血漿熱休克蛋白90α表達(dá)對老年原發(fā)性肝癌患者經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞術(shù)后預(yù)后的預(yù)測價值

［摘要］目的探討血漿中熱休克蛋白90α（Hsp90α）在老年原發(fā)性肝癌患者經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞術(shù)（TACE）后預(yù)后評估中的價值。方法選取2020年2月—2022年2月就診于吉林省腫瘤醫(yī)院高新院區(qū)綜合外科介入組的110例老年原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行回顧性分析。采用ELISA法檢測術(shù)前血漿中Hsp90α表達(dá)情況，以60 ng/mL作為截斷值，分為Hsp90α高表達(dá)組（55例）和Hsp90α低表達(dá)組（37例）。采用 Kaplan-Meier法繪制生存曲線，Log-rank檢驗比較生存曲線的差異。采用多因素Cox回歸模型分析血漿中Hsp90α表達(dá)與TACE治療的老年原發(fā)性肝癌預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果Hsp90α高表達(dá)組的2年總生存及無進(jìn)展生存的累積生存率均低于Hsp90α低表達(dá)組（P＜0.05）。多因素Cox回歸分析結(jié)果顯示：Hsp90α高表達(dá)是影響患者總生存及無進(jìn)展生存的獨(dú)立危險因素（P＜0.05）。結(jié)論老年原發(fā)性肝癌患者血漿Hsp90α表達(dá)水平可作為接受TACE治療后短期預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測因子。

［關(guān)鍵詞］原發(fā)性肝癌；經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞術(shù)；熱休克蛋白90α

doi：10.3969/j.issn.1674-7593.2024.03.013

Predictive Value of Plasma Heat Shock Protein 90α Expression on the Prognosis ofTranscatheter Arterial Chemoembolization in Elderly Patients with Primary Liver Cancer

Jiang Chengyi1，Yu Jun2，Liu Lu1，Li Xu3，Sun Zhiqiang1**

1Jilin Cancer Hospital，Changchun130102;2School of Basic Medicine，Jilin University，Changchun130012;3The First Clinical Hospitalof Jilin University，Changchun130012

**Corresponding author：Sun Zhiqiang，email：173012100@qq.com

［Abstract］ObjectiveTo investigate the value of plasma heat shock protein 90α（Hsp90α） in the prognostic assessment of elderly patients with primary hepatocellular carcinoma（HCC） after transcatheter arterial chemoembolization（TACE）.MethodsA retrospective analysis was conducted on 110 elderly patients diagnosed with primary HCC who underwent TACE in the Interventional Department of the High-tech Zone of Jilin Cancer Hospital from February 2020 to February 2022.The expression of Hsp90α in preoperative plasma was detected using ELISA，with a cut-off value of 60 ng/mL.Patients were divided into the high Hsp90α expression group（55 cases） and the low Hsp90α expression group（37 cases）.Kaplan-Meier method was used to draw survival curves，and the Log-rank test was used to compare the differences in survival curves.Multivariate Cox regression analysis was performed to analyze the relationship between plasma Hsp90α expression and the prognosis of elderly patients with primary HCC treated with TACE.ResultsThe cumulative survival rates of two-year overall survival and progression-free survival in the high Hsp90α expression group were lower than those in the low Hsp90α expression group（P＜0.05）.Multivariate Cox regression analysis results showed that high Hsp90α expression was an independent risk factor affecting overall survival and progression-free survival in patients（P＜0.05）.ConclusionThe expression level of plasma Hsp90α in elderly patients with primary HCC can serve as an independent predictive factor for short-term prognosis after receiving TACE treatment.

［Key words］Primary liver cancer;Transcatheter arterial chemoembolization;Heat shock protein 90α

原發(fā)性肝癌是具有高發(fā)病率的一種惡性腫瘤，我國肝癌發(fā)病率的增速是世界的兩倍左右，已成為嚴(yán)重危害我國居民健康的主要問題［1-2］。經(jīng)導(dǎo)管肝動脈化療栓塞術(shù)（Transcatheter arterial chemoembolization，TACE）是原發(fā)性肝癌最常見的治療方式，然而術(shù)后?？沙霈F(xiàn)復(fù)發(fā)，患者預(yù)后情況并不樂觀。因此對原發(fā)性肝癌患者的預(yù)后情況進(jìn)行早期評估有利于改善其預(yù)后。熱休克蛋白90α（Heat shock protein 90α，Hsp90α）是一種重要的分子伴侶蛋白，清華大學(xué)抗腫瘤蛋白質(zhì)藥物國家工程實驗室首次發(fā)現(xiàn)其能夠在腫瘤患者的血液中被檢測到，細(xì)胞內(nèi)的Hsp90α與血液中的分泌型Hsp90α在結(jié)構(gòu)上完全不同，并揭示了其分泌調(diào)控機(jī)理［3］。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，Hsp90α能夠在腫瘤患者的血液中被檢測到，并且血漿Hsp90α表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展、惡性程度尤其是轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，為原發(fā)性肝癌等惡性腫瘤的早期診斷、合理治療、病情評估等提供理論依據(jù)，已成為原發(fā)性肝癌患者常規(guī)臨床檢測項目之一［4-6］。故本研究通過分析老年原發(fā)性肝癌患者血漿Hsp90α表達(dá)與TACE治療術(shù)后預(yù)后的關(guān)系，旨在為接受TACE治療的老年原發(fā)性肝癌患者預(yù)后情況的評估和改善提供有效的指標(biāo)。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2020年2月—2022年2月就診于吉林省腫瘤醫(yī)院高新院區(qū)綜合外科介入組的110例老年原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行回顧性分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥60歲；②根據(jù)《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》（2019年版）［7］中診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為原發(fā)性肝癌，病理組織學(xué)確診為肝細(xì)胞癌；③既往未接受過任何治療；④入組時美國東部腫瘤協(xié)作組（Eastern cooperative oncology group，ECOG）評分為0～2分；⑤肝功能Child分級為A級和B級；⑥具有至少1個二維可測量病灶，病灶大小≥2 cm；⑦HIV抗原或抗體陰性；⑧至少接受1次TACE治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有其他惡性腫瘤；②臨床資料缺失不全；③接受TACE治療外的其他治療；④Hsp90α采血檢測時正處于發(fā)熱、創(chuàng)傷修復(fù)、營養(yǎng)不良、炎癥急性期或活動期、極度抑郁等嚴(yán)重心理應(yīng)激或其他應(yīng)激狀態(tài)者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過。其中男90例，女20例，年齡60～87歲，中位年齡66歲；ECOG評分0分1例，1分109例；門靜脈癌栓患者44例，無門靜脈癌栓患者66例；巴塞羅那分期（Barcelona clinic liver cancer，BCLC）A期9例，B期42例，C期59例。根據(jù)Rich等［8-9］研究結(jié)果，以Hsp90α表達(dá)60 ng/mL作為截斷值，將110例老年原發(fā)性肝癌患者分為Hsp90α高表達(dá)組（55例）和Hsp90α低表達(dá)組（37例）。

1.2方法

1.2.1TACE治療方法TACE手術(shù)在局麻下經(jīng)股動脈。引入5-F導(dǎo)管，并進(jìn)行血管造影以評估腫瘤數(shù)量、大小、位置和腫瘤供血動脈。然后，根據(jù)體質(zhì)量指數(shù)給予個體化劑量的化療藥物（洛鉑，30～40 mg；吡柔比星，10～30 mg）通過肝臟動脈輸注。隨后，經(jīng)微導(dǎo)管栓塞（2.7 F， Terumo Medical Corporation，日本東京）選擇性或超選擇性使用傳統(tǒng)的基于碘油的技術(shù)進(jìn)行。記錄TACE后栓塞綜合征發(fā)生情況，并在每次TACE治療后3 d內(nèi)檢查肝功能指標(biāo)，7 d內(nèi)復(fù)查腹部CT。

1.2.2血漿Hsp90α檢測于TACE治療前抽靜脈血，收集血樣裝在EDTA-K2抗凝管中，上下顛倒8～10次，3 000 r/min離心10 min，分離血漿，將500 μL血漿樣本分成2份至EP管中，于-18℃冷凍保存?zhèn)錂z。采用ELISA法檢測血漿Hsp90α表達(dá)情況，檢測試劑盒由煙臺普羅吉生物科技發(fā)展有限公司提供。

1.2.3術(shù)后隨訪所有患者每3～4周進(jìn)行1次隨訪，隨訪項目：問診和查體及全血細(xì)胞計數(shù)、肝功能、腎功能、甲胎蛋白、Hsp90α等相關(guān)實驗室檢查。每1～2個月進(jìn)行1次影像學(xué)檢查，以評估治療效果。當(dāng)發(fā)現(xiàn)殘留存活腫瘤或出現(xiàn)新病灶時，根據(jù)腫瘤狀態(tài)和患者一般情況給予TACE或內(nèi)科治療。失訪患者被視為事件未發(fā)生，直到最后一次隨訪日期為止。記錄兩年總生存（Overall survival，OS）時間及兩年無進(jìn)展生存（Progression-free survival，PFS）時間。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS26軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。Kaplan–Meier方法繪制生存曲線，組間比較采用Log-rank檢驗。使用Cox比例風(fēng)險模型評估Hsp90α等資料與患者OS和PFS的相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者OS情況比較

Hsp90α高表達(dá)組的兩年OS的累積生存率低于Hsp90α低表達(dá)組（χ2=6.367，P=0.012），見圖1。說明Hsp90α低表達(dá)組患者的兩年OS狀況優(yōu)于高表達(dá)組。

2.2兩組患者PFS情況比較

Hsp90α高表達(dá)組的兩年P(guān)FS的累積生存率低于Hsp90α低表達(dá)組（χ2=22.889，P＜0.001），見圖2。說明Hsp90α低表達(dá)組患者的PFS優(yōu)于高表達(dá)組。

2.3影響患者OS的單因素分析及多因素分析

分別以Hsp90α表達(dá)水平（低表達(dá)=0，高表達(dá)=1）、BCLC分期（A+B期=1，C期=2）、Child分級（A級=0，B級=1）、肝外轉(zhuǎn)移（無=0，有=1）、門靜脈癌栓（無=0，有=1）為自變量，進(jìn)行單因素Cox回歸分析，結(jié)果顯示：Hsp90α高表達(dá)、BCLC分期C期、肝外轉(zhuǎn)移、合并門靜脈癌栓是影響患者兩年OS的相關(guān)危險因素（P＜0.05），見表1。以單因素分析進(jìn)入方程的指標(biāo)為自變量進(jìn)行多因素Cox回歸分析，結(jié)果顯示：Hsp90α高表達(dá)是影響患者OS的獨(dú)立危險因素（P＜0.05），見表2。

2.4影響患者PFS的單因素分析及多因素分析

分別以Hsp90α表達(dá)水平（低表達(dá)=0，高表達(dá)=1）、BCLC分期（A+B期=1，C期=2），Child分級（A級=0，B級=1）、肝外轉(zhuǎn)移（無=0，有=1）、門靜脈癌栓（無=0，有=1）為自變量，進(jìn)行單因素Cox回歸分析，結(jié)果顯示：Hsp90α高表達(dá)、BCLC分期C期、肝外轉(zhuǎn)移、合并門靜脈癌栓是影響患者兩年P(guān)FS的相關(guān)危險因素（P＜0.05），見表3。以單因素分析進(jìn)入方程的指標(biāo)為自變量進(jìn)行多因素Cox回歸分析，結(jié)果顯示：Hsp90α高表達(dá)、肝外轉(zhuǎn)移及伴有門靜脈癌栓是影響患者PFS的獨(dú)立危險因素（P＜0.05），見表4。

3討論

近年來，原發(fā)性肝癌的患病率和致死率持續(xù)升高。特別是年齡＞60歲的老年原發(fā)性肝癌患者，預(yù)后通常較差［10］。TACE已廣泛用于治療中晚期原發(fā)性肝癌。而由于患者之間存在顯著的個體差異，TACE的療效在不同患者中表現(xiàn)出差異，有些患者難以獲得顯著的生存益處。因此，在術(shù)前對老年原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行評估，以確定TACE治療的預(yù)后，并為高風(fēng)險患者量身制定更積極的綜合治療方案，以延長他們的生存期，一直是臨床醫(yī)生們努力的目標(biāo)。

盡管近年來有許多研究報道了Child-Pugh分級、BCLC分期、甲胎蛋白表達(dá)以及門靜脈侵犯等臨床指標(biāo)在預(yù)測原發(fā)性肝癌患者接受TACE治療后生存方面的價值。但目前仍然缺乏一種有效的方法來評估行TACE治療的老年原發(fā)性肝癌患者的預(yù)后，相關(guān)指標(biāo)仍需要更深入地研究和探索。

熱休克蛋白是一類在幾乎所有生物體中廣泛存在的蛋白質(zhì)，它們在新生肽鏈的正確折疊過程中發(fā)揮著重要的角色，這有利于確保蛋白質(zhì)以正確的結(jié)構(gòu)執(zhí)行其功能。當(dāng)腫瘤細(xì)胞面臨應(yīng)激條件，比如高溫、缺乏營養(yǎng)和氧氣時，會增加熱休克蛋白的表達(dá)，這有利于維持惡性腫瘤中蛋白質(zhì)的合成和降解之間的平衡，使得腫瘤細(xì)胞能夠在惡劣的微環(huán)境下生存［11］。熱休克蛋白可以根據(jù)分子量分為不同的類別，包括Hsp100、Hsp90、Hsp70、Hsp60和小Hsp。Hsp90是熱休克蛋白家族中研究最廣泛的成員之一，在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)較高，這種高表達(dá)有利于維持多種促癌分子的穩(wěn)定性，同時抑制抗癌分子的活性，最終促進(jìn)了原發(fā)性肝癌的生長和擴(kuò)散［12］。Hsp90α在晚期原發(fā)性肝癌患者血漿中呈高表達(dá)狀態(tài)［13］。以原發(fā)性肝癌為適應(yīng)證的臨床試驗，入組樣本量為1 525例，當(dāng)Hsp90α的cut-off值為62.44 ng/mL時，對原發(fā)性肝癌的診斷靈敏度為92.7%、特異度為91.3%，而對于早期原發(fā)性肝癌診斷的靈敏度為91.4%、特異度為91.3%［8］。此外，廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)，無論是原發(fā)性肝癌（cut-off值69.10 ng/mL），還是繼發(fā)性肝癌（cut-off值64.7 ng/mL），Hsp90α均具有較好的診斷價值［9］。因此本研究將Hsp90α的cut-off值定為60 ng/mL，可以明顯地將患者進(jìn)行區(qū)分。另外四川省人民醫(yī)院研究發(fā)現(xiàn)，Ｈsp90α區(qū)分早期原發(fā)性肝癌和肝硬化的診斷效能較好，且隨著BCLC分期發(fā)展，ROC曲線下面積越大，診斷能力越明顯，且患者預(yù)后通常較差［14］。

本研究結(jié)果顯示Hsp90α高表達(dá)是影響老年原發(fā)性肝癌患者兩年OS及PFS的獨(dú)立危險因素（P＜0.05）。近期一項研究提示，檢測血漿Hsp90α可動態(tài)監(jiān)測原發(fā)性肝癌手術(shù)治療效果，在12例術(shù)后Hsp90α升高的原發(fā)性肝癌患者中，有8例通過影像學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)了術(shù)后殘留或復(fù)發(fā)［15］。一項納入了2 150例原發(fā)性肝癌患者的研究顯示，血漿Hsp90α高表達(dá)是影響OS的獨(dú)立影響因素，且Hsp90α高表達(dá)組比Hsp90α低表達(dá)組表現(xiàn)出更好的OS［16］。另一項有關(guān)TACE治療的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，Hsp90α是原發(fā)性肝癌患者術(shù)后生存的獨(dú)立影響因子［17］。這些研究均說明Hsp90α表達(dá)可能成為一種用于預(yù)測原發(fā)性肝癌患者生存的腫瘤標(biāo)志物。

綜上所述，老年原發(fā)性肝癌患者血漿Hsp90α表達(dá)水平可作為接受TACE治療后短期預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測因子。這項研究存在一些限制，包括單中心研究、樣本量較小以及分組細(xì)分不足等。未來的研究應(yīng)采用多中心、大樣本和更詳細(xì)的分組研究，以深入探討Hsp90α在TACE治療后的老年原發(fā)性肝癌患者預(yù)后中的價值。此外，還需要進(jìn)一步研究Hsp90α表達(dá)的臨界值，以更準(zhǔn)確地評估其在TACE治療后的肝癌患者預(yù)后中的作用，為臨床提供更有力的依據(jù)。

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（2024-01-17收稿）