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    湖南省1日齡雛雞肌胃腺胃炎流行病學(xué)調(diào)查及其致病因素研究

    2024-06-04 05:34:07徐鈺棟郭陽(yáng)浩肖騫珣劉勃攻宋澤和賀喜劉自逵
    家禽科學(xué) 2024年5期
    關(guān)鍵詞:血清

    徐鈺棟 郭陽(yáng)浩 肖騫珣 劉勃攻 宋澤和 賀喜 劉自逵

    摘 要:為探究湖南省1日齡雛雞肌胃腺胃炎的流行情況及其致病原因,本研究于2023年對(duì)湖南省11個(gè)不同種雞場(chǎng)進(jìn)行了15次1日齡雛雞的肌胃腺胃炎流行病學(xué)調(diào)查及肌胃腺胃樣品采集,進(jìn)行病理剖檢、病理評(píng)分、病理切片觀察、炎癥因子基因表達(dá)測(cè)定和霉菌毒素含量測(cè)定,并收集血清測(cè)定免疫球蛋白含量。結(jié)果表明,15次流行病學(xué)調(diào)查肌胃腺胃炎患病率為62.1%,病理剖檢和病理切片觀察發(fā)現(xiàn)患病雛雞肌胃腺胃都出現(xiàn)了比較明顯的潰瘍和病灶以及黏膜層破損潰爛、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和肌層肌纖維疏松。患病雛雞肌胃腺胃內(nèi)炎癥因子(IL-1β、IL-6和TNF-ɑ)基因表達(dá)和肌胃腺胃組織內(nèi)玉米赤霉烯酮和T-2毒素的含量均顯著高于正常雛雞(P<0.05),血清中IgA、IgM和IgG含量均顯著低于正常雛雞(P<0.05)。綜上所述,湖南省內(nèi)1日齡雛雞肌胃腺胃炎流行程度較為嚴(yán)重,種蛋中的霉菌毒素對(duì)肌胃腺胃的毒性作用及其所導(dǎo)致的雞胚免疫能力下降可能是導(dǎo)致1日齡雛雞肌胃腺胃炎的重要因素。

    關(guān)鍵詞:1日齡雛雞;肌胃腺胃炎;流行病學(xué)調(diào)查;炎癥因子;霉菌毒素;血清免疫球蛋白

    中圖分類號(hào):S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B? 文章編號(hào):1673-1085(2024)05-0014-11

    基金項(xiàng)目:湖南家禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系

    第一作者:徐鈺棟(1999—),男,碩士,研究方向?yàn)楂F藥創(chuàng)制與臨床應(yīng)用研究,E-mail:791819417@qq.com

    *通信作者:劉自逵(1965—),男,教授,碩士生導(dǎo)師,研究方向?yàn)楂F用中藥資源與中獸藥創(chuàng)制,E-mail:lzk7035@sina.com

    *并列通信作者:賀喜(1977—),男,教授,博士生導(dǎo)師,研究方向?yàn)榧仪轄I(yíng)養(yǎng),E-mail:hexi111@126.com

    肌胃腺胃炎是雞常見(jiàn)的一種消化道疾病[1],臨床表現(xiàn)精神萎靡、食欲不振、虛弱等癥狀,剖檢可見(jiàn)腺胃腫脹、乳頭扁平甚至消失、肌胃潰瘍出血、角質(zhì)層增厚、破損易剝離等病變,這極大地影響了雞只的消化功能和健康狀況,增加了雞群料肉比和患病風(fēng)險(xiǎn),給肉雞養(yǎng)殖帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。近年來(lái)我國(guó)華北、華東和東北地區(qū)相繼發(fā)生大面積肌胃腺胃炎[3],且研究發(fā)現(xiàn)該病在1日齡雛雞中也時(shí)有發(fā)生[4]。有文獻(xiàn)報(bào)道,飼料霉菌毒素污染等非傳染性因素以及網(wǎng)狀內(nèi)皮增生狀病毒[5,6]、腺胃壞死病毒[7]、腺胃型傳染性支氣管炎病毒[8]和傳染性法氏囊病毒[9]感染等傳染性因素均可導(dǎo)致雞只出現(xiàn)肌胃腺胃炎。1日齡雛雞由于尚未進(jìn)食飼料,其發(fā)生肌胃腺胃炎的原因可能與父母代種雞日糧霉菌毒素污染或病毒感染等因素相關(guān)[4],但目前尚未有相關(guān)研究報(bào)道。本試驗(yàn)通過(guò)調(diào)研湖南省內(nèi)多個(gè)種雞場(chǎng)1日齡雛雞肌胃腺胃炎發(fā)病情況并對(duì)相關(guān)潛在致病因素進(jìn)行了分析,以期為1日齡雛雞肌胃腺胃炎的防控提供數(shù)據(jù)和理論支撐。

    1? 材料與方法

    1.1? 主要試劑及儀器

    1.1.1? 主要試劑? 生理鹽水、60%甲醇溶液、80%甲醇溶液、10%甲醛溶液、SteadyPure通用型RNA提取試劑盒、Evo M-MLV反轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR Green嵌合熒光定量染料,購(gòu)于湖南艾科瑞生物工程有限公司;雞免疫球蛋白(IgA、IgM和IgG)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒,購(gòu)于上海酶聯(lián)生物科技有限公;霉菌毒素含量ELISA試劑盒,購(gòu)于普瑞邦生物科技有限公司。

    1.1.2? 主要儀器? 離心機(jī)(TDL5E 型, 長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司)、光學(xué)顯微鏡(ML31型,廣州市明美光電技術(shù)有限公司)、分光光度計(jì)(Nanodrop One 型,美國(guó)賽默飛世爾科技公司)、移液器(美國(guó)Gilson公司)、熒光定量PCR儀(LightCycler480Ⅱ型,瑞士羅氏公司)、勻漿機(jī)(JXFSTPRP-96L型,上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司)、酶標(biāo)儀(Infinite M PLEX型,瑞士帝肯公司)。

    1.2? 樣品來(lái)源

    對(duì)湖南省11個(gè)規(guī)?;N雞場(chǎng)的15批不同品種的1日齡雛雞進(jìn)行肌胃腺胃炎流行病學(xué)調(diào)查和樣品采集,采樣地點(diǎn)及具體信息見(jiàn)表1。

    1.3? 樣品采集和處理

    各批次雛雞均采用頸靜脈取血并收集于促凝管中,血液樣品于室溫放置30 min,3 000 r/min離心10 min分離血清,將血清分裝至1.5 mL 凍存管后放置于-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。雛雞使用CO2窒息致死后,分離肌胃和腺胃,剖檢并拍照用于病理評(píng)分;拍照后取肌胃腺胃樣品2份,一份樣品于生理鹽水中漂洗干凈,放入10%甲醛溶液固定,用于制作組織切片;另一份樣品于液氮中速凍,放置于-80 ℃冰箱保存,待測(cè)。

    1.4? 肌胃腺胃炎患病率的統(tǒng)計(jì)及病理評(píng)分

    肌胃和腺胃病理評(píng)分按照本研究自行設(shè)計(jì)的病理等級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病理評(píng)分,病理評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)參照?qǐng)D1。0分(正常):肌胃腺胃表面呈鮮黃色,無(wú)任何炎癥、潰瘍和病變部位;1分(低程度患?。杭∥赶傥副砻娉庶S色,出現(xiàn)些許點(diǎn)狀炎癥、潰瘍和病變部位;2分(中程度患病):肌胃腺胃表面呈暗黃色或褐色,出現(xiàn)有一定面積的炎癥、潰瘍和病變部位;3分(高程度患?。杭∥赶傥副砻娉拾迭S色、褐色甚至是黑色,出現(xiàn)大面積炎癥、潰瘍和病變部位。

    1.5? 肌胃腺胃組織病理學(xué)檢查

    10%甲醛溶液固定的肌胃腺胃樣品,經(jīng)脫水、透明、石蠟包埋、切片、H&E染色后,每個(gè)樣本選擇整體伸展良好、無(wú)過(guò)渡拉伸和壓縮的組織切片,在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察并拍照取樣,使用Image-Pro Plus 6.0軟件在100×倍數(shù)下觀察肌胃腺胃黏膜層組織病變和肌層肌纖維組織病變情況,并在400×倍數(shù)下觀察肌胃腺胃黏膜層和肌層炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況。

    1.6? 肌胃腺胃內(nèi)炎癥因子相關(guān)基因mRNA表達(dá)的測(cè)定

    選取15批次中患病率和病情嚴(yán)重程度最高的2批組織樣品(下同),用RNA裂解液勻漿后,按照SteadyPure通用型RNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)操作進(jìn)行肌胃腺胃組織RNA提取。使用核酸蛋白測(cè)定儀測(cè)定其濃度和純度,按照Evo M-MLV反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,反轉(zhuǎn)錄采用20 μL體系:gDNA Clean Reaction Mix Ver.2? 2 μL,5× Evo M-MLVRT Reaction Mix Ver.2 4 μL,RNA (1000/濃度)μL,RNase free water (14-RNA加入量)μL,反轉(zhuǎn)錄得到cDNA。使用SYBR Green嵌合熒光法進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)。

    10 μL反應(yīng)體系:cDNA 2 μL,5×SYBR 5 μL,上游引物 0.5 μL,下游引物0.5 μL,RNase-free water 2 μL。白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-ɑ(TNF-ɑ)引物參照Li等[10]的設(shè)計(jì),并由生工生物工程(上海)有限公司合成,序列見(jiàn)表2;以β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)作為內(nèi)參基因,根據(jù)2-ΔΔCt法對(duì)定量結(jié)果進(jìn)行計(jì)算分析。

    1.7? 血清免疫球蛋白的測(cè)定

    2批血清樣品中免疫球蛋白(IgA、IgM和IgG)采用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒測(cè)定。

    1.8? 肌胃腺胃內(nèi)霉菌毒素含量的測(cè)定

    2批肌胃腺胃組織樣品中霉菌毒素含量的測(cè)定參考Wang等[11]研究中的方法,使用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定。具體操作如下:

    取肌胃腺胃樣品0.150 g于1.5 mL勻漿管中(4份),分別加入300 μL 60%甲醇溶液(用于測(cè)定玉米赤霉烯酮)、60%甲醇溶液(用于測(cè)定黃曲霉毒素)、蒸餾水(用于測(cè)定嘔吐毒素)和80%甲醇溶液(用于測(cè)定T-2毒素),加入勻漿珠2顆,置于勻漿機(jī)中充分勻漿5 min后于室溫4 000 r/min離心5 min,取上清液,使用定性濾紙過(guò)濾并收集濾液,并采用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒對(duì)待測(cè)液進(jìn)行測(cè)定。

    1.9? 數(shù)據(jù)處理與分析

    數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016整理后采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(ONE-WAY ANOVA),使用Duncan氏多重比較法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性進(jìn)行處理分析,以P<0.05為顯著性水平,數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。相關(guān)性分析是通過(guò)R語(yǔ)言自編程序來(lái)計(jì)算炎癥因子、血清免疫球蛋白和肌胃腺胃內(nèi)各類霉菌毒素含量之間的 person 相關(guān)系數(shù)。

    2? 結(jié)果與分析

    2.1? 1日齡雛雞肌胃腺胃炎檢測(cè)結(jié)果分析

    本次調(diào)研對(duì)湖南省11個(gè)種雞場(chǎng)內(nèi)15批次1日齡雛雞進(jìn)行了肌胃腺胃炎流行病學(xué)調(diào)查,共采集樣品1 303份,其中正常雛雞493只、患病雛雞810只,患病率為62.1%。

    2.2? 1日齡雛雞肌胃腺胃剖檢及病理評(píng)分結(jié)果分析

    由表3可見(jiàn),本次調(diào)研患病雛雞的病情較為嚴(yán)重,低患病程度(1分)雛雞和中患病程度(2分)雛雞分別占比32%和23%,高患病程度(3分)雛雞占比7%。

    2.3? 1日齡雛雞肌胃腺胃H&E染色切片病理觀察結(jié)果分析

    由圖2中A~H可見(jiàn),患病雛雞肌胃腺胃的黏膜層破損潰瘍,肌胃腺不同程度的斷裂,肌胃腺胃的肌層肌纖維密度顯著低于正常雛雞,且這些病理現(xiàn)象隨著患病程度的升高而呈現(xiàn)更加嚴(yán)重的趨勢(shì);由圖2中I~P所見(jiàn),患病雛雞肌胃腺胃的黏膜層和肌層出現(xiàn)比較明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和紅細(xì)胞滲出,這些病理現(xiàn)象同樣隨著患病程度的升高而呈現(xiàn)更加嚴(yán)重的趨勢(shì)。

    2.4? 1日齡雛雞肌胃腺胃炎癥因子相關(guān)基因mRNA的表達(dá)結(jié)果分析

    結(jié)果見(jiàn)表4所示。低患病組、中患病組、高患病組的肌胃腺胃組織內(nèi)炎癥因子(IL-1β、IL-6和TNF-ɑ)基因表達(dá)顯著高于正常組(P<0.05),且炎癥因子(IL-1β、IL-6和TNF-ɑ)基因的表達(dá)隨著肌胃腺胃炎病情嚴(yán)重程度的增加而呈顯著線性上升(P<0.05)。

    2.5? 1日齡雛雞血清免疫球蛋白含量結(jié)果分析

    結(jié)果見(jiàn)表5所示。低患病組、中患病組、高患病組的血清免疫球蛋白IgA、IgM含量顯著低于正常組(P<0.05),且雛雞血清IgA、IgM含量隨著病情嚴(yán)重程度的增加而呈顯著線性下降(P<0.05);中患病組、高患病組的血清IgG的含量顯著低于正常組和低患病組(P<0.05),但各組數(shù)據(jù)之間并無(wú)顯著線性關(guān)系(P>0.05)。

    2.6? 1日齡雛雞肌胃腺胃內(nèi)各類霉菌毒素的含量結(jié)果分析

    結(jié)果見(jiàn)表6所示。由表6可知,各患病組肌胃腺胃內(nèi)嘔吐毒素(DON)和黃曲霉毒素(AFB1)含量與正常組相比,無(wú)顯著差異(P>0.05),且各組數(shù)據(jù)之間并無(wú)顯著線性關(guān)系(P>0.05);中患病組、高患病組肌胃腺胃內(nèi)的玉米赤霉烯酮和T-2毒素含量顯著高于正常組(P<0.05),且肌胃腺胃內(nèi)玉米赤酶烯酮(ZEN)和T-2毒素(T-2toxin)的含量隨著病情嚴(yán)重程度的增加而呈顯著線性上升(P<0.05)。

    2.7? 1日齡雛雞肌胃腺胃炎癥因子基因的表達(dá)、霉菌毒素的含量以及血清免疫球蛋白間的pearson相關(guān)性分析

    結(jié)果見(jiàn)圖3所示。雛雞肌胃腺胃內(nèi)玉米赤霉烯酮含量同雛雞肌胃腺胃內(nèi) IL-1β 基因表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05),雛雞肌胃腺胃內(nèi)T-2毒素含量同雛雞肌胃腺胃內(nèi)TNF-ɑ基因表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05);雛雞肌胃腺胃內(nèi)T-2毒素含量同雛雞血清IgM含量呈負(fù)相關(guān)(P<0.01),雛雞肌胃腺胃內(nèi)玉米赤霉烯酮含量同雛雞血清IgM含量呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),雛雞肌胃腺胃內(nèi)黃曲霉毒素含量同雛雞血清IgG含量呈負(fù)相關(guān)(P<0.001);雛雞肌胃腺胃的炎癥因子基因表達(dá)與雛雞血清免疫球蛋白的含量呈顯著負(fù)相關(guān)的關(guān)系(P<0.001)。

    3? 討論

    3.1? 1日齡雛雞肌胃腺胃炎流行病學(xué)調(diào)查及剖檢和鏡檢觀察的意義

    該病主要降低消化功能、降低飼料轉(zhuǎn)化率,同時(shí)增加其他疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn),導(dǎo)致雞只大量死亡,進(jìn)而對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[3,4]。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)湖南省內(nèi)11個(gè)種雞場(chǎng)的15批次1日齡雛雞進(jìn)行肌胃腺胃炎流行病學(xué)調(diào)查,發(fā)現(xiàn)1日齡雛雞肌胃腺胃炎患病率為62.1%,說(shuō)明肌胃腺胃炎不止成年雞發(fā)生[12],在1日齡雛雞中同樣流行廣泛。通過(guò)對(duì)雛雞的肌胃、腺胃進(jìn)行剖檢和病理評(píng)分,本研究發(fā)現(xiàn)患病雛雞的肌胃腺胃出現(xiàn)了明顯潰瘍、炎癥、出血,這些癥狀和伍娟等[13]攻毒試驗(yàn)中提到的典型的肌胃腺胃炎癥狀一致。病理切片觀察結(jié)果顯示,患病雛雞的肌胃腺胃黏膜層出現(xiàn)明顯的破損、破裂和炎性細(xì)胞浸潤(rùn),肌層肌纖維密度出現(xiàn)明顯的下降。這些組織病理學(xué)變化與郭劍英等[14]通過(guò)高銅飼料攻毒造成肌胃腺胃炎后觀察到患病雞肌胃肌纖維變得較為稀疏的結(jié)果和Lemiere S等[15]研究提到的患有肌胃腺胃炎肉雞肌胃角質(zhì)層退化、黏膜壞死破損、細(xì)胞核內(nèi)包含體及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的結(jié)果相一致。

    3.2? 1日齡雛雞肌胃腺胃內(nèi)炎癥因子測(cè)定的意義

    炎癥因子是一種可以反映炎癥反應(yīng)的劇烈程度及其所導(dǎo)致的損傷程度的重要指標(biāo)[16]。IL-1β 是一種重要的促炎性細(xì)胞因子,參與多種自身免疫性炎癥反應(yīng)和多種細(xì)胞活動(dòng),包括細(xì)胞增殖、分化和凋亡,也誘導(dǎo)諸如 IL-6、TNF-ɑ等其他細(xì)胞因子的產(chǎn)生,進(jìn)而一同發(fā)揮促進(jìn)炎癥的作用[17-18]。為確定患病雛雞肌胃腺胃炎癥反應(yīng)的劇烈程度及損傷程度,本研究抽取了15批次流行病學(xué)調(diào)查中患病率最高、患病程度最嚴(yán)重的2批次樣品,測(cè)定了樣品中炎癥因子的基因表達(dá),發(fā)現(xiàn)患病雛雞促炎性細(xì)胞因子(IL-1β、IL-6 和 TNF-ɑ)基因表達(dá)相較正常雛雞顯著上升,說(shuō)明肌胃腺胃剖檢和鏡檢出現(xiàn)的病理變化可能與肌胃腺胃炎癥反應(yīng)相關(guān)。這些結(jié)果與夏楠等[19]收集到的21日齡患有肌胃腺胃炎的肉雞血清 IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-ɑ 炎癥因子含量顯著高于對(duì)照組的結(jié)果相似。本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,1日齡雛雞肌胃腺胃炎的流行情況嚴(yán)峻且患病雞肌胃腺胃的病理變化可能是由機(jī)體內(nèi)源性炎癥反應(yīng)導(dǎo)致的。

    3.3? 1日齡雛雞肌胃腺胃內(nèi)霉菌毒素含量測(cè)定的意義

    研究發(fā)現(xiàn),成年肉雞患肌胃腺胃炎與霉菌毒素污染密切相關(guān)[1,10,20,21]。霉菌毒素是由各種真菌產(chǎn)生的天然有毒的次級(jí)代謝物,包括曲霉菌、鐮刀菌等產(chǎn)生的毒素,其中黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、T-2毒素和玉米赤霉烯酮是污染飼料及飼料原料的主要毒素[22]。種雞飼料中的霉菌毒素被種雞食用后可以通過(guò)體循環(huán)沉積到種蛋中,這得到了相關(guān)研究的證實(shí)。Zahoor 等[23]研究發(fā)現(xiàn),持續(xù)使用黃曲霉毒素污染的谷物喂養(yǎng)種雞,飼喂后的第5天可在其產(chǎn)下的雞蛋中檢測(cè)出黃曲霉毒素,停止飼喂后的第6天在雞蛋中消除完全。Sypecka 等[24]的研究發(fā)現(xiàn),分別使用含有5、7.5、10 mg/kg嘔吐毒素的飼料飼喂蛋雞,均可在其產(chǎn)下的雞蛋中檢測(cè)出嘔吐毒素。在胚胎發(fā)育過(guò)程中,雞胚吸收可能含有霉菌毒素的卵黃與卵白以獲得生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[25],上述研究結(jié)果說(shuō)明沉積到雞蛋中的霉菌毒素可以與發(fā)育中的雞胚接觸,對(duì)其肌胃腺胃發(fā)揮毒性作用。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),患有肌胃腺胃炎的雛雞肌胃腺胃內(nèi)T-2毒素和玉米赤霉烯酮含量顯著高于正常雛雞,但嘔吐毒素和黃曲霉毒素含量卻沒(méi)有顯著差異,這說(shuō)明垂直傳遞至種蛋或者種蛋內(nèi)滋生的T-2毒素和玉米赤霉烯酮可能是1日齡雛雞肌胃腺胃炎的重要致病因素之一。

    3.4? 1日齡雛雞血清內(nèi)免疫球蛋白含量測(cè)定的意義

    作為機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分,由漿細(xì)胞合成和分泌的血清球蛋白是動(dòng)物體內(nèi)能夠抵抗外源性病毒或細(xì)菌的具有免疫功能的蛋白質(zhì)[26]。Islam等[27]的研究發(fā)現(xiàn),暴露于玉米赤霉烯酮的小鼠脾臟以及腸系膜淋巴結(jié)(MLN)中的CD4+和CD8+等免疫細(xì)胞出現(xiàn)顯著下降;Cai等[28]的研究發(fā)現(xiàn),玉米赤霉烯酮可誘導(dǎo)MAPK過(guò)度激活,促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的凋亡,從而降低機(jī)體的免疫功能。Chen等[29]的研究發(fā)現(xiàn),肉雞飼喂含有T-2毒素的飼料后,暴露于 T-2 毒素的肉雞表現(xiàn)出脾臟相對(duì)重量和大小下降、脾細(xì)胞凋亡百分比增加,且隨著T-2毒素劑量的增加,CD4+/CD8+ T細(xì)胞比率也隨之降低增加。上述研究結(jié)果說(shuō)明,玉米赤霉烯酮和T-2毒素可以抑制機(jī)體免疫反應(yīng),從而降低其對(duì)某些傳染性病毒的抵抗力。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),患有肌胃腺胃炎的雛雞血清IgA、IgM和IgG含量顯著低于正常雛雞,這與Wu等[30]的研究中使用玉米赤霉烯酮攻毒后造成大鼠血清免疫球蛋白IgG含量下降的結(jié)果以及Rahman等[31]的研究中使用T-2毒素攻毒后造成大鼠血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量呈劑量依賴性下降的結(jié)果均相似。這說(shuō)明雞胚中霉菌毒素引起的肉雞免疫能力下降可能是造成肌胃腺胃炎的致病因素之一。

    3.5? 1日齡雛雞肌胃腺胃炎癥因子基因表達(dá)、霉菌毒素含量以及血清免疫球蛋白間的pearson相關(guān)性分析的意義

    綜合所測(cè)的霉菌毒素和生化指標(biāo)數(shù)據(jù),通過(guò)皮爾森相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),肌胃腺胃內(nèi)T-2毒素、玉米赤霉烯酮和肌胃腺胃炎癥因子指標(biāo)成正相關(guān),與血清IgM成負(fù)相關(guān);而雛雞肌胃腺胃的炎癥因子的基因表達(dá)則是與雛雞血清免疫球蛋白的含量呈顯著負(fù)相關(guān)的關(guān)系。

    上述結(jié)果表明,雞胚中玉米赤霉烯酮和T-2毒素的毒性作用及其引起的雞胚免疫能力下降可能是1日齡雛雞肌胃腺胃炎的重要致病因素。

    4? 結(jié)論

    本研究結(jié)果顯示,2023年湖南省內(nèi)部分地區(qū)種雞場(chǎng)1日齡雛雞肌胃腺胃炎檢出率為62.1%,患病雛雞的肌胃腺胃出現(xiàn)明顯組織病變和促炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)上升,這可能是由垂直傳遞至種蛋或者種蛋內(nèi)滋生的玉米赤酶烯酮和T-2毒素直接與發(fā)育中的肌胃腺胃接觸產(chǎn)生毒性作用,或間接降低雞胚免疫力而使得雞胚對(duì)傳染性病毒性因素的抵抗力下降共同導(dǎo)致的。

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    Epidemiological survey of myogastric adenogastritis in 1-day-old chicks in Hunan Province and preliminary study on the causative factors of the disease

    XU Yudong1,GUO Yanghao2,3,XIAO Qianxun2,3,LIU Bogong2,4,SONG Zehe2,3,HE Xi2,3,

    LIU Zikui1

    (1.College of Veterinary Medicine,Hunan Agricultural University,Changsha 410128,China;2.College of Animal Science and Technology, Hunan Agricultural University,Changsha? 410128,China;3.Ministry of Education Engineering Research Center of Feed Safety and Efficient Use,Changsha 410128,China;4. Hunan Engineering Research Center of Poultry Production Safety,Changsha 410128,China)

    Abstract: This exprement was conducted to investigate the prevalence of myogastric adenogastritis and its causative factors in 1-day-old chicks in Hunan province, this study conducted 15 epidemiological surveys and collected myogastric adenogastric samples from 11 different breeder farms in Hunan province in 2023. Samples of the myogastric glandular stomach were dissected, scored, and sectioned for pathological observation. The expression of inflammatory factors and mycotoxin levels were also determined. Additionally, serum was collected to determine immunoglobulin levels.The prevalence of myogastric adenogastritis was found to be 62.1% in 15 epidemiological surveys. Pathological dissection and section observations showed that diseased chicks had ulcers, lesion, broken and ulcerated mucosal layers, inflammatory cell infiltration, and laxity of the muscle fibers in the myogastric layer. The gene expression of pro-inflammatory factors IL-1β, IL-6, and TNF-ɑ, as well as the levels of zearalenone and T-2 toxin in the myogastric tissues of diseased chicks, were significantly higher than those in normal chicks (P < 0.05). Additionally, the serum levels of immunoglobulins IgA, IgM, and IgG were significantly lower in diseased chicks than in normal chicks (P < 0.05). In conclusion, the incidence of myogastric adenogastritis in 1-day-old chicks in Hunan Province is relatively high. One of the possible contributing factors to this condition is the presence of mycotoxins in eggs, which can lead to reduce immunocompetence of chicken embryos.

    Keywords:? ?1-day-old chicks;myogastric adenogastritis;epidemiological investigation;inflammatory factors;mycotoxins;Serum immunoglobulin

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