寬體金線蛭體成分研究進展

摘要：寬體金線蛭是我國傳統(tǒng)中藥材，具有通經(jīng)、消腫等功效，廣泛應(yīng)用于傳統(tǒng)中醫(yī)藥和現(xiàn)代醫(yī)藥學等方面，許多學者對其化學成分開展深入研究，目前已報道了多種蛋白多肽類、蝶啶類、脂質(zhì)類等具有抗凝血、抗血栓等生物活性的化合物。本文對寬體金線蛭體成分相關(guān)研究成果進行綜述，以期為今后相關(guān)基礎(chǔ)研究和藥用資源開發(fā)利用提供參考。

關(guān)鍵詞：寬體金線蛭；營養(yǎng)成分；活性成分

中圖分類號：R285 文獻標識碼：A

寬體金線蛭（Whitmania pigra Whitman）又稱螞蟥、寬身金線蛭，隸屬黃蛭科（Haemopidae Sawyer）、金線蛭屬（Whitmania），其分布范圍廣、個體大、適應(yīng)能力強［1］，不吸血，主要以蚌、蜆、螺等軟體動物體液為食［2-3］?！吨腥A人民共和國藥典》認定日本醫(yī)蛭（Hirudo nipponica Whitman）、尖細金線蛭（W. acranulate Whitman）和寬體金線蛭（W. pigra Whitman）為中藥藥材來源［4］。研究表明，寬體金線蛭活性肽（APP）與日本醫(yī)蛭活性肽（APH）、尖細金線蛭活性肽（APA）具有共同的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機理，在抗血瘀、抗血栓藥效上無明顯差異［5］。近年，隨著寬體金線蛭藥用價值的發(fā)掘利用，市場需求量逐漸增大，經(jīng)濟價值不斷提高，已成為我國水蛭增養(yǎng)殖的主要品種，養(yǎng)殖前景廣闊［6-7］。

目前，已有許多學者先后從寬體金線蛭及其制品中分離、鑒定了多種蛋白多肽類、蝶啶類、脂質(zhì)類等化合物，并對寬體金線蛭所含微量元素、氨基等其他營養(yǎng)成分進行分析，探究了寬體金線蛭中有效活性物質(zhì)的成分、作用機制和藥用機理［8］，然而尚未見到寬體金線蛭體成分的系統(tǒng)性整理研究，本文對相關(guān)文獻綜合整理，為相關(guān)藥用資源開發(fā)利用和基礎(chǔ)研究提供參考。

1 常規(guī)體組成

野生寬體金線蛭群體水分含量為85.61%、粗蛋白質(zhì)含量11.24%、粗脂肪含量0.95%、粗灰分含量0.77%，養(yǎng)殖群體水分含量為83.52%、粗蛋白質(zhì)含量13.03%、粗脂肪含量1.21%、粗灰分含量0.95%［9］，二者常規(guī)營養(yǎng)成分含量相近，這與史紅專等［10］對野生和養(yǎng)殖群體三種常用炮制品的水分含量檢測結(jié)論一致，推測與兩個群體有共同的飼料基礎(chǔ)有關(guān)。寬體金線蛭主要以無脊椎動物體液為食，故其體內(nèi)水分含量高于魚、蝦等水生動物［11］。不同地理群體寬體金線蛭體組分有所差異，江蘇江寧群體水分含量、酸不溶性灰分含量均高于浙江桐鄉(xiāng)群體，但總灰分含量低于浙江桐鄉(xiāng)群體［12］。

2 活性成分

2.1蛋白質(zhì)及多肽類

蛋白質(zhì)及多肽類為寬體金線蛭活性物質(zhì)的主要成分，按藥理作用可分為直接作用于凝血系統(tǒng)的凝血酶抑制劑，及其它蛋白酶抑制劑兩大類［13-14］。

水蛭素是最早從水蛭中發(fā)現(xiàn)的多肽類成分，作為迄今為止所發(fā)現(xiàn)最強的天然凝血酶特異抑制劑［15-16］，被廣泛應(yīng)用于心腦血管等疾病的臨床治療和預防［17-20］。已有研究表明，水蛭素及其異構(gòu)體為吸血水蛭類抗凝血主要成分［21］，一些學者認為天然水蛭素存在于新鮮吸血水蛭的唾腺分泌物中［22-24］，寬體金線蛭等非吸血水蛭體內(nèi)可能不含水蛭素［25-27］，但曾有學者報道從寬體金線蛭干品中提取到較純的水蛭素［28］。近年已在寬體金線蛭中成功比對到水蛭素基因并對其基因結(jié)構(gòu)進行了分析［29-30］，何盛盛等［31］應(yīng)用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測到水蛭素基因表達量，證明寬體金線蛭也會產(chǎn)生水蛭素，已有學者通過檢測水蛭素基因表達水平來評價寬體金線蛭內(nèi)在品質(zhì)［32］。

為探尋寬體金線蛭中的有效活性成分，許多學者對其體內(nèi)的非水蛭素類抗凝活性物質(zhì)進行了深入探究［33-35］。Zhong等［36］通過抗凝血活性篩選，從寬體金線蛭干體中分離純化到一種新抗凝多肽——螞蟥多肽（whitmanin），屬于糖蛋白類，其氨基酸組成與水蛭素具有很大的同源相近性；Zheng等［37］分離純化得到具有抗凝血作用的螞蟥寡肽-1（whitide-1），具有一定熱穩(wěn)定性，與人源膠原蛋白片段氨基酸序列配對一致率達61%；Xiao等［38］將分離得到的一種具有抗凝血活性的糖肽類化合物命名為寬體金線蛭多肽Ι；馬洪利等［39］用從寬體金線蛭干品中提取純化出一種抗凝活性、理化性質(zhì)與菲牛蛭素相似的抗凝蛋白A1-1，稱之螞蟥蛭素；Zhang等［40］首次在寬體金線蛭中發(fā)現(xiàn)3個含有D型氨基酸的多肽，均具有抗蛋白酶降解活性。

另有一些學者從寬體金線蛭中分離得到具有一定生物活性的蛋白質(zhì)及多肽類化合物，具體見表1。

2.2 蝶啶類化合物

蝶啶類是由嘧啶和吡嗪并聯(lián)而成蝶啶環(huán)的一類化合物，目前已從寬體金線蛭中鑒定出多種蝶啶類成分（表2）。

Zheng等［53-55］先后從寬體金線蛭中發(fā)現(xiàn)水蛭甲素（Hirudonucleodisulfide A）、水蛭乙素（Hirudonucleodisulfide B）等四種喋啶類雜環(huán)新化合物，其中三種具有抗缺氧活性；Li等［56-57］分離得到三個新的蝶啶類生物堿螞蟥堿A（whitmanine A）、螞蟥堿B（whitmanine B）和5，8-二甲基亮氨酸（5，8-dimethylleucopterin），但均未能檢測出明顯的抗凝血酶活性。

2.3 脂質(zhì)類化合物

脂質(zhì)類化合物是一種極易溶于有機溶劑的化合物，在化學成分和結(jié)構(gòu)上呈現(xiàn)非均一性，包括脂肪酸類、固醇類等［48］。

李艷玲等［58］研究發(fā)現(xiàn)，寬體金線蛭的乙酸乙酯部分有較為明顯的抗凝血作用，并從中分離鑒定出了膽固醇，可能對心腦血管疾病有良好療效。目前，寬體金線蛭已檢測到31種脂肪酸，其中不飽和脂肪酸占30.59%，飽和脂肪酸占69.41%［59］，花生四烯酸（ARA）是含量最高的單個脂肪酸［11］。ARA及其代謝產(chǎn)物能減少血栓形成和組織缺血等生理機能的改變，具有降低血糖、血脂和血液中膽固醇的功效，能有效預防心腦血管疾病發(fā)生［60］。

2.4 氨基酸

寬體金線蛭的水解氨基酸含量達49.4%，目前已檢測到19種氨基酸［61］，其中谷氨酸、天冬氨酸、賴氨酸含量較高，蛋氨酸含量最低［11］。

谷氨酸具有促進紅細胞生成和改善腦細胞營養(yǎng)的作用，天冬氨酸可改善心肌收縮功能，賴氨酸是人體第一必需氨基酸，可預防心腦血管疾病發(fā)生，這些氨基酸可能是寬體金線蛭發(fā)揮抗凝血等藥理作用的有效成分［62］。

2.5 微量元素

寬體金線蛭中含有多種微量元素［63］，其中鈣、鎂、鐵元素含量較為豐富，養(yǎng)殖群體及其炮制品中鐵、銅、鎳、鋅、鉛、鎘幾種元素含量顯著高于野生群體［10］。

已有研究表明，鐵元素對活血化瘀的療效起重要作用，銅、鋅元素對治療心腦血管疾病十分有益，錳、鎂、鋅元素與抗癌、抑癌藥理活性密切相關(guān)，藥用水蛭可能通過調(diào)整體內(nèi)微量元素變化引起的紊亂而達到治療疾病的目的［64-65］。

2.6 其它化學成分

除以上成分外，寬體金線蛭體內(nèi)還含有多種其它小分子化合物。黃榮清等［66］對寬體金線蛭脂溶性成分進行分析，發(fā)現(xiàn)其中含有豐富的甾體類化合物。李桃［67］從寬體金線蛭中分離鑒定出一種新的α-吡喃酮苷，名為螞蟥苷A，推測其可能為寬體金線蛭中內(nèi)生細菌或真菌的次生代謝產(chǎn)物，同時分離到一種淡黃色油狀物，經(jīng)鑒定為首次作為天然產(chǎn)物分離得到的2-哌啶酮（2-piperidinone）。張紫月［48］運用Sephadex G25、Sephadex G10、ODS、HPLC等多種色譜方法分離得到了21個肽類成分，其中WP-21為首次從寬體金線蛭中分離得到的一種脯氨酸與亮氨酸縮合而成的環(huán)肽。

一些學者還對寬體金線蛭中次黃嘌呤、尿苷、尿嘧啶、黃嘌呤等成分含量進行了測定［68-71］，研究結(jié)果表明，不同地理群體寬體金線蛭所制藥材品中黃嘌呤和次黃嘌呤含量差異顯著，江蘇江寧群體黃嘌呤含量高于河北衡水和浙江桐鄉(xiāng)群體；浙江桐鄉(xiāng)群體次黃嘌呤含量高于江蘇江寧和河北衡水群體［12］。

3 小結(jié)

寬體金線蛭是當前水蛭中藥材市場的主流商品，但對其抗凝活性成分、作用機理和藥理作用研究尚不充分［72-73］。已發(fā)現(xiàn)的活性組分主要集中在蛋白多肽類等大分子物質(zhì)，氨基酸、微量元素等小分子物質(zhì)的組成與其藥用價值是否直接相關(guān)，尚需做進一步藥理學研究［74］。目前，許多學者仍在持續(xù)從寬體金線蛭中探索新的抗凝物質(zhì)［75］，不斷開發(fā)新的重組蛋白藥物及水蛭肽類衍生物也是未來重要的研究方向之一。

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