50%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑在茶葉上的殘留試驗(yàn)

茶小綠葉蟬是一種常見(jiàn)的茶葉害蟲(chóng)，對(duì)茶葉的產(chǎn)量和品質(zhì)有嚴(yán)重影響。為了控制其危害，需要采取多種防治措施，包括加強(qiáng)茶園管理、利用天敵、采用物理防治和合理使用農(nóng)藥等。在必要的情況下，可以使用50%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑進(jìn)行防治，但要嚴(yán)格按照安全間隔期使用，否則會(huì)造成農(nóng)藥殘留。本研究將50%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑在茶樹(shù)上施用后，檢測(cè)了其在茶樹(shù)可食用部位的殘留量，研究農(nóng)藥在茶樹(shù)上的殘留及降解情況，并參考農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，為50%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑在茶葉上的安全使用提供了依據(jù)。

1. 材料與設(shè)備

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

乙腈、水、甲酸，均為HPLC級(jí)；NaCl為分析純；C18吸附劑；醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)品（1000±20）μg/mL，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；茶葉樣品，來(lái)自日照市高新區(qū)河山鎮(zhèn)草坡村茶樹(shù)試驗(yàn)田。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備

安捷倫1290Ultivo型超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀、KJYQ-500B超聲波清洗器、SL-2000A多功能粉碎機(jī)、XW-80A微型旋渦混合儀、Scout百分之一電子天平、移液槍及各種玻璃儀器。

2. 試驗(yàn)與方法

2.1 選擇試驗(yàn)地塊

試驗(yàn)地點(diǎn)為山東省日照高新區(qū)河山鎮(zhèn)草坡村（最終殘留量試驗(yàn)），土壤類(lèi)型為棕壤，氣候?qū)倥瘻貛Ъ撅L(fēng)氣候類(lèi)型，降水集中、雨熱同季，春秋短暫、冬夏較長(zhǎng)，年平均氣溫為11℃-14℃，年降水量一般在550-950mm，年光照時(shí)數(shù)為2290-2890h。此地塊無(wú)前茬作物，未曾施用過(guò)與試驗(yàn)藥劑性質(zhì)相似的農(nóng)藥。在此地塊上的供試茶樹(shù)為福鼎大白茶。

2.2 施藥方法和器具

選擇背負(fù)式電動(dòng)噴霧器施藥，每畝兌水20L，進(jìn)行植株均勻噴霧處理。試驗(yàn)均在風(fēng)速小于3m/s、氣溫小于40℃、施藥后2h內(nèi)無(wú)降雨的情況下開(kāi)展。施藥前對(duì)噴霧器具進(jìn)行徹底清洗，校準(zhǔn)后使用。

2.3 田間管理

試驗(yàn)期間，對(duì)供試作物在灌溉、施肥方面進(jìn)行常規(guī)化管理，必要時(shí)可進(jìn)行疏苗、疏花、疏果、耕作等操作。為確保供試作物的正常生長(zhǎng)而必須使用其他農(nóng)藥時(shí)，應(yīng)在病蟲(chóng)害發(fā)生時(shí)同時(shí)在對(duì)照小區(qū)和處理小區(qū)使用相同劑量的同種農(nóng)藥，且該農(nóng)藥不能對(duì)被試農(nóng)藥造成分析干擾。施藥后觀察作物的生長(zhǎng)情況，若有藥害產(chǎn)生，需評(píng)估該次施藥對(duì)試驗(yàn)項(xiàng)目的影響。

2.4 最終殘留量試驗(yàn)

在各試驗(yàn)地均設(shè)計(jì)1個(gè)處理小區(qū)、1個(gè)對(duì)照小區(qū)，處理小區(qū)和對(duì)照小區(qū)的面積均為300m2，小區(qū)之間隔離帶為5m。處理小區(qū)按照表1的信息施藥，采用其推薦劑量的最高值3克/畝，每畝兌水20L，以植株均勻噴霧的方式施藥1次。對(duì)照小區(qū)采用清水噴霧。

2.5 田間樣品采樣

最后一次施藥后間隔14、21d，在處理小區(qū)分別采集2個(gè)茶葉樣品。按試驗(yàn)計(jì)劃采樣要求，戴一次性手套，小區(qū)邊行和每行兩邊0.5m不采樣，用對(duì)角線(xiàn)法在試驗(yàn)小區(qū)的不少于12個(gè)點(diǎn)采樣，將生長(zhǎng)正常、無(wú)病害、成熟的茶葉（至少1kg）裝入自封袋。在樣品自封袋加貼標(biāo)簽，標(biāo)簽內(nèi)容包括：項(xiàng)目編號(hào)、樣品編號(hào)、試驗(yàn)地點(diǎn)、樣品名稱(chēng)、采收間隔期、采收日期、田間試驗(yàn)單位和采樣人員。

2.6 樣品運(yùn)輸、制備與儲(chǔ)藏

采集的田間樣品在8h內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行樣品制備。將茶葉樣品充分混勻，四分法縮分，取2份各150-250g樣品，貼好樣品標(biāo)簽，A樣用于檢測(cè)，B樣用于留樣。制備好的農(nóng)殘樣品在低于-18℃冰箱中冷凍保存，并且連續(xù)監(jiān)控溫度。試驗(yàn)結(jié)束后B樣在低于-18℃條件下至少保存半年。

2.7 殘留物檢測(cè)

根據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2019）規(guī)定，殘留物為啶蟲(chóng)脒。檢測(cè)方法來(lái)自《啶蟲(chóng)脒在茶葉上的殘留分析方法驗(yàn)證試驗(yàn)》（試驗(yàn)項(xiàng)目編號(hào)：FXS20004，試驗(yàn)報(bào)告編號(hào)：FXS20004R）。茶葉樣品先用乙腈提取，再用Florisil選擇性吸附劑和石墨化碳黑凈化，然后用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行測(cè)定，最后用定性離子和保留時(shí)間雙重定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)-外標(biāo)法定量。

2.8 樣品檢測(cè)

2.8.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。以空白鮮葉基質(zhì)溶液為定容介質(zhì)，配制一系列質(zhì)量濃度為0.005、0.010、0.020、0.050、0.100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.8.2 檢測(cè)步驟。2.8.2.1 樣品的提取和凈化。取待測(cè)樣品（基質(zhì)），放入粉碎機(jī)制成粉末，稱(chēng)取勻漿試樣（5.00±0.10）g（其質(zhì)量記作M）于具塞試管中，添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)30min后（樣品空白不需要添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)），加入50.0mL乙腈提取劑（提取劑加入體積記作V），超聲提取15min，加入2.00g氯化鈉，渦旋混合30s。靜置后吸取5.0mL上清液，加入0.20g Florisil選擇性吸附劑和0.10g石墨化碳黑，渦旋混合30s。靜置后取1.0mL上清液，根據(jù)實(shí)際情況稀釋?zhuān)ㄌ崛∫合♂尡稊?shù)記作f），取適量稀釋液過(guò)0.22μm有機(jī)微膜，測(cè)試。

2.8.2.2 質(zhì)控樣品的提取和凈化。取對(duì)照小區(qū)空白樣品，放入粉碎機(jī)制成粉末，稱(chēng)取勻漿試樣（5.00±0.10）g（其質(zhì)量記作M）于具塞試管中，添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)30min后，加入50.0mL乙腈提取劑（提取劑加入體積記作V），超聲提取15min，加入2.00g氯化鈉，渦旋混合30s。靜置后吸取5.0mL上清液，加入0.20g Florisil選擇性吸附劑和0.10g石墨化碳黑，渦旋混合30s，靜置后取1.0mL上清液，過(guò)0.22μm有機(jī)濾膜，測(cè)試。

2.8.2.3 儀器條件。儀器：Agilent 1290-Ultivo超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；色譜柱：Eclipse Plus C18，1.8μL，2.1×50mm；柱溫：40.0℃；進(jìn)樣量：3.00μL；流動(dòng)相預(yù)處理：超聲脫氣；流動(dòng)相A：0.1%甲酸緩沖液；流動(dòng)相B：乙腈；梯度洗脫條件：0min A：B=90：10，1min A：B=90：10，2min A：B=50：50，3min A：B=0：100，5min A：B=90：10，5min A：B=90：10；離子源：AJS-ESI；掃描方式：MRM模式；鞘氣溫度：250℃；鞘氣流速：11.0L/min；氣體溫度：300℃；氣體流速：7.0L/min；MS2 Heater：65℃；MS1 Heater：65℃；噴霧：15.0psi；MRM質(zhì)譜條件見(jiàn)表2。

2.9 質(zhì)控樣品

將本試驗(yàn)點(diǎn)的農(nóng)殘樣品作為一個(gè)批次進(jìn)行檢測(cè)，設(shè)置2個(gè)質(zhì)控樣品（理論添加濃度為0.20mg/kg），以對(duì)照小區(qū)茶葉樣品為基質(zhì)，按照2.8.2中的檢測(cè)步驟進(jìn)行檢測(cè)。

2.10 定性和定量方法

采用保留時(shí)間（3.000min）及定性離子對(duì)（223.0/90.0）定性；采用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)-外標(biāo)法定量（定量離子對(duì)223.0/125.9）。

3. 結(jié)果與分析

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和質(zhì)控樣品結(jié)果

本試驗(yàn)采用外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量，在2.8.2的儀器條件下對(duì)空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)濃度采集3個(gè)平行，以5個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) y=349567.862638x+161.299020，相關(guān)性良好，r為0.999；質(zhì)控樣品啶蟲(chóng)脒回收率在100%-110%。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)性和質(zhì)控樣品的回收率均符合殘留檢測(cè)要求，滿(mǎn)足《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》（NY/T 788-2018）對(duì)殘留檢測(cè)方法的相關(guān)要求。

3.2 最終殘留量試驗(yàn)結(jié)果

2023年在山東省日照市進(jìn)行殘留試驗(yàn)，最終結(jié)果顯示，將50%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑按3克/畝的制劑量噴施在茶樹(shù)上，施藥1次，安全間隔期14d，最終殘留樣品采收間隔期為14、21d，試驗(yàn)點(diǎn)茶葉中啶蟲(chóng)脒平均殘留量為0.65mg/kg、0.88mg/kg，低于GB 2763-2019中規(guī)定的10mg/kg。

因此，在使用50%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑防治茶小綠葉蟬時(shí)，制劑用藥量應(yīng)為2-3克/畝，施藥1次，安全間隔期為14d，此條件下茶葉中啶蟲(chóng)脒殘留量低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。