短暫性腦缺血發(fā)作病人血清MPO、TRAF6表達(dá)水平及其對(duì)腦梗死發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值

魏官 辛雁瑞 沈?yàn)t

摘要 目的： 探討短暫性腦缺血發(fā)作（TIA）病人血清髓過氧化物酶（MPO）、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6）水平及其對(duì)腦梗死（CI）發(fā)生的預(yù)測(cè)價(jià)值。 方法： 選取2020年3月—2022年3月大同市某三級(jí)甲等醫(yī)院收治的147例TIA病人為TIA組，同期年齡相匹配的147名健康體檢者為健康組。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清MPO、TRAF6水平。根據(jù)ABCD2評(píng)分將TIA病人分為高危組44例（ABCD2評(píng)分6～7分）、中危組52例（ABCD2評(píng)分4～5分）、低危組51例（ABCD2評(píng)分≤3分）；比較不同嚴(yán)重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平。根據(jù)TIA病人是否發(fā)生CI分為CI組（57例）和非CI組（90例），比較CI組、非CI組臨床資料及血清MPO、TRAF6水平差異。分析TIA病人發(fā)生CI的可能相關(guān)因素。 結(jié)果： 與健康組比較，TIA組血清MPO、TRAF6水平升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＜0.001）。不同嚴(yán)重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＜0.001）。與低危組比較，中危組、高危組血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）；與中危組比較，高危組血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）。與非CI組比較，CI組高脂血癥占比、血清MPO、TRAF6水平較高，每個(gè)月發(fā)作次數(shù)增多，癥狀持續(xù)時(shí)間、發(fā)作至就診時(shí)間延長(zhǎng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＜0.05）。高脂血癥、癥狀持續(xù)時(shí)間、每個(gè)月發(fā)作次數(shù)、發(fā)作至就診時(shí)間、 MPO、TRAF6是TIA病人發(fā)生CI的因素（ P ＜ 0.001）。受試者工作特征（ROC）曲線分析顯示，血清MPO、TRAF6預(yù)測(cè)TIA病人發(fā) 生CI的ROC曲線下面積（AUC）分別為0.870，0.862； MPO、TRAF6聯(lián)合預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的AUC為0.945，表明MPO、TRAF6聯(lián)合可提高TIA病人發(fā)生CI的臨床預(yù)測(cè)價(jià)值。 結(jié)論： TIA病人血清MPO、TRAF6水平升高，可能與TIA疾病嚴(yán)重程度及CI發(fā)生相關(guān)，且MPO、TRAF6聯(lián)合預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的臨床價(jià)值較高。

關(guān)鍵詞 ?短暫性腦缺血發(fā)作；腦梗死；腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6；髓過氧化物酶

doi： ?10.12102/j.issn.1672.1349.2024.10.032

短暫性腦缺血發(fā)作（transient ischemic attack，TIA）是一種腦血管痙攣疾病，其發(fā)生率逐年升高，且趨于年輕化，可反復(fù)發(fā)作，易引發(fā)腦梗死（cerebral infarction，CI），CI是我國(guó)成年人致殘、致死的重要原因 ?［1.2］ ，因此，尋找可預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的方法尤其重要。相關(guān)研究顯示，TIA病人發(fā)生CI可能與炎癥反應(yīng)、凝血功能異常、動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）、氧化應(yīng)激等相關(guān) ?［3.4］ 。髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）是一種血色素蛋白，可影響AS，其在急性腦梗死（acute cerebral infarction，ACI）中呈高水平，MPO具有診斷ACI的潛在價(jià)值 ?［5］ 。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（tumor necrosis factor receptor associated factor 6，TRAF6）參與炎癥反應(yīng)，影響免疫調(diào)節(jié)，其在CI中水平升高，與CI嚴(yán)重程度相關(guān)，TRAF6可輔助診斷CI ?［6］ 。本研究通過檢測(cè)TIA病人血清MPO、TRAF6表達(dá)水平，分析二者對(duì)CI的預(yù)測(cè)價(jià)值，以期為臨床預(yù)防TIA病人發(fā)生CI提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2020年3月—2022年3月大同市某三級(jí)甲等醫(yī)院收治的147例TIA病人為TIA組，其中男103例，女44例，年齡50～72（60.94±7.25）歲。根據(jù) ABCD2評(píng)分 ?［7］ 將TIA病人分為高危組44例（ABCD2 ?評(píng)分6～7分）、中危組52例（ABCD2評(píng)分4～5分）、低危組51例（ABCD2評(píng)分≤3分）。另納入同期健康體檢者147名為健康組，其中男92名，女55名，年齡50～72（59.51±7.08）歲。TIA組和健康組性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＞0.05）。本研究符合《赫爾辛基宣言》，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：TIA病人符合《急性缺血性腦血管病中西醫(yī)診療指南》 ?［8］ 中TIA診斷標(biāo)準(zhǔn)；所有病人均為初次TIA，發(fā)病后24 h內(nèi)入院；臨床資料完整，且病人或家屬對(duì)本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有偏頭痛、癲癇或其他神經(jīng)系統(tǒng)疾??；伴有顱內(nèi)出血、顱內(nèi)感染、腦代謝性疾病、腦腫瘤、腦血管畸形；有顱腦外傷史、手術(shù)史；伴有免疫、凝血系統(tǒng)疾病或遺傳代謝疾病等。

1.2 方法

1.2.1 資料收集

收集所有研究對(duì)象年齡、性別、高血壓、高脂血癥、糖尿病、吸煙、主要臨床表現(xiàn)、發(fā)作次數(shù)、發(fā)作至就診時(shí)間、癥狀持續(xù)時(shí)間等。

1.2.2 血清MPO、TRAF6水平檢測(cè)

收集所有TIA病人入院次日和健康體檢者體檢當(dāng)天空腹外周血，靜置40 min后，以4 500 r/min離心7 min，分離血清，采用人MPO酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme ?linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（QY.SZ0647， 購(gòu)自上海喬羽生物科技有限公司）、人TRAF6 ELISA試劑盒（DLR.TRAF6.Hu，購(gòu)自無錫市東林科技發(fā)展有限責(zé)任公司）、酶標(biāo)儀（ELX800，購(gòu)自美國(guó)BIOTEK公司）測(cè)定血清MPO、TRAF6水平。

1.3 CI評(píng)估及分組方法

發(fā)生CI的TIA病人符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2014》 ?［9］ 中CI診斷標(biāo)準(zhǔn)，顱腦CT檢查提示存在明顯低密度影，同時(shí)伴有嗜睡、意識(shí)障礙、昏睡、昏迷及肢體障礙等臨床表現(xiàn)。所有TIA病人入院后均進(jìn)行3個(gè)月隨訪，隨訪方式為門診復(fù)查或電話，隨訪終點(diǎn)事件為發(fā)生CI或隨訪時(shí)間結(jié)束。將發(fā)生C I的TIA病人作為CI組（57例），未發(fā)生CI的TIA病人作為非CI組（90例）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x ?± s ）表示，兩組間比較采用 ?t 檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析；定性資料以例數(shù)、百分比（%）表示，采用 χ ?2檢驗(yàn)。采用Logistic回歸法分析TIA病人發(fā)生CI的影響因素；受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評(píng)估血清MPO、TRAF6預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的臨床價(jià)值。以 P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 TIA組、健康組臨床資料比較

與健康組比較，TIA組血清MPO、TRAF6水平升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＜0.001）。詳見表1。

2.2 不同嚴(yán)重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比較

不同嚴(yán)重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＜0.001）。與低危組比 較，中危組、高危組血清MPO、TRAF6水平均升高 （ P ＜0.05）；與中危組比較，高危組血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）。詳見表2。

2.3 CI組和非CI組臨床資料比較

與非CI組比較，CI組高脂血癥占比、血清MPO、TRAF6水平較高，發(fā)作次數(shù)增多，癥狀持續(xù)時(shí)間、發(fā)作至就診時(shí)間延長(zhǎng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P ＜0.05）。詳見表3。

2.4 多因素Logistic回歸分析TIA病人發(fā)生CI的影響因素

以TIA病人是否發(fā)生CI為因變量（發(fā)生＝1，不發(fā)生＝0），高脂血癥（有＝1，無＝0）、癥狀持續(xù)時(shí)間（實(shí)測(cè)值）、每個(gè)月發(fā)作次數(shù)（實(shí)測(cè)值）、發(fā)作至就診時(shí)間（實(shí)測(cè)值）、MPO（實(shí)測(cè)值）、TRAF6（實(shí)測(cè)值）為自變量，進(jìn)行Logistic回歸分析。結(jié)果顯示，高脂血癥、癥狀持續(xù)時(shí)間、每個(gè)月發(fā)作次數(shù)、發(fā)作至就診時(shí)間、MPO、TRAF6是TIA病人發(fā)生CI的因素（ P ＜0.001）。詳見表4。

2.5 血清MPO、TRAF6水平預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的臨床價(jià)值

ROC曲線顯示，血清MPO預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的ROC曲線下面積（area under curve，AUC）為0.870［95%CI（0.807，0.933）， P ＜0.001］，截?cái)嘀禐?16.03 U/mL，約登指數(shù)為0.674，敏感度為80.7%，特異度為86.7%；TRAF6預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的AUC為0.862 ［95%CI（0.793，0.932）， P ＜0.001］，截?cái)嘀禐?.06 μg/mL， 約登指數(shù)為0.678，敏感度為78.9%，特異度為89.9%；兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)TIA 病人發(fā)生CI的AUC為0.945［95%CI （0.906，0.983）， P ＜0.001］，約登指數(shù)為0.803，敏感度為94.7%，特異度為85.6%。詳見圖1。

3 討 論

TIA是一種常見的缺血性腦血管疾病，多發(fā)生于中老年人群，若不及時(shí)治療，可能發(fā)展為CI，嚴(yán)重影響病人生存質(zhì)量 ?［10.11］ 。因此，尋找可預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的方法，盡早預(yù)防、及時(shí)干預(yù)，對(duì)降低CI發(fā)生率有積極的臨床意義。

MPO是由中性粒細(xì)胞分泌的一種蛋白，可促進(jìn)活性氧產(chǎn)生，介導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)，引起血管損傷，還可促進(jìn)炎癥反應(yīng)，影響巨噬細(xì)胞吸收及泡沫細(xì)胞形成，加速AS，與缺血再灌注損傷、CI等疾病有關(guān) ?［12.13］ 。既往研究顯示，MPO在發(fā)生腦疝的CI病人中呈高水平，MPO對(duì)CI病人預(yù)后有較好的預(yù)測(cè)價(jià)值 ?［14］ 。Chen等 ?［15］ 研究顯示，MPO可促進(jìn)氧化應(yīng)激和神經(jīng)炎癥反應(yīng)，引起腦缺血再灌注損傷，MPO可能是治療ACI的潛在靶點(diǎn)。本研究中TIA病人血清MPO水平高于健康體檢者，說明MPO可能參與TIA發(fā)病過程。TIA病人病情越嚴(yán)重，血清MPO水平越高，提示MPO可能與TIA病情嚴(yán)重程度相關(guān)。進(jìn)一步本研究結(jié)果顯示，發(fā)生CI的TIA病人血清MPO水平高于未發(fā)生CI的TIA病人，提示MPO可能與TIA病人發(fā)生CI密切相關(guān)，推測(cè)MPO可能通過調(diào)節(jié)活性氧產(chǎn)生，促進(jìn)氧化應(yīng)激反應(yīng)，造成腦血管損傷，促使TIA病人發(fā)生CI；MPO可促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成，影響炎癥反應(yīng)，加速AS，從而促進(jìn)TIA病人發(fā)生CI。本研究回歸分析顯示，MPO升高是TIA病人發(fā)生CI的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，說明MPO水平增加，動(dòng)脈硬化風(fēng)險(xiǎn)增加，促進(jìn)CI發(fā)生。通過ROC曲線分析發(fā) 現(xiàn)，血清MPO預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的AUC為0.870， 表明MPO對(duì)TIA病人發(fā)生CI有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，檢測(cè)血清MPO水平可能有利于判定TIA病人是否發(fā)生CI，為臨床預(yù)防CI提供依據(jù)。

TRAF6是一種多功能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，可影響血栓及淋巴結(jié)形成，參與細(xì)胞凋亡，介導(dǎo)免疫反應(yīng)，通過激活核因子.κB等分子調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，與腦缺血再灌注損傷病人有關(guān) ?［16.17］ 。相關(guān)研究顯示，TRAF6在CI病人中表達(dá)上調(diào)，經(jīng)唐古特白刺治療后，TRAF6表達(dá)下調(diào)，其可能通過影響腦缺血再灌注損傷進(jìn)而影響CI病理變化 ?［18］ ；TRAF6在急性缺血損傷中呈高表達(dá) ?［19］ 。本研究結(jié)果顯示，TIA病人血清TRAF6水平較高，且血清TRAF6水平隨著TIA疾病加重呈升高趨勢(shì)，提示TRAF6可能與TIA病情變化有關(guān)，輔助評(píng)估TIA病人病情；發(fā)生CI的TIA病人血清TRAF6水平高于未發(fā)生CI的TIA病人，與杜秀民等 ?［6］ 研究結(jié)果一致，且TRAF6是TIA病人發(fā)生CI的獨(dú)立因素，說明檢測(cè)TRAF6水平變化可預(yù)測(cè)CI發(fā)生。本研究 ROC分析顯示，血清TRAF6預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的AUC為0.862， 提示TRAF6可能參與TIA病人發(fā)生CI的過程，且TRAF6可能是判定TIA病人是否發(fā)生CI的潛在指標(biāo)，推測(cè)TRAF6可能通過影響核因子.κB等分子激活，進(jìn)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)，在TIA病人發(fā)生CI的過程中發(fā)揮促進(jìn)作用。同時(shí)本研究結(jié)果還顯示，MPO、TRAF6聯(lián)合預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的AUC為0.945，高于二者單獨(dú)預(yù)測(cè)，敏感度為94.7%，特異度為85.6%，表明MPO、TRAF6聯(lián)合可提高對(duì)TIA病人發(fā)生CI的預(yù)測(cè)價(jià)值，可能是采用并聯(lián)方式將兩個(gè)指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測(cè)CI，其中一個(gè)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性即可以判定為陽(yáng)性，降低單一指標(biāo)預(yù)測(cè)存在的漏診現(xiàn)象，提高了敏感度。

本研究Logistic回歸分析結(jié)果顯示，患有高脂血癥、TIA癥狀持續(xù)時(shí)間及發(fā)作至就診時(shí)間越長(zhǎng)、每個(gè)月發(fā)作次數(shù)越多是TIA病人發(fā)生CI的影響因素，與王海霞等 ?［20］ 研究結(jié)果一致。曹暉等 ?［10］ 研究顯示，發(fā)作次數(shù)、發(fā)作至就診時(shí)間、持續(xù)時(shí)間是TIA后發(fā)生CI的獨(dú)立影響因素。發(fā)作持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)、發(fā)作次數(shù)多可能提示腦組織損害嚴(yán)重，預(yù)后較差，且隨著就診時(shí)間延長(zhǎng)，缺血半暗帶損傷逐漸加重，導(dǎo)致更多的神經(jīng)元損害 ?［11］ 。

綜上所述，MPO、TRAF6在TIA病人血清中水平較高，可能與TIA嚴(yán)重程度及其發(fā)生CI有關(guān)，二者均可作為預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的血清標(biāo)志物，且MPO、TRAF6聯(lián)合可提高TIA病人發(fā)生CI的臨床預(yù)測(cè)價(jià)值，作為臨床預(yù)測(cè)TIA病人發(fā)生CI的潛在方法。本研究樣本量有限，可能導(dǎo)致結(jié)果存在偏差，后期應(yīng)擴(kuò)大樣本量，深入分析MPO、TRAF6在TIA并發(fā)CI中的具體機(jī)制，以期為臨床防治CI提供依據(jù)。

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（收稿日期：2023.03.01）

（本文編輯 薛妮）