移風(fēng)險越大，預(yù)后情況越差。受試者工作特征曲線表明，血清miR-18a、CXCL10水平評估宮頸癌患者3年生存預(yù)后的曲線下面積為0.805、0.763，提示兩項(xiàng)指標(biāo)檢測對預(yù)測宮頸癌患者預(yù)后狀況具有參考意義。將miR-18a與CXCL10并聯(lián)檢測用于評估宮頸癌預(yù)后的敏感度為81.8%，特異度為79.7%，說明聯(lián)合檢測能夠提高對宮頸癌患者預(yù)后的評估效能。

綜上所述，miR-18a和CXCL10在宮頸癌患者血清中高表達(dá)，并與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及生存預(yù)后情況密切相關(guān)，兩者可作為早期評估患者預(yù)后的潛在生物學(xué)指標(biāo)。但本研究屬于小樣本回顧性研究，數(shù)據(jù)采集完整性不足，需要進(jìn)行前瞻性研究，進(jìn)一步驗(yàn)證血清miR-18a、CXCL10水平對宮頸癌患者預(yù)后評估價值，為指導(dǎo)宮頸癌患者個性化治療提供依據(jù)。

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［專業(yè)責(zé)任編輯：張忠明］

［中文編輯：向婉婉；英文編輯：劉昕田］